重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ用pMAL-p2X载体的表达和纯化

作者:刘君梁; 刁建波; 唐建洲; 谢锦云; 梁宋平

摘要:虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ基因通过PCR扩增,插入pMAL-p2X载体,基因5'端插入凝血酶切割位点.在大肠杆菌中经IPTG诱导高效分泌表达.表达产物N端含麦芽糖结合蛋白,融合蛋白被分泌到大肠杆菌的胞间质.经冷渗透休克后,透析脱盐,用凝血酶切割融合蛋白,再经SuperdexTM75分子筛柱层析、高效液相色谱反相C18柱纯化,得到重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ.质谱分析表明,rHWTX-Ⅺ系正确表达产物,重组HWTX-Ⅺ表现出与天然HWTX-Ⅺ一致的生物学活性.

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关键词:
  • 凝血酶
  • 胰蛋白酶抑制剂

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期刊名称:中国生物化学与分子生物学报

期刊级别:北大期刊

期刊人气:1489

杂志介绍:
主管单位:中国科学技术协会
主办单位:中国生物化学与分子生物学会;北京大学
出版地方:北京
快捷分类:生物
国际刊号:1007-7626
国内刊号:11-3870/Q
邮发代号:82-312
创刊时间:1985
发行周期:月刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:0.71
综合影响因子:0.99