肾小球滤过率估测值评判老年高血压及2型糖尿病并发终末期肾病患者血红蛋白浓度的变化
摘要：目的探讨用肾小球滤过率估测值（eGFR）评判的老年高血压及2型糖尿病并发终末期肾病（ESRD）患者血红蛋白（Hb）浓度改变。方法收集高血压及2型糖尿病并发慢性肾病且≥60岁患者230例,将eGFR〈15ml.min-1.1.73m-2（7.80±3.14ml.min-1.1.73m-2）者归为ESRD组,eGFR≥15ml.min-1.1.73m-2（29.76±12.90ml.min-1.1.73m-2）者归为非ESRD组,回顾性比较两组间Hb浓度。结果较非ESRD组〔Hb（100.8±23.0）g/L〕,ESRD组Hb浓度〔（74.4±22.5）g/L〕显著降低（P〈0.05）,且在ESRD与非ESRD组中eGFR均与Hb浓度显著正相关（P〈0.05）。结论eGFR评判的老年高血压及2型糖尿病并发ESRD患者Hb浓度显著降低,且eGFR与Hb浓度具有显著正相关性。MMP-2、MMP-9在胃癌组织中的表达及相关性分析
摘要：目的研究基质金属蛋白酶（MMP）-2、-9在胃癌组织中的表达及相关性。方法采用免疫组化法观察60例胃癌及20例胃正常黏膜石蜡标本中MMP-2、-9蛋白的表达情况。结果MMP-2在胃癌组织中的表达率为75%,MMP-9在胃癌组织中的表达率为68.3%,均显著高于周围正常组织（P〈0.05）。MMP-2和-9的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及肿瘤临床分期相关（P〈0.05）。且MMP-2的表达与MMP-9的表达呈正相关（P〈0.05）。结论MMP-2和-9在胃癌组织中显著高表达,与胃癌的浸润转移相关,其异常表达可能共同参与胃癌的发生、发展过程,检测MMP-2、-9可作为反映胃癌病理学特点的参考指标。Ahmed青光眼阀植入术治疗老年难治性青光眼的疗效观察
摘要：目的探讨Ahmed青光眼阀植入术治疗老年难治性青光眼的疗效。方法对本院收治的难治性老年青光眼患者30例31只眼,行Ahmed青光眼阀植入术,并对其手术前后的眼压、视力、术后并发症等进行分析。结果Ahmed青光眼阀植入术后有效降低了青光眼患者的眼压（P〈0.01）,明显减少了新生血管性青光眼患者的虹膜新生血管;术中部分结扎引流管可减少术后低眼压、浅前房的发生率;术中使用异体巩膜可减少术后引流管暴露。结论（1）Ahmed青光眼阀植入术是一种操作简便、痛苦少、创伤小、有效可行的治疗难治性青光眼的方法。（2）Ahmed青光眼阀植入术后并发症影响手术成功率,术后早期应密切随访,及时处理并发症。瑞舒伐他汀对老年患者的调脂抑炎作用
摘要：目的比较瑞舒伐他汀和阿托伐他汀在老年患者中的调脂抑炎作用。方法选择75例老年血脂异常患者,随机分为A、B、C三组,A组服用阿托伐他汀（10mg/d）,B组服用瑞舒伐他汀（5mg/d）,C组服用瑞舒伐他汀（10mg/d）,三组均服药12w。于治疗前、治疗4w末、12w末分别采空腹静脉血测TC,LDL-C,TG,HDL-C,IL-6,IL-10,TNF-α。结果①三组各项指标治疗前无差异（P〉0.05）;4w末,TC,LDL-C,TG均降低,HDL-C均升高（P〈0.01）;12w末,血脂未见变化（P〉0.05）。②4w末,A,B两组TC,LDL-C比较无差异（P〉0.05）,C组TC,LDL-C较A、B两组降低（P〈0.01）。③4w末,三组IL-6、TNF-α降低,IL-10升高（P〈0.01）;12w末,炎症因子变化持续（P〈0.01）。④除12w末C组TNF-α较B组稍低外,未见到三组炎症因子变化有差异（P〉0.05）。结论①阿托伐他汀和瑞舒伐他汀均有调脂抑炎作用,且抑炎作用是独立于调脂作用以外的。②瑞舒伐他汀5mg/d和阿托伐他汀10mg/d调脂效果类似,瑞舒伐他汀10mg/d调脂作用大于阿托伐他汀10mg/d。③瑞舒伐他汀与阿托伐他汀抑炎作用大致相当。Cyclin D1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性
摘要：目的探讨细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和抑癌基因PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学染色S-P法检测Cyclin D1和PTEN在不同胃黏膜病变石蜡包埋标本的表达并进行相关性分析。结果在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌中Cyclin D1的表达率逐渐增高,PTEN的表达率逐渐降低,且差异有统计学意义（P〈0.05）;Cyclin D1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的阳性表达率呈负相关。结论Cyclin D1、PTEN在胃癌的发生、发展中起协同作用,对其进行联合检测有助于胃癌的早期诊断。高龄患者后路腰椎椎间融合术40例临床分析
摘要：目的探讨行后路腰椎椎间融合术（PLIF）的高龄患者围手术期特点及临床疗效。方法回顾性分析2004年1月至2006年9月间进行的PLIF手术107例,其中老年组（≥65岁）40例,青年组（〈65岁）67例。随访时间13～37个月,平均19.6个月。对比术前合并症、美国麻醉医师协会（ASA）分级;对比术中出血量、术后引流量、术中术后异体血输入量、手术时间及术后住院日;对比腰痛视觉模拟疼痛评分（VAS）及日本矫形外科协会（JOA）下腰痛评分;观察并发症的发生及术后椎间融合情况。结果老年组术前ASA病情分级（P=0.001）、内科合并症（P=0.02）与青年组间差异有统计学意义。手术时间、术中出血量、术后引流量、术中术后异体血输入量、术后腰痛VAS、术后优良率、椎间融合率、并发症发生率两组间差异无统计学意义（P〉0.05）。老年组并发症发生率为20.0%（8例）,其中具有合并症的患者并发症发生率与无合并症患者间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论高龄并非融合内固定手术的禁忌证;高龄虽增加手术风险,但多科协作、及时纠正围手术期的病理状态,是可以安度围手术期的,且能够获得良好的骨性融合和神经功能改善。眼科影像学检查在老年脉络膜转移癌诊断中的意义
摘要：目的探讨老年脉络膜转移癌患者眼科影像学检查特点及其在脉络膜转移癌诊断中的意义。方法对13例15眼老年脉络膜转移癌的眼科影像学检查结果进行分析,包括眼A/B超、FFA及ICGA、CT、MRI、OCT检查。结果FFA表现早期不显荧光,而后逐渐显现斑点状荧光,晚期荧光增强融合呈斑驳样。ICGA早期呈弱荧光,而后出现弱的荧光斑点。脉络膜转移癌的A超扫描为中等到高的反射,内部结构不规则。B超显示为扁平隆起的病灶,常有病灶周围视网膜隆起。CT显示球壁扁平状隆起肿块或限局性增厚,MRI显示肿块T1W呈高于玻璃体的中高信号,T2W为低信号。OCT表现为病灶区神经上皮层浆液性脱离。结论眼科影像学检查有助于脉络膜转移癌的诊断及鉴别诊断,以FFA、ICGA、眼A/B超的意义较大,FFA检查在小病灶的早期发现上有重要意义。六味地黄丸治疗老年复发性口疮的疗效观察
摘要：目的探讨六味地黄丸对老年复发性口疮（ROU）的疗效。方法采用六味地黄丸治疗老年ROU（阴虚火旺型）,并对患者治疗前后T淋巴细胞亚群的变化及临床疗效进行观察,并与常规治疗组和健康者进行比较。结果两组患者治疗前CD3、CD4、CD4/CD8比率均显著低于健康（P〈0.01）,CD8均明显高于健康组（P〈0.01）;两组间相比无明显差异（P〉0.05）。观察组治疗后CD3、CD4、CD4/CD8比率均明显高于治疗前（P〈0.01）,与健康组相比无明显差异（P〉0.05）,观察组治疗前后CD8无明显变化（P〉0.05）。对照组治疗前后CD3、CD4、CD8、CD4/CD8无明显差异（P〉0.05）。两组治疗后总有效率存在显著性差异（P〈0.01）。治疗后观察组患者主要症状和体征均有明显改善,与治疗前相比具有明显差异（P〈0.01）。治疗后对照组患者：平均溃疡与疼痛自评分均明显降低,与治疗前相比有明显差异（P〈0.05）;治疗后其各项躯体伴随症状均无明显改善,与治疗前相比无明显差异（P〉0.05）。结论六味地黄丸具有纠正老年ROU（阴虚火旺型）患者T淋巴细胞亚群的平衡失调,调节自身免疫功能,增强机体抗病能力的作用。急性心肌梗死患者院前延迟影响因素及对预后的影响
摘要：目的探讨急性心肌梗死（AMI）院前延迟（PHD）的影响因素及其对预后的影响。方法采用问卷调查、出院随访、查阅病历收集资料等方法,对332例AMI患者PHD影响因素及对预后的影响进行分析。结果患者延迟（PD）中位数时间为90min;PHD中位数时间为170min;PD占PHD的46.6%～64.5%;PHD越长,PD在PHD中所致的比例越大。多因素Logistic回归分析显示,梗死前心绞痛、服止痛药、不愿打扰别人、等症状消失、逐渐发病、年龄≥65岁、无医疗保险是PD的独立危险因素。以PD60min为界点,与晚决定组相比,早决定组患者发病至再灌注治疗延迟明显缩短;AMI患者PHD≤2h组,1年内无心血管事件发生;〉2h组心血管事件发生率为27.03%,与前者比较有显著差异（P〈0.05）。结论AMI患者延迟就医受多种因素影响,PD是影响PHD的主要因素,PD使AMI患者1年心血管事件发生率增高。缩短PHD,并及早实施再灌注治疗,对降低AMI患者病死率并改善远期预后至关重要。氯化甲基汞抗裸鼠皮下U251胶质瘤细胞的体内实验研究
摘要：目的在建立裸鼠皮下U251胶质瘤模型基础上,通过体内实验及相关形态学研究,分析氯化甲基汞（MMC）的抗脑胶质瘤作用。方法制备裸鼠皮下U251胶质瘤模型,随机分为对照组和实验组,实验组裸鼠注射U251脑胶质瘤细胞1w后,每天灌胃给予10mg/kg体重MMC,连续5d,对照组给予相同体积的生理盐水。全部裸鼠于肿瘤接种后14d处死。结果大体病理显示实验组肿瘤体积明显小于对照组,病理组织学观察发现实验组U251胶质瘤细胞生长密度较对照组低,并可见细胞体积变小、核固缩等凋亡的形态学改变。透射电镜显示实验组肿瘤细胞发生核固缩、染色质周边化、核断裂、胞浆空泡变性等改变,实验组瘤体汞含量明显高于对照组。结论MMC对裸鼠U251胶质瘤细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能是通过诱导胶质瘤细胞凋亡实现的,相关分子机制有待进一步深入研究。人脂肪干细胞向内皮分化最佳诱导体系的建立
摘要：目的探讨人脂肪干细胞（human Adipose-derived stem cells,hADSCs）体外分化为内皮细胞的最佳诱导体系。方法利用胶原酶消化法和贴壁筛选法从人脂肪组织中分离、培养及扩增hADSCs,分3组分别进行内皮诱导：即纤维连接蛋白（fibronectin,FN）包被组、明胶包被组和未铺组;同时诱导液分为两组：单纯内皮细胞生长培养基（EGM2-MV）组及内皮细胞生长培养基（EGM2-MV）＋50ng/ml血管内皮细胞生长因子（VEGF165）组。诱导15d后,通过流式细胞术检测各组内皮细胞特异性表面抗原CD34的表达;通过相差显微镜观察诱导前后细胞的一般形态学特征。结果体外分离、培养出高度同源性的hADSCs,CD29、CD44、CD90、CD105及CD166呈阳性表达,而CD34、CD45及HLA-DR呈阴性表达;诱导后细胞流式结果显示单纯EGM-2MV诱导的3组细胞内皮细胞特异性标志CD34阴性表达,而EGM2-MV＋50ng/mlVEGF165诱导的细胞,其中FN包被组CD34表达率为8.4%,明胶包被组为5.4%,未铺组为4.2%;相差显微镜下可见诱导后细胞呈三角形或多边形,融合处呈铺路石样生长。结论FN作为细胞外基质与EGM2-MV＋50ng/mlVEGF165组成的诱导液协同作用,构成了hADSCs体外分化为内皮细胞的最佳诱导体系,可为临床上缺血性疾病的自体细胞移植治疗提供大量的种子细胞来源。甲型流感病毒M2e与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达
摘要：目的将甲型流感病毒M2蛋白胞外区（M2e）基因与人血清白蛋白（HSA）基因融合,以构建高效分泌表达的毕赤酵母菌株。方法通过RT-PCR扩增HSA基因,构建pPICZα-HSA质粒,将人工合成的M2e序列与pPICZα-HSA质粒分别经BstBI和KpnI酶切消化后连接,构建真核表达载体pPICZα-HSA/M2e,线性化后电转化毕赤酵母X-33。用PCR法筛选Zeocin抗性阳性的克隆,SDS-PAGE和Western印迹法筛选高表达HSA/M2e菌株。结果经RT-PCR法克隆的HSA基因序列与GenBank登录的cDNA序列一致,构建的pPICZα-HSA/M2e真核表达载体,经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆。SDS-PAGE和Western印迹分析证实了甲醇诱导的培养基上清中含有HSA/M2e,分子量约为68kD。结论成功构建了分泌表达重组HSA/M2e融合蛋白的毕赤酵母菌株,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。大鼠局灶性脑缺血Activin A及其受体ActRⅡA表达变化及意义
摘要：目的探讨大鼠局灶性脑缺血激活素A（ActA）及其受体ⅡA（ActRⅡ）的表达变化规律及意义。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,采用光镜、免疫组化方法检测大鼠局灶性脑缺血后梗死体积、病理变化,免疫组化染色观察ActA、ActRⅡA免疫阳性表达。结果正常组织有极低水平的ActA、ActRⅡA表达,免疫组化显示缺血3h后在周边区ActA、ActRⅡA阳性细胞数量显著高于假手术组（P〈0.05）,并随缺血时间延长而逐渐增高,于24h达高峰。结论局灶脑缺血损伤可诱导内源性神经元ActA高表达,并可能通过特异性跨膜信号受体ActRⅡA发挥靶源性作用。水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体荧光探针的制备及其对肝癌细胞HepG2的免疫荧光标记
摘要：目的制备水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体（QDs-MAb）荧光探针,并对其特异免疫性识别能力和荧光稳定性进行检测。方法在EDC偶联剂的作用下,将水溶性CdTe量子点与广谱细胞角蛋白单克隆抗体（PanCK）进行了连接;对肝癌细胞HepG2采用免疫细胞化学法和QDs-MAb单抗荧光探针直接免疫荧光标记法观察比较PanCK蛋白在细胞内的分布;将量子点与传统的荧光染料FITC的荧光强度和荧光稳定性进行了比较。结果QDs-MAb单抗荧光探针对HepG2细胞内的PanCK分子具有特异性的识别能力;与FITC相比,QDs-MAb荧光探针荧光度更强,光化学稳定性更好,激发光连续照射30min及室温放置3d后均未见明显淬灭。结论本实验成功制备了QDs-MAb荧光探针,为半导体量子点用于上皮来源的肿瘤细胞内PanCK分子的相关检测提供了科学依据。益脑颗粒对亚急性衰老大鼠慢性脑缺血模型脑组织中HSP70表达的影响
摘要：目的观察益脑颗粒对慢性脑缺血大鼠脑组织中HSP70表达的影响,探讨益脑颗粒治疗慢性脑缺血的作用机制。方法采用D-gal注射诱导亚急性衰老大鼠模型,永久性双侧大鼠颈总动脉结扎术（2VO）制备亚急性衰老大鼠慢性脑缺血模型。给予高、低剂量益脑颗粒灌胃,并以尼莫地平为对照,免疫组化法观察大鼠脑组织中HSP70表达。结果模型组脑组织中HSP70表达无明显改变（P〉0.05）,益脑颗粒高、低剂量组表达升高（P〈0.01）,尼莫地平组无明显改变（P〉0.05）。结论益脑颗粒能通过增加缺血脑组织中HSP70的表达,改善慢性脑缺血。芪蛭益肺颗粒对COPD大鼠模型SP-A表达和超微结构的影响
摘要：目的探讨芪蛭益肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）表达及肺组织超微结构的影响。方法运用气管内滴注脂多糖加烟熏28d法建立COPD大鼠模型,免疫组化法检测SP-A表达及透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构变化。结果与空白组比较,模型组大鼠SP-A表达明显减少,有显著差异（P〈0.01）,肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构不完整;与模型组比较,芪蛭益肺颗粒治疗组大鼠SP-A表达明显增强,差异显著（P〈0.01）,肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构完整。结论芪蛭益肺颗粒可显著提高模型大鼠SP-A表达,改善细胞超微结构,对COPD的发生起到预防保护作用。衣原体蛋白酶样活性因子（CPAF）的克隆、表达及纯化
摘要：目的构建含衣原体蛋白酶样活性因子（CPAF）的原核表达载体,经转化E.coli以表达CPAF融合蛋白,研究其生物学功能。方法从病料中克隆得到CPAF的原始基因,将PCR产物经纯化连接到pMD18-T,将重组质粒pMD-CPAF经NdeI和BamHI双酶切,与用相同酶消化的原核表达载体pET42b（＋）连接,建立pET42b（＋）-CPAF表达载体,阳性克隆经鉴定后,转化大肠杆菌BL21（DE3）进行表达,经亲和纯化、离子交换纯化、分子筛纯化融合蛋白,进行SDS-PAGE分析,Western印迹检测。结果经酶切鉴定和测序分析证实原核表达质粒构建正确。SDS-PAGE和West-ern印迹结果显示在70kD处呈现单一蛋白条带,pET42b（＋）-CPAF重组载体在大肠杆菌BL21（DE3）中成功地表达了CPAF天然蛋白,目的蛋白占全菌体蛋白的20%左右,采用镍柱的亲和纯化后,可达70%左右。结论经DNA测序、SDS-PAGE、Western印迹检测表明成功构建了能够稳定表达可溶性CPAF的菌株,并获得纯化CPAF的方法,为今后CPAF的研究及应用奠定了基础。应用低浓度长春新碱分离并鉴定MG-63细胞系中的骨肉瘤干细胞
摘要：目的分离并鉴定人成骨肉瘤细胞系MG-63中的骨肉瘤类肿瘤干细胞。方法通过无血清培养基加入低浓度长春新碱的方法悬浮培养成骨肉瘤细胞球来进行分离和类干细胞富集。后行细胞形态学观察、细胞球免疫荧光染色、RT-PCR、流式细胞仪鉴定细胞表面标志物,成骨、成脂肪诱导及裸鼠成瘤的一系列鉴定试验。结果悬浮培养得到肉瘤细胞球,可持续传代细胞亚系＂MG-63-M＂,多能干细胞、胚胎干细胞标志物及多药耐药基因表达均为阳性。具有很强的自我更新及多项分化能力。结论MG-63细胞系中存在具有自我更新及多向分化能力的骨肉瘤干细胞,而采用神经干细胞培养基中添加低浓度长春新碱是从骨肉瘤细胞系中分离培养出骨肉瘤干细胞的有效办法。
