中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2009年第02期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

AngⅡ诱导血管内皮细胞衰老相关基因表达的研究129-132

摘要：目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）衰老相关基因p16^INK4a、p21^cip1的表达。方法体外培养HUVECs并予AngⅡ（10^-6mol／L）干预，采用光镜观察细胞形态学改变，β-半乳糖苷酶（β—gal）染色和流式细胞术鉴定细胞衰老，并利用免疫细胞化学染色法分析AngⅡ诱导HUVECs0、12、24、36、48h的p16^INK4a阳性细胞表达率，Western印迹法分析AngⅡ诱导HUVECs0、12、24、36、48h的p16^INK4a、p21^cip1蛋白表达的时间效应关系。结果AngⅡ诱导组HUVECs出现典型的细胞体积增大，形态不规则；约80％的细胞呈现β-gal阳性染色（80．10±6．81）％，流式细胞仪检测细胞周期停滞于G0／G1（91．36±6．45）％，证实细胞衰老；AngⅡ呈时间依赖性上调p16^INK4a、p21^cip1蛋白表达。结论AngⅡ诱导血管内皮细胞衰老的分子机制之一可能与上调衰老细胞内细胞周期蛋白p16^INK4a、p21^cip1的表达，使细胞周期停滞于G1期有关。

SMAD3，SMAD7在糖尿病大鼠心肌组织的表达132-134

摘要：目的探讨糖尿病大鼠心脏SMAD3和SMAD7的表达变化及其与糖尿病心肌病的关系。方法20只雄性SD大鼠随机分成对照组和糖尿病组，腹腔注射链脲菌素建立糖尿病模型。多导生理记录仪测定大鼠心功能，测定大鼠体质量、心脏质量并计算心脏质量／体质量，电镜观察心肌超微结构改变，苦味酸天狼星染色观察心肌间质纤维化程度，原位细胞凋亡检测法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡情况，RT-PCR测定各组大鼠的SMAD3、SMAD7的mRNA水平，免疫组化法检测SMAD3、SMAD7的蛋白水平。结果与对照组相比，糖尿病大鼠心功能受损；HW／BW明显增高（P〈0．01），电镜显示心肌肌丝溶解、断裂，间质胶原增生，VG染色显示心肌间质明显纤维化（P〈0．01），心肌细胞凋亡增加（P〈0．01）；心脏SMAD3的mRNA表达增加（P〈0．01），SMAD7的mRNA表达减少（P〈0．01），SMAD3蛋白表达水平增加（P〈0．01），SMAD7的蛋白表达水平降低（P〈0．01）。结论SMADs信号通路活化可能参与了糖尿病大鼠心肌病的发生发展过程。

白芍对去卵巢大鼠体重、血脂及抗氧化能力的影响135-137

摘要：目的研究白芍水提取液对模拟妇女围绝经期的去卵巢大鼠体重增加的抑制作用、降血脂作用及提高机体抗氧化能力的影响。方法成年SD大鼠切除双侧卵巢后，自然饮用白芍水提取液，观察白芍水提取液对其体重、摄食量的影响。第55天末取血测血清雌二醇（E2）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、总抗氧化能力和丙二醛（MDA）含量。结果卵巢切除后大鼠体重、摄食量、TC、TG、MDA较假手术组显著增加（P〈0．01，P〈0．05）。饮用白芍水提取液后，与去卵巢组大鼠比较，体重、摄食量增加受到抑制，TG和MDA水平显著下降（P〈0．01，P〈0．05）。结论白芍水提取液可以抑制去卵巢大鼠肥胖，改善脂代谢紊乱、清除体内过多自由基以提高机体抗氧化能力。

白头翁总苷平喘作用的试验研究137-139

摘要：目的观察白头翁总苷（PTG）的平喘、镇咳、祛痰作用。方法将实验动物随机分成阴性对照组、阳性对照组及PTG200mg／kg组、PTG100mg／kg组、PTG50mg/kg组，每组10只。连续灌胃7d。结果PTG100mg／kg以上剂量对巴豆油致小鼠耳肿胀及对角叉菜胶引起的小鼠足肿胀有明显的抑制作用（P〈0．05），可明显延长小鼠卵自蛋白诱发的哮喘潜伏期（P〈0．05），抑制氨水引起的小鼠咳嗽次数并延长咳嗽的潜伏期（P〈0．05）。结论PTG具有一定的平喘、镇咳作用。

乳胞素诱导大鼠致帕金森病的实验研究139-141

摘要：目的应用蛋白酶体抑制剂乳胞素（lactacystin）构建帕金森病（PD）模型，从泛素一蛋白酶体功能角度探讨PD的发病机制。方法应用立体定向注射法在大鼠黑质致密部上方注射乳胞素；观察大鼠行为学改变及光镜下中脑组织学改变；免疫组化染色观察黑质细胞α—synuclein表达和酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数。结果注射乳胞素后大鼠逐渐出现运动迟缓、少动、震颤等行为学异常，阿朴吗啡诱导出向健侧旋转行为；3w后黑质部TH阳性细胞减少，部分黑质细胞内出现α—synuclein免疫反应呈强阳性的Lewy小体。结论乳胞素对多巴胺能神经元有毒性作用，可导致蛋白聚集、包涵体形成，应用乳胞素可成功构建PD模型；蛋白酶体功能异常可能在PD的发病中发挥重要作用。

加味青麟丸对老龄大鼠血脂代谢能力的影响142-143

摘要：目的观察加味青麟丸对老龄大鼠血脂代谢的影响。方法选用Wistar大鼠120只，适应性喂养1w后随机分为6组：4月龄空白对照组（4C组）、14月龄空白对照组（14C组）、14月龄加味青麟丸组（14JL组）、24月龄空白对照组（24C组）、24月龄加味青麟丸组（24JL组）和14～24月龄加味青麟丸组（14～24JL组），每组各20只，雌雄各半。各组均按实验设计要求分别喂养后剖检。结果对比14C组大鼠，加味青麟丸可显著降低14JL组血清甘油三酯（TG）的含量，对皿清胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）的含量影响不显著。对比24C组大鼠，加味青麟丸可显著降低24JL组与14．24JL组大鼠血清TC、TG、LDL含量，提高HDL含量。尤其对血清TC、HDL含量影响显著。结论加昧青麟丸具有调节血脂代谢、抗衰老作用。

神经保护肽对老年性痴呆模型大鼠病理学及海马NF—κB mRNA表达的影响144-146

摘要：目的探讨神经保护肽（NAP）对老年性痴呆模型大鼠病理学及海马内核因子（NF）-κBmRNA表达的影响。方法Wistar雄性大鼠40只，随机分为对照组，假手术组，痴呆组，治疗组，每组10只。建立β-淀粉样蛋白（Aβ）大鼠海马注射的老年性痴呆大鼠动物模型，利用HE染色观察病理变化，利用原位杂交的方法观察大鼠海马内NF—κB mRNA的表达。结果HE染色观察病理变化：治疗组可看到部分神经细胞的坏死，形状不规则，核固缩，染色加深，与痴呆组相比，神经元损伤情况明显减轻。原位杂交结果：痴呆组可见较多的NF-κB mRNA阳性神经元，治疗组大鼠海马区NF—κB mRNA表达较痴呆组明显减少，但较对照组NF—κB mRNA表达增多。痴呆组的平均光密度及平均灰度值与对照组、治疗组有显著性差异（均P〈0.01）。结论NAP对老年性痴呆大鼠海马神经元具有保护作用。

毒素清对内毒素肺损伤兔小肠MIP-2 mRNA表达的影响150-152

摘要：目的探讨毒素清颗粒对内毒素肺损伤家兔小肠组织巨噬细胞炎症蛋白-2信使核糖核酸（MIP-2 mRNA）表达的影响。方法静脉注射脂多糖建立家兔肺损伤模型。大耳白兔36只，随机分为空白对照组、模型组、毒素清大中小剂量组、双黄连组，每组6只。采用原位杂交技术测定MIP-2 mRNA表达水平。结果与对照组比较，模型组小肠组织MIP-2mRNA表达明显上调（P〈0．01）；与模型组比，毒素清大、中剂量组MIP-2mRNA表达明显减弱（P〈0．01）。结论内毒素肺损伤家兔小肠组织MIP-2mRNA表达显著增强。毒素清能抑制MIP-2释放，减轻炎症反应。

RNA干扰沉默Twist基因对人膀胱癌T24细胞增殖的影响155-157

摘要：目的研究RNA干扰沉默Twist基因对人膀胱癌T24细胞周期和增殖的影响。方法体外构建Twist基因的shRNA表达载体，Lipofectamin 2000介导转染膀胱癌T24细胞，采用RT—PCR和Western印迹方法检测特异性shRNA对Twist基因沉默效果，转染后采用MTY法检测shR—NA对细胞增殖的作用；应用PI单染流式细胞术分析细胞周期的改变。结果Twist基因的shRNA表达载体有效下调Twist基因表达（P〈0．05）。与对照组比较，细胞增殖明显抑制（P〈0．05）；同时引起细胞G1期阻滞，RNA干扰后，G1期细胞从（48．17±1．62）％增加到（74．34±3．24）％（P〈0．05），S期细胞从（33．71±3．54）％减少到（11．58±1．02）％（P〈0．05）。结论Twist—shRNA表达载体可以特异高效地抑制膀胱癌T24细胞Twist基因的表达，从而调控肿瘤细胞周期，抑制肿瘤细胞增殖。

耳针对血管性痴呆大鼠海马长时程增强的影响158-160

摘要：目的研究耳针对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力和海马齿状回长时程增强（LTP）的影响。方法设立对照组、模型组和针刺组，采用改良四血管闭塞法建立VD大鼠模型，针刺组刺激耳“肾”“心”穴，Morris水迷宫观察VD大鼠学习记忆能力，微电极记录海马齿状回LTP作为反映学习记忆的电生理指标。结果与模型组比较，针刺组VD大鼠平均逃避潜伏期缩短、第Ⅲ象限活动时间延长、穿越站台次数增加（P〈0．05）；高频刺激后相对群峰电位潜伏期缩短、相对兴奋性突触后电位斜率和相对群峰电位幅值增大（P〈0．05）。结论针刺大鼠“肾”“心”耳穴能改善VD大鼠学习记忆能力，其机制可能是通过易化VD大鼠海马齿状回LTP的维持和诱导实现的。

维A酸对慢性阻塞性肺疾病基质金属蛋白酶的影响160-161

摘要：目的利用维A酸对实验性大鼠慢性阻塞性肺疾病的干预，检测其基质金属蛋白酶（MMP）的变化。方法Wistar雄性大鼠36只，随机分为正常对照组、模型组和用药组，每组12只。将模型组大鼠放入染毒箱内，每天被动吸烟2次，每次16支（30min），2次间隔4h，连续75d；用药组每天被动吸烟染毒前通过胃管给大鼠灌胃维A酸15mg／kg，共75d；对照组气管内滴入等量的生理盐水25d后处死大鼠。模型组大鼠用药后观察各组大鼠肺组织的病理改变，免疫组化方法及酶联免疫试验观察肺组织基质金属蛋白酶表达情况。结果模型组MMP-2和MMP-9的活性分别为（1．03±0．21）ng／ml、（0．984±0．182）ng／ml，其表达与正常对照组[（0．49-t-O．15）ng／ml、（0．415±0．084）ng/ml]比较差异有显著性（P〈0．01）；用药组MMP-2和MMP-9的活性[（0．91±0．19）ng／ml、（0．670±0．012）ng／m1]和表达与模型组比较差异有显著性（P〈0．01）。结论维A酸对慢性阻塞性肺疾病防治及治疗有很好的作用。

左归丸对老年性痴呆模型鼠脑神经元HSP70及超微结构的影响161-163

摘要：目的探讨左归丸对老年性痴呆（Alzheimer病，AD）动物模型HSP70及超微结构的影响。方法模型组以D-半乳糖腹腔注射合并Aβ注射海马制备AD动物模型，各治疗组分别在造模的同时灌胃左归丸和抗脑衰胶囊、哈伯因。采用生化法检测各组大鼠脑匀浆AchE，运用RT—PCR测定各组海马HSP70的表达并用透射电镜观察各组海马神经元超微结构的变化。结果左归丸能明显抑制模型鼠脑组织中AchE活性，上调HSP70的表达，抑制细胞凋亡。超微结构观察发现模型组海马神经元显现凋亡早期的形态特点，各治疗组和对照组对凋亡皆有抑制作用。结论左归丸对痴呆鼠海马神经元细胞凋亡有抑制作用，其机制可能与其抑制模型鼠脑组织中AchE活性、上调HSP70的表达和改善神经元细胞损害有关。

糖尿病大鼠心肌细胞中survivin、p27 mRNA表达及相关蛋白变化的研究166-168

摘要：目的观察糖尿病状态下大鼠心肌细胞中survivin及p27 mRNA的表达及相关survivin及p27蛋白的变化。方法35只雄性SD大鼠随机分为对照组（10只）和高脂组（25只）。对照组喂养标准饲料，高脂组喂养高脂饲料。喂养8w后，各组检测空腹血糖、口服糖耐量试验、胰岛素敏感指数（ISI）、血糖钳技术证实高脂组大鼠产生胰岛素抵抗。高脂组随机抽取10只大鼠作为单纯胰岛素抵抗组，其余15只大鼠注射STZ获得糖尿病大鼠模型，空腹血糖〉7．8mmol／L的大鼠纳入糖尿病组，继续高脂饲料喂养6w。14W时各组用RT-PCR方法检测心肌survivin及p27 mRNA变化，采用Western blot方法检测心肌相关survivin及p27蛋白变化。结果高脂饲料喂养8W和14W时，糖尿病组空腹血糖高于对照组和单纯胰岛素抵抗组（P〈0．05）；糖尿病组IsI与对照组ISI之间有显著性差异（P〈0．05）；14W时糖尿病组的survivin及p27 mRNA表达水平明显低于对照组和胰岛素抵抗组（P〈0．05），糖尿病组survivin及p27蛋白表达水平明显低于对照组和胰岛素抵抗组（P〈0．05），而对照组和胰岛素抵抗组间无统计学差异。结论糖尿病状态下survivin及p27 mRNA表达水平下调，表明在糖尿病状态下心肌细胞易发生凋亡，进而形成心力衰竭。

基因芯片研究艾灸大鼠命门穴延缓衰老的抗氧化机制169-171

摘要：目的探讨艾灸大鼠命门穴延缓衰老的分子机制。方法老年大鼠分为老年组和灸疗组，另设年轻组，用Illumina大鼠全基因组芯片研究其分子机制。结果老年组与年轻组中涉及氧和活性氧中间产物参与新陈代谢的过程的9条基因下调，经过灸命门穴位治疗后，有8条基因在灸疗组与年轻组中正常表达。结论抗氧化可能是灸命门穴延缓老年大鼠衰老的机制之一。

美乐昔康对慢性铝过负荷致大鼠神经元退变的保护作用研究173-175

摘要：目的观察美乐昔康对慢性铝过负荷致大鼠神经元退变的保护作用。方法葡萄糖酸铝（200 mg Al^3＋／kg）灌胃给予Wistar大鼠，一天一次，每周连续5d，共20W，建立慢性铝过负荷致神经元退变大鼠模型。美乐昔康（1和3mg／kg），在每次给予铝盐后30min灌胃给予。Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力，HE染色观察大鼠海马神经元形态变化，生化酶学方法检测乙酰胆脂酶（AchE）、单胺氧化酶-B（MAO-B）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果慢性铝过负荷致大鼠空间学习记忆能力明显下降，海马神经元核固缩；海马AchE、MAO-B活性、MDA含量明显增加，SOD活性明显降低。美乐昔康能以剂量依赖性的方式改善铝过负荷诱导大鼠学习记忆能力的损害、海马神经元损伤，并能明显阻遏慢性铝过负荷诱导的海马AchE与MAO—B活性、MDA含量的增加以及SOD活性的降低。结论美乐昔康对慢性铝过负荷致大鼠神经元退变有一定的保护作用。

复元胶囊对膝骨关节炎模型血清软骨寡聚基质蛋白的影响178-180

摘要：目的观察复元胶囊对实验性膝骨关节炎（OA）模型病理形态及血清中软骨寡聚基质蛋白（COMP）的影响。方法72只雄性sD大鼠随机分成正常组、模型组、壮骨关节丸组、复元胶囊组，每组18只。除正常组外，其余各组采用Huhh法建立膝OA动物模型。造模后，壮骨关节丸组、复元胶囊组分别给予壮骨关节丸、复元胶囊灌胃，而正常组、模型组给予生理盐水。灌胃后4、8、12W分别随机选取6只进行X线摄片取材。通过X线摄片、肉眼观察、Mankin评分以及电镜检测评价复元胶囊治疗OA疗效，酶联免疫吸附法检测血清中COMP水平。结果复元胶囊组膝关节x线积分、Mankin评分在4、8、12W三个时间点均显著低于模型组（P〈0．01），复元胶囊组血清COMP水平也低于模型组（P〈0．01）。结论复元胶囊能降低血清软骨代谢标志物COMP水平，延缓OA软骨退变过程。

BELT402细胞低剂量辐射后细胞周期和相关蛋白表达的变化181-184

摘要：目的研究低剂量辐射（LDR）对人肝癌细胞（BEL7402）增殖、细胞周期及相关信号蛋白表达的影响，为LDR临床应用提供理论依据。方法体外培养BEL7402，分为7个实验组：假辐射组（0mGy）、5个LDR组（25，50，75，100，200mGy）及高剂量辐射组（1Gy）。辐射后用细胞计数法及噻唑蓝比色试验（MTT）检测细胞增殖率，用流式细胞术测定细胞周期中G0／G1，S，G2／M期的比例。应用蛋白分析系统分析检测细胞周期及相关信号蛋白共40个蛋白的表达。结果细胞计数及MTT试验，5个LDR组BEL7402细胞增殖率与假辐射组比较差异不显著（P〉0．05）。流式细胞术试验，5个LDR组BEL7402细胞12、24hG0／G1期细胞比例增高，但与假辐射组比较差异不显著（P〉0．05）；S期比例降低，与假辐射组比较差异显著（P〈0．05）；G2／M期比例升高，与假辐射组比较差异显著（P〈0．05）。48h后G0／G1，S，G2／M期与假辐射组比较差异不显著（P〉0．05）。蛋白分析试验LDR后8种蛋白表达降低。结论LDR对BEL7402细胞增殖无促进作用，但在一定程度抑制增殖及细胞周期相关蛋白的表达。

中国老年学杂志临床研究

克-雅氏病患者脑脊液中细胞因子IL-6的变化187-188

摘要：目的研究克-雅氏病（CJD）患者脑脊液中细胞因子自细胞介素（IL）-6的水平，探讨促炎性细胞因子在CJD疾病过程中的作用。方法病例分为CJD组、脑炎组和对照组。采用酶联免疫吸附实验检测脑脊液中IL-6的浓度。结果CJD患者脑脊液中IL-6水平明显升高，与对照组相比有统计学意义（P〈0．01）。结论促炎性细胞因子IL-6在CJD患者脑脊液中含量增加，在其神经变性过程中可能发挥重要的作用。