中国生物制品学杂志

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中国生物制品学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

Chinese Journal of Biologicals

  • 22-1197/Q 国内刊号
  • 1004-5503 国际刊号
  • 0.55 影响因子
  • 1-3个月下单 审稿周期
中国生物制品学是中华预防医学会;长春生物制品研究所主办的一本学术期刊,主要刊载该领域内的原创性研究论文、综述和评论等。杂志于1988年创刊,目前已被国家图书馆馆藏、CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)等知名数据库收录,是国家卫生健康委员会主管的国家重点学术期刊之一。中国生物制品学在学术界享有很高的声誉和影响力,该期刊发表的文章具有较高的学术水平和实践价值,为读者提供更多的实践案例和行业信息,得到了广大读者的广泛关注和引用。
栏目设置:疫苗研究、基础研究、治疗制剂、诊断制剂、临床研究、技术方法、综述、专题报道

中国生物制品学 2004年第03期杂志 文档列表

中国生物制品学杂志OriginalArticles
我国流行的4株狂犬病街毒株G基因序列及分子流行病学研究129-132

摘要:目的 探讨我国流行的狂犬病毒(RV)基因差异,评价现有疫苗的适用性。方法 通过RT-PCR并对其产物测序后获得4株RV街毒株的G基因序列以及G与M和L基因的区间序列。利用计算机分析软件比较4株RV与已经发表的毒株的核苷酸和推导的氨基酸序列。结果 糖蛋白(GP)完整的编码基因序列长度为1575bp。GP氨基酸序列同源性明显高于相应的核苷酸序列(除Mokoh外),4株街毒与CTN的同源性高于aG株。GP不同区段比较显示,膜外区同源性高于膜内区。G-M区间核苷酸序列长度为5bp;除广西4外,其余毒株100%同源。G-L区间核苷酸序列长度为24bp,越1与肥东同源性为100%。结论 4株RV均属于基因Ⅰ型。广西的毒株之间存在不同的来源。街毒与疫苗株之间基因存在差异。4株RV与SAD-B19进化途径相近,与PV株相差较远。越1与肥东株亲缘关系极近,可能是由同一毒株演化而来。

抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素基因的克隆与表达133-135

摘要:目的 扩增抗癌胚抗原单链抗体(CEA-ScFv),与绿脓杆菌外毒素(PE40)进行重组及原核表达,旨在进一步研究重组蛋白CEA-ScFv-PE40的靶向抗肿瘤作用。方法 分别扩增抗癌胚抗原单链抗体的重链区、轻链区,用overlap PCR按照VH-VL的顺序连接,克隆至pMD18T载体中。再将VH-VL基因片段与含有PE40的表达载体pET28a连接,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达。结果 经DNA测序,其结果与设计完全相符。SDS-PAGE分析,在相对分子质量66000处可见明显表达带,表达量可占菌体蛋白总量的13%以上。免疫印迹表明重组蛋白具有PE40的抗原特异性。结论 抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素的成功克隆与表达,为进一步研究其生物活性奠定基础。

小鼠白细胞介素-18的克隆及在原核细胞中的表达136-138

摘要:目的 克隆小鼠白细胞介素-18(mIL-18)全长cDNA,并使其在大肠杆菌中表达。方法 利用RT-PCR和巢式-PCR,从活化小鼠腹腔巨噬细胞中扩增成熟IL-18的全长cDNA。经双酶切,将该cDN断插入表达载体pRSET-C,构建含T7启动子的原核表达载体pRSET-mIL-18。测序鉴定后,将重组体转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和,或乳糖的诱导下,使重组质粒获得表达。结果 重组质粒读码框及mIL-18的序列与预期一致,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析获得证实。结论 已成功构建了原核表达载体pRSET-mIL-18,并使其在大肠杆菌中获得了融合表达。

运用实时荧光定量RT-PCR检测人正常组织及肿瘤组织中BRDT表达139-141

摘要:目的 探讨BRDT基因在正常组织及癌组织中的分布及其作为肿瘤治疗靶分子的可能性。方法 运用实时荧光定量PCR方法分析BRDT在人正常组织及癌组织中的表达,使用18S rRNA作为内对照。结果 在所检测的正常组织中该蛋白的mRNA只存在于睾丸组织中,而在其它组织不表达;在检测的10例胃腺癌组织标本中,有6例mRNA的微弱表达;在检测的10例食管鳞状细胞癌组织标本中,有3例mRNA的微弱表达;在检测的12例子宫颈鳞状细胞癌组织标本中均未有表达;在检测9例子宫内膜腺癌组织标本中,有2例微弱表达;在检测12例脑癌组织标本中,只有1例微弱表达。结论 BRDT不可能作为子宫颈鳞状细胞癌、脑癌、子宫内膜腺癌及食管鳞状细胞癌治疗的潜在分子靶点,是否能够做胃腺癌的靶点还需进一步探讨。

基因重组钙调蛋白提取纯化的新方法142-144

摘要:目的 建立一个简捷高效的纯化基因重组钙调蛋白(Recombinant-calmodulin,CaM)的新方法。方法 培养CaM基因重组大肠杆菌,并用IPIG诱导CaM表达,将菌体冻融、超声破碎,再经三氯醋酸、硫酸铵沉淀及超速离心,获得CaM;经SDS-PAGE检测CaM的纯度与相对分子质量,用甘油电泳和Seoin Image密度扫描软件检测CaM激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),从而引起肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化的活性。结果 SDS-PAGE显示,重组大肠杆菌表达了大量CaM,且所提取CaM的相对分子质量及纯度均与CaM标准品一致;甘油电泳结果显示,CaM0.1μg/ml即可激活MLCK,使MLC20部分磷酸化,至3μg/ml时使MLC20双重磷酸化,其所致磷酸化的程度与等剂量的CaM标准品基本相同。Scoin Image密度扫描结果显示,CaM激活MLCK引起MLC20磷酸化的百分率与等剂量CaM标准品差异无显著意义(P>0.01)。结论 已建立了简捷高效纯化CaM的新方法。

重组幽门螺杆菌粘附素的纯化工艺145-148

摘要:目的 纯化大肠杆菌表达的重组幽门螺杆菌粘附素。方法 将表达HpaA蛋白的工程菌经高压均质机破菌获得包涵体,经洗涤、变性、复性,Q Sepharose High Performance阴离子交换层析和亲和层析分离纯化。采用SDS-PAGE和HPLCE检测纯度,用Westem blot检测其抗原性。结果 纯化后HpaA蛋白纯度高达95%以上,具有良好的抗原性。结论 建立了从包涵体中获得高纯度HpaA纯化工艺,为进一步的研究打下了基础。

应用骨形成蛋白与胶原膜复合物修复大鼠颅骨缺损149-151

人结缔组织生长因子的透皮吸收实验152-154

摘要:目的 研究人结缔组织生长因子的透皮吸收。方法 应用氯胺T法制备^125I-人结缔组织生长因子(^125I-rCTGF),采用家兔进行不同剂量的^125I-rCTGF的完整皮肤和破损(烫伤)皮肤吸收试验。结果 ^125I-rCTGF的比活度为2.0×10^5计数,(分μg)。皮肤吸收试验表明,不同剂量^125I-rCTGF透皮给药后家兔均未能通过皮肤经毛细血管吸收入血。结论 为重组人CTGF临床试验提供必要的实验数据。

表达HIV-1 gp160膜蛋白靶细胞的制备及鉴定155-157

摘要:目的 获得表达HIV-1 gp160膜蛋白的靶细胞,用于HIV-1特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL)和抗HIV-1重组毒素细胞杀伤活性检测。方法 采用PCR方法,从质粒pJen 10中扩增HIV-1 gp160基因,插入pGEM-T载体,测序后克隆入 pIRES1,neo载体中构建成重组质粒pIRE160,酶切鉴定正确后,转染人肝癌细胞(SMMC-7721),G418加压筛选至细胞不再死亡为止,并采用Western blot和间接免疫荧光法对制备的靶细胞进行检测。结果 HIV-1gp160在SMMC7721表面表达,并裂解为gp120和gp41蛋白。结论 已成功得到稳定表达HIV-1 gp160的靶细胞,且表达的蛋白具有良好的特异性。

关于统计学符号规范化要求157-157

无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞的比较158-160

摘要:目的 对无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞进行比较。方法 应用两种培养基采用小方瓶培养CHO细胞,观察细胞维持时间、培养过程的形态变化及对血凝效价的影响。结果 应用无血清培养基(A)培养CHO-C28细胞虽然可维持细胞正常生长,但贴壁不好,逐渐降低(A)加量情况可得到相应改善。结论 目前无血清培养基尚不能完全取代含血清培养基用于培养CHO细胞。

应用免疫策略对蒙脱石HIV DNA疫苗免疫作用的研究161-162

摘要:目的 运用Prime-Boost策略,研究蒙脱石(MMT)DAN疫苗对小鼠免疫功能的影响。方法 选用^3H-TdR掺入法测定MMT和DNA联合免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖反应;采用ELISA试剂盒检测血清中的抗体和细胞因子。结果 使用痘苗病毒和/或加入MMT加强免疫DNA疫苗后,均可以提高其体液和细胞免疫功能。结论 “Prime-boost-boost”免疫方案在小动物模型中取得了较好的免疫效果。

长春新碱治疗糖尿病肾病大鼠的实验研究163-165

摘要:目的 验证长春新碱对糖尿病肾病大鼠的治疗作用。方法 用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型。将模型大鼠分为治疗组与非治疗组,治疗组给予长春新碱(VCR)0.2ms/ks,尾静脉注射,每周2次,观察给药后大鼠血糖、尿蛋白、肾功能、肾重,体重等值的改变以及肾脏病理的改善情况。结果 治疗组大鼠尿蛋白明显减少,肾重,体重低于非治疗组。光镜下观察治疗组肾脏病理学变化情况有明显改善。结论 长春新碱可降低糖尿病肾病大鼠的尿蛋白并改善糖尿病肾病早期病理损害。

应用疏水层析纯化HIV-1跨膜蛋白gp41截短体包涵体166-167

摘要:目的 对表达HIV-1跨膜蛋白gp41截短体包涵体进行纯化。方法 将收获的表达菌体洗涤、超声波破菌、预处理后进行疏水层析。结果 纯化后的gp41截短体的融合蛋白纯度达到90%,并且具有较好的抗原性和特异性。结论 利用疏水层析可以将目的蛋白进行有效的纯化,为下一步的应用打下基础。

H5和H9亚型禽流感病毒联合RT-PCR检测方法的建立168-170

摘要:目的 建立H5和H9亚型禽流感病毒(MV)联合RT-PCR检测方法。方法 针对H5和H9亚型AIV血凝素(HA)基因,在其裂解位点两侧设计引物。在确定单项RT-PCR检测方法反应条件基础上,建立、优化联合RT-PCR反应体系和反应条件,并通过相关病毒检测试验,验证其敏感性和特异性。结果 所建立的H5和H9亚型联合RT-PCR检测方法具有特异、敏感、简便、快捷等特点。结论 该方法可用于AIV的检测及致病性分析。

应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白含量171-174

摘要:目的 应用酶免疫方法检测生物制品中残余牛血清白蛋白(BSA)含量。方法 制备高亲和力、高纯度的抗BSA单克隆抗体作为包被抗体,高纯度、高效价的兔抗BSA多克隆抗体为酶标抗体,采用ELISA夹心方法,以系列含量的BSA溶液作为标准,制备标准曲线,对样品中所含BSA进行定量。结果 优化了酶免疫反应条件,标准曲线线性范围内r≥0.98,经验证,该方法对BSA的最低检测限为2.5ng/ml。分别检测5、10、30ng/ml含量的BSA时,试验内(n=11)和试验间(n=3)测定的变异系数分别为2.3%~4.9%和4.0%~6.1%;回收率均值分别为104%、123%和109%。未见该方法与人、马、猪血清白蛋白之间的交叉反应。结论 该法敏感度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于生物制品的质量控制。

HIV抗体快速诊断试剂与酶联免疫诊断试剂灵敏度比较175-176

摘要:目的 比较HIV抗体快速诊断试剂与抗体酶联免疫诊断试剂检测不同样品灵敏度的差异。方法 用HIV抗体诊断试剂和HIV抗体酶联免疫诊断试剂分别检测。HIV抗体酶联免疫试剂国家参考品、HIV不同亚型样品以及HIV高危人群样品。结果 检测HIV抗体酶联免疫试剂国家参考品中,20份阳性样品只检出10份阳性,5份最低检出限样品只检出1份阳性。与酶联免疫试剂相比,对B亚型样品的检测,其灵敏度低2~8倍;对AE重组样品,其灵敏度低100倍;对BC重组样品,其灵敏度低2~10倍。在HIV高危人群样品中,与酶联免疫诊断试剂阳性符合率为88.2%,阴性符合率为97.3%。结论 快速诊断试剂的灵敏度明显低于酶联免疫诊断试剂,因此,其应用范围不能等同于酶联免疫诊断试剂。

应用区带离心法纯化地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗177-178

摘要:目的 应用区带离心法纯化原代地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗。方法 浓缩的原代地鼠肾细胞乙脑灭活疫苗,经36%和60%不连续蔗糖密度、23000r/min离心4h后,收取纯化的乙脑抗原组分,制成纯化乙脑疫苗。结果 浓缩疫苗经一步区带离心纯化后,抗原效价提高3倍以上,蛋白去除99.5%以上。经稀释制成的半成品疫苗与未经浓缩的原疫苗相比,抗原效价提高4倍以上,蛋白去除99%以上。结论 区带离心法可用于纯化地鼠肾细胞乙脑疫苗。