中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2009年第06期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

睾酮对衰老心肌细胞及细胞周期调控因子的作用641-644

摘要：目的探讨不同剂量睾酮对心肌细胞衰老的干预作用及其可能机制。方法用1μmol／L、100nmol／L、10nmol／L三种剂量睾酮干预自然衰老的小鼠心肌细胞，应用流式细胞仪检测各组细胞周期分布，用RT—PCR及Western印迹检测各组细胞p16INK4a、cyclinD1 mRNA、蛋白及去磷酸化RB蛋白的表达。结果与衰老心肌细胞相比，1μmol／L、100nmol／L、10nmol／L睾酮干预细胞G0／G1期比例明显降低（P〈0．05），这一作用具有剂量依赖性。睾酮干预可上调cyclinD1 mRNA及蛋白表达，下调p16INK4a mRNA及蛋白表达，并使去磷酸化RB蛋白表达下降（P〈0．05），而这些作用均可被雄激素受体阻断剂而不被雌激素受体阻断剂所阻断（P〈0．05）。结论睾酮可剂量依赖性的抑制小鼠心肌细胞衰老，这一作用部分是通过睾酮上调cyclinD1表达，下调p16INK4a及去磷酸化RB蛋白表达而实现的。

D-半乳糖合并半高脂饲料致认知功能障碍大鼠模型的建立及评价647-650

摘要：目的建立复合因素所致认知功能障碍大鼠模型，并从行为学、病理形态学、细胞凋亡、氧化损伤和炎症因子等角度进行评价。方法选用雌性正常SD大鼠，采用皮下注射D-半乳糖及饲喂半高脂饲料，制备6W及8W不同时程的认知功能障碍动物模型。采用Morris水迷宫实验及物体识别实验检测各组大鼠学习记忆能力；采用HE染色及电镜观察海马组织病理形态；测定脑中丙二醛（MDA）、氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6）的含量；比较不同时程认知功能障碍模型大鼠之间及与正常大鼠的差异。结果6W末时，认知功能障碍模型大鼠在物体识别实验中，分辨指数较空白组明显下降（P〈0．05），但水迷宫实验成绩与空白组比较无明显差异；而8W末时，模型动物在分辨指数下降（P〈0．01）的同时，水迷宫成绩亦明显下降，逃避潜伏期明显延长（P〈0．01），穿台次数明显减少（P〈0．05）；8W末与6W末相比，水迷宫实验逃避潜伏期明显延长（P〈0．01）；造模后，能引起海马神经细胞的退行性改变及早期凋亡现象，且存在着进行性加重的病理变化；6、8W模型组大鼠脑组织的TNF-α、IL-6水平显著升高（P〈0．05，P〈0．01），同时8W大鼠IL-6水平高于6W模型组（P〈0．05）；6、8W模型组ox—LDL、MDA水平均显著升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论以该方法复制的认知功能障碍大鼠模型，在一定程度上模拟了认知功能障碍发生、发展的多环节病理变化，可为认知功能障碍的治疗，特别是其早期干预打下基础。

rLent／NT4-NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响653-655

摘要：目的探讨神经保护肽慢病毒（rLent／NT4-NAP）感染老年性痴呆（AD）大鼠鼻黏膜后分泌表达NAP对AD大鼠行为学及海马内NF-κB mRNA及caspase-3 mRNA表达的影响。方法选择无菌级雄性Wistar大鼠40只，随机分为正常对照组、假手术组、AD组、慢病毒组，每组10只。Aβ1-40联合转移生长因子β1（TGFβ1）注入各实验大鼠左侧海马区制备AD动物模型，利用水迷宫实验检测大鼠记忆能力，利用原位杂交方法观察大鼠海马内NF-κB mRNA和caspase-3 mRNA的表达。结果AD组与正常组、假手术组比较，逃避潜伏期明显延长，差异有统计学意义（P〈0．05）；慢病毒组与AD组比较逃避潜伏期明显缩短，差异有统计学意义（P〈0．05）；慢病毒组与正常组、假手术组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。原位杂交结果示：AD组NF-κB mRNA，caspase-3 mRNA相对表达水平明显升高，与正常对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。慢病毒组NF-κB mRNA，caspase-3 mRNA相对表达水平与AD组比较明显降低（P〈0．01）；与正常组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论rLent／NT4-NAP感染AD大鼠鼻黏膜后能够分泌表达NAP；NAP能够下调AD大鼠海马NF-κB mRNA，caspase-3 mRNA的表达，抑制细胞凋亡，对AD大鼠海马神经元具有保护作用。

本刊启事655-655

HGF／c-Met系统在大鼠肝纤维化转归中作用及其机制656-659

摘要：目的研究HGF／C-met系统在肝纤维化发生和转归过程中的表达水平，探讨其逆转纤维化的作用机制。方法60只雄性Wistar大鼠应用硫代乙酰胺（TAA）饮用水喂养，制备肝纤维化模型。42只大鼠模型制备成功后，随机分为7组，每组6只。每隔2w处死一组大鼠，留取血清检测肝功能，并检测肝组织中羟脯氨酸含量，HE和天狼星红染色，进行组织学观察，同时应用RT-PCR技术检测HGF及其受体c-Met的表达量，以正常大鼠6只为对照。结果肝纤维化各组HGF／c-Met mRNA表达显著高于正常对照组，随着停止应用TAA时间的延长，肝功能、组织学改变、羟脯氨酸含量及HGF／c-Met的mRNA表达水平均逐渐恢复，且与停药时间呈正相关关系。结论肝损伤发生后，通过增加HGF／c-Met系统的表达水平，可促进肝细胞再生，逆转肝纤维化。

川芎嗪对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞TNF-α表达影响的实验研究659-660

摘要：目的研究川芎嗪对佐剂性关节炎（AA）大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法采用大鼠足跖注射Freundi＇s完全佐剂形成AA，观察川芎嗪对模型大鼠滑膜细胞TNF-α mRNA表达的变化。结果川芎嗪抑制滑膜细胞TNF-α表达。结论川芎嗪通过降低TNF-α的表达起到抗RA的作用。

2009年《国际护理学杂志》征订启事660-660

通心络超微粉对大鼠心肌梗死后心室重塑及其病理和心肌线粒体超微结构的影响661-664

摘要：目的探讨通心络超微粉对大鼠心肌梗死后心室重塑（LVRM）及其病理和心肌线粒体超微结构的影响。方法130只SD大鼠随机取14只分为假手术组（0．9％NaCl灌胃，n=14，至实验终点时n=12）4w后处死。116只SD大鼠结扎冠状动脉前降支，术后存活的38只大鼠随机分为：急性心肌梗肆（AMI）模型组（0．9％NaCl灌胃，n=12）和通心络治疗组（1．0g·kg^-1·d^-1，n=13），卡托普利治疗组（15mg·kg-1·d^-1，n=13）。心脏标本固定和病理分析，HE和Masson染色评价形态学特点。对术后2d和4w心脏超声数据分别进行分析。药物治疗4w后，用电子显微镜观察心肌细胞线粒体的变化。结果模型组和两治疗组间心肌梗死面积无明显差异，且三组大鼠术后2d和假手术组比较，左室舒张末期内径（LVEDD）明显增大（均P〈0．001），而射血分数（EF）和短轴缩短率（FS）明显缩小（均P〈0．001）。药物治疗4w后与模型组相比，两治疗组EF和FS明显增大（P〈0．001），而左室舒张末期内径（LVEDD）明显缩小（P〈0．001）。与术后2d相比，4w后模型组LVEDD明显增大（P〈0．001），而两治疗组LVEDD明显减小（P〈0．001）和EF和FS明显增加（P〈0．001）。结论通心络超微粉可预防大鼠AMI后LVRM和改善心功能，这些作用基于通心络超微粉抗氧化应激作用。

贴壁法体外培养纯化鼠骨髓间充质干细胞666-667

摘要：目的研究贴壁法体外分离、纯化及增殖鼠骨髓间充质干细胞（MSCs），并进行鉴定。方法取出生5d的Wistar乳鼠的股骨及胫骨，冲取骨髓，采用贴壁法分离筛选分离鼠的MSCs，通过传代进行纯化，增殖，测定其生长曲线，检测生长周期，流式细胞仪分析表面抗原。结果贴壁培养法能够有效地分离鼠的MSCs，MSCs形态为均一的梭形，生长曲线呈S型，细胞周期显示第三代细胞约有80．89％处于G0／G1期，第三代以后细胞表面抗原CD90阳性，CD34、CD45阴性。结论建立了一种较好的体外培养、纯化及扩增鼠MSCs的方法，适用于MSCs的进一步研究。

双歧杆菌脂磷壁酸延缓细胞衰老的作用机制668-670

摘要：目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸（Lipoteichoic acid，LTA）在延缓H2O2诱导细胞衰老中的作用。方法H2O2诱导WI-38细胞衰老，β-半乳糖苷酶细胞化学染色计算衰老细胞百分率变化，RT—PCR和Western印迹检测衰老细胞p21、细胞周期蛋白E（cyclin E）和周期蛋白依赖性蛋白激酶2（CDK2）表达水平的变化。结果双歧杆菌LTA处理后，β-半乳糖苷酶细胞化学染色阳性细胞百分率较衰老模型组降低（P〈0．01）。与年轻对照组相比，衰老模型组细胞中p21的表达增高，cyclin E和CDK2表达降低，而双歧杆菌LTA能够逆转上述变化（P〈0．01）。结论双歧杆菌能延缓H2O2诱导的细胞衰老，机制可能与改变p21，cyclin E和CDK2表达水平有关。

微创血肿抽吸治疗对脑出血兔神经元特异性烯醇化酶的影响674-676

摘要：目的探讨微创血肿抽吸治疗脑出血兔神经元特异性烯醇化酶（NSE）含量变化在预后评估中的价值。方法分别进行血肿体积、Zea Longa评分、血清NSE浓度检测。结果①与对照组比较治疗组在治疗后3、7d血肿体积明显缩小（P〈0．001），神经功能缺失体征评分差异显著（P〈0．05）；②与对照组比较，治疗组治疗后3、7d血清NSE水平显著降低（均P〈0．001）；③血清NSE浓度既与血肿体积呈正相关，也与预后呈正相关。结论早期微创血肿抽吸治疗可显著降低血肿体积和血清NSE水平，改善预后。提示NSE是预测早期神经功能损害和恢复的可靠指标。

脊髓拴系综合征大鼠模型后肢运动功能的检测676-677

摘要：目的探讨大鼠脊髓拴系综合征术后后肢运动功能变化及临床意义。方法选取出生后20d的Wistar大鼠48只，随机分为3个实验组（术后24h、7、30d）及相应的对照组。实验组行腰骶部椎板切除加终丝缝合固定，对照组仅行椎板切除术，术后采用改良的Tarlov分级法，观察大鼠后肢行为学功能的变化。结果实验组术后24h无明显后肢功能障碍，术后7d后肢肌力有所下降，但与对照组相比无显著差异（P〉0．05），术后30d大鼠双后肢肌力明显下降，与对照组相比差异显著（P〈0．01），且30d与7d的Tarlov评分与对照组相比亦差异显著（P〈0．01），伴有后肢肿胀、溃疡。结论为脊髓拴系综合征疾病的治疗和临床研究提供了基础资料和依据。

由漱口液提取人基因组DNA量与质的分析678-681

摘要：目的评价一种新的基因样本获取办法用于大样本遗传学研究。方法通过邮寄的方法获得病人的漱口液（mouthwash）共492份，用氯．酚法提取其中脱落的口腔上皮细胞中的DNA，测定提取数量；通过聚合酶链反应（PCR）用提取的DNA扩增大分子红视蛋白DN段，并将纯化的DNA产物进行转化生长因子β诱导因子的部分片段基因测序，以评定DNA提取质量。结果每份样本的DNA提取量中位数为52．63μg（10％及90％界值分别为16和143．25μg），其中10—20ng的DNA即可获得好的PCR扩增产物，并能得到清晰的基因测序结果。结论用邮寄的方法，采用生理盐水做漱口液，采集口腔黏膜上皮细胞，从中提取的人类DNA的数量和质量均理想，在实际应用中结果可靠。

菟丝子水提物对衰老模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响681-682

摘要：目的探讨菟丝子水提物对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法将Wistar大鼠30只，随机分为青年对照组，衰老模型组，模型给药组，制作D-半乳糖衰老模型，模型给药组同时灌服菟丝子水提物。观察各组大鼠心肌线粒体丙二醛（MDA）的含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性的变化。结果菟丝子水提物可提高心肌线粒体SOD的活性、降低MDA的含量；并且使呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性明显升高。结论菟丝子水提物能提高心肌线粒体抗氧化能力，改善线粒体能量代谢障碍，维护线粒体功能。

重组人载脂蛋白E3发酵条件的优化及纯化683-685

摘要：目的研究重组人载脂蛋白E3（rhApoE3）在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件，以及rhApoE3的纯化方法。方法分别从甲醇浓度、pH、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生rhApoE3的发酵过程进行了优化；通过阳离子交换层析和反向疏水层析，对rhApoE3的纯化方法进行了研究。结果确定rhApoE3在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为：在pH6．0的条件下，以0．5％甲醇诱导72h，经过阳离子交换层析和反向疏水层析，rhApoE3纯度可达94％以上。结论确定了rhApoE3在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件，以及rhApoE3的纯化方法。

叶黄素对化学诱导急性肝损伤小鼠的预防研究685-687

摘要：目的研究叶黄素对四氯化碳（CCl4）所致急性化学性肝损伤小鼠的保护作用。方法雄性昆明种小鼠60只，随机分为正常对照组、急性化学性肝损伤模型组（模型组）、联苯双酯阳性对照组（阳性对照组）（联苯双酯15mg／kg）以及叶黄素低、中、高剂量组（10、15、20mg／kg）共6组，每组10只。测定并比较各组小鼠肝脏系数，血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性与丙二醛（MDA）含量；测定肝组织中SOD、GSH-Px活性、MDA含量以及组织病理系数。结果叶黄素各剂量组均能升高急性化学性肝损伤小鼠血清与肝组织SOD、GSH-Px活性（P〈0．01），降低血清ALT、AST活性（P〈0．01）和血清与肝组织MDA含量（P〈0．01），并能不同程度地改善肝脏病理组织损伤。结论叶黄素对CCl4所致急性化学性肝损伤具有预防性保护作用。

麝香心脑乐片对犬急性心肌缺血影响的实验研究688-690

摘要：目的观察麝香心脑乐片的抗心肌缺血作用，为确保其临床疗效提供科学依据。方法通过结扎犬冠状动脉前降支制备急性心肌梗死（AMI）模型，采用心外膜电图标测法、定量组织学法、血液生化学法和电镜法，观察该药对犬急性心肌缺血的影响。结果麝香心脑乐片可明显减轻缺血程度（∑-ST），减少缺血范围（N—ST），缩小心肌梗死面积（MIS），并能显著降低血清乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸磷酸激酶（CPK）的含量。结论麝香心脑乐片对犬急性心肌缺血具有明显的改善和保护作用。

地塞米松对失血-内毒素二次打击大鼠肺ACE和AngⅡ表达的影响690-692

摘要：目的通过复制失血-内毒素二次打击大鼠动物模型，观察肺血管紧张素转换酶（ACE）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的变化及地塞米松对其的影响。方法大鼠随机分为对照组（C组）、二次打击模型组（HL组）、地塞米松预治疗组（HLD组）。大鼠放血至平均动脉压（MAP）40mmHg，然后回输复苏，血压恢复达110mmHg左右，10min后经腹腔注射LPS复制大鼠二次打击模型；RT—PCR法测定肺组织ACE mRNA的表达、免疫组织化学法检测肺组织ACE、AngⅡ蛋白的表达。结果HL组肺间质弥漫性炎性改变和水肿，HLD组的炎症程度明显减轻。与C组相比，HL组肺组织ACE mRNA表达水平明显增高，而HLD组明显低于HL组（P〈0．05）。免疫组化显示HL组肺组织中ACE蛋白呈强阳性表达，主要位于肺泡腔中巨噬细胞胞浆，AngⅡ在肺泡表面上皮细胞及肺间质呈阳性表达，而HLD组肺组织中ACE和AngⅡ都呈弱阳性表达。结论二次打击鼠肺组织ACE增加肺组织局部AngⅡ蛋白的表达，地塞米松可降低肺组织AngⅡ的表达而减轻肺组织局部炎症反应，表明肺组织局部的AngⅡ参与了急性肺损伤的发生。