中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2009年第09期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

葡萄籽提取物对缺血再灌注导致衰老大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用1049-1052

摘要：目的探讨葡萄籽提取物（Grape seed extract proanthocyanidin,GSPE）对缺血再灌注（I/R）导致衰老大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用。方法分离培养24月龄Wistar雄性大鼠的原代肾小管上皮细胞,第3代后,将细胞分为对照组、10μmol/L Antimycin A处理组、GSPE干预组以及Antimysin A＋GSPE组。Anexin V/PI染色,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡情况,定量PCR和Western印迹法分别检测Caspase-3mRNA和蛋白表达水平,化学发光法检测细胞Capsase-3活性及过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。激光共聚焦检测细胞内活性氧（ROS）的浓度。结果（1）衰老大鼠肾小管细胞经Antimycin A处理后,凋亡率增高,Caspase-3,MDA,ROS明显增加,SOD下降;（2）经GSPE干预后,其凋亡情况明显好转,caspase-3、MDA、ROS明显降低。SOD含量部分恢复（P〈0.05）。结论老年大鼠肾小管细胞在I/R损伤时,ROS堆积,线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡。GSPE可清除ROS从而达到抑制肾小管上皮细胞凋亡、减轻I/R损伤的作用。

肺缺血-再灌注氧化应激反应对超微结构的影响及川芎嗪的作用1052-1053

摘要：目的探讨川芎嗪对肺缺血-再灌注（IR）损伤超微结构的影响及其机制。方法采用在体兔单侧肺左肺门持续性阻断1h,再灌注1,3,5hIR损伤的动物模型。90只兔随机分为3组：（1）对照组：对兔进行假手术,不发生缺血;（2）IR组：缺血1h,分别再灌注1,3,5h。（3）TMP组：缺血前1h静脉滴注射川芎嗪60mg/kg,其余同IR组。测定各组血浆1,3,5h末血浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量。常规电镜制片、染色,观察肺组织超微结构的变化。结果与对照组相比IR组各时相血浆MDA含量显著升高（P〈0.01）,SOD显著降低（P〈0.05）;与IR组相比川芎嗪能减轻MDA的升高（P〈0.05,P〈0.01）,而使SOD升高（P〈0.01）。电镜下见对照组：肺微小动脉内皮结构、毛细血管内皮细胞及肺泡上皮细胞结构正常;IR组肺微小动脉内皮细胞损伤明显,线粒体水肿、空泡变性。肺毛细血管腔内多形核白细胞（PMN）堵塞,肺泡Ⅱ型上皮微绒毛脱失,细胞内板层小体疏松肿大;TMP组肺微小动脉内皮结构基本正常,个别线粒体轻度水肿,无空泡变性,毛细血管腔内PMN少,堵塞相对较轻,肺泡Ⅱ型上皮微绒毛少许脱落。结论川芎嗪通过抑制氧自由基的作用,明显改善肺IR肺组织超微结构的改变,从而对IR肺组织有保护作用。

骨髓间充质干细胞在造血重建中的作用1054-1056

摘要：目的探讨骨髓间充质干细胞（bonemarrow mesenchymal stem cells,BM-MSC）在造血损伤修复中的作用。方法将同系小鼠股骨、骨壳、注入骨髓条的塑料管及经20Gyγ-射线照射的股骨分别植入同一小鼠腹部皮下,观察1、2、3、4w各移植物造血重建情况。观察髓腔内微循环结构与机能、组织学、分化不同阶段的造血细胞数目与机能等变化,以及骨皮质体外间充质干细胞（MSC）培养与扩增规律。结果乏造血干细胞（HSC）的骨皮质异位移植完全可以造血重建,在移植后4w,移植物已形成完整的封闭的具有正常造血组织的股骨,其重建的程序、速度与具有大量HSC的完整股骨移植的重建基本一致。而经射线破坏和注入塑料管内的骨髓条完全失去造血重建功能。结论骨皮质可能是骨髓MSC的源泉,BM-MSC是造血重建的不可缺少的因素。

射干麻黄汤对支气管哮喘大鼠肺组织细胞因子表达的影响1056-1057

摘要：目的探讨射干麻黄汤对支气管哮喘大鼠肺组织转化生长因子（TGF）-β1表达的影响方法采用免疫组化、NYD1000型图像分析软件半定量测定TGF-β1表达并对各组大鼠支气管-肺病理组织学HE染色进行观察及定量分析。结果射干麻黄汤组支气管-肺病理组织学指标改善优于桂龙咳喘宁组（P〈0.01）;TGF-β1表达明显低于桂龙咳喘宁组（P〈0.01）。结论射干麻黄汤可以通过减少TGF-β1表达减轻炎症反应,抑制气道重塑,对支气管哮喘起到很好的治疗作用。

维生素E对老年雌性大鼠雌激素及海马芳香化酶表达的影响1058-1060

摘要：目的探讨维生素E用于防治绝经后女性中枢神经系统退行性疾病的作用及机制。方法采用自然衰老雌性大鼠为动物模型,实验组每日注射维生素E5mg/kg（小剂量组）、15mg/kg（中剂量组）、60mg/kg（大剂量组）（n=8）。采用放免法检测血清雌激素含量,用免疫组化法观察维生素E对海马芳香化酶表达的影响,并与成年大鼠（对照组）对比观察。结果老年对照组较成年对照组雌激素水平下降,中、大剂量组血清雌激素水平回升（P〈0.05）,海马芳香化酶表达阳性细胞数目多、表达强,大剂量组呈强阳性。结论一定剂量维生素E不仅可以提高血中雌激素水平,而且可以通过增强海马芳香化酶的表达使局部雌激素浓度增加而发挥其神经保护作用。

月见草油与维生素E对衰老模型小鼠骨丢失的影响1060-1062

摘要：目的观察月见草油和维生素E对D-半乳糖致衰老小鼠骨丢失的预防作用,从骨代谢方面探讨其可能的机制。方法40只8周龄昆明雌性小鼠随机分为4组：青年对照组,衰老模型组,维生素E组,月见草油组,每组10只,以颈背部皮下注射半乳糖1000mg·kg-1·d-1造成亚急性衰老模型,并预防灌胃用药6w,观察月见草油和维生素E对小鼠骨丢失时骨量、骨长度、骨有机质、骨钙、磷等骨矿物质以及血清骨代谢相关酶活性的影响。结果D-半乳糖可使小鼠骨量、骨长度、骨有机质减少（P〈0.05）,血清碱性磷酸酶（AKP）活性下降（P〈0.01）;同时给药月见草油和维生素E分别能使骨量、骨长度、骨矿物质及骨有机质得到恢复（P〈0.05或P〈0.01）并提高血清AKP活性（P〈0.01）,月见草油还能有效抑制抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）活性（P〈0.05）。结论D-半乳糖可导致小鼠骨丢失,月见草油和维生素E均可预防衰老模型小鼠骨丢失,而其机制可能与成骨细胞、破骨细胞活性的调控有关。

诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究1069-1071

摘要：目的观察乳鼠心肌细胞条件培养液、SalB、5-氮胞苷（5-aza）及SalB联合5-aza体外诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为心肌样细胞的作用及其机制。方法分离培养及鉴定大鼠MSCs,培养乳鼠心肌细胞,收集条件培养液对其进行分组诱导：①SalB（终浓度为250μg/L）,②5-aza组（终浓度为10μg/L）,③SalB联合5-aza组（终浓度分别为250μg/L与10μmol/L）,④乳鼠心肌细胞条件培养液,⑤未加诱导剂的阴性对照组。选取MSCs进行诱导,诱导周期为4w。倒置相差显微镜下观察细胞的生长情况及形态变化,免疫细胞化学法鉴定心肌特异性肌钙蛋白T（cTnT）表达,实时荧光定量RT-PCR法检测心肌早期基因NKX2.5、GATA-4 mRNA的相对表达量。结果细胞形态学显示,诱导后的MSCs体积增大,增殖减慢,并出现肌管样结构;免疫细胞化学结果显示,诱导后的MSCs表达心肌特异性蛋白cTnT,与5-aza组相比,SalB组和条件培养液两组蛋白表达较低,SalB联合5-aza组蛋白表达升高;实时荧光定量RT-PCR结果显示除阴性对照组外,其他四组表达心肌分化早期基因,SalB联合5-aza组诱导后的MSCs的心肌早期分化基因表达明显高于其他三组。结论SalB联合5-aza诱导MSCs表达心肌特异性肌钙蛋白cTnT;上调心肌早期基因NKX2.5、GATA-4mRNA的表达,证实其能够向心肌细胞分化能力;条件培养液不能上调心肌细胞的早期基因和蛋白,不能诱导其分化。

siRNA-Med19对人肺癌A549细胞Med19转录、表达的影响1072-1074

摘要：目的研究siRNA-Med19对人肺癌A549细胞Med19的影响。方法利用前期已合成的siRNA-Med19慢病毒载体,感染A549细胞,并以无病毒感染组作为空白对照组,以慢病毒载体感染组作为阴性对照组。采用荧光图片和白光图片对比方法判断细胞的感染率;RT-PCR法检测细胞Med19mRNA的转录水平;Western印迹法检测细胞Med19蛋白表达水平。结果慢病毒载体对人肺癌A549细胞的感染率在80%以上,siR-NA-Med19慢病毒感染组Med19mRNA转录水平明显降低,敲减效率大于70%,Med19蛋白表达量也明显降低。结论siRNA-Med19慢病毒载体可以高效感染人肺癌A549细胞,siRNA-Med19对A549细胞Med19的转录和表达具有明显的抑制和消减作用。

依达拉奉抑制血管性痴呆大鼠脑组织环氧化酶-2与NF-κB的表达1074-1077

摘要：目的观察依达拉奉对血管性痴呆（VD）大鼠行为学和脑组织环氧化酶-2（COX-2）、核转录因子-κB（NF-κB）表达的影响,探讨依达拉奉对VD脑保护作用机制。方法Wistar大鼠随机分为：正常组、假手术组、痴呆模型组（模型组）、依达拉奉治疗组（治疗组）。水迷宫和穿梭箱实验检测行为学特征;免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测大鼠脑组织COX-2、NF-κB的表达,用图象分析仪测定光密度（OD）值。结果治疗组大鼠的前后两次跳台实验的检测结果差异显著（P〈0.01）,治疗组的行为学症状较模型组明显改善。NF-κBp65和COX-2阳性细胞百分率治疗组较正常组、假手术组明显增高（P〈0.01）,较模型组明显降低（P〈0.01）,NF-κBp65和COX-2OD值,治疗组较正常组、假手术组明显降低（P〈0.01）,较模型组明显增高（P〈0.01）。结论依达拉奉能明显改善VD大鼠的行为学症状、降低大鼠脑组织NF-κBp65和COX-2表达,依达拉奉能够通过抑制大鼠脑组织NF-κBp65和COX-2表达途径发挥其脑保护作用。

伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立1078-1080

摘要：目的制备与人类发病过程类似的伴高血压2型糖尿病大鼠模型。方法选择40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组12只和实验组28只,对照组以标准大鼠饲料饲喂,实验组以高脂高盐饲料喂养,两组均饮用大鼠专用去离子水,16w进行正糖钳实验,确定胰岛素抵抗,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）造成2型糖尿病。实验过程中每周测食量、水量和体重,每4w测血糖和尾动脉血压,实验16w时取血测空腹血浆胰岛素。结果饲喂高脂高盐饲料16w后,与对照组相比,实验组尾动脉血压明显升高,差异显著（P〈0.01）;实验组空腹胰岛素浓度明显高于对照组（P〈0.01）;与对照组相比,实验组葡萄糖输注速率明显降低,两组差异有统计学意义;STZ注射后实验组血糖明显升高,达到了糖尿病的诊断标准。结论高脂高盐饮食配合STZ腹腔注射可成功诱导出伴高血压2型糖尿病大鼠模型。

卵巢切除小鼠骨组织中肿瘤坏死因子-α的基因表达和细胞定位1080-1081

摘要：目的观察卵巢切除小鼠骨组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的基因表达及细胞定位。方法小鼠双侧卵巢切除12w后,通过原位杂交观察骨组织中TNF-αmRNA的表达及细胞定位,测定骨组织阳性细胞染色积分光密度值。结果卵巢切除小鼠骨组织中TNF-αmRNA表达明显强于对照组（P〈0.01）。成骨细胞、骨髓基质细胞和骨小梁周边骨细胞具有较强的TNF-αmRNA杂交信号。结论卵巢切除导致骨组织成骨细胞系TNF-αmRNA的表达升高,TNF-α在卵巢切除小鼠骨丢失中可能起重要作用。

砷、铝联合中毒对小鼠脑细胞Ca2＋浓度的影响1084-1085

摘要：目的探讨砷、铝中毒导致脑细胞损伤的机制。方法建立砷、铝中毒动物模型,以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光扫描共聚焦显微镜测定脑细胞内游离Ca2＋含量的变化,同时检测脑组织砷、铝含量及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的活性。结果砷中毒组及铝中毒组小鼠脑细胞内Ca2＋平均荧光强度明显高于对照组（P〈0.001）;砷铝联合中毒组小鼠脑细胞内Ca2＋平均荧光强度稍低于对照组,但无显著差异（P〉0.05）;砷铝联合中毒组小鼠脑组织中砷、铝含量、MDA活性明显高于对照组,而SOD活性则低于对照组,两组差异显著（均P〈0.05）。结论砷、铝均可增加小鼠脑细胞内的游离Ca2＋浓度,提示脑细胞内钙超载可能是其致脑细胞损伤的分子机制之一。

大鼠动脉粥样硬化COX-2 mRNA表达及白黎芦醇干预的实验研究1086-1087

摘要：目的观察白黎芦醇对动脉粥样硬化（AS）模型大鼠主动脉粥样硬化段COX-2 mRNA表达的影响。方法雄性SD大鼠高脂饲料喂养,复制食饵性AS早期模型,用药组灌胃白藜芦醇。造模给药4w后,用RT-PCR方法观察对照组、模型组和用药组主动脉壁粥样硬化段COX-2 mRNA的表达。结果用药组降低AS早期主动脉硬化段COX-2表达,阻止AS的进程。结论白藜芦醇对大鼠AS具有保护作用,并能提高AS斑块稳定性。

尾加压素Ⅱ对大鼠血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响1089-1091

摘要：目的观察尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖及凋亡的影响。方法采用体外培养大鼠VSMC,将不同浓度UⅡ与VSMC孵育不同时间,应用MTT法检测VSMC增殖,流式细胞仪检测VSMC凋亡。结果体外培养的大鼠VSMC在浓度为（0、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L）的UⅡ培养液中孵育24h后,其A值分别为0.457±0.072,0.531±0.065,0.568±0.094,0.614±0.102,0.676±0.048,0.754±0.093;细胞凋亡率分别为2.20%±0.46%,2.80%±0.86%,7.79%±1.70%,13.31%±2.57%,18.71%±1.39%,23.32%±2.88%;表明UⅡ呈浓度依赖性诱导大鼠VSMC增殖和凋亡。在终浓度为10-7mol/LUⅡ的培养液中分别孵育0、6、12、24、48、72h后,其A值分别为0.499±0.062,0.558±0.081,0.629±0.114,0.685±0.061,0.715±0.131,0.803±0.097;细胞凋亡率分别为1.74%±0.42%,2.36%±0.86%,9.88%±1.45%,16.50%±1.68%,23.14%±2.33%,26.09%±1.66%;表明UⅡ呈时间依赖性诱导大鼠VSMC增殖和凋亡。结论UⅡ可以诱导VSMC增殖与凋亡,这一双重作用可能是UⅡ参与血管重塑性疾病的作用机制之一。

川芎嗪对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺泡中肿瘤坏死因子-α的影响1092-1094

摘要：目的探讨川芎嗪对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠肺泡中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法24只SD大鼠随机分为3组：正常对照组（对照组）、COPD模型组（模型组）、川芎嗪治疗组（川芎嗪组）每组8只。采用熏吸香烟并经气管内注入脂多糖（LPS）法建立大鼠COPD模型,川芎嗪组于COPD模型开始建立后第8天起每天腹腔注射川芎嗪注射液80mg/kg,至第28天。观察各组气道炎症病理特点,肺平均内衬间隔（MLI）和平均肺泡数（MAN）,计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞总数、多形核中性粒细胞（PMN）数及TNF-α浓度。结果川芎嗪组肺组织形态学改变较模型组减轻;MLI较模型组降低,较对照组增高,而MAN与之相反,差异显著（均P〈0.05）。川芎嗪组BALF中白细胞总数、PMN数及TNF-α浓度较模型组下降,差异非常显著（P〈0.01）;较对照组略升高,差异不显著（P〉0.05）。结论川芎嗪可降低COPD大鼠BALF中TNF-α浓度,抑制炎症细胞生成,对COPD大鼠气道炎症具有明显的抑制作用。

乌司他汀治疗失血性休克的实验研究1094-1095

摘要：目的探讨乌司他可应用失血性休克治疗时血管活性物质一氧化氮（NO）和血管内皮素（ET）水平的变化及其意义。方法复制大鼠失血性休克模型,于复苏时予以乌司他汀治疗,采用酶联免疫法（ELISA）测定大鼠血浆一氧化氮合酶（NOS）及血管内皮素（ET）的含量。结果对照组血浆cNOS呈逐渐下降趋势,而治疗组2h及4h时cNOS均明显上升（P〈0.05）。对照组血浆中iNOS在体克末及复苏时均明显上升,而治疗组在复苏后iNOS测定值明显下降。治疗组在复苏后2h及4h与对照组相比对ET的增高有明显抑制（P〈0.05）。结论失血性休克后体内iNOS及ET升高,乌司他汀对其升高有抑制作用,并可促进cNOS的释放,从而对机体起保护作用。

中国老年学杂志临床研究

金莲花黄酮对人乳腺癌细胞作用的研究1098-1099

摘要：目的探讨金莲花黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞增殖抑制作用及对端粒酶活性的影响。方法不同浓度金莲花黄酮作用于MCF-7细胞24h,以CCK-8法检测细胞增殖抑制作用、流式细胞术检测端粒酶活性。结果9.516、6.344、3.172、1.586、0.793mg/ml5个不同浓度金莲花黄酮作用于MCF-7细胞24h,对细胞增值的抑制率依次为17%、28%、48%、50%、55%。各实验组A490与对照组比较差异均显著（P〈0.05,P〈0.01）,且用药浓度与抑制率呈正相关;端粒酶活性均有不同程度降低、且端粒酶活性与用药浓度成正比。结论金莲花黄酮对MCF-7细胞有明显抑制作用并降低端粒酶活性。

老年冠心病患者血浆心肌营养素-1与心功能的关系1100-1102

摘要：目的探讨老年冠心病患者血浆心肌营养素-1（CT-1）与心功能的关系及其临床意义。方法应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定老年冠心病患者54例（NYHAⅠ级11例,NYHAⅡ级16例,Ⅲ级16例,Ⅳ级11例）血浆CT-1、脑钠素（BNP）水平,通过超声心动图检查测定左室射血分数（LVEF）。结果老年冠心病患者血浆CT-1水平随心功能下降而升高。其中NYHAⅣ级患者为（249.95±53.529）pg/ml,Ⅲ级患者为（159.67±50.159）pg/ml,Ⅱ级患者为（108.70±39.241）pg/ml,NYHAⅠ级为（70.66±29.021）pg/ml,各组CT-1水平差异具有统计学意义（F=35.144,P〈0.01）,组间比较亦有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。Spearman直线相关分析显示老年冠心病患者血浆CT-1水平与心功能分级相关（r=0.805,P〈0.01）;Pearson直线相关分析显示冠心病组血浆CT-1水平与血浆BNP水平相关（r=0.819,P〈0.01）,与LVEF值负相关（r=-0.678,P〈0.01）。通过绘制CT-1的ROC曲线,CT-1在ROC曲线下的面积为0.882,95%的可信区间为0.789～0.974,曲线下面积差异有统计学意义（P〈0.01）。结论老年冠心病患者血浆CT-1水平随心功能下降而升高,且与BNP、NYHA分级、LVEF具有较好的相关性。联合检测老年冠心病患者血浆CT-1、BNP浓度有助于判断冠心病预后。