摘要:虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ基因通过PCR扩增,插入pMAL-p2X载体,基因5'端插入凝血酶切割位点.在大肠杆菌中经IPTG诱导高效分泌表达.表达产物N端含麦芽糖结合蛋白,融合蛋白被分泌到大肠杆菌的胞间质.经冷渗透休克后,透析脱盐,用凝血酶切割融合蛋白,再经SuperdexTM75分子筛柱层析、高效液相色谱反相C18柱纯化,得到重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ.质谱分析表明,rHWTX-Ⅺ系正确表达产物,重组HWTX-Ⅺ表现出与天然HWTX-Ⅺ一致的生物学活性.
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