HarpinXooc蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性检测

作者:何丹 刘俊 高学文 沈波

摘要:采用PCR方法从水稻细菌性条斑病菌RS105菌株中扩增harpinXooc编码基因hrf2,将其克隆到酵母表达载体pPICZαA的分泌信号肽基因下游,获得重组表达质粒pPICZαA-hrf2。重组表达质粒线性化后电击转化至毕赤酵母宿主菌X-33,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌X-33/pPICZαA-hrf2。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵上清液经浓缩后进行SDS-PAGE电泳分析,在约18kD处有特异目标条带出现。Western blot检测表明表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明酵母重组表达蛋白harpinXooc能够诱导烟草产生过敏反应和促进烟草生长,活性高于在大肠杆菌中表达的harpinXooc。

分类:
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关键词:
  • 毕赤酵母
  • harpinxooc蛋白
  • 生物活性检测

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期刊名称:中国生物防治学报

期刊级别:北大期刊

期刊人气:1944

杂志介绍:
主管单位:中华人民共和国农业农村部
主办单位:中国农业科学院植物保护研究所;中国植物保护学会
出版地方:北京
快捷分类:农业
国际刊号:2095-039X
国内刊号:11-5973/S
邮发代号:2-507
创刊时间:1985
发行周期:双月刊
期刊开本:B5
下单时间:1-3个月
复合影响因子:1.12
综合影响因子:1.77