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中国肿瘤生物治疗 2004年第03期杂志 文档列表

中国肿瘤生物治疗杂志论著

EBV-LMP2多肽激活的特异性CTL抑制同HLA-Ⅰ亚型的鼻咽癌移植瘤形成157-160

摘要：目的:研究异体的EBV-LMP2表位多肽所激活的特异性CTL对具有相同HLA-Ⅰ类分子亚型鼻咽癌细胞(CNE2)移植瘤的抑制作用,探讨异体间的免疫治疗.方法:先将CNE2细胞接种于Scid鼠背部皮下建立移植瘤模型;然后通过SSP-PCR确定CNE2的HLA-Ⅰ类分子亚型,并选取与CNE2有相同HLA-Ⅰ类分子亚型的外周血淋巴细胞;实验再将3组不同细胞分别接种于Scid鼠北部皮下,(1)对照组:仅接种CNE2细胞;(2)T细胞组:接种未激活的淋巴细胞与CNE2混合细胞.(3)CTL组接种经EBV-LNP2多肽激活的特异性CTL与CNE2混合细胞.观察EBV-LMP2多肽激活的CTL对CNE2移植瘤生长的影响.结果:CNE2于一周左右在Scid鼠背部形成肿块,病理学鉴定为低分化上皮癌;SSP-PCR显示CNE2含有HLA-A11基因位点;含有相同基因位点的DC负载LMP2-A11多肽所激活的CTL,明显抑制CNE2移植瘤生长.结论:EBV-LMP2多肽所激活的特异性CTL抑制HLA亚型相同的CNE2移植瘤的形成.

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

第三届亚洲-大洋洲免疫学联合会学术大会征文通知160-160

中国肿瘤生物治疗杂志论著

嵌合轻链为模板导向筛选人源性抗肝癌抗体重链Fd片段161-165

摘要：目的:利用噬菌体抗体库和导向选择技术,以抗HAb18G嵌合抗体轻链为模板,筛选人源性抗肝癌抗体Fd片段.方法:利用RT-PCR自肝癌患者外周血淋巴细胞中扩增全套人抗体重链Fd基因片段,克隆入含嵌合L链的展示载体pComb3X,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库.然后,利用大肠杆菌表达的非融合HAb18GE为抗原进行亲和筛选,利用pⅢ融合抗体的形式进行克隆鉴定,并对筛选出的杂合抗体进行初步的功能检测.结果:构建成功库容量为2×107PFU的杂合人-鼠噬菌体抗体库,利用非融合表达的HAb18GE进行6轮筛选.ELISA及流式细胞仪检测,其中7个克隆呈特异性阳性反应.其中克隆AP6-2和AP6-7亲和力较高,测序显示其基因序列相同,且与亲本抗体恒定区序列相同,属IgG2亚类,可变区属VH3家族.结论:通过本实验,利用嵌合轻链为模板,进行Fd片段替换,成功筛选到人源性抗体Fd片段.

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

第二届《中国肿瘤生物治疗杂志》编委会成立会议及其首次编委会会议在银川召开165-165

中国肿瘤生物治疗杂志论著

Hsp70-肿瘤抗原肽复合物防治小鼠黑色素瘤B16肺转移的作用166-169

摘要：目的:探讨热休克蛋白70-肿瘤抗原肽复合物(Hsp70-antigen peptide complexes)对小鼠黑色素瘤B16转移的防治作用.方法:分别从小鼠腿部接种的B16实体瘤及小鼠肺B16转移灶提取混合抗原肽,体外与Hsp70结合制得复合物,此复合物免疫小鼠后用于预防或治疗经尾静脉接种转移至肺的B16黑色素瘤,观察其对肿瘤转移的防治作用.结果:Hsp70-肿瘤抗原肽复合物免疫后肺转移灶节结数显著减少(P＜0.01),体外脾细胞表现出对B16较高的杀伤率(P＜0.01);并对肺转移灶有显著的治疗作用(P＜0.01),而从B16实体瘤提取的混合抗原肽制得的复合物比从肺转移灶提取的混合抗原肽制得复合物有更好的治疗效果(P＜0.01),表现出体外脾细胞对B16更高的杀伤率(0.01＜P＜0.05).结论:Hsp70-肿瘤抗原肽复合物对肿瘤的转移有明显的防治作用,而从实体瘤提取的混合抗原肽比从转移灶提取的混合抗原肽更为有效.

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第八次全国学术交流会议征文通知169-169

中国肿瘤生物治疗杂志论著

MUC1肿瘤抗原表位PDTRP基因免疫诱导的体内外抗瘤效应170-174

摘要：目的：构建MUCl肿瘤抗原表位γIneo-PDTRP质粒，基因免疫诱导机体产生有效的体内外抗瘤效应。方法：用InsightⅡ将PDTRP抗原表位与MUCl分子模拟，构建含PDTRP的抗原化抗体表达质粒γIneo-PDTRP，体外转染检测表达。用该质粒基因免疫小鼠，免疫后ELISA动态检测血清中抗PDTRP抗体的产生及特异性细胞免疫应答；以4T1-PDTRP肿瘤细胞攻击经γIneo-PDTRP免疫小鼠，观察免疫保护效应。结果：三串联肿瘤抗原表位PDTRPDTRPDTRP模拟了MUCl核心序列的空间结构；构建γIneo-PDTRP质粒并在体外转染表达，基因免疫小鼠诱导出特异性抗PDTRP体液和细胞免疫应答，免疫小鼠对4T1-PDTRP肿瘤细胞的攻击具有显著的体内保护效应。结论：MUCl肿瘤抗原表位PDTRP可模拟MUCl核心序列的天然构象，γIneo-PDTRP基因免疫在体外诱导特异性的体液和细胞免疫应答，体内诱导对机体的免疫保护效应．

全反式维甲酸对结肠癌不同增殖潜能细胞株增殖的抑制作用研究175-178

摘要：目的:研究ATRA对结肠癌不同增殖能力细胞株生长抑制的可能机制,为ATRA应用于结肠癌的治疗提供可靠依据.方法:应用细胞观察、FACS和MTT方法,研究ATRA对结肠癌不同增殖能力细胞株LS174T和CW-2细胞的生长抑制现象.结果:LS174T的生长速度明显比CW-2细胞快.ATRA对体外培养的结肠癌细胞株LS174T和CW-2细胞的生长有明显抑制和诱导细胞分化作用.结论:ATRA对LS174T和CW-2细胞的生长有抑制作用,抑制细胞增殖的程度与ATRA的浓度有关,ATRA对结肠癌细胞有一定的抑制癌细胞增殖和诱导癌细胞分化作用.

中国肿瘤生物治疗杂志研究简报

大肠癌和大肠腺瘤DNA含量与细胞增殖活性检测的临床意义178-178

摘要：分子生物学及细胞生物学的研究表明,恶性肿瘤最重要的生物学特征为肿瘤细胞异常增殖和分化不良、浸润性生长和远处转移以及细胞恶性特征的遗传性.以上3点癌细胞共同生物学特征的出现,均以细胞核DNA含量和(或)染色体倍体与功能等微细异常为物质基础.因此,测量和分析癌前病变及癌组织中细胞核DNA含量与倍体对恶性肿瘤的病理诊断、恶性程度判定、疗效评估、预测预后均具有重要价值.本研究应用流式细胞术(FCM)检测了经手术或肠镜取得的对照组(正常大肠黏膜)、大肠腺瘤(绒毛状腺瘤、管状腺瘤)和大肠癌组织,检测了它们的DNA倍体、DNA含量和细胞的增殖活性,并进行了临床分析.

中国肿瘤生物治疗杂志论著

人血管抑制因子Vasostatin短片段（120-180aa）的克隆、表达及功能研究179-182

摘要：目的:利用基因工程技术,克隆并表达人血管抑制因子Vasostatin120-180aa功能区片段,探讨其对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管抑制的作用.方法:采用PCR技术扩增人血管抑制因子Vasostatin120-180aa功能区基因,并利用pQE30原核表达系统诱导表达Vasostatin120-180aa,经镍金属螯合层析法纯化,通过鸡胚绒毛尿囊膜实验验证其抑制新生血管生成的作用.结果:PCR扩增出了长度为180 bp的Vasostatin120-180aa功能区基因,后经pQE30原核表达系统表达并纯化出Vasostatin120-180aa,SDS-PAGE显现一条约8 kD的阳性条带,Vasostatin120-180aa可显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的生成.结论:原核表达的Vasosta-tin120-180aa功能区片段具有生物学活性,可明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的生成,在一定范围内呈量效依赖性.

中国肿瘤生物治疗杂志研究简报

IFN-α对CML树突状细胞表型及功能的影响182-182

摘要：临床观察表明IFN-α治疗早期慢性期CML患者有效,并且IFN-α治疗CML达到部分细胞遗传学缓解以上的患者较之IFN-α治疗无效者其生存期明显延长.IFN-α治疗CML有效的机制尚不清楚,可能与其增强DC的表型及功能有关.DC是体内唯一能激活初始型T细胞的抗原递呈细胞,在机体免疫系统中处于中心地位.我们采用CML患者骨髓单个核细胞,体外有血清培养体系中观察IFN-α对CML-DCs的分化及其功能的影响.

中国肿瘤生物治疗杂志论著

肿瘤增殖基因Ki67反义寡核苷酸对人肾癌细胞增殖及凋亡的影响183-186

摘要：目的:探讨肿瘤增殖基因Ki67反义寡核苷酸(Ki67-ASODNs)对人肾癌细胞增殖及凋亡的影响.方法:将Ki67-ASODNs转染人肾癌细胞系786-0细胞,采用免疫组化、Western blot技术检测Ki67表达,细胞生长曲线、3H-TdR掺入试验等检测肾癌细胞增殖,免疫组化TUNEL法检测肾癌细胞凋亡.结果:Ki67-ASODNs处理组(10,40 μmol/L)的786-0细胞Ki67表达阳性率(%)(29.9±0.4,24.5±1.2)降低,Ki67蛋白(%)(82.1±2.2,66.6±4.2)降低,分别与对照组(33.4±0.8,100)比较,差异有显著性(P＜0.01).Ki67-ASODNs处理组的3H-TdR掺入率(%)(44.5±4.4,34.5±3.2)与对照组(100)比较,差异有显著性(P＜0.01).Ki67-ASODNs处理组凋亡细胞阳性率(%)(12.7±0.5,23.1±2.1)增加,与对照组(9.3±2.0)比较,差异有显著性(P＜0.01).结论:肿瘤增殖基因Ki67反义寡核苷酸能抑制人肾癌786-0细胞Ki67基因表达,进而抑制其增殖,促进其凋亡,且有剂量依赖性.

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

书讯186-186

中国肿瘤生物治疗杂志论著

反义寡核苷酸抑制survivin基因表达及肝癌细胞生长的研究187-190

摘要：目的:采用反义寡核苷酸抑制肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其对肝癌细胞生长的作用.方法:采用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,Western blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测凋亡细胞比率,检测转染前后细胞贴壁率变化,并绘制细胞生长曲线.结果:survivin反义寡核苷酸转染后,肝癌细胞survivin蛋白及mRNA表达均显著降低,细胞贴壁率显著降低,细胞增殖活性明显受抑,细胞凋亡率显著增加.结论:survivin反义寡核苷酸转染可以有效降低细胞内survivin基因的表达,诱导细胞发生凋亡,抑制肝癌细胞生长.

中国肿瘤生物治疗杂志简讯

《中国肿瘤生物治疗杂志》征订启事190-190

中国肿瘤生物治疗杂志论著

血管内皮生长因子促进小鼠胚胎干细胞生成CD34^＋细胞的研究191-194

摘要：目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)体外促进小鼠胚胎干细胞系ES-D3生成CD34+细胞的能力.方法:将ES-D3形成拟胚体,将拟胚体细胞转入含不同浓度的VEGF和VEGF+干细胞因子(stem cellfactor,SCF)的培养基中.实验分6组,分别为VEGF 5μg/L组、VEGF 10 μg/L组、VEGF 20μg/L组、VEGF 5μg/L+SCF组、VEGF 10μg/L+SCF组、VEGF20μg/L+SCF组,同时设不加因子的自发分化对照组.RT-PCR检测CD34 mRNA的表达,流式细胞仪检测CD34+细胞的比例,甲基纤维素半固体培养法检测生成造血集落的能力.结果:经过1周的诱导培养,实验组生成的细胞可以表达CD34 mRNA,CD34+细胞的比例也升高,并可形成造血祖细胞的集落.从CD34 mRNA的表达水平、诱导生成CD34+细胞的比例和生成的集落数量看,VEGFμg/L+SCF组和VEGF 10μg/L+SCF组的诱导效率最高.结论:VEGF能够促进ESC生成CD34+细胞,尤以与SCF合用时,其诱导效率更高.

AML-M2a诱导TCRVβT细胞的克隆性增殖和细胞毒作用195-199

摘要：目的:了解急性髓性白血病(AML)M2a细胞诱导的体外增殖T细胞的特异性杀伤作用和克隆性增殖情况.方法:利用肿瘤细胞-T淋巴细胞混合培养方法(MLTC),分别收集3例经AML-M2a细胞体外诱导不同扩增时间的健康人T细胞,利用LDH释放方法分析其特异性细胞毒作用,同时利用RT-PCR和基因扫描方法分析经AML-M2a细胞诱导前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族基因的表达和克隆性情况.结果:在培养第12天和第21天时,1例AML-M2a细胞诱导的3例健康人T细胞对该诱导细胞的平均杀伤率分别为39.88±7.79%和62.14±9.79%,而对AML-M2a患者和健康人外周血T细胞均无杀伤作用.TCR Vβ谱系分析发现诱导后3例健康人T细胞均出现Vβ16的克隆性增殖.结论:AML-M2a细胞可诱导健康人T细胞成为具有克隆性增殖的特异性CTL,并以Vβ16的克隆性增殖为主.

中国肿瘤生物治疗杂志研究简报

来源不同的三种树突状细胞介导白血病免疫杀伤效应比较研究199-199

摘要：树突状细胞(dendritic cells,DC)是迄今为止发现的递呈功能最强的专职抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC),通过启动细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lympho-cytes,CTL)而发挥特异性抗肿瘤免疫效应.本研究利用流式细胞技术及体外细胞培养方法,观察脐血、健康人及慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者外周血等不同来源的单个核细胞在细胞因子(GM-CSF,TNF-a,IL-4)培养条件下诱导DC,观察DC细胞形态、产率、免疫表型的差别,同时观察了Ph染色体阳性的CML细胞可溶性抗原刺激后的DC所诱导的CTL特异性抗白血病效应,为临床最终治愈白血病提供实验依据.结果表明:3种来源的DC均表现出典型的镜下DC形态,DC产率分别为74.43%、61.23%和60.48%,脐血DC产率高于其它2组(P＜0.001),这可能由于:①脐带血中含有较丰富和更纯的造血干/祖细胞(与外周血比),其分化增殖的潜能更强;②脐血血浆中含有丰富的造血因子如GM-CSF、干细胞生长因子(SCF)等DC生长所必须的因子.培养第7天后,3组DC均高表达HLA-DR,CD83,CD1a,CD80等特征性DC分子.