体外建立dsRNA结合甲基化转移酶抑制剂转染猪肾细胞的模型

作者:王晓铄; 俞英; 敖红; 郑云胜; 王楚端

摘要:病毒性疾病对现代养猪业造成了巨大的经济损失。猪RNA病毒基因组在复制过程中形成双链RNA(dsRNA)的复制型中间体,并诱导Ⅰ型干扰素的产生,从而对病毒的增殖起抑制作用,这是宿主抗RNA病毒感染的重要天然防线。猪许多病毒的dsRNA对上皮细胞有明显的趋化作用,而DNA甲基化转移酶抑制剂Aza—CdR可诱导感染细胞凋亡并发挥抗病毒作用。本实验结合荧光定量PCR,计算干扰素相关基因(TLR3、IRF、IFNA)的相对表达量。同时,通过设计剂量和时间依赖实验,利用CCK8实验方法,计算细胞生存比率,最终确定dsRNA模拟物Poly I:C体外转染PKl5细胞后,Aza—CdR处理的理想细胞转染模型。此模型能有效地在体外模拟活病毒感染细胞的效果,更便于在常规实验室使用,是研究猪宿主与病毒感染关系的理想细胞模型。

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关键词:
  • 双链rna
  • dna甲基化转移酶抑制剂
  • 转染模型

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期刊名称:中国畜牧

期刊级别:北大期刊

期刊人气:14273

杂志介绍:
主管单位:中国科学技术协会
主办单位:中国畜牧兽医学会
出版地方:北京
快捷分类:农业
国际刊号:0258-7033
国内刊号:11-2083/S
邮发代号:82-147
创刊时间:1953
发行周期:月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:1.05
综合影响因子:1.41