中药鉴定与标准研究
摘要：中药材品种繁多，习用品、代用品以及多基原、同名异物、同物异名等混乱问题一直是影响中药安全有效的主要问题之一，如何鉴定复杂的中药材是相关企业及监管部门关注的难题。基原鉴定、性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定等传统鉴定方法存在一定局限性，而且此类人才已远远满足不了中药现代化的市场需求。因鉴定方法缺失导致多起安全性事件，给中药临床应用带来极大挑战，中国动物药材DNA条形码数据库
摘要：课题组联合相关研究者开展动物药材DNA条形码分子鉴定研究，并结合分析GenBank序列，采用BLAST分析防错、系统树分析防错和Barcoding Gap检验防错等方法核验序列的可靠性，构建了中国动物药材DNA条形码数据库。该库由样品数据库、序列数据库和文献数据库组成，包含800余种动物药材和大量动物药材混伪品及密切相关物种。中国动物药材DNA条形码数据库可以通过中药材DNA条形码鉴定系统（www.tcmbarcode.cn）进行网络访问并实现未知动物样本的DNA条形码鉴定。该研究首次构建统一的中国动物药材DNA条形码数据库，对动物药材鉴定、资源可持续利用和濒危物种保护均有重要意义。基于ITS2条形码鉴定柴胡与大叶柴胡
摘要：为准确鉴定柴胡与大叶柴胡，该研究共48份柴胡、大叶柴胡药材，扩增ITS2 序列并进行测序，采用CodonCode Aligner软件进行序列拼接，用软件MEGA5.0分析比对确定不同的单倍型，并基于K2P模型进行遗传距离等分析。采用相似性搜索法、最近距离法、构建邻接树（NJ树）法对柴胡与大叶柴胡进行鉴定。结果显示柴胡与大叶柴胡种间最小K2P距离为0.049，远远大于柴胡种内最大K2P距离0.013。NJ树显示大叶柴胡独自聚为一支，可明显与柴胡区分。因此应用ITS2条形码可以准确鉴定柴胡及大叶柴胡。应用ITS2条形码鉴定中药材合欢皮、合欢花及其混伪品
摘要：为准确鉴别中药材合欢皮、合欢花及其混伪品，该研究应用ITS2条形码对46份药材及其混伪品进行鉴定研究。通过对样本进行基因组DNA提取，PCR扩增和双向测序获得ITS2序列。所得序列经CodonCode Aligner 拼接后，基于隐马尔可夫模型的HMMer 注释方法去除两端5.8S 和28S 区段，用软件MEGA5.0对序列进行分析比对，并基于K2P模型进行遗传距离分析。采用相似性搜索法、最近距离法、构建NJ树对序列鉴定能力进行评估。结果表明，药材基原物种合欢的ITS2序列种内最大K2P遗传距离均远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离；应用相似性搜索法分析结果表明ITS2 序列可准确鉴定合欢药材及其混伪品；NJ树显示合欢药材与其混伪品可明显区分开，表现出良好的单系性。因此，应用ITS2条形码可稳定、准确地鉴别合欢药材及其混伪品。木香、川木香、土木香、青木香和红木香药材的ITS2条形码分子鉴定
摘要：通过分析木香、川木香、土木香、青木香、红木香药材的ITS2（internal transcribed spacer 2）条形码序列，探讨木香类药材鉴定新方法。对60份样品提取基因组DNA，PCR扩增ITS2序列并进行双向测序，所得序列经CodonCode Aligner拼接后，采用 MEGA5.0 软件进行序列比对，计算种内和种间遗传距离（K2P），构建邻接树（neighbor-joing tree，NJ Tree）。结果表明，无论是菊科的木香、川木香、土木香，还是马兜铃科的青木香和五味子科的红木香，ITS2序列种内变异均小于种间变异，ITS2序列所有单倍型比对后长度为272 bp，变异位点达到162个；遗传距离显示物种种内平均K2P远远小于种间平均K2P；NJ树结果显示木香、川木香、土木香、青木香和红木香药材可明显区分，且能鉴别川木香的2个基原物种。因此，ITS2序列可用于鉴定木香、川木香、土木香、青木香、红木香药材，为临床安全用药提供依据。基于ITS2条形码的中药材天南星及其混伪品DNA分子鉴定
摘要：该研究收集天南星及其混伪品7种，共58份样品，通过DNA提取和PCR扩增，经注释后获得其ITS2条形码，然后进行序列变异分析和NJ树聚类分析。结果表明天南星3种基原天南星、异叶天南星和东北天南星的种内K2P距离均小于其种间K2P距离，在NJ聚类树上天南星3种基原分别聚为独立的支。天南星3种基原与天南星混伪品聚为不同的支。因此，ITS2作为DNA条形码可以鉴定天南星3种基原及其混伪品，DNA条形码技术可为天南星及其混伪品的鉴定提供新的方法。基于ITS2序列鉴定中药材升麻及其混伪品
摘要：该研究选用ITS2序列对升麻及其混伪品进行分子鉴定，从而确保用药安全。实验采用DNA条形码技术，对升麻及其混伪品的ITS2核基因片段进行扩增并双向测序，经CodonCode Aligner V3.7.1拼接后，利用MEGA 5.0软件对相关数据分析，构建邻接（NJ）系统聚类树进行鉴定分析。结果表明升麻药材的3个基原物种：大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia、升麻C. foetida、兴安升麻C. dahurica，其ITS2序列长度分别为217，219，219 bp，3个基原物种ITS2序列与混伪品的种间平均K2P距离大于其种内平均K2P距离，ITS2系统发育树显示，升麻的3个基原物种均各自聚为一单系分支，并与其他混伪品明显分开。ITS2序列能够有效准确地鉴别中药材升麻及其混伪品。白术与苍术及其混伪品DNA条形码鉴定研究
摘要：药材白术与苍术为苍术属植物，为常用健脾之要药，但二者功效不完全相同，古代对二者未进行区分，现代用药也容易将其混用，为了确保用药安全，该文采用ITS2序列对药材白术与苍术及其混伪品进行DNA条形码鉴定研究。白术与苍术的3个基原物种（苍术、关苍术和朝鲜苍术）ITS2序列均为229 bp。13条白术的序列仅在98 bp处有C-G变异，平均GC含量为69.42%；4条苍术序列无变异位点；关苍术与朝鲜苍术的种内最大K2P距离均为0.013。白术、苍术、关苍术和朝鲜苍术种内最大K2P距离均小于与混伪品的种间最小K2P距离。邻接（NJ）法构建的系统聚类树，白术、朝鲜苍术序列能各自聚为一支，关苍术与苍术聚为一支，但都能与混伪品明显分开。ITS2序列在药材白术与苍术及其混伪品的鉴定方面具有很好的鉴别效果。凉茶药材鸡蛋花及其混伪品的DNA条形码鉴定
摘要：该研究应用ITS2序列作为DNA条形码鉴定凉茶药材鸡蛋花及其混伪品，共收集48份药材和基原植物样本，提取基因组DNA，通过PCR扩增ITS2序列并进行双向测序，经CodonCode Aligner拼接注释获得序列，然后应用MEGA5.0比对ITS2序列，计算种内和种间遗传距离，构建系统进化NJ树进行鉴定。结果表明，鸡蛋花ITS2序列长度为244 bp，种内遗传距离为0-0.016 6，远小于其与混伪物种间的遗传距离0.320 8-0.650 4，NJ树结果显示鸡蛋花与其混伪品均可准确区分。因此，应用ITS2条形码能够准确、有效地鉴别凉茶药材鸡蛋花及其混伪品，为鸡蛋花药材的鉴定提供了一种新的分子手段，为其使用安全提供了有力保障。基于COI序列的紫河车药材及其混伪品的DNA条形码鉴定研究
摘要：利用COI序列对紫河车及其常见混伪品进行DNA条形码分子鉴定，探究准确、快速鉴定紫河车及其混伪品的方法。该研究共收集6个种41份样品，以COI作为条形码序列，对紫河车的正品及其混伪品提取基因组DNA，通过PCR扩增和双向测序，运用CodonCode Aligner进行序列拼接后，采用 MEGA6.0 软件进行序列比对，分析比较种内、种间序列差异，并构建正品紫河车及其混伪品的NJ树。结果表明紫河车COI序列种内平均K2P距离为0.001，种内最大K2P距离为0.008，紫河车的正品来源人与其混伪品种间存在较多变异位点。由所构建的NJ 树显示紫河车与其混伪品均可明显区分。基于COI序列的DNA条形码技术可以鉴定紫河车及其混伪品，为紫河车的鉴别提供了新的工具。中药材蜈蚣及其混伪品DNA条形码鉴别研究
摘要：利用DNA条形码技术对蜈蚣药材进行鉴别，为蜈蚣药材鉴定提供新的方法。该研究以COI条形码序列为基础，对蜈蚣实验样品进行DNA提取，PCR扩增和双向测序，用MEGA6.0软件对所有5个物种的50份样品进行序列比对和邻接（NJ）树构建。结果显示实验样品均可以获得COI序列，蜈蚣药材与其混伪品COI序列种间平均K2P距离为0.222，种间最小K2P 距离为0.190，基于COI序列构建的邻接（NJ）树中少棘巨蜈蚣单独聚在一枝，与其混伪品可以相互区分。因此基于COI条形码序列可以准确鉴定蜈蚣及其混伪品。名贵动物药材穿山甲的DNA条形码分子鉴定研究
摘要：利用COI序列作为DNA条形码对名贵珍稀动物药材穿山甲及其混伪品进行鉴定，为穿山甲药材分子鉴定提供科学依据。该实验采用试剂盒法提取穿山甲及其混伪品的基因组DNA，通过PCR扩增和双向测序，应用CodonCode Aligner软件进行校对拼接，采用MEGA 6.0软件对所有7个物种的56份样品进行序列比对，构建邻接（NJ）树。结果表明穿山甲药材COI序列扩增成功，所构建的NJ树结果显示穿山甲及其混伪品均可明显区分。因此，基于COI序列，应用DNA条形码技术可有效鉴定名贵动物药材穿山甲及其混伪品，为其市场监管提供了新的技术手段。基于形态特征和DNA条形码技术的维吾尔药材沙枣基原鉴定
摘要：该研究从形态学及分子生物学角度研究新疆维吾尔医常用药材沙枣的基原是否为胡颓子属3种沙枣。随机选择不同产地3种沙枣的叶片、花、果实，通过形态学比较外观差异；使用DNA条形码ITS2序列对新疆3种17份沙枣ITS2序列进行PCR扩增和测序，比较17份样品ITS2序列种内和种间变异、采用NJ树法及ML法对其亲缘关系进行分析，结果表明新疆胡颓子属3种沙枣叶片、花、果实均无明显区别特征，肉眼不易区分；沙枣、尖果沙枣、东方沙枣ITS2序列长度变化范围为220-223 bp，平均GC质量分数为61.9%，单倍型数分别为4，3，3，NJ树及ML树均不能将三者区分。因此，从分子生物学角度看，新疆胡颓子属3种沙枣可能为同一起源，均可作为维吾尔药材沙枣的基原植物，但需进一步结合其分布、化学成分和药理药效等因素进行综合深入的研究。蕨类药材石韦及其混伪品的psbA-trnH序列鉴定
摘要：为考察psbA-trnH序列鉴定蕨类药材的可行性，该研究以蕨类药材石韦及其混伪品作为研究对象，对其106份样品提取基因组DNA，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增其叶绿体psbA-trnH序列，并采用Mega6.0软件进行多序列比对，计算种内及种间K2P遗传距离，采用最大似然法（ML）构建系统聚类树。结果表明：石韦药材3个基原植物的psbA-trnH序列种内最大遗传距离均小于其与混伪品的种间最小遗传距离；ML树显示石韦药材可与其混伪品明显分开；psbA-trnH序列可作为蕨类药材的DNA条形码，能准确、稳定鉴定蕨类药材石韦及其混伪品。基于ITS2和psbA—trnH序列对细小种子类药材车前子的鉴定比较
摘要：为考察ITS2 序列和psbA-trnH 序列对车前子药材及其常见混伪品的鉴定能力，该研究对车前子2个基原物种及7种混伪品共71份样本进行了研究。采用MEGA 5.1对获得的ITS2和psbA-trnH进行序列比对，计算种内和种间kimura 2-parameter（K2P）遗传距离，并构建系统发育树。结果显示，车前和平车前的ITS2 序列长度分别为199，200 bp；两者的ITS2序列种内最大 K2P 遗传距离均小于与混伪品的最小种间K2P 遗传距离；基于ITS2 序列构建的NJ 树中，车前、平车前及其混伪品都表现出良好单系性，都能相互明显区分。表明ITS2序列能将车前子药材与混伪品进行很好的区分。车前和平车前的psbA-trnH序列长度均为340 bp，两者的psbA-trnH 序列种内最大K2P 遗传距离小于与混伪品的最小种间K2P 遗传距离；基于psbA-trnH 序列构建的NJ 树结果显示，除大车前外，车前子药材与其余混伪品可以明显区分。因此，ITS2序列作为DNA条形码，车前子及其混伪品具有良好的鉴别能力，对保障车前子用药安全具有重要意义。金银花品种的本草考证
摘要：金银花是中国传统的药用品种。该文通过系统地梳理中国历代本草文献中所记载的药用金银花的植物形态，指出传统中医使用的金银花具有缠绕藤本；茎微紫色，有被毛；叶对生，卵状心形，两面皆有被毛；一蒂双花，单花唇形，花冠长3.2 cm左右，花蕊长，花开先白后黄，总花梗单生于小枝叶腋且总苞片叶状卵形，花期3月中旬到5月中旬等特征。在忍冬科各种植物中，仅忍冬科忍冬Lonicera japonica Thunb.一个品种符合传统药用金银花的植物学特征，应作为正品药用金银花的品种使用。马兜铃酸毒性研究进展及风险因素分析
摘要：马兜铃酸（aristolochic acids，AA）的肾毒性和致突变性，以及其对泌尿系统上尿路移行上皮的致癌性已广为人知。2003年以来，药品监管部门先后取消了青木香、关木通、广防己等含AA药材的质量标准，并对其他含AA的药材如朱砂莲、马兜铃、寻骨风等采取了加强监管、修订说明书或质量标准等措施，以控制其安全性风险。近年来，国内外对AA的研究内容主要包括AA毒性的作用机制及临床表现、早期诊断及治疗方法。该文对使用含AA药品的风险因素做了简要的归纳与评述，并提出了预防及控制AA毒性发生的措施及建议。蚂蟥不同月龄口器组织学及组织化学研究
摘要：利用石蜡切片、HE及AB-PAS染色法研究不同月龄蚂蟥口器组织结构的变化。结果显示1-3月龄口径与口宽增加幅度较小，分别为0.6，0.3 mm；3-4月龄增幅最大，为1.2 mm；4-6月龄口径、口宽达到最大值，基本不再增加。口唇位于口部最前端的外缘，外被薄的保护膜，随着生长口膜上皮细胞由立方上皮细胞到柱状细胞再到长柱状细胞。口腔深处共有3个颚，较大1个居背面，另外2个较小的分居左右腹侧，与肌肉质的咽相连，颚从外到内由角质层、上皮细胞层、肌层、颚腔组成，颚上均存在具有分泌酸性颗粒的乳突，从2月龄开始存在大量酸性颗粒状物质；口腔由内向外由黏膜层、黏膜下层、肌层组成，周围有着丰富的围口神经。咽由内向外由黏膜层、肌层、浆膜层构成，黏膜褶皱随生长增高增厚，黏膜上皮由复扁平上皮变为柱状上皮，肌层发达且随着生长逐渐增厚，4月龄厚度最大。蚂蟥黏液细胞主要由管状、梨状2种形态4种着色类型构成，不同时期AB-PAS染色变化不大，口唇1月龄黏液细胞少，2，3月龄黏液细胞增多且主要为Ⅱ型黏液细胞，口腔中含有较多Ⅰ型黏液腺细胞，咽部肌层下的结缔组织层分布着较少的Ⅱ型黏液细胞。
