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中国肿瘤生物治疗 2006年第01期杂志 文档列表

中国肿瘤生物治疗杂志专家论坛

抗体治疗造血系统肿瘤的临床效果1-2

摘要：肿瘤的抗体治疗指用特异性抗体或抗体片段治疗肿瘤，是当前医药学研究的热点之一。造血系统肿瘤包括淋巴瘤和白血病，虽然放疔和化疗可缓解大多数造血系统肿瘤，但仍存在复发和治疗无效（难治）的患者。抗体治疗以其较高的有效率和安全性为复发和难治的患者提供了一种选择。

中国肿瘤生物治疗杂志论著

RhoC小干扰RNA抑制胃癌细胞的迁移和侵袭3-7

摘要：目的：研究Ras homologyC（RhoC）在胃癌转移中的作用。方法：利用Vector NTI软件设计并构建RhoC的小干扰RNA（siRNA）载体，利用脂质体介导法将一组RhoCsiRNA分别转染胃癌SGC7901细胞。筛选出稳定抗性克隆；Westernblot检测RhoCsiRNA转染后的抑制效应，Cell Counting Kit-8检测RhoC siRNA转染细胞株的生长速度；MTT法检测转染细胞株对化疗药物的敏感性；损伤刮擦实验和TRANSWELL小室实验分别检测转染细胞株的迁移与侵袭能力。结果：在计算机辅助下成功地设计并构建了5个RhoC的小干扰RNA载体，Western blot显示其中一个RhoC的小干扰RNA RhloC-s362对RhoC的表达有明显的抑制作用；尽管下调RhoC的表达对胃癌细胞的生长和药物敏感性元明显影响，但可显著抑制肿瘤细胞的迁移与侵袭。结论：RhoC siRNARhoC-s362能够明显抑制胃癌SGC7901细胞中RhoC的表达，并进而抑制胃癌细胞的迁移与侵袭，提示RhoC可能在胃癌转移中发挥重要作用。

中国肿瘤生物治疗杂志读者·作者·编者

参考文献题名后需标注文献类型标志代码7-7

中国肿瘤生物治疗杂志论著

HPV16Z-Hsp65-E6／E7无佐剂重组蛋白疫苗的研究8-12

摘要：目的：研究治疗性HPV16Z-Hsp65-E6／E7无佐剂重组蛋白疫苗的抗肿瘤活性。方法：通过淋巴细胞增殖实验和细胞毒性杀伤实验研究该疫苗激发的细胞免疫反应及反应强度；观察该疫苗对小鼠TC-1肿瘤细胞移植瘤的体内治疗作用和对小鼠生存期的影响。结果：重组蛋白疫苗免疫小鼠后，小鼠脾淋巴细胞与该疫苗体外混合培养增殖明显，并可特异性地在体外杀伤TC-1细胞；体内抑瘤试验显示该疫苗对HPV16病毒转化的TC-1细胞小鼠移植瘤的生长有显著的抑制作用。结论：该疫苗能激发特异性细胞免疫反应；显著抑制HPV16转化的TC-1肿瘤细胞生长。

中国肿瘤生物治疗杂志研究简报

RAd-ODC／Ex3as对肺癌A-549细胞的抑制作用12-12

摘要：鸟氨酸脱羧酶（ornithine decarboxylase，ODC）是多胺生物合成途径中的第一个限速酶。据报道，ODC的含量在许多肿瘤中增高，并与肿瘤的复发有一定的关系。为探讨以ODC为靶标进行反义基因治疗的可行性，本实验利用表达ODC第三外显子反义RNA的腺病毒介导的rAd-ODC／Ex3as，将腺病毒介导的ODC反义RNA转入肺癌A-549细胞中，观察其体外抑制肺癌细胞的作用。

中国肿瘤生物治疗杂志论著

重组血管抑制剂CHM-I对骨肉瘤的治疗作用13-17

摘要：目的：观察重组人软骨调节素（chondromodulin，CHM）蛋白对骨肿瘤的治疗作用。方法：利用RT-PCR技术从人软骨组织中扩增出CHM—I基因片段，并将其克隆到原核表达载体pET28a，在大肠杆菌中诱导表达和纯化重组人软骨调节素蛋白，将重组蛋白与人脐静脉上皮细胞或MG-63骨肉瘤细胞共培养，观察其对内皮细胞形成管样结构和MG-63骨肉瘤细胞生长的影响；将重组蛋白局部注射裸鼠皮下肿瘤，观察其对肿瘤形成的影响。结果：获得纯化的重组人软骨调节素蛋白，该蛋白在体外可以抑制血管内皮细胞管样结构的形成而对肿瘤细胞的生长无影响；重组蛋白瘤内注射可以抑制肿瘤在裸鼠体内的生长。结论：重组人软骨调节索蛋白通过抑制血管形成而抑制肿瘤生长，具有良好的临床应用价值。

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

《结核病与胸部肿瘤》杂志征稿启事17-17

中国肿瘤生物治疗杂志论著

慢病毒导入的PLCγ1 siRNA对人大肠癌细胞增殖和黏附的影响18-21

摘要：目的：制备在人大肠癌细胞系LoVo中稳定抑制PLCγ1（phospholiase C-gamma1）的重组病毒，建立PLCγ1表达降低的细胞系，以便客观研究该基因的作用。方法：制备产生PLCγ1 siRNA分子的重组慢病毒，在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应用Western—blot和RT—PCR对细胞中PLCγ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析，XTF法和黏附能力测定分别检测其对细胞增殖和黏附的影响。结果：PLCγ1 siRNA显著下调了LoVo细胞中PLCγ1的表达，所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率，LoVo细胞的黏附能力显著降低，细胞增殖元明显改变。结论：研究证实了PLCγ1基因可显著地影响大肠癌LoVo细胞的黏附能力，为利用PLCγ1介导的信号通路进行肿瘤基因治疗提供了实验依据。

中国肿瘤生物治疗杂志科技动态

活化型抗CD40抗体对人成熟和未成熟DC的不同作用21-21

摘要：CD40为48000的跨膜糖蛋白细胞，CD40L为其配体，分属于TNF-α受体／TNF-α家族成员。树突状细胞（DC）、巨噬细胞、上皮细胞、造血祖细胞以及活化的CD8^＋细胞都表达CD40。而CIMOL集中表达于活化的T细胞、B细胞和血小板表面。在免疫应答中，CD40与CD40L相互作用是B细胞活化的最重要共刺激信号，并能活化未成熟DC使之具有免疫原性，上调CIM^＋T细胞免疫应答。因此，人们关注于CD40单克隆抗体的治疗作用并发现其在一系列床前实体肿瘤和淋巴瘤模型中具有治疗潜能。该实验利用人离体混合淋巴细胞培养体系发现抗CIM0活化型抗体能促进LPS或TNF-α（TLR活化剂）诱导的成熟DC的凋亡．从而削弱了成熟DC产生特异性T细胞应答的能力，具有重要的免疫调节功能。

中国肿瘤生物治疗杂志论著

硫代修饰脂质体包裹反义VEGF寡核苷酸对肺癌血流的影响22-26

摘要：目的：探讨硫代修饰脂质体包裹的反义VEGF寡核苷酸对肺癌血流的抑制作用。方法：40只C57BL／6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞后，随机分为4组：VEGF反义寡核苷酸组（ASODN）、VEGF正义寡核苷酸组（SODN）、VEGF错义寡核苷酸组（MODN）及对照组。接种24h内，4组小鼠分别皮下注射经脂质体包裹的ASODN、SODN及MODN进行治疗，对照组只注射脂质体，每周2次，连续4周。观察各组小鼠肿瘤的生长情况，超声检测肿瘤血管的收缩期峰值速度（Ps）及阻力指数（砌），原位杂交法及RT—PCR法对肿瘤内VEGFmRNA表达水平进行检测。结果：ASODN组小鼠肿瘤生长受到显著抑制，PS、RI与其它各组相比有明显差异（P〈0．01），VEGF mRNA表达水平亦有明显降低。结论：硫代反义VEGF寡核苷酸能明显抑制肺癌血流，从而抑制肿瘤生长。

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

第九届全国肿瘤生物治疗学术会议征稿启事26-26

中国肿瘤生物治疗杂志论著

靶向生存素基因siRNA诱导骨肉瘤细胞株U-2OS的凋亡27-31

摘要：目的：体外转录合成生存素（survivin）基因siRNA，观察其在骨肉瘤细胞株U-2OS中抑制survivin基因后细胞增殖及细胞凋亡情况。方法：将U-2OS细胞分为A组（空白对照组）、B组（非特异性转染组）、C组（特异性转染组），在荧光显微镜下观察转染前后细胞形态的改变，用RT—PCR和Western blot法分别检测转染前后survivin基因mRNA和蛋白的干涉效果，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，并比较各组结果。结果：荧光显微镜下可见转染后细胞增殖变慢，凋亡细胞增加；RT-PCR结果显示survivin siRNA明显抑制survivin基因mRNA表达。Western blot法检测C组蛋白阳性表达率比A、B两组显著降低（P〈0．01）；特异性转染组的细胞增殖缓慢，与其它两组比较有显著性差异（P〈0．01）。流式细胞仪检测C组细胞凋亡率与其他两组比较有显著性差异（P〈0．01）。结论：体外转录合成特异性survivin siRNA能有效抑制U-2OS细胞中survivln mRNA及蛋白表达，从而抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。RNA干扰技术为骨肉瘤的基因治疗提供了一种新策略。

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

《中国肿瘤生物治疗杂志》征稿启事31-31

中国肿瘤生物治疗杂志论著

抗γ-精浆蛋白人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的构建及导向筛选32-36

摘要：目的：建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库，筛选抗γ-精浆蛋白（γ-sm）人源性抗体轻链。方法：PCR扩增前列腺癌患者外周血淋巴细胞人抗体全套轻链基因，克隆人含鼠源抗γ—8m抗体Fd基因的pComb3X噬粒中，建立人．鼠杂合Fab噬菌体抗体库。通过稀释滴定、限制性酶切等分别对库容、基因重组率和多样性进行鉴定。以M13K07辅助噬菌体超感染，利用纯化的γ-sm对杂合库进行筛选，对筛出的阳性克隆进行功能检测。结果：构建了库容量为1．2×10^7CFU、重组率为90％、多样性好的人-鼠杂合噬菌体抗体库。ELISA检测出2个强阳性克隆，Western blot确证为抗γ-sm的人-鼠杂合Fab，竞争ELISA显示其表观亲和力约为亲本鼠抗体亲和力的71．8％。DNA测序显示筛到的人源轻链可变区基因属IGKV4-1＊01胚系家族。结论：成功得到人源性抗γ-sm抗体轻链，为进一步获得全人源化抗体奠定了基础。

用RNAi沉默survivin基因表达对前列腺癌细胞系PC3的影响37-41

摘要：目的：运用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术阻断前列腺癌细胞系PC3中survivin基因的表达，并研究survivin基因沉默后对PC3细胞产生的影响。方法：用真核转录载体pSilencer^TM3．1-H1 neo构建针对survivin基因的重组真核转录载体pSilencer3．1-SVVl、pSilencer3．1-SVV2和pSilencer3．1-SVV3，并用脂质体法转染前列腺癌细胞系PC3，通过RT—PCR、蛋白印迹实验检测survivin的表达变化，并用流式细胞术、MTT法检测转染后PC3细胞的凋亡、细胞周期、细胞生长速度、对顺铂的敏感性等方面的变化。结果：重组载体pSilencer3．1-SVV2和pSilencer3．1-SVV3有效地阻断了PC3细胞中survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达（P〈0．01）。重组载体转染PC3细胞后，与对照组相比，细胞的凋亡增加了10％～15％；细胞生长速度明显变慢，其细胞数在84h时与对照组相比减少约30％；G1期细胞增加了10％。G2期和S期细胞减少了5％以上。加入顺铂后，pSilencer3．1-SVV2、pSilencer3．1-SVV3重组质粒转染的PC3细胞的存活数下降了35％～45％，细胞凋亡则增加了10％-14％。结论：初步证明了survivin基因在前列腺癌细胞分化增殖、抗凋亡等方面所扮演的重要角色，为进一步阐明survivin基因与前列腺癌的关系以及以survivin基因为靶点的前列腺癌基因治疗研究奠定了基础。

中国肿瘤生物治疗杂志读者·作者·编者

文稿中统计学符号规范化书写的要求41-41

中国肿瘤生物治疗杂志论著

Bcl-XL siRNA抑制人结肠癌细胞生长的研究42-44

摘要：目的：探讨应用siRNA技术下调Bcl-xL对人结肠癌细胞生长的抑制作用。方法：采用人结肠癌细胞株DLDl，利用人工合成的Bcl-XL靶向小分子干扰RNA（siRNA）转染DLD1细胞，通过Western blot法检测转染细胞Bcl—XL蛋白的表达，流式细胞仪检测处理后细胞的凋亡情况，锥虫蓝染色法计数存活细胞。结果：与空白组和对照组相比，转染Bcl-XL siR-NA组的Bcl-xL蛋白表达显著性下降，凋亡细胞的数量显著增加（P〈0．05），细胞存活率显著降低（P〈0．05）。结论：Bcl—XL siRNA能显著降低人结肠癌细胞的Bcl-XL蛋白表达，有效抑制细胞的生长，为结肠癌的治疗提供了一种新的治疗策略。

中国肿瘤生物治疗杂志读者·作者·编者

文稿中数字用法的要求44-44