摘要：Aii A蛋白能够专一性地水解革兰氏阴性菌分泌的信号分子,从而抑制其致病基因的表达,减弱致病性。根据NCBI上公布的蜡状芽胞杆菌ATCC14579的aii A序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis NBIN-861中扩增得到aii A基因(Gen Bank登录号:MG704113),全长基因约750 bp。将aii A基因插入大肠杆菌表达载体p ET-28a和芽胞杆菌表达载体p BMB1A中,构建重组表达载体p ETaii A和p BMaii A,p ETaii A转化大肠杆菌BL21(DE3),p BMaii A转化多黏类芽胞杆菌NR1,获得重组工程菌BLaii A和BPaii A。SDS-PAGE和蛋白质谱鉴定表明Aii A蛋白均成功表达,利用指示菌紫色杆菌CV026检测发现目的蛋白具有水解N-酰基高丝氨酸内酯活性。其中纯化的Aii A蛋白(1.13 mg/m L)和重组菌BPaii A浓缩的发酵上清液中的Aii A蛋白活性较高(透明圈直径分别为16和18 mm),马铃薯致病性试验和抑菌试验结果表明该蛋白对胡萝卜欧文氏菌具有一定的抗病活性,但不具有抑菌活性。多黏芽胞杆菌NR1和重组菌BPaii A发酵产生的抑菌物质含量均为1.2%~1.3%,具有良好的抑菌效果。本研究为构建更有效的生物防治菌株奠定了理论基础。