木本饲料的研究进展
摘要:在简述木本饲料概念和总结中国饲料资源现状的基础上,概括了木本饲料的应用研究动态,详细论述了木本饲料在营养价值、饲喂效果、饲料型植物生理生态特性等领域的研究进展,并分析了中国发展木本饲料的必要性和存在的优势,据此展望了木本饲料广阔的发展前景。猪肉pH值相关QTL整合定位与基因关联分析
摘要:为了整合与优化猪肉pH值相关数量性状位点(quantitativetraitloci,QTL),为分子标记辅助选择奠定基础,采用Meta分析,整合猪pH相关QTL,并对已知候选基因与“真实”QTL(MQTL)进行关联。收集猪肉pH值相关QTL,将其映射到美国内畜研究中心(USDA—MARC2.0)公布的猪遗传连锁图谱,构建新的整合图谱,新图谱中的QTL簇经Meta分析,聚合为MQTL。进一步将已知候选基因映射到整合图谱,比较候选基因与各“真实”QTL的位置差异,分析其关联性。结果显示:224个原始QTL聚合成37个OTL簇,通过Meta分析,得到37个MQTL。MQTL的95%置信区间1.35-25.32cM,相比原始QTL缩短29.20%-92.36%。其中,MQTL35、MQTLl6、MQTLl0、MQTL4和MQTLl7的置信区间均在5cM以内,且分别是由7、8、4、5、7个QTL聚合而成,具有较高的精确度和一致性。LYZ,RYRl、y烈MYPN和PRKA(73基因映射到整合图谱后,分别定位在MQTLl3、MQTLl8、MQTL29、MQTL32和MQTL34置信区间内。可将其作为关键区域,开展深入研究工作。金定鸭体型性状的主成分分析研究
摘要:为了对金定鸭体型性状的选育提供方向和重点。通过测定金定鸭的10个体型性状,计算各性状的平均数与变异性指标和性状问的相关系数。结果表明:种公鸭的10个体型性状可简化为3个主成分(占信息总量的85.441%),可从这3个主成分中选取体重、胸深、骨盆宽、胫围和颈长为代表性的性状指标。蛋母鸭的10个体型性状可简化为4个主成分(占信息总量的85.244%),可从这4个主成分中选取体重、骨盆宽、胸宽、胸深、胫长和颈长为代表性的性状指标。对金定鸭体型性状进行主成分分析,有利于明确金定鸭的体型特征,所研究的结果为金定鸭的选育研究提供参考依据。不同秋眠级紫花苜蓿品种生产性能的对比分析研究
摘要:为获得适宜在北京地区种植的优良休眠型苜蓿品种,并利用苜蓿品种的休眠级数来指导国内苜蓿种植区划。采用随机区组法,进行了7个不同休眠级紫花苜蓿(Medicagosativa)在北京地区的生产性能对比分析田间试验研究,在2010年8月-2011年10月,连续2年对紫花苜蓿的出苗时间、越冬率、生长速度、再生性、草产量、干鲜比、茎叶比进行测定。结果表明:不同休眠类型的紫花苜蓿生产性能存在显著差异(火0.05),不同品种草产量存在显著差异(氏0.05),半秋眠苜蓿的鲜草产量显著高于非秋眠苜蓿,秋眠性强的品种越冬存活率高,所有品种草产量第一茬〉第二茬〉第三茬;在北京地区,应主要考虑秋眠和半秋眠的高产品种的培育与引进,秋眠型和半秋眠型的紫花苜蓿均可安全越冬,生产性能较好,适宜北京地区种植,非秋眠型(7-9级)的紫花苜蓿其越冬率相对较低,植株存活率低,生产性能较低,若要在北京地区种植需采取其他农艺措施提高其越冬存活率。戴云山羊多胎性能候选基因BMPR-IB、BMP15、GDF9的应用研究
摘要:为初步探索戴云山羊多胎性能的分子机制。以控制部分绵羊品种高繁殖力的BMPR-IB、BMPl5和GDF9基因作为候选基因,采用PCR.RFLP方法分析戴云山羊BMPR-IB、BMPl又GDF9基因多态性与繁殖性状的关系。结果表明:多胎品种戴云山羊及南江黄羊在BMPR-1B基因的相应位置上并未发生与BooroolaMerino羊相同的突变,同时也未检测到BMPl5的FecXi、FecXh、FecXB基因、GDF9的FecGa基因,因此排除了这5个突变位点影响戴云山羊高繁殖力性状的可能性。由于戴云山羊的BMPR-IB、BMPl天GDF9的全基因序列信息的缺乏,尚不能完全断定3个基因对戴云山羊高繁殖力性状没有影响。转基因克隆牛外源基因整合位点的研究
摘要:整合位点的侧翼序列是外源基因表型研究和功能探讨的前提条件,对目的基因的正常转录和表达有着重要影响。本试验利用热不对称交措式PCR(ThermalAsymmetricInterlacedPCR,TAIL-PCR)的方法克隆了目的基因。结果表明:外源基因整合到牛的12号染色体基因组克隆(Nw_003104315.1)中。分析了整合位点的纯合性发现转基因牛为整合位点杂合子。TAIL-PCR法能够有效、快速的鉴定外源基因在基因组中的整合位置,具有良好的应用前景。添加绿汁发酵液和山梨酸对“大力士”饲用甜高粱青贮品质的影响研究
摘要:为探讨绿汁发酵液和山梨酸对“大力士”饲用甜高粱青贮饲料品质的影响。试验设对照组、绿汁发酵液组、山梨酸组及绿汁发酵液+山梨酸组,常温下贮存60天后开窖取样,测定其发酵品质与化学成分。结果表明:添加绿汁发酵液、山梨酸及绿汁发酵液+山梨均可显著降低“大力士”饲用甜高粱青贮饲料的pH值、氨态氮含量和气体损失率(P〈0.05),提高乳酸含量、水溶性碳水化合物含量和干物质回收率的(P〈0.05)。表明添加绿汁发酵液、山梨酸及绿汁发酵液+山梨酸均可显著改善“大力士”饲用甜高粱的音贮品席.庄河大骨鸡GHR基因的多态性及其遗传效应分析
摘要:为了探究庄河大骨鸡GHR基因的多态性与屠宰性状相关的遗传标记。以17周龄庄河大骨鸡为试验材料,利用PCR.RFLP标记技术、最小二乘法分析了GHR基因群体遗传结构与屠宰性状的关联。结果表明:GHR基因的多态性信息含量为0.285,属于中度多态,存在3种基因型,其基因型的频率分别为:0.3575、0.3825、0.26,等位基因M和Ⅳ的频率为0.54875和0.45125;MM型基因型公母鸡的活体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重和平均日增重分别显著的高于MN型和NN型的公母鸡(P<O.05)。GHR基因的MM型对鸡的屠宰性状有显著影响。红褐色乌苏里貉MC1R基因的克隆及序列分析
摘要:为了探讨红褐色貉的促黑素细胞激素受体(MClR)的序列长度、多态性以及与其他物种的同源性。以青岛莱西养殖基地的野生型乌苏里貉8只,红褐色乌苏里貉7只,吉林白貉6只,银黑狐6只为研究对象,用提取貉和银黑狐的毛囊DNA作为模板,根据GenBank已知序列(GenBank:HM852533.1)设计引物,利用克隆测序技术,通过sNP检测,分析MCIR基因在不同毛色乌苏里貉的表达水平和毛色之间相关性以及与其他物种的同源性。结果表明:本实验成功成功获得了红褐色貉MCIR基因序列长度为1329bp,与已知序列同源性98%,13处突变,与野生型乌苏里貉同源性达到99%,8处突变。通过酶切鉴定在MCIR基因约300bp处酶切得到2种基因型AB型和BB型,红褐色貉为AB型,野生型貉为BB型。根据实验结果推测MClR基因存在红褐色毛色性状相关的功能突变位点,从而导致毛色突变。鹅A-FABP基因内含子I序列的分析研究
摘要:为了探讨鹩脂肪型脂肪酸结合蛋白(AdipocyteFattyAcid.BindingProtein,A-FABP)基因内含子I的序列长度、多态性及与其他物种的同源性。根据鹅A-FABP mRNA(AF472610)和鸡A-FABP基因组序列(AY675941)设计1对引物,扩增鹅A-FABP基因内含子I序列;利用PCR-SSCP技术和序列比对,开展鹅A-FABP基因内含子I的多态性研究。结果表明:鹅A-FABP基因内含子I序列长为1473bp,与其他12个物种序列比较,发现其与鸭的同源性达到94.42%,与鸡的同源性为81.82%。经SNPs检测发现,P:和P3扩增产物存在变异位点。遗传多态性分析表明,A、B2个等位基因的基因频率分别为0.597和0.403,多态信息含量(PIC)是0.365,基因型分布未偏离Hardy-weinberg平衡状态(文=0.020,P〉0.05);D、E两个等位基因的基因频率分别为0.483和O.517,PIC是0.375,基因型分布偏离Hardy-weinberg平衡状态(文=6.782,0.O1〈P〈O.05)。鹅A-FABP基因内含子I序列遗传变异处于中度多态,P2扩增产物的基因型分布处于Hardy-weinberg平衡状态,P3扩增产物的基因型分布偏离Hardy.weinberg平衡状态。生猪屠宰监管技术系统设计与实现研究
摘要:为控制肉品在屠宰过程中的质量安全,加强政府监管力度。以生猪屠宰监管为研究对象,从信息技术的角度构建了一个以实现质量监管为目的的生猪分级屠宰监管技术系统。设计了系统主要功能实现的流程,探讨了关键技术,开发了基于分级管理报送数据的生猪屠宰监管技术系统。结果表明:该系统在山东省的多家屠宰企业进行了试运用,使用该系统提高了政府对屠宰企业的监管水平及企业生产管理水平,增强了消费者的肉品安全意识。通过统一使用的山东省屠宰监管技术系统,将政府监管、用户监督和企业自律有机地结合起来,建立有效的监督保证机制,从而保障食品安全。从食品安全的角度。提出了一套政府监管模式,为实现猪肉质量安全全程追溯打下基础。狮头鹅不同繁殖阶段血清生化指标的测定研究
摘要:为了完善狮头鹅的品种特征数据,探讨就巢性极强的狮头鹅繁殖周期的血清生化指标变化规律。选取健康成年狮头母鹅45只,对其产蛋期、就巢期和休产期的血清钙、磷、总蛋白、葡萄糖等11项生化指标进行测定。结果表明:产蛋期血钙、血磷水平较高,而就巢期和休产期差异不显著;血清ALP水平在产蛋期较高,分别比就巢期和休产期提高39.49%(P〈0.05)和12.70%;3个时期血清TP、CREA、UA和CHO含量差异均不显著,BUN含量在就巢期较低,分别比产蛋期和休产期低24.49%(P〈0.05)和34.69%(P〈0.05)。试验建立了狮头鹅不同繁殖阶段血清生化指标参考值,为其饲养管理、保种选育、疾病防治等方面提供依据。兴奋或抑制GTH细胞内PKC对FSH分泌的影响
摘要:为了分析大鼠FSH分泌受体后信号转导机制。将GTH细胞用PMA或H7处理后,用GnRH脉冲刺激,再用ELISA法检测其FSH分泌量,并与空白对照组比较。结果表明:PMA能显著提高GTH细胞中PKC活性,H7能显著降低GTH细胞中PKC活性,PMA或H7都不会影响GTH细胞的cAMP含量,GTH细胞PKC活性显著影响FSH的分泌,FSH随着PKC活性的升高而升高,随着cAMP的降低而降低。得出PKC.Ca2+是GnRH脉冲刺激所引起的FSH分泌的受体后的信号转导途径。响应面法优化银翘天甘含药血清制备工艺
摘要:为了优化银翘天甘含药血清的制备工艺。在单因素试验的基础上,选取采血时间、给药次数及给药浓度为自变量,以小鼠血清中绿原酸和连翘苷含量的综合评分为响应值,采用响应面分析方法,研究各自变量及其交互作用对综合评分的影响。利用Design.expert软件分析得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定了银翘天甘含药血清最佳制备工艺条件为:采血时间30min、给药次数4次、给药浓度0.02g/mL,理论计算综合评分为95.62%,小鼠血清中绿原酸浓度为33.65μg/mL,连翘苷浓度为193.86μg/mL。该研究为银翘天甘含药血清的制备奠定了基础。猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的克隆表达
摘要:为了研究不同时间段细胞MHC分子表达的变化情况,从分子水平上说明E2基因与NHC之间的关系。本研究克隆了中国猪瘟病毒强毒石门毒株E2基因,构建了pcDNA3,0真核表达质粒P-E2基因。限制性内切酶进行双酶切和序列分析鉴定E2基因插入位置、方向和读码框架的正确性。构建成功的真核表达质粒P-E2,用脂质体转染方法瞬时转染进行体外细胞表达,转染后24、48h后用Western-blot和间接免疫荧光技术检测P-E2基因质粒在PK-15细胞内的表达情况。结果表明:用His抗体进行间接免疫荧光检测发现E2基因得到表达,并定位于细胞浆,同时Western-blot检测后发现重组质粒P-E2转染后也在PK-15细胞中得到了表达。为进一步研究猪瘟病毒与宿主细胞之间的关系,病毒的致病机理提供了基础材料。RP-HPLC法测定“加味白头翁”颗粒中盐酸小檗碱的含量
摘要:为了建立“加味白头翁”颗粒剂中盐酸小檗碱含量的反向高效液相层析(reversephasehigh.performanceliquidchromatography,RP-HPLC)法。采用KromasilC18柱(4.6min×250mm,5μm),流动相:乙腈与0.03mol/L磷酸二氢钾溶液体积比30:70的混合溶液,流速1mL/min,紫外检测波长:265nm.柱温:30℃。在所选的色谱条件下,盐酸小檗碱峰与辅料、溶剂及复方提取物中的其他成分的峰分离良好,盐酸小檗碱在93.00-186.00μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9997,n=6),平均回收率为99.49%。RSD=0.76%。所用方法简便、灵敏,可用于“加味白头翁”颗粒剂的质量控制。新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及其抗原捕捉ELISA方法的建立
摘要:为建立一种快速的新城疫病毒病原检测方法。本研究以原核表达的重组I-IN蛋白免疫7周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA方法筛选,成功获得了1株能稳定分泌抗新城疫病毒HN蛋白的McAb杂交瘤细胞,命名为4E8,4E8亚类鉴定为重链属于IgG2a,轻链属于燃。以多克隆抗体作为包被抗体、单克隆抗体4E8作为检测抗体,通过双抗夹心ELISA各个反应条件的优化,建立检测新城疫病毒抗原捕捉ELISA方法。该方法对EDSV、ITLV、IBV、IBDV不发生交叉反应,其敏感性比HA试验要高4倍以上,与RT-PCR相比较,符合率、敏感性和特异性分别为95.6%、93.3%、96.1%。本研究建立的NDVAC-ELISA有良好的重复性、敏感性和特异性,可应用于新城疫病毒威染的早期诊断。DNA免疫法制备猪圆环病毒Ⅱ型ORF3抗体
摘要:为了制备猪圆环病毒Ⅱ型(ecv2)开放阅读框3(ORF3)蛋白的抗体,并为ORF3功能研究奠定基础,用PCR方法扩增PCV2ORF3基因,对其PCR产物用EcoRI与XhoI进行酶切,并对真核表达载体pCDNA3.1(+)进行同样酶切,连接2种目的酶切产物后转化EcoliDH5a感受态,菌落PCR和序列测定结果显示成功构建出重组质粒pCDNA3.1-PCV2ORF3。将该重组质粒接种BALB/c小鼠,用间接免疫荧光(IFA)检测小鼠血清PCV2ORF3抗体的特异性及其效价。IFA结果证实经PCV2ORF3重组质粒接种所制备的小鼠血清是PCV2ORF3的特异性抗体,小鼠血清PCV2ORF3抗体效价在经过4次接种后均达到1-2^5以上,抗体检测结果表明成功制备了具有较高效价的PCV2ORF3抗体。研究结果提示:可以通过质粒DNA免疫方法来快速、简便地制备PCV2ORF3抗体,为PCV2ORF3抗体制备提供了一种新的有效途径。