重组结核疫苗AEC／BC02诱导豚鼠的I型超敏反应
摘要：目的评价重组结核疫苗AEC／BC02诱导豚鼠I型超敏反应炎性介质的释放。方法将18只雄性豚鼠分成3组：AEC／BC02疫苗组、阴性对照组和阳性对照组，每组6只，分别经后腿肌肉注射AEC／BC02疫苗、生理盐水和卵清蛋白（ovalbumin，OVA），共7针，间隔10d。于末次免疫后14d，各组豚鼠经心脏采血，收集抗凝血，加入不同刺激物；豚鼠采血后，吸人二氧化碳致死，分离豚鼠气管，置于含不同刺激物的KBS缓冲液中；剪开分离气管后的豚鼠腹腔，分别灌入含不同刺激物的KBS缓冲液；AEC／BC02疫苗组用重组蛋白Ag85b、EC及BCG-CpG-DNA（简称CpG）刺激，阴性对照组未刺激，阳性对照组用OVA蛋白刺激。按组胺检测试剂盒和半胱氨酰白三烯检测试剂盒说明书，采用ELISA法检测外周血、气管和腹腔特异性刺激后释放的组胺和半胱氨酰白三烯含量。结果AEC／BC02疫苗组外周血释放的组胺含量（41．0±23．4）ng／ml与阳性对照组（46．4-4-28．2）ng／ml比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；但气管和腹腔肥大细胞释放的组胺含量[气管：（27．4±10．8）ng／ml和腹腔：（9．7±8．1）ng／m1]均明显低于阳性对照组[气管：（71．44-21．1）ng／ml，腹腔：（23．5±12．4）ng／m1）]，释放的半胱氨酰白三烯含量[气管：（236．4±63．5）pg／ml，腹腔：（173．4±31．3）pg／m1]也均明显低于阳性对照组[气管：（458．0±208．2）pg／ml，腹腔：（259．2±30．4）Pg／ml]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论肌肉注射途径下，AEC／BC02疫苗给药7针不会诱导豚鼠严重的I型超敏反应。灭活轮状病毒与灭活肠道病毒71型联合疫苗的免疫效果
摘要：目的评价灭活轮状病毒（rotavirus，RV）与灭活肠道病毒71型（enterovirus71，EV71）联合疫苗的免疫效果及两种抗原间的相互作用。方法将灭活RV与EV71按不同抗原含量配比制成联合疫苗免疫ICR小鼠，同时设单价疫苗组，均经小鼠腿部肌肉注射，隔2周免疫1次，共2次，分别于每次免疫后2周，经小鼠尾静脉采血，分离血清，经56。c灭活30rain后，采用血清中和试验检测小鼠血清中抗RV和抗EV71中和抗体效价。结果初次免疫后14d，各组小鼠血清中RV特异性中和抗体阳转率为50％-67％，中和抗体效价为2．2-2．8，加强免疫后14d，抗体阳转率达100％，中和抗体效价为28．5-35．9。初次免疫后14d，各组小鼠血清中抗EV71中和抗体阳转率为83％-100％，中和抗体效价为4．0-7．1，加强免疫后14d，中和抗体阳转率达100％，中和抗体效价为25．4-71．8；联合疫苗组与单价疫苗组间抗RV及抗EV71中和抗体效价差异无统计学意义（P〉0．05）；Rv和EV71抗原量按160／160EU配比时，可诱导出最高的抗RV抗体及抗EV71抗体应答。结论Rv与EV71联合疫苗可诱导小鼠产生针对两种病毒的体液免疫应答，抗体应答水平与疫苗抗原配比剂量相关，未发现两种抗原间有协同或拈抗作用。不同裂解工艺制备的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的透射电子显微镜观察
摘要：目的透射电子显微镜观察不同工艺制备的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗形态，筛选最佳裂解工艺，为疫苗的大规模生产提供参考依据。方法应用透射电镜对4种不同裂解工艺制备的甲型H1N1流感病毒疫苗进行形态观察，采用中和试验分析其免疫原性，异常毒性试验分析其安全性。结果透射电镜观察显示4种样品均无完整病毒，样品1裂解程度最大，囊膜破裂，多数为病毒碎片；样品2大多数囊膜未破损，缺少纤突；样品3较完整的病毒颗粒略小（约30-40nm），纤突清晰；样品4大多数病毒颗粒保留着纤突，但纤突已不整齐清晰。样品2组小鼠中和抗体滴度最低，而样品1、3、4组较高，与样品2组相比，差异明显，其中以样品3组最高；样品2组小鼠、豚鼠体重增加不明显，而样品1、3、4组小鼠、豚鼠体重增加明显，与样品2组相比差异显著，其中以样品3组最明显。结论电镜观察可直观反映疫苗裂解程度；3种裂解工艺均可用于疫苗生产，其中样品3具有较好的免疫原性和安全性，其工艺可作为最佳裂解工艺用于后续疫苗生产。氢氧化铝和PolyIC佐剂在结核亚单位疫苗中的佐剂效应
摘要：目的观察重组抗原Ag85b和ESAT6-CFPIO（EC）联合氢氧化铝佐剂（A1）和PolylC（IC）佐剂诱导小鼠的免疫效果及对豚鼠结核的预防作用。方法将BALB／c小鼠随机分为6组：PBS组、Pro组（Ag85b＋EC）、Al＋IC组、Pro＋Al组（Ag85b＋Ec＋A1）、Pro＋Ic组（Ag85b＋Ec＋Ic）、Pro＋Al＋Ic组（Ag85b＋Ec＋Al＋IC），经小鼠后肢内侧肌肉注射，共注射3次，间隔10d。末次注射后2周，摘眼球采血，分离血清，采用间接ELISA法检测IgG抗体效价；同时处死小鼠，无菌取脾，分离淋巴细胞，采用ELISPOT法检测抗原特异性的IFNv水平。将豚鼠随机分为3组：Ns组、BCG组和Pro＋Al＋Ic组，NS组和Pro＋Al＋Ic组免疫3次，间隔10d；BCG组仅免疫1次，于前两组第3次免疫时进行免疫。末次免疫30d后经皮下注射结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis，Mtb）菌液，攻毒41d后，处死豚鼠，解剖，检测肝、脾、肺的病变程度，并进行评分，同时分离脾脏Mtb，计算每只豚鼠的脾菌分离对数值。结果经Ag85b多肽和Ec多肽刺激后，Pro＋Al＋Ic组IFM斑点形成细胞（spotformingcell，SFC）数均显著高于其他各组（P〈0．0001或〈0．05），同组间经Ag85b多肽刺激后的SFC均高于经Ec多肽刺激后的SFC。Pro＋Al＋Ic组血清Ag85b特异性IgG抗体效价最高，与Pro＋Al组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），但与Pro＋Ic组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；Pro＋Al＋Ic组血清EC特异性IgG抗体效价最高，与Pro＋Al和Pro＋Ic组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；同组间Ag85b特异性IgG抗体效价高于Ec特异性IgG抗体效价。Pro＋Al十Ic组豚鼠脏器综合病变指数和脾菌分离对数值均显著高于BCG组（P〈0．0001），略低于NS组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论氢氧化铝佐剂和PolylC佐剂联合使用可协同增强结核分枝杆菌抗原Ag85b和Ec的细胞免疫应答及体液免疫一例人狂犬病病例的病毒分离及鉴定
摘要：目的对2013年武汉市新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行病毒分离及鉴定。方法采用直接荧光抗体法（DFA）和ELISA法检测狂犬病病毒（rabiesvirus，RABV）抗原；提取病毒RNA，设计12对引物，分段扩增全基因组，克隆后测序，应用DNAStar软件包中的MegAlign模块对基因所编码的氨基酸进行对位分析；ClustMX1．83软件和GENEDOC软件用于序列比对；MEGA4．1软件以Kimuratwo-parameter模型邻位相连法（Neighbor-Joining，NJ）构建系统进化树（Bootstrap．1000），并与国内外疫苗株及近期湖北省及周边地区分离的代表性街毒株进行同源性分析。结果分离的街毒株13WHl0的RABV抗原呈阳性；13WHl0街毒株基因组全长11924bp，属基因I型狂犬病病毒；13WH10与湖北省及周边街毒株处于同一亚群，与CTN-1疫苗株及东南亚地区的街毒株同源性较高，高于欧美国家疫苗株。结论成功对武汉市2013年新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行了病毒分离及鉴定；CTN-1与RABV国内分离株同源性较高，系统进化关系较近，提示采用CTN-1疫苗株生产的狂犬病疫苗可有效预防中国狂犬病的流行。人叉头转录因子O亚型3基因重组表达质粒的构建及鉴定
摘要：目的构建人叉头转录因子O亚型3（forkheadboxClaSS03，FOX03）基因重组表达质粒，并检测其在人外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuelearcell，PBMC）中的表达。方法利用3对引物从人cDNA巾分别扩增大小为382、829和891bp的3个目的片段，胶回收后进行拼接，获得hFOX03的CDS片段，与pcDNA3．1（＋）载体连接，构建重组表达质粒pcDNA3．1（＋）-hFOX03，转染人PBMC，采用Real-timePCR和Westernblot分别检测hFOX03基因mRNA水平及蛋白表达水平。结果重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确；转染PBMC后，pcDNA3．1（＋）．hFOX03组hFOX03基因mRNA的水平分别为转染试剂对照组和pcDNA3．1（＋）组的2599．7和2377．8倍，且差异均有统计学意义（P〈0．001）；pcDNA3．1（＋）-hFOX03组hFOX03蛋白的表达水平分别为转染试剂对照组和pcDNA3．1（＋）组的2和1．8倍，且差异均有统计学意义（P〈0．01）；而转染试剂对照组和pcDNA3．1（＋）组问hFOX03基因mRNA水平和蛋白的表达水平差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论成功构建了pcDNA3．1（＋）-hFOX03重组表达质粒，其在人PBMC中能进行hFOX03基因mRNA的转录及蛋白的表达．为进一步研究hFOX03的生物学功能及其作用机制奠定了基础。融合蛋白TF-CTP-OD-HA和TF-CTP-OD1-HA的原核表达、纯化及其生物学活性
摘要：目的原核表达、纯化融合蛋白TF-CTP．OD-HA和TF-CTP-OD1-HA，并检测其生物学活性。方法以pET32a（＋）CTP-OD-HA为模板，PCR扩增OD序列中的第l-87bp和第190．216bp序列，并通过重叠PCR连接成为新序列，命名为ODl，克隆至pET32a（＋）载体，构建原核表达质粒pET32a（＋）CTP-ODI-HA；再分别以pET32a（＋）CTP．0D．HA和pET32a（＋）CTP-OD1-HA质粒为模板，PCR扩增CTP-0D—HA和CTP．ODl．H段，分别克隆至表达载体pCOLD-TF-DNA，构建质粒pCOLD-TF．CTP-0D-HA和pCOLD-TF-CTP-OD1-HA，转化EcoliBL21，IPTG诱导表达TF-CTP-OD-HA和TF-CTP-OD1-HA融合蛋白；表达的融合蛋白经镍离子亲和层析纯化和脱盐浓缩后，采用M1Tr法和DAPI染色检测两种融合蛋白对K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。结果重组原核表达质粒pCOLD-TF-CTP-OD-HA和pCOLD-TF-CTP-OD1-HA经菌落PCR及测序证实构建正确；表达的TF-CTP-OD-HA和TF-CTP-OD1-HA融合蛋白相对分子质量分别约为67000和63000，主要为可溶性表达，表达量分别占总菌体蛋白的35％和20％，脱盐浓缩后，纯度分别约为98％和95％，均可与鼠抗HA单克隆抗体特异性结合；TF-CTP-OD-HA和TF-CTP-OD1-HA对K562细胞的增殖抑制率分别为34％和31％，与PBS对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．001）；TF-CTP-OD-HA和TF-CTP-OD1-HA处理的K562细胞胞核均具有细胞凋亡的典型特征。结论原核表达并纯化了TF-CTP-OD1-HA融合蛋白，该蛋白具有与TF-CTP-OD-HA相似的生物学活性，为今后开发治疗慢性粒细胞白血病的小分子多肽药物提供了新的策略。淋巴细胞功能相关抗原-1基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠引流淋巴结T细胞活性的影响
摘要：目的探讨淋巴细胞功能相关抗原-1（1ymphocytefunction-associatedantigen．1，LFA-1）基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE）模型小鼠引流淋巴结T细胞活性的影响。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelinoligodendrocyteglycoprotein，MOG）35-55多肽诱导LFA-1a链CDlla基因敲除的C57BL／6小鼠及野生型C57BL／6小鼠，建立EAE小鼠模型，取MOG诱导后21dEAE模型小鼠脊髓颈段切片，HE染色和LuxolFastBlue染色，观察小鼠脊髓组织学变化；于MOG诱导后7、14、21d处死小鼠，收集腹股沟引流淋巴结CD4~T淋巴细胞，加入终浓度为1斗g／ml的MOG35-55多肽刺激48h后，应用Brdu试剂盒检测细胞增殖情况；于MOG诱导后4、7、10、14、21d处死小鼠，收集腹股沟引流淋巴结细胞，加入终浓度为1P,g／ml的MOG35-55多肽刺激48h后，进行细胞内细胞因子染色，观察分泌IFNγ／和IL-17的T细胞比例。结果MOG诱导的野生型小鼠脊髓出现明显淋巴细胞浸润及广泛的脱髓鞘变化，而LFA．1基因敲除小鼠无明显变化；在EAE疾病早期（7d），LFA-1基因敲除可减少淋巴细胞向引流淋巴结聚集，降低MOG体外刺激T细胞增殖能力，分泌IFNγ／及IL-17的T细胞比例也较野生型C57BL／6小鼠明显降低（P〈0．05）；而在EAE疾病缓解期（21d），LFA-1基因敲除小鼠淋巴细胞聚集及T细胞增殖能力与野生型C57BL／6小鼠相比无明显差异（P〉0．05），分泌IFN3＇及IL-17的T细胞比例高于野生型C57BL／6小鼠（P〈0．05）。结论在EAE疾病发生早期，LFA-1可能起到了关键性的作用，LFA-1有可能成为自身免疫性疾病治疗的重要分子靶点。唑来膦酸对甲型肝炎病毒抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响
摘要：目的探讨唑来膦酸（zoledronicacid，ZOL）对甲型肝炎病毒（hapatitisAvirus，HAV）抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将不同剂量（10、20、40Ixg）的ZOL与HAV抗原（18EU）混合，为ZOL不同剂量组，并设阴性对照组（生理盐水0．2ml）、阳性对照组（HAV抗原18EU）、铝佐剂对照组[HAV抗原（18Eu）＋Al（OH）3（100μg）]，均经皮下注射ICR小鼠，免疫4、8、12、16周后，经小鼠尾静脉采血，分离血清，采用ELISA法检测小鼠血清中抗HAV抗原特异性IgG抗体水平．免疫16周后，取ZOL40μg组及阴性对照组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织进行病理切片观察。结果除阴性对照组外，各ZOL剂量组小鼠免疫4周后，均产生抗．HAVIgG，并随着时间的延长呈上升趋势，于第8周后达到峰值，此后逐渐下降；ZOL不同剂量组的抗体水平均明显高于阳性对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），免疫8周后，40斗g组抗体水平最高，为1079EU；ZOL40μg组免疫4和16周后的抗体水平高于铝佐剂对照组，但差异无统计学意义（P〉0．05），ZOL的最佳剂量为40μg／只。ZOL40μg组小鼠心、肝、脾、肺、肾组织均未观察到病变。结论ZOL可明显增强HAV抗原诱导小鼠的体液免疫应答。基于口蹄疫病毒2段的多基因共表达质粒的构建及表达
摘要：目的构建基于口蹄疫病毒（footandmouthdiseasevirus，FMDV）2段的多基因共表达质粒，并在293T细胞中共表达HBx、人Sox2及人c-Myc基因。方法以FMDV2A自剪切片段连接HBx、Sox2和c-Myc基因编码序列，克隆至载体pEGFP-C1，构建多基因共表达质粒pEGFP-XSM；在脂质体LipofectamineTM2000的介导下，将重组质粒pEGFP-XSM转染293T细胞，同时设空载体组（转染空载体pEGFP-C1）和空白对照组（未转染），转染48h后，荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）的表达；Real．timePCR和Westernblot法分别检测各组293T细胞中HBx、Sox2和c-Myc基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果多基因共表达质粒pEGFP-XSM经酶切和测序鉴定构建正确；空载体组和pEGFP-XSM转染组细胞荧光镜下均可见GFP的表达；pEGFP-XSM转染组中HBx、Sox2和c．Myc基因mRNA的转录水平较空白对照组及空载体组均明显升高（P〈0．001）；pEGFP．XSM转染组可见相对分子质量约48000的GFP-HBx-2A融合蛋白条带和约38000的HA．Sox2-2A融合蛋白条带，各组均可见相对分子质量约49000的c-Myc蛋白条带，pEGFP-XSM转染组c-Mye蛋白的表达水平明显高于空白对照组及空载体组（P〈0．01）。结论成功构建了多基因共表达质粒pEGFP-XSM，并在293T细胞中实现了HBx、Sox2和c-Myc蛋白的共表达，为进一步深入研究该共表达蛋白在肝细胞肝癌（hepatocellutarcarcinoma，HCC）发生发展中的生物学机制奠守了基础。酶联免疫法测定重组乙型肝炎疫苗中庆大霉素残留量的相关影响因素分析
摘要：目的分析酶联免疫法测定重组乙型肝炎疫苗中庆大霉素残留量的相关影响因素。方法使用庆大霉素酶联免疫试剂盒对3种表达系统的重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母、汉逊酵母、CHO细胞）成品和原液进行庆大霉素回收率测定，同时对不同来源庆大霉素标准品绘制的标准曲线进行对比，对铝佐剂和标准品对庆大霉素残留量检测的影响进行分析。结果含铝佐剂的乙型肝炎疫苗成品中庆大霉素回收率差异较大，疫苗原液中测定庆大霉素的回收率较稳定，在85．1％-101．5％之间，波动性较小；试剂盒自带标准品与庆大霉素国家标准品绘制的标准曲线存在差异。结论不同制备工艺的铝佐剂会影响乙型肝炎疫苗中庆大霉素的回收率，在原液中测定庆大霉素残留量稳定性良好，标准品来源及批次会影响庆大霉素残留量的测定。球形节杆菌尿酸酶的表达、纯化及其活性
摘要：目的在大肠埃希菌中表达球形节杆菌尿酸酶（uriease，Uri），并进行纯化和检测其活性。方法根据大肠埃希菌遗传密码子偏爱性，结合原核翻译起始序列的局部二级结构自由能最小化原则，优化设计编码Uri蛋白的核苷酸序列，经PCR扩增球形节杆菌“矗基因，克隆至载体pET43．1a，构建重组表达质粒pET43．1a-uri，转化感受态大肠埃希菌BL21-odonPlus（DE3）-RIPL，IPTG诱导表达。表达产物经硫酸铵粗纯及DEAE琼脂糖凝胶层析纯化后，经SDS-PAGE分析纯度；参考Uri产品说明书测定蛋白酶活性，并确定其最佳检测温度及pH值。结果重组表达质粒pET43．1a-uri经酶切及测序鉴定构建正确；重组蛋白相对分子质量约33000，以可溶性形式存在，表达量约占菌体总蛋白的40％；纯化后纯度可达90％以上；酶活性达13．2U／mg，酶活性检测最佳反应温度为40℃，最佳反应pH值为9．0。结论成功于大肠埃希菌中表达了uri基因，并获得高纯度的uri蛋白，其酶学性质与天然的球形节杆菌尿酸酶基本一致，为其大规模稳定生产及尿酸酶法检测试剂的配制研究奠定了基础。腺病毒介导的slit2shRNA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响
摘要：目的观察腺病毒介导的slit2shRNA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞（retinalpigmentepithelialcells，RPE）中血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）表达的影响，探讨slit2在脉络膜新生血管（cho-rodalneovascularation，CNV）中的可能作用，为CNV的治疗提供新的思路。方法分别采用RT-PCR和免疫组化法检测人视网膜色素上皮-19（ARPE-19）细胞中slit2及受体Robol基因mRNA的转录和蛋白的表达；用200p,mol／L氯化钴处理人ARPE-19细胞，建立化学缺氧模型，以未缺氧组作为对照，采用Real-timePCR和Westernblot法检测在缺氧状态下细胞中slit2、Robol、VEGF基因mRNA及蛋白水平表达的变化；将缺氧的人ARPE-19细胞随机分为shRNA处理组（加入Ad-slit2-shRNA）、空腺病毒组（加入空腺病毒）和缺氧组，24h后收集各组细胞，Real-timePCR和Westernblot法检测slit2 shRNA干扰后细胞中slit2、Robol、VEGF基因mRNA和蛋白水平表达的变化，ELISA法检测细胞培养上清中VEGF蛋白水平的变化。结果在正常人ARPE-19细胞中有slit2和Robol基因mRNA的转录及蛋白的表达；缺氧组人ARPE-19细胞中slit2、Robol、VEGF基因mRNA和蛋白的表达水平均较未缺氧组明显升高（P〈0．05）；与缺氧组相比，slit2-shRNA处理组人ARPE-19细胞中slit2、Robol、VEGF基因mRNA和蛋白的表达水平均明显降低（P〈0．05），缺氧组与空腺病毒组slit2、Robol、VEGF的变化差异无统计学意义（P〉0．05）。结论slit2shRNA沉默RPE细胞中的slit2后，可明显抑制缺氧诱导的RPE细胞中VEGF的表达，为临床CNV的治疗提供了新的思路。抗炎抗凝双效融合蛋白TAP-SSL5的药理学分析
摘要：目的分析抗炎抗凝双效融合蛋白TAP．SSL5对动物的药理作用，为其安全性用药提供实验依据。方法取昆明（KM）小鼠，经尾静脉分别注射1、3和9mg／kgTAP-SSL5，观察其对小鼠神经系统的影响；取sD大鼠，经尾静脉分别注射1和3mg／kgTAP-SSL5，设溶剂[20mmol／L甘氨酸（Gly）-NaOH缓冲液，pH10．6]为对照组，观察其对呼吸系统和心血管系统的影响。结果TAP-SSL5对KM小鼠一般行为状态、协调机能和戊巴比妥钠阈下剂量催眠的协同作用无明显影响；对SD大鼠的血压、呼吸频率和心率无明显影响，与溶剂对照组比较，差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论融合蛋白TAP-SSL5对动物的神经系统、呼吸系统和心血管系统无明显影响，表明其具有较好的安全性，且无明显的毒副作用。高效价巨细胞病毒人免疫球蛋白原料血浆的筛查
摘要：目的分析普通健康供浆员中人巨细胞病毒humancytomegalovirus，HCMV）免疫球蛋白（IgG）抗体效价分布情况，筛查富含高效价HCMVIgG抗体的原料血浆。方法采用HCMVIgG定量检测试剂，检测本公司下属广西地区五个单采血浆站采集的血浆样本的HCMVIgG抗体效价，检测抗体效价〉15PEI-U／ml的血浆样本混合后的HCMVIgG抗体效价，并对血浆中富含HCMV抗体的供浆员血浆进行采集，分析效价分布变化情况。结果健康供浆员28607份血浆样本的HCMVIgG抗体阳性率为85．2％，其中效价分布在1-10、10-15、〉15PEI-U／ml的各占64．5％、8．7％和11．9％；1318名血浆中富含HCMV抗体的供浆员8426份血浆样本HCMVIgG抗体阳性率为98．1％，抗体效价〉15PEI-U／ml占43．8％，约为普通健康人血浆样本的3．7倍，3个月内平均抗体效价可维持在15PEI-U／ml以上的有586人，占44．5％；不同浆站抗体效价〉15PEI-U／ml的血浆样本混和后的平均效价为33．72PEI-U／ml。结论健康供浆员中高效价HCMVIgG抗体的比例较高，部分供浆员HCMVIgG抗体高效价水平可稳定维持3个月，从健康供浆员中采集含高效价HCMVIgG抗体的原料血浆，用于制备巨细胞病毒人免疫球蛋白具有可行性。姜黄素对人髓母细胞瘤DOAY细胞增殖的影响及其机制
摘要：目的探讨姜黄素对髓母细胞瘤（medulloblastoma，MB）DAOY细胞增殖的影响及其机制。方法用20、40、60、80、100Ixmol／L的姜黄素（curcumin）处理DAOY细胞24、48和72h，采用MTY法检测姜黄素对细胞增殖活性的影响；用30μmol／L姜黄素处理DAOY细胞48h，设未处理细胞为对照组，免疫细胞化学法检测姜黄素对细胞中13-catenin蛋白表达的影响，Westernblot法检测B．catenin及cylinDl蛋白的表达水平。结果不同浓度及作用不同时间姜黄素均可明显抑制DAOY细胞的增殖（P〈0．05），且在姜黄素浓度≤60μmol／L时，呈时间、剂量依赖性。对照组细胞中，β-catenin蛋白在胞浆和胞核中均有表达，且以胞核为主，经30μmol／L姜黄素处理48h后，胞核蛋白β-catenin及总蛋白cyclinDl的表达均明显低于对照组（P〈0．05），胞浆蛋白β-catenin的表达无明显降低（P〉0．05）。结论姜黄素可通过抑制β-catenin的表达和核转位，阻断Wnt／β-catenin信号通路转导，进而抑制其下游靶基因cyclinDl的表达，从而抑制MB的增殖。VacChina2014．第四届疫苗中国发展国际峰会将于2014年4月在京举行
摘要：由士研传媒主办，国际疫苗研究所、国际疫苗学会、中国生物技术股份有限公司和百华协会支持的亚洲品牌疫苗盛会VacChina2014-第四届疫苗中国发展国际峰会，将于2014年4月8-9日在中国北京隆重召开。2012年沧州市手足口病发病情况分析
摘要：目的分析2012年沧州市手足口病（hand-foot-mouthdisease，HFMD）的发病情况，为今后沧州市HFMD疫情的防控提供参考。方法收集沧州市2012年HFMD疫情报告的流行病学资料及实验室核酸检测资料，对2012年沧州市HFMD发病情况进行分析。结果2012年沧州市HFMD病例累计报告12659例，比上年同期（14858例）降低14．80％；5月份为发病的高峰期；疫情丰要集中在任丘市、肃宁县、沧县、青县、河问市；1岁儿童发病率最高（34．84％）；男女发病比例为1．9：1；病例多发于5岁以下散居儿童（87．51％）；实验室病原学检测739份标本，检出EV71型187份（25．30％），CoxA16型263份（35．59％），其他肠道通用病毒感染106份（14．34％）；2012年核酸检测总阳性率和EV71阳性率明显低于2011年（P〈0．01），CoxA16阳性率明显高于2011年；重症20例，死亡0例。结论沧州市2012年HFMD感染以CoxA16型病毒为主，提示今后沧州市HFMD的疫情应侧重CoxA16型病毒的防控。
