炎症——肿瘤恶性演进的推手
摘要：越来越多的证据表明,炎性微环境在肿瘤的发生、发展中发挥着重要的促进作用,炎性因子介导的信号通路参与了肿瘤细胞的恶性演进。细胞上皮-间质转型（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是肿瘤恶性演进过程中的关键机制,炎性细胞因子（白细胞介素、TNF-α、TGF-β等）、EMT的关键转录因子[锌指E盒结合同源盒蛋白（zinc finger E-box-binding homeobox,ZEB）、Snail和Twist等]及某些miRNA（let-7、miR-200等）共同构成复杂的调控网络,调控肿瘤细胞的表型转化、药物抗性的产生、肿瘤干细胞（cancer stem cell,CSC）的增殖及自我更新。本文将重点讨论炎症及相关信号通路在肿瘤发生、发展以及CSC形成过程中的调控机制。沉默HerpUD1基因表达提高人肝L-02细胞对放射处理的敏感性
摘要：目的：利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1（homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1）基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用。方法：根据HerpUD1基因序列设计shRN段,构建靶向HerpUD1基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中HerpUD1 mRNA及蛋白的表达。以8 Gy X射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况。结果：成功构建靶向HerpUD1的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株。在稳定转染的L-02细胞中,shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组（阴性对照组）相比,shHerpUD1-1420组HerpUD1 mRNA表达显著下降[（0.15±0.05）vs（1.00±0.08）,P〈0.05],其蛋白水平的表达也显著降低[（0.19±0.01）vs（1.62±0.08）,P〈0.01]。转染后细胞经8 Gy X射线照射后24 h,L-02-shHerpUD1-1420组细胞凋亡率显著高于L-02-NC组（阴性对照组）[（10.23±3.37）%vs（6.89±1.49）%,P〈0.01],而L-02-NC组与L-02-Neo组相比则无显著差异（P〉0.05）。结论：HerpUD1基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用。siRNA沉默ATM增强CpG ODN 7909对肺癌A549细胞的放射增敏作用
摘要：目的：研究siRNA沉默毛细血管扩张—共济失调突变（atxia-telangiectasia mutated,ATM）基因的表达增强胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸（cytosine-phophate-guanine oligodeoxynucleotide,CpG ODN）7909对人非小细胞肺癌A549细胞的放射增敏作用。方法：将ATM-siRNA转染至A549细胞中,Western blotting检测A549细胞中ATM蛋白的表达。A549细胞随机分为6组：对照组、CpG组、X射线（IR）组、CpG＋IR组、ATM-siRNA＋CpG＋IR组和NC-siRNA＋CpG＋IR组,克隆形成分析法检测各组细胞克隆形成率,Graphpad prism 5.0软件进行单击多靶模型和L-Q线性模型拟合辐射后A549细胞的生存曲线,以D0、Dq、N、α/β及SF2等参数分析A549细胞辐射损伤修复能力,流式细胞术检测A549细胞的凋亡。结果：ATM-siRNA转染可明显抑制A549细胞中ATM蛋白的表达（P〈0.01）。X射线可剂量依赖性抑制A549细胞的克隆形成能力（P〈0.05）;且CpG＋IR组A549细胞的克隆形成能力进一步降低（P〈0.01）;ATM-siRNA转染后,CpG处理的A549细胞克隆形成能力再度降低[10 Gy时,（0.05±0.00）%vs（0.71±0.00）%,P〈0.01]。辐射损伤剂量生存曲线结果显示,ATM-siRNA转染后,ATM-siRNA＋CpG＋IR组较CpG＋IR组A549细胞的α/β值明显增大（1.48 vs 0.97,P〈0.05）,对放射损伤修复能力明显减弱。CpG＋IR组较IR组细胞凋亡率显著升高[（9.18±0.16）%vs（6.56±0.33）%,P〈0.01];ATM-siRNA＋CpG＋IR组A549细胞凋亡率进一步升高[（10.45±0.40）%vs（9.18±0.16）%,P〈0.05]。结论：siRNA沉默ATM的表达可增强CpGODN 7909对A549细胞的放射增敏作用,ATM可作为肺癌治疗的潜在靶点。白介素22活化STAT3信号通路促进结直肠癌细胞的增殖及其可能机制
摘要：目的：探究白介素22（interleukin-22,IL-22）对结直肠癌细胞增殖的影响,并阐明其信号通路机制。方法：Real-time PCR检测结直肠癌细胞SW480和SW620中IL-22受体1（IL-22 receptor 1,IL-22R1）mRNA的表达;采用不同质量浓度IL-22（0、1、5、10 ng/ml）处理结直肠癌细胞,MTT法及克隆形成实验检测IL-22对SW480和SW620细胞增殖的影响;IL-22处理SW480和SW620细胞不同时间后,采用Western blotting检测其STAT3、AKT、ERK、JNK、P38蛋白磷酸化的情况;观察特异性STAT3磷酸化抑制剂LLL12处理是否影响IL-22诱导的结直肠癌细胞的促增殖效应。结果：IL-22R1 mRNA在结直肠癌SW480、SW620细胞中均有表达。IL-22剂量依赖性地促进SW480和SW620细胞增殖,10 ng/ml IL-22作用后,SW480与SW620细胞增殖倍数均明显增高[（5.18±0.212）vs（2.64±0.27）,（8.14±0.61）vs（6.08±0.096）;均P〈0.01];且IL-22可提高SW480与SW620细胞克隆形成能力,细胞克隆数明显多于空白对照组[（1 680.67±124.05）vs（730±64.29）,（2 668±116.37）vs（1 294±171.61）;均P〈0.01]。Western blotting证实IL-22能显著活化STAT3通路,而对AKT、ERK、JNK、P-38通路影响不明显;STAT3抑制剂LLL12处理后,IL-22对SW480和SW620细胞的促增殖效应明显减弱。结论：IL-22通过活化STAT3信号通路促进结直肠癌细胞SW480和SW620的增殖。化学元素和核素符号规范书写的要求
摘要：化学符号虽然是化学专业的学术交流语言,但在生物医学领域也有很广泛的使用。化学符号的书写有其特殊的规律和要求,生物医学论文中必须重视化学符号书写的规范化。根据GB3102.8-93《物理化学和分子物理学的量和单位》的规定,把化学元素和核素符号书写的规范要求介绍如下：（1）元素或核素的单字母符号均用正体大写,双字母符号首字母正体大写,第二个字母用正体小写。miRNA-210对人乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
摘要：目的：探讨miRNA-210（miR-210）在人乳腺癌组织中的表达及其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭的影响。方法：收集2011年10月至2012年6月期间昆明医科大学第一附属医院20例乳腺癌患者组织标本,real-time PCR检测乳腺癌组织和癌旁组织以及乳腺癌细胞MDA-MB-231和正常乳腺细胞MCF-10a中miR-210的表达。采用Lipofectami-neTM2000将miR-210 inhibitor转染至MDA-MB-231细胞中,通过荧光显微镜检测miR-210的转染效率,MTT和软琼脂克隆形成实验检测MDA-MB-231细胞的增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Transwell法检测细胞的迁移、侵袭能力。结果：miR-210在乳腺癌组织和MDA-MB-231细胞中的表达水平均显著高于癌旁组织和正常乳腺细胞（P〈0.01）。miR-210 inhibitor成功转染MDA-MB-231细胞,转染效率为（88.29±2.98）%,转染miR-210 inhibitor后MDA-MB-231细胞的增殖和克隆形成能力明显减弱（P〈0.05）,被阻滞于G0/G1期的细胞数明显增多[（64.23±3.12）%vs（55.53±0.96）%,P〈0.01],凋亡细胞比例也显著增加[（31.90±3.05）%vs（15.98±0.63）%,P〈0.01],细胞的迁移[（291.00±43.12）vs（1137.38±83.49）个,P〈0.01]、侵袭[（131.63±32.01）vs（647.88±31.20）个,P〈0.01]均受到明显抑制。结论：miR-210在乳腺癌组织和细胞中过表达,转染miR-210 inhibitor后乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。miRNA-126真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用
摘要：目的：构建miRNA-126的重组真核表达载体,研究其对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖和迁移的影响。方法：设计合成miRNA-126的正义和反义寡核苷酸,构建真核表达载体pcDNA6.2-miR-126,体外瞬时转染至4T1细胞,荧光显微镜下观测转染效率。Real-time PCR检测4T1细胞中miRNA-126的表达,MTT法和克隆形成实验检测4T1细胞的增殖和克隆形成能力,划痕法观察4T1细胞的体外迁移。结果：成功构建pcDNA6.2-miR-126真核表达载体,其可在4T1细胞中有效表达miR-126。与转染空质粒组（pcDNA6.2-Ctrl）相比,瞬时转染72 h后,pcDNA6.2-miR-126转染组4T1细胞的体外增殖能力受到明显抑制[（0.30±0.03）vs（0.51±0.04）,P〈0.05];瞬时转染48 h后,pcDNA6.2-miR-126组4T1细胞迁移能力也受到明显抑制[（8.17±2.30）vs（28.33±2.16）个,P〈0.05]。结论：miRNA-126过表达可抑制乳腺癌4T1细胞的增殖及迁移。文稿中须写成斜体的外文字符
摘要：在科技文稿中出现许多外文字符,它们有的是正体、有的是斜体。正体和斜体外文字符各有其特定含义和用法,切不可混淆使用。现根据有关标准和规则,把生物医学文稿中须要写成斜体的外文字符归纳为以下几类：siRNA沉默KLF4的表达促进食管癌KYSE140细胞的增殖及迁移
摘要：目的：探讨体外沉默Kruppel样因子4（Kruppel like factor 4,KLF4）基因的表达对食管癌KYSE140细胞增殖及迁移的影响。方法：Western blotting法检测人食管癌细胞株KYSE140、KYSE150、EC109及EC9706及食管永生化细胞NE3中KLF4蛋白的表达,化学合成2对靶向KLF4的siRNA（KLF4-siRNA1,KLF4-siRNA2）,并设对照siRNA（Ctrl-siRNA）,分别体外转染至高表达KLF4的食管癌KYSE140细胞中,形成KLF4-siRNA1-KYSE140、KLF4-siRNA2-KYSE140及Ctrl-siRNA-KYSE140细胞,通过MTT实验、Transwell实验分别检测转染后食管癌KYSE140细胞的增殖及迁移。结果：食管癌细胞株KYSE140中KLF4蛋白的表达明显高于KYSE150、EC109及EC9706细胞株[（5.62±0.02）vs（1.71±0.23）、（3.24±0.35）、（3.16±0.41）,均P〈0.05]。KLF4-siRNA1-KYSE140、KLF4-siRNA2-KYSE140与Ctrl-siRNA-KYSE140细胞相比,KLF4蛋白表达明显降低[（0.49±0.18）、（0.32±0.09）vs（0.98±0.19）,均P〈0.05],细胞增殖能力明显增高[（1.2±0.8）、（1.4±0.1）vs（0.6±0.1）,均P〈0.05],迁移细胞数量也明显增加[（780±22）、（475±25）vs（83±17）个,P〈0.05]。结论：KLF4在人食管癌细胞的增殖和迁移过程中起着负调控作用。沉默AQP-5对人结肠癌HT-29细胞的增殖、凋亡及其化疗敏感性的影响
摘要：目的：探讨小干扰RNA（small interference RNA,siRNA）沉默水通道蛋白-5（aquaporin-5,AQP-5）的表达对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗药敏感性的影响。方法：以合成的AQP-5-siRNA序列转染HT-29细胞,采用Western blotting检测AQP-5-siRNA的转染效率,磺酰罗丹明（sulphorhodamine B,SRB）染色法检测各组细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡。分光光度法检测HT-29细胞caspase-3活性,real-time PCR和Western blotting检测AQP-5-siRNA转染后HT-29细胞中PCNA和P53在mRNA和蛋白水平的表达。选用5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）和顺铂（cisplatin,DDP）刺激AQP-5-siRNA转染细胞,SRB染色法检测细胞的增殖抑制率,以金正均法计算两药联合作用的Q值。结果：与NC-HT-29细胞相比,AQP-5-siRNA-HT-29细胞中AQP-5蛋白的表达显著下降（P〈0.05）。SRB检测显示,AQP-5-siRNA-HT-29细胞的增殖抑制率显著增加[（9.23±0.51）%vs 0,P〈0.05]。流式细胞术检测显示,AQP-5-siRNA-HT-29细胞的凋亡率显著升高[（10.81±1.32）%vs（0.99±0.18）%,P〈0.05];caspase-3活性显著升高[（0.19±0.03）vs（0.09±0.01）,P〈0.05]。Real-time PCR和Western blotting结果显示,AQP-5-siRNA-HT-29细胞中PCNA mRNA和蛋白表达明显下降（P〈0.05）,同时,P53 mRNA和蛋白表达明显上升（P〈0.05）。AQP-5-siRNA＋5-FU组细胞的增殖抑制率显著高于AQP-5-siRNA组和5-FU组[（44.93±2.28）%vs（9.11±0.32）%、（25.68±1.71）%,均P〈0.05],AQP-5-siRNA＋DDP组细胞的增殖抑制率显著高于AQP-5-siRNA组和DDP组[（39.01±1.76）%vs（9.11±0.32）%、（18.47±1.25）%,P〈0.05],而且,AQP-5-siRNA与5-FU或DDP联用的Q值分别为1.38和1.51,均表现为协同作用。结论：AQP-5-siRNA能抑制HT-29细胞增殖、促进其凋亡、并提高HT-29细胞对5-FU和DDP的化疗敏感性。Trex1通过调控溶酶体诱导干扰素非依赖性抗病毒基因的活化
摘要：病毒感染机体后,病毒核酸作为主要的病原体相关分子模式,可被Toll样受体（Toll-like receptors,TLR）以及相关的DNAsensor、RNA sensor识别,通过下游接头分子TANK结合激酶1（TANK-binding kinase 1,TBK1）及干扰素调节因子3（interferonregulatory factor 3,IRF3）促进Ⅰ型干扰素的产生。腺病毒介导miRNA-29a过表达抑制人胃癌细胞的增殖
摘要：目的：利用重组人5型复制缺陷型腺病毒载体介导miRNA-29a（miR-29a）过表达,观察miR-29a对人胃癌细胞系SGC-7901及AGS的增殖抑制作用。方法：构建含pre-miR-29a的重组腺病毒Ad-miR29a及含LacZ基因的对照腺病毒Ad-LacZ,分别感染人胃癌SGC-7901及AGS细胞,采用real-time PCR法检测SGC-7901及AGS细胞中miR-29a的表达,CCK-8法检测miR-29a对SGC-7901及AGS细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测SGC-7901及AGS细胞的细胞周期,Transwell法检测miR-29a对SGC-7901及AGS细胞迁移能力的影响。结果：与Ad-LacZ对照组相比,Ad-miR29a组感染后胃癌SGC-7901及AGS细胞中miR-29a的表达均显著增加[（17.35±0.71）vs（1.12±0.09）,（26.50±1.09）vs（0.95±0.04）;均P〈0.01];且胃癌SGC-7901及AGS细胞增殖明显受到抑制,感染6 d后D值均显著降低[（0.54±0.03）vs（0.77±0.04）,（0.70±0.03）vs（0.88±0.04）;均P〈0.01）],而Ad-LacZ感染组与未感染组相比则无明显变化（P〉0.05）;与Ad-LacZ对照组相比,Ad-miR29a组SGC-7901及AGS细胞中G0/G1期细胞比例均显著增加[（63.10±4.91）%vs（47.60±5.31）%,（69.80±3.15）%vs（54.60±4.22）%;均P〈0.05],但胃癌SGC-7901及AGS细胞的迁移能力并没有明显差异。结论：miR-29a过表达可有效抑制胃癌SGC-7901及AGS细胞的增殖,miR-29a有望成为治疗胃癌的新靶标。GADD45A基因在人贲门腺癌组织中的异常甲基化和表达及其临床意义
摘要：目的：探讨生长阻滞和DNA损伤诱导45A（growth arrest and DNA-damage-inducible 45 alpha,GADD45A）基因在贲门腺癌（gastric cardia adenocarcinoma,GCA）中的异常甲基化及表达,并探讨其临床意义。方法：选取河北医科大学第四医院2004-2007年期间GCA患者组织标本（138例）。分别应用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing,BS-Seq）、亚硫酸氢盐转换-甲基化特异性聚合酶链式反应（bisulfite conversion-methylation specific polymerase chain reaction,BS-MSP）、RT-PCR和免疫组织化学法检测GADD45A基因在GCA组织及癌旁正常组织中的甲基化、GADD45A mRNA及蛋白表达的情况。结果：GADD45A远端启动子区的4个CpG位点在GCA组织中的甲基化率[44.93%（62/138）]显著高于癌旁正常组织[0.00%（0/138）]（P〈0.01）,且在Ⅲ期和Ⅳ期GCA组织中的甲基化率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期GCA组织（P〈0.05）,但GADD45A在GCA组织中的甲基化与患者的年龄、性别及病理分化程度无关（P〉0.05）。GADD45A近端启动子（region 2）及第一外显子区（region 3）的CpG岛在GCA及癌旁组织中均未检测到甲基化。GCA组织中GADD45A mRNA和蛋白阳性表达率显著低于癌旁正常组织[（0.35±0.15）vs（0.78±0.26）,42.75%vs 71.01%,均P〈0.05],且与其远端启动子区4个CpG位点的甲基化状态之间有明显的相关性（r=-0.52,P〈0.01）。结论：GADD45A基因远端启动子区的4个CpG位点的高甲基化导致的基因沉默可能与GCA中GADD45A基因表达降低有关。长链非编码RNA——NeST调控小鼠对病原体的易感性和IFN-γ基因的活化
摘要：表观遗传学通常指基因表达通过有丝分裂或减数分裂发生了可遗传的改变,而DNA序列不发生改变。表观遗传学的机制主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）调控。ncRNA是指不能翻译为蛋白质的功能性RNA,分为看家ncRNA和调控ncRNA,其中具有调控作用的ncRNA按大小主要分为两类：短链ncRNA（包括siRNA、miRNA、piRNA）和长链ncRNA（long non-coding RNA,lncRNA）。体外扩增对食管癌患者NK细胞表面受体表达及其抑瘤活性的影响
摘要：目的：探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤。方法：收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例,健康供者（对照组）外周血10例。NK细胞培养采用细胞因子（IL-2＋IL-12＋IL-15＋IL-18）组合,流式细胞术检测NK细胞免疫表型及其受体（CD56＋、CD69＋、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、CD158b、CD159a）的表达,LDH法检测不同效靶比时NK细胞对多种肿瘤细胞株（K562、Raji、Eca-109、TE-1）的杀伤作用。结果：与对照组相比,食管癌患者外周血CD3＋、CD4＋细胞比例以及CD4＋/CD8＋T细胞比值明显降低（P〈0.05）,NK细胞（CD3-CD56＋）及调节性T细胞（Treg）比例明显升高（P〈0.05）。经细胞因子IL-2＋IL-12＋IL-15＋IL-18组合定向扩增20 d后,食管癌患者NK细胞比例高达90%以上,NK细胞数扩增达1 000倍以上（P〈0.01）;而CD3＋T细胞、CD4＋、CD8＋T细胞、CD19＋B细胞、Treg细胞及单核巨噬细胞（CD14＋）比例均显著降低（P〈0.01）,且食管癌患者与对照组之间无统计学差异（P〉0.05）。经细胞因子体外培养20 d后,NK细胞表面CD69及活化性受体（NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46）均明显上调,而抑制性受体（CD158b、CD159a）均明显下调（P〈0.05）。培养20 d后,食管癌患者NK细胞对肿瘤细胞K562、Raji、Eca-109、TE-1的杀伤能力均显著高于培养前[（69.2±5.1）%vs（42.3±3.0）%,（44.6±3.2）%vs（21.1±2.0）%,（69.7±3.9）%vs（50.3±3.5）%,（67.1±4.5）%vs（41.2±3.3）%;均P〈0.01]。结论：细胞因子IL-2＋IL-12＋IL-15＋IL-18组合能有效扩增外周血NK细胞并上调其活并性受体的表达、下调抑制性受体的表达,其数量及功能均能满足临床治疗需要。《中国肿瘤生物治疗杂志》被DOAJ收录
摘要：《开放存取期刊指南》（Directory of Open Access Journals,DOAJ）由瑞典隆德大学图书馆主任Lars教授于2003年创办,DOAJ的目标是建设成为全面覆盖全球科技学术界开放存取（open access,OA）期刊的门户网站。迄今为止,DOAJ共收录全世界119个国家的9 480种OA期刊,其中收录中国OA期刊45种。四种NK细胞体外扩增方案的比较
摘要：目的：通过对4种NK细胞体外培养方案扩增后产物的细胞免疫表型、扩增倍数以及杀伤活性进行比较,确定一种高效的NK细胞体外扩增方案。方法：建立4种NK细胞体外培养方案：方案1为经典的NK细胞体外扩增方案（IL-2＋IL-15）;方案2为IL-2＋IL-15＋IL-18;方案3为IL-2＋IL-15＋IL-7;方案4为新型NK培养基（IL-2＋OKT3）。收集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年2月至2012年4月间10例晚期实体瘤患者的PBMC,按照4种方案进行体外扩增。在体外扩增的0、5、10、15 d,采用流式细胞仪检测各淋巴细胞亚群（尤其是NK细胞）的比例;比较各方案体外扩增15 d后的NK细胞的扩增倍数、淋巴细胞亚群比例变化,并采用LDH法检测各方案扩增产物对人白血病K562细胞的杀伤活性。结果：上述4种NK细胞培养方案体外扩增15 d后,细胞总数分别扩增（40.1±20.00）、（44.08±22.09）、（44.82±23.67）、（46.82±25.02）倍,其中NK细胞的扩增倍数分别为（75.86±28.57）、（93.32±32.16）、（88.66±24.94）,（58.88±41.53）倍。NK细胞比例由0 d的（20.44±2.23）%分别扩增至15 d的（48.30±13.90）%、（54.72±12.25）%、（55.94±12.70）%和（54.5±14.93）%;各培养方案组在总细胞扩增倍数、NK细胞扩增倍数上的差异均无统计学意义（P〉0.05）。前3种培养方案体外扩增产物的杀伤活性明显高于方案4[（63.40±5.00）%、（77.30±9.40）%、（62.17±5.60）%vs（37.39±10.42）%,均P〈0.05],而方案1、2、3之间体外扩增产物杀伤活性的差异则无统计学意义（P〉0.05）。结论：细胞因子组合对于体外大规模培养NK细胞有着一定的优势,但不同的细胞因子组合（方案1中是否加入IL-18或IL-7）对NK细胞体外大规模扩增的影响差异并不显著;但前3个方案扩增产物对K562细胞的杀伤活性明显强于方案4。常见参考文献著录格式示例
摘要：1专著著录格式：主要责任者.题名[文献类型标志].其他责任者（例如翻译者）.版本项（1版不著录）.出版地：出版者,出版年：起页-止页.[1]Abrams WB,Beers MH,Berkow R.默克老年病手册[M].
