中国生物制品学杂志

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中国生物制品学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

Chinese Journal of Biologicals

  • 22-1197/Q 国内刊号
  • 1004-5503 国际刊号
  • 0.55 影响因子
  • 1-3个月下单 审稿周期
中国生物制品学是中华预防医学会;长春生物制品研究所主办的一本学术期刊,主要刊载该领域内的原创性研究论文、综述和评论等。杂志于1988年创刊,目前已被国家图书馆馆藏、CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)等知名数据库收录,是国家卫生健康委员会主管的国家重点学术期刊之一。中国生物制品学在学术界享有很高的声誉和影响力,该期刊发表的文章具有较高的学术水平和实践价值,为读者提供更多的实践案例和行业信息,得到了广大读者的广泛关注和引用。
栏目设置:疫苗研究、基础研究、治疗制剂、诊断制剂、临床研究、技术方法、综述、专题报道

中国生物制品学 2004年第04期杂志 文档列表

中国生物制品学杂志论著
幽门螺杆菌鞭毛蛋白B亚单位原核表达系统的构建及其产物的免疫性193-195

摘要:目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)鞭毛蛋白B亚单位(flaB)原核表达系统,并鉴定其表达产物的免疫性。方法:采用PER从幽门螺杆菌基因组DNA中扩增全长flaB基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a-flaB表达载体,以E.coli BL21DE3为表达宿主菌,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rFlaB)的表达水平。采用Hp全菌抗体的Western blot和兔抗rFlaB血清的免疫扩散试验鉴定其免疫反应性和抗原性。结果:所克隆的flaB基因与文献报道的核苷酸序列同源性为96.31%~97.73%,氨基酸序列同源性高达99.41%~100%。构建的原核表达系统pET32a-flaB-E.coli BL21DE3的rFlaB产量为细菌总蛋白的40%左右。Hp全菌抗体能识别rFlaB。rFLaB免疫家兔能获得高效价血清抗体。结论:已成功地构建了Hp flaB高效原核表达系统,所表达的rFlaB有良好的免疫反应性和抗原性,可作为Hp疫苗的候选抗原。

我国水痘-带状疱疹病毒VZV84-7减毒株基因特征研究196-199

摘要:目的:建立水痘-带状疱疹病毒(VZV)毒株的特异性鉴定方法,研究我国分离的VZV84-7减毒株(VZVS4-7株)基因特征。方法:利用PER分别扩增VZV84-7株和Oka株r2和R5可变区基因,比较两者串联重复单位拷贝数;用PER结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析VZV84-7株和Oka株基因的BglⅠ、PstⅠ酶切位点突变;并对gp Ⅰ编码区基因进行序列分析。结果:VZV84-7株R2、R5区PCR产物分别为425bp和255bp,对应的串联重复单位拷贝数分别为7和1;Oka株R2、R5区PER产物分别为425bp和367bp,对应的串联重复单位拷贝数分别为7和2。VZV84-7株基因存在Pst Ⅰ酶切位点,而Oka株无Pst Ⅰ酶切位点;两者均存在Bgl Ⅰ酶切位点。基因序列分析显示,VZV84-7株与Oka株在gpⅠ区存在4个碱基差异,并导致1个编码氨基酸不同,氨基酸序列同源性为99.8%。结论:所建立的PER和PCR-RFLP方法简便、特异;VZV84-7株的基因特征与Oka株存在一定差异,但两株之间gp Ⅰ编码区氨基酸序列具有较高的同源性。

《药品质量控制与质量保证管理规范》新书征订199-199

NDRG2基因的克隆、表达及抑瘤活性研究200-203

摘要:目的:克隆、表达抑癌基因NDRG2,纯化后考察其对肿瘤细胞的抑制作用。方法:将NDRG2基因克隆进pQE30/M15表达载体,经DNA测序,IPIG诱导表达,SDS-PAGE测定表达量及相对分子质量,复性后浓缩,脱盐,亲和层析纯化,对纯化表达产物进行一系列检测,考察其抑瘤作用。结果:克隆构建的表达载体经DNA测序证明构建正确,表达产物相对分子质量为39977,表达量为加.05%,纯度为94%,等电点为6.3,表达蛋白N端氨基酸序列正确,NDRG2蛋白对肿瘤细胞有较强抑制作用。结论:构建了NDRG2的pQE30/M15表达载体并取得高表达,该蛋白对7901和HHCC肿瘤细胞均有抑制作用,为基因功能研究奠定了基础。

人类白细胞抗原DRB等位基因多态性与克罗恩病遗传易感性的研究204-206

纤溶酶原饼环区5蛋白重组大肠杆菌高效表达体系的建立207-210

摘要:目的:建立纤溶酶原饼环区5(Human plasminogen kringle,hPK-5)蛋白重组大肠杆菌高效表达体系,为高密度发酵创造条件。方法:观察一级、二级种子的生长状态,比较表达hPK-5蛋白的4种重组工程菌株在相同条件下的表达情况,选出首选发酵种子;对其培养时间、诱导时间、培养基种类、pH等条件进行优化;并用凝胶成像分析系统对SDS-PAGE结果进行分析。结果:经过筛选,JM109/pBV220/hPK-5(简称JP5)是获取hPK-5蛋白的首选工程菌株,其最佳表达条件是LB培养基(pH7.4、溶解氧充足)、30℃培养3h、42℃诱导6h。在此条件下,JP5表达目的蛋白占菌体总蛋白的38%左右。结论:为高密度发酵获取hPK-5蛋白奠定了实验基础。

一种新型HBsAg真核表达载体的构建211-213

摘要:目的:在CHO细胞中高效表达HBsAg。方法:通过PCR方法扩增出S和dhfr基因片段,分别克隆到T载体上。然后分别将S和dhfr基因克隆到pCI载体上,构建pCO-S-dhfr真核表达载体。转染CHO(dhfr)细胞,并用ELISA方法检测HBsAg表达量。结果:S和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。PCR和测序结果与预期一致。转染后检测结果呈阳性。结论:已成功构建在CHO(dhfr-)细胞中高效表达的pCI-S-dhfr双顺反子真核表达载体。

替换稀有密码子提高HBsAg在CHO细胞中的表达量214-216

摘要:目的:通过替换S基因稀有密码子,提高HBsAg在CHO细胞中的表达量。方法:利用重叠PCR技术,将S基因上3个稀有密码子替换成哺乳动物细胞偏爱的密码子,得到S^m基因。把S和S^m基因分别克隆到pCI载体上,并转染CHO(dhfr-)细胞,利用ELISA方法检测HBsAg的表达量。结果:获得预期的S^m基因。在CHO细胞中,S^m基因表达量明显高于S基因。结论:替换S基因稀有密码子可以提高HBsAg的表达量。

肾移植微嵌合体与免疫耐受相关性研究217-219

摘要:目的:探讨肾移植术后受者微嵌合体与免疫耐受的相关性。方法:采集接受男性供体肾脏移植术后女性受者不同生存期外周血及尿沉渣标本,采用Y染色体3对引物SRY1、DYZ1^1nt和DYZ1^2nd,应用PCR和RTPCR方法检测标本中微嵌合体特异性标志Y染色体DNA和mBNA的表达,同时测定移植肾功能。结果:在130例肾移植受者中,检测到嵌合阳性者98例,占75.39%,嵌合阴性者32例,占24.61%。嵌合阳性与阴性两组比较,移植肾平均存活时间分别为8.7±3.5年和5.4±3.3年;嵌合阳性者发生过排斥反应者11例,占11.22%,而嵌合阴性者9例,占28.13%;血清肌酐在嵌合阳性者为74.3μmol/L±32.5μmol/L,而嵌合阴性者为113.6μmol/L±37.8μmol/L。结论:受者体内嵌合阳性比阴性者具有更好的移植肾功能和低排斥率;受者生存期愈长。嵌合阳性率愈高;体内的嵌合状态与免疫耐受具有相关性。

抗瘤酮A10、5Fu、GM-CSF和IL-2的抗癌效果220-222

摘要:目的:比较A10、5Fu、GM-CSF和IL-2的抗癌效果。方法:选取NIH小鼠,分别腹腔接种肝腹水HeP-A-22细胞、骨肉瘤S180细胞及胃癌MFC细胞,10d后将注射每种细胞的小鼠分为3组,每组12只,分别于小鼠腹腔注射A10、5Fu、GM-CSF和IL-2,每日1次,每次1ml/只,连续给药8d后改为每3d给药1次,观察小鼠生存时间及抑瘤效果。结果:A10、5Fu、GM-CSF及IL-2均能延长小鼠生存时间,A10抑制肝HeP-A-22肿瘤效果显著。结论:A10、5Fu、GM-CSF和IL-2均有抑制癌细胞生长作用。

人胚肺二倍体细胞2BS株的不同细胞系对甲肝病毒的敏感性223-224

摘要:目的:筛选人胚肺二倍体细胞2BS株中对HAV敏感的细胞系。方法:在相同条件下,用同一批HAV感染2BS株的4个细胞系细胞,采用免疫荧光法(IFA)每周检测细胞中HAV的荧光强度,Ridit分析法计算各细胞系对HAV的敏感性系数,即Ridit值。结果:4个细胞系对HAV敏感性不同,且差异有显著意义。结论:选择人胚肺二倍体细胞2BS株中敏感的细胞系可提高HAV增殖强度。

双价肾综合征出血热纯化疫苗的研究225-228

摘要:目的:研制包含Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗原的肾综合征出血热纯化疫苗,以提高疫苗质量及临床应用效果。方法:用金黄地鼠肾细胞培养的PS-6株(Ⅰ型)病毒和L99株(Ⅱ型)病毒以体积比1:1的比例配制成双价疫苗,经醋酸锌沉淀、超滤浓缩、Sepharose 4FF柱层析制备成双价纯化疫苗。结果:双价纯化疫苗经中国药品生物制品检定所检测,各项指标全部合格。疫苗于37℃放置2周和4℃放置3年,效力试验均合格。临床观察血清中和抗体阳转率大于85%,仅出现0.5%的轻反应。结论:研制的出血热双价纯化疫苗,各项质量指标均符合《双价肾综合征出血热纯化疫苗试行规程》的要求,临床应用效果良好。

脊髓灰质炎减毒活疫苗中SV40和泡沫病毒的检测229-232

摘要:目的:检测脊髓灰质炎减毒活疫苗中的SV40和猴泡沫病毒(Simian Fosmy Virus,SFV)。方法:用PCR方法检测我所1997年至2003年生产用的毒种10批、半成品140批及成品糖丸疫苗128批。结果:脊髓灰质炎减毒活疫苗毒种、半成品和成品糖丸疫苗中均未检测到SV40和SFV DNA。结论:我所生产的脊髓灰质炎减毒活疫苗是安全的。

在搅拌培养和静态培养中造血细胞亚群组成的分析233-236

摘要:目的:分析转瓶和方瓶培养过程中造血细胞亚群组成的变化。方法:观察培养过程中脐血单个核细胞总细胞扩增倍数,CD34^+细胞、CD33^+细胞、CFU-GM、CD41^+细胞、CFU-Mk和BFU-E占总细胞的比例及其随培养时间的变化。结果:14d的培养中,无论是用转瓶和方瓶,总细胞不断扩增,CD34^+细胞含量在第7天、CFU-GM含量在第10天、BFU-E含量在第5天达到最高,而后出现分化。转瓶和方瓶培养的CD34^+细胞和CFU-GM和BFU-E含量差异无显著意义;CFU-Mk则不同,其含量在转瓶培养第7天时达到最高,而在方瓶第10天达到最高。在转瓶中CFU-Mk的含量一直低于方瓶培养;两种培养过程中CD33^+细胞比例均在50%~70%之间,而且差异无显著意义。转瓶培养中CD41^+细胞含量到后期出现下降,而方瓶中则一直增加。结论:与静态培养环境相比,搅拌环境对干,祖细胞分化速度、粒,巨噬系祖细胞和红系祖细胞的分化没有明显影响,但不利于巨核系祖细胞的扩增。促进了其分化。

乙型脑炎灭活疫苗效力参考品的制备及稳定性237-238

摘要:目的:制备乙型脑炎灭活疫苗国家效力参考品。方法:按《中国生物制品规程》要求制备乙型脑炎灭活疫苗原液,经超滤处理后加入冻干保护剂,制成冻干参考品并进行检测标定。结果:经检测,效力参考品外观、水分、无菌试验、效力试验均合格,稳定性好,且T值可保持在较高水平。结论:该批乙型脑炎灭活疫苗效力参考品可作为国家效力参考品。

应用ELISA法检测静脉注射用人血免疫球蛋白抗补体活性239-241

摘要:目的:建立检测静脉注射人血免疫球蛋白的抗补体活性的ELISA方法及其相应的标准品。方法:用Clq包被酶标板,以辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(SVA-HRP)作为酶标记物,邻苯二胺为底物。结果:应用ELISA法检测静脉注射用人免疫球蛋白抗补体活性具有准确性高(97.2%),精确性好(试验内精密度为6.7%,试验间精密度为9.1%),特异性强,灵敏性高(测定限度为0.2ACA单位,测量限度为0.3ACA单位)等特点。结论:ELISA法检测抗补体活性简便、快捷、准确。

关于统计学符号规范化要求241-241

牛血清质量及其中甲肝抗体对甲肝疫苗生产的影响242-243

摘要:目的:对牛血清质量及其中的甲肝病毒抗体进行检测,评估此类抗体对甲肝疫苗生产的影响。方法:根据《中国生物制品主要原辅材料质控标准》检测项目,全检4个厂家共17批新生牛血清,另用EIA法检测血清中的甲肝抗体,并用此血清中和甲肝病毒抗原,用EIA法检测中和后剩余的甲肝病毒抗原,以此来评估新生牛血清中的甲肝抗体对甲肝病毒的影响。结果:17批牛血清(未灭活),检出3批噬菌体阳性,4批内毒素和1批蛋白含量超标。12批甲肝抗体阳性,其中最高687.52mIU/ml,最低8.91mIU/ml。甲肝抗体阳性牛血清可将甲肝病毒抗原中和,1mIU/ml的抗体可中和7.53~11.64EU/ml甲肝抗原。结论:牛血清蛋白含量、无菌试验、牛病毒等项目质量控制较好,其它则有待提高。牛血清中存在甲肝抗体,能将甲肝病毒大量中和。用于甲型肝炎疫苗生产的新生牛血清除按《中国生物制品主要原辅材料质控标准》进行质控外,还必须进行甲肝抗体的检测。