摘要：经Swiss-Prot蛋白质数据库中查询发现茶树紫黄素脱环氧化酶(VDE)蛋白结构中含有lipocalin特征区，利用重叠延伸法把该特征区中最保守的Gly(GGG)和Trp(TGG)分别定点突变为Leu(TTG)和Tyr(TAG),构建了表达载体pET-32a／G→L和pET-32a／W→Y，在E．coli BL21 trxB(DE3)进行了诱导表达，并对表达蛋白进行His-Tag亲和纯化，结果表明，表达蛋白的分子量和预计的相等，为58．9kD，表达量占菌体总蛋白的45％。体外酶促反应分析得出，G→L或W→Y突变都能导致茶树VDE生物活性大幅度降低。证明了：lipocalin特征区是VDE的主要活性中心之一。