摘要:采用染色体步移方法从产孢量显著减少的哈茨木霉Trichoderma harzianum T-DNA插入突变株1413中克隆出caf(染色体组装蛋白基因)类似基因。序列分析显示该基因全长3418bp,共有5个外显子,4个内含子,开放阅读框长为2904 bp(GenBank登录号:JN802132),编码967个氨基酸,有两个保守的功能结构域WAC_Acfl_DNA_bd和DDT domain,该氨基酸序列与血红丛赤壳Nectria haematococca mp VI77—13-4的核染色质组装蛋白(chromatin assembly protein)有69%相似性,推测该基因编码的蛋白为一个核染色质组装蛋白,命名为ThConl。构建了ThConl基因置换载体pDHt/SKThConl::hph,采用ATMT方法转入野生型哈茨木霉TH-33菌株,筛选到1株表型发生明显差异的突变株,PCR证实该突变株中ThConl基因已被置换为潮霉素抗性基因。对突变株进行表型分析,结果显示:与野生菌株相比,突变株生长速率下降,菌落稀薄,产孢量减少。表明ThConl基因影响哈茨木霉的生长和产孢。
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