中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2008年第24期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

乳腺癌中环指蛋白5（RNF5）基因表达水平的研究2397-2399

摘要：目的探讨乳腺癌中RNF5基因mRNA和蛋白表达水平的变化。方法取51例乳腺癌标本，并以癌旁正常组织为对照，应用半定量RT-PCR方法检测乳腺癌中RNF5基因mRNA表达水平，应用Western印迹杂交方法检测相应标本中蛋白表达水平。结果在51例标本中，31例癌组织中RNF5 mRNA表达水平高于癌旁正常组织，33例中RNF5蛋白表达水平增高，经统计分析两组差异显著（P〈0．05）。结论RNF5基因在乳腺癌中存在高表达，这可能是乳腺癌发生发展的另一新的分子机制。

低密度脂蛋白受体基因多态性与高血压伴肥胖的关系2399-2400

摘要：目的探讨低密度脂蛋白受体（LDLR）基因HincⅡ多态性与原发性高血压（EH）伴肥胖的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法测定86例EH患者和120例正常对照者的LDLR基因型。结果LDLR分CC、CT、TT3种基因型。EH组C等位基因频率高于对照组（P〈0．05）。EH组具有C等位基因者（CC基因型＋CT基因型）体重指数（BMI）及腰围（WC）高于TT基因型者（P〈0．05）。结论LDLR基因多态性可能与EH伴肥胖相关。

缺氧诱导因子-1α血管内皮生长因子在骨关节炎软骨细胞中的表达2401-2403

摘要：目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）在骨关节炎（OA）软骨细胞中的表达。方法新西兰大白兔随机分为正常对照组和模型组，分别对关节软骨病理切片后采用Safranin O染色，进行Mankin评分；免疫组织化学染色，并利用图像分析测定HIF-1α、VEGF表达的阳性指数。实时荧光定量PCR检测HIF-1α mRNA、VEGF mRNA在各组的表达。结果正常对照组的Mankin评分与模型组差异显著（P〈0．01），模型组HIF-1α、VEGF染色阳性指数与正常对照组比较，差异显著（P〈0．01）。模型组HIF-1α mRNA和VEGF mRNA表达较正常对照组明显升高，差异显著（P〈0．05）。结论OA中HIF-1α和VEGF表达密切相关，HIF-1α表达增强可能是促进VEGF表达增强的重要途径之一。

重组人HER2／neu ICD在毕赤酵母中的表达及鉴定2403-2405

摘要：目的用毕赤酵母表达体系制备具有与天然HER2／neu ICD相同结构和活性的重组HER2／neuICD。方法PCR法自质粒pCMV中克隆HER2／neuICD基因，构建真核表达载体pPICZα／HER2／neu ICD，电转化至毕赤酵母菌株X-33。对基因转染Zeocin抗性阳性的克隆，采用PCR法筛选出稳定表达HER2／neuICD的菌株。最后用SDS-PAGE鉴定甲醇诱导的培养上清液中的HER2／neuICD。结果构建pPICZα／HER2／neu ICD真核表达载体并经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆；PCR法筛选了稳定表达HER2／neu ICD的菌株；SDS-PAGE分析显示甲醇诱导后表达上清中含有HER2／neu ICD，分子量约为84kDa。结论成功构建pPICZα／HER2／neuICD真核表达载体并筛选出稳定表达HER2／neuICD的毕赤酵母工程菌。

参芪复方对2型糖尿病GK大鼠胰岛β细胞凋亡及Caspase-表达的影响2412-2413

摘要：目的观察参芪复方对自发性2型糖尿病（T2DM）动物GK大鼠胰岛8细胞凋亡的影响并探讨其可能机制。方法选取4月龄SPF级雄性GK大鼠50只，随机分为模型组、盐酸二甲双胍组、参芪复方低、高剂量组并另设正常对照组。连续灌药4w后，TUNEL染色观察各组胰岛β细胞凋亡指数（AI），并采用免疫组化染色，Mias-2000图像分析系统观察各组大鼠胰岛β细胞Caspase-3阳性物质积分光密度。结果模型及低剂量组β细胞AI较正常组显著增高（P〈0．01），各治疗组β细胞AI显著低于模型组（P〈0．01），高剂量组及二甲双胍组β细胞AI显著低于低剂量组（P〈0．01）且与正常组比较无统计学意义（P〉0．05）；模型及低剂量组胰岛Caspase-3积分光密度显著高于正常组（P〈0．01），高剂量组、二甲双胍组Caspase-3积分光密度显著低于模型组和低剂量组（P〈0．01），且与正常组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论参芪复方能够抑制GK大鼠胰岛β细胞凋亡，机制可能与其抑制β细胞Caspase-3表达有关。

参芪复方对2型糖尿病GK大鼠胰岛β细胞凋亡及Caspase-3表达的影响2412-2413

化学药物诱导构建衰老糖尿病大鼠模型2416-2418

摘要：目的采用化学药物损伤法构建衰老糖尿病（DM）大鼠模型。方法3月龄健康Wistar雌性大鼠，20只腹腔注射生理盐水为正常对照组；20只腹腔注射D-半乳糖42d为衰老模型组；另25只大鼠腹腔注射D-半乳糖42d，并于第13天加灌高脂高糖乳剂30d后腹腔注射链脲佐菌素（STZ）（30mg／kg），制备衰老DM模型大鼠，筛选空腹血糖（FPG）≥11．1mmol／L者为成模鼠。各组大鼠再灌胃生理盐水10d后检测血生化指标。结果①正常对照组和衰老模型组大鼠体重增加幅度类似；衰老DM模型组大鼠于灌胃高脂高糖乳剂后，体重增加幅度显著高于前两组，但于注射STZ 10d后体重显著低于前两组。②衰老模型组较正常对照组超氧化物歧化酶（SOD）、胰岛素、高密度脂蛋白（HDL）明显降低，丙二醛（MDA）、胰高血糖素明显升高，并呈现一定程度FPG、糖化血清蛋白（GSP）、总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）升高和胰高血糖素样多肽（GLP）-1降低；衰老DM模型组上述指标变化更为显著，尤以胰岛素、GLP-1降低，血糖、血脂、胰高血糖素和肿瘤坏死因子（TNF）-α升高更为突出，呈现胰岛素／胰高血糖素严重失衡，糖脂代谢显著异常，类似老年DM特征，其成模机制可能与GLP-1分泌减少，TNF-α释放增加有关。结论采用D-半乳糖＋高脂高糖乳剂＋STZ,可以较成功诱导出类似老年人DM的衰老DM大鼠模型。

运动后甘丙肽分泌对大鼠胰岛素敏感性的影响2419-2421

摘要：目的探讨运动后甘丙肽（Galanin，Gal）分泌对大鼠胰岛素敏感性的影响。方法大鼠分4组：安静对照组及运动对照组均注射生理盐水，安静用药组及运动用药组注射Gal受体拮抗剂Galantide。两运动组鼠正式游泳10d，60min／d。用正糖钳了解胰岛素敏感性，检测空腹胰岛素、血糖及骨骼肌细胞膜葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）含量。结果运动对照及运动用药组正糖钳的葡萄糖输注速率比相应安静组分别有极显著（P〈0．01）及显著增加（P〈0．05），两用药组比相应对照组有极显著下降（P〈0．01）；两用药组实验后比实验前胰岛素均显著增加（P〈0．05），安静用药组实验后比实验前以及与安静对照组实验后相比亦糖明显增加（P〈0．05）；运动对照及运动用药组比相应安静组骨骼肌细胞膜GLUT4分别提高26％（P〈0．01）及17．8％（P〈0．05）。结论运动诱导Gal浓度增高，可通过增加GLUT4浓度和促进GLUT4向细胞膜转运提高胰岛素敏感性。

本刊启事2423-2423

纤维蛋白溶解酶诱导大鼠玻璃体后脱离的实验研究2424-2426

摘要：目的探讨纤维蛋白溶解酶（Plasmin）致大鼠玻璃体后脱离（posterior vitreous detachment，PVD）的效果、剂量，对视网膜组织形态的影响及其作用机制。方法健康Wistar大鼠30只，随机分为A、B两组。右眼玻璃体内注射Plasmin2．38μg（A组）或4．76μg（B组）作为实验眼；左眼注射1μl的平衡盐溶液（BSS）作为对照眼。每组随机抽取5只于注射后1h、24h和7d处死。光镜检查视网膜形态、计数视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）；扫描电镜检查玻璃体视网膜分离情况；透射电镜检查视网膜及玻璃体视网膜交界面的超微结构。结果注射Plasmin后实验眼均有不同程度PVD发生，随着剂量的增加和作用时间的延长，效果增强。组织结构、RGCs计数以及超微结构检查，实验组与对照组无明显差异。结论大鼠玻璃体内注射Plasmin具有分离玻璃体后皮质与视网膜内界膜的作用，诱导玻璃体后脱离产生，对视网膜形态无影响。

苯乙酸钠对小鼠腹腔内种植肝癌细胞株凋亡的作用2427-2429

摘要：目的探讨苯乙酸钠（NaPA）对小鼠体内种植性肿瘤生长的影响，以及对肿瘤细胞凋亡和细胞周期的作用，寻找新的有效的肿瘤治疗药物。方法制作小鼠体内种植性肿瘤模型，NaPA腹腔内注射10d后运用流式细胞技术检测肿瘤组织细胞凋亡及细胞周期的变化情况，并检测NaPA对荷瘤小鼠的抑瘤作用和毒副作用。结果随着NaPA浓度的增加，对荷瘤小鼠的抑瘤作用加强，肿瘤细胞凋亡率呈正比例增加。NaPA主要抑制细胞的G1期，且与浓度相关。NaPA各组肿瘤细胞增殖指数下降，细胞生长受阻于G0／G1期，细胞趋于成熟。且没有检测到药物对荷瘤鼠正常组织的毒副作用。结论NaPA可以抑制肿瘤生长，使肿瘤细胞产生凋亡，诱导细胞向成熟转化；并且无毒副作用，有望成为新的肿瘤治疗药物。

葡激酶纳米脂质体的制备及靶向溶栓的实验研究2429-2430

摘要：目的探讨葡激酶（PK）纳米脂质体的溶栓效果。方法采用逆相蒸发法制备PK纳米脂质体，并用反相液相色谱（HPLC）法制备归巢装置，观察PK纳米脂质体包封率、分散性、形态、大小，制备血栓动物模型，应用不同剂量的PK纳米脂质体导向装置，观察溶栓效果。结果PK纳米脂质体平均粒径为（78．6±5．7）nm，多分散性指数为0．298。PK纳米脂质体包封率71．5％，回收率93．2％。分析10、20、30、40min各个时间段，PK大剂量组与精-甘-天冬-丝氨酸（RGDS）-PK纳米脂质体在血压变化方面与对照组均有显著差异（P〈0．05），各实验组的血栓湿重与对照组比较均有显著差别（P〈0．001）。其中PK纳米脂质体、RGDS-PK纳米脂质体与小剂量PK组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论制备PK纳米脂质体是可行的，RGDS有导向性，该归巢装置具有较好的溶栓效果。

损伤肝组织匀浆诱导间充质干细胞甲胎蛋白和白蛋白的表达2431-2433

摘要：目的建立分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的方法，探讨损伤肝组织匀浆对MSCs的诱导分化作用。方法采用密度梯度离心、贴壁培养法分离培养大鼠MSCs，以10％损伤肝组织匀浆、10％FBS的L-DMEM诱导培养，并在不同时间点采用免疫组化方法（SP）检测甲胎蛋白（AFP）和白蛋白（Alb）的表达。结果MSCs在含10％损伤肝组织匀浆的10％FBSL-DMEM培养基中培养，呈类上皮样细胞。诱导组在培养7d时，大部分细胞呈AFP阳性表达（75．2％），与对照组比较有显著差异（P〈0．05）；诱导培养14、21和28dAFP表达阳性率分别为35．2％、12．3％和2．O％，与对照组及不同时间点比较差异显著（P〈0．05）；诱导组在培养7d仅少数细胞Alb呈阳性表达（14．6％），诱导培养14、21和28dAlb表达阳性率分别为67．6％、88．9％和95．6％，与对照组及不同时间点比较均差异显著（P〈0．05）。结论该方法可获得纯度较高MSCs，损伤肝组织匀浆可诱导MSCs表达AFP和Alb。

益生宝口服液药效学研究2433-2434

摘要：目的观察益生宝口服液的抗氧化功能及对免疫功能及改善记忆力的影响。方法益生宝西服液按7．0、3．5ml／kg给大鼠灌胃给药，测血清中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量；益生宝口服液按10、5、2．5mL／kg给大鼠灌胃，观察对免疫功能及记忆力影响。结果益生宝口服液经多次给药能明显提高SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量，增强机体的免疫力，对损伤的记忆功能有改善作用。结论益生宝口服液具有一定的延缓衰老作用。

紫草萘醌类提取物通过抑制DNA合成诱导肝癌细胞凋亡2435-2437

摘要：目的研究紫草萘醌类化合物（LE）抑制肝癌细胞生长及诱导凋亡的机制。方法MTT法测定LE对人肝癌细胞系SMMC-7721和人胚肾细胞系HEK-293的生长抑制作用；透射电镜检查、DNA电泳和原位末端标记检测凋亡；流式细胞仪分析细胞周期。结果LE明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长。药物孵育24～72h，电镜检查可见凋亡的典型过程；原位末端标记显示细胞核阳性染色。药物孵育16h后流式细胞术检查：S期细胞明显减少。药物与正常传代细胞系HEK293孵育，对细胞周期没有影响。结论LE具有专一性抗肿瘤作用，可诱导肝癌细胞凋亡。其作用机制为首先抑制DNA合成，进而引起细胞凋亡。

中国老年学杂志临床研究

老年性黄斑变性脉络膜新生血管的组织病理变化研究2443-2445

摘要：目的研究老年黄斑变性（AMD）脉络膜新生血管（CNV）的组织病理变化特点。方法选择22例AMD病人的CNV膜，光镜和透射电镜下分析CNV膜标本中新生血管的数量、成熟程度、色素细胞的包裹、纤维组织的多少。结果对比吲哚青绿血管造影（ICGA）分期，发现活动期CNV膜：可见大量CNV，无色素性细胞和纤维组织或有少量的色素性细胞；血管内皮细胞肥大，代谢旺盛，细胞器丰富，血管不成熟。消退期CNV膜：CNV较活动期减少，有较多的色素性细胞、少量的纤维组织，血管内皮细胞器、细胞浆较活动期减少，血管腔较宽大。静止期CNV膜：见大量的纤维组织，无CNV、或有极少的CNV，无色素性细胞；少见血管内皮细胞，见大量胶原纤维。结论AMD中CNV的ICGA不同分期具有相关的组织病理改变。

人参二醇皂甙抑制人乳腺癌细胞增殖的实验研究2448-2449

摘要：目的观察人参二醇组皂苷（PDS）对人乳腺癌细胞MCF7的抑制作用。方法观察PDS作用后MCF7细胞的形态学改变；利用MTT法检测PDS作用后MCF7细胞的生长抑制率。结果PDS作用后的MCF7细胞生长状态变差，细胞变圆漂浮在培养液中；MTT结果显示：细胞生长明显受到抑制，72h生长抑制率可达到80．6％；且生长抑制率呈时间依赖性和剂量依赖性。结论PDS对人乳腺癌细胞MCF7有抑制作用。

急性脑卒中患者胰岛素抵抗状态分析2449-2451

摘要：目的观察高血压合并急性脑卒中患者的胰岛素抵抗状态和脂质代谢情况。方法100例高血压合并脑卒中患者分为动脉粥样硬化性脑血栓形成（脑血栓组）、腔隙性脑梗死（腔梗组）和脑出血组，分别测定3组急性期与恢复期空腹血糖（FPG）、空腹血胰岛素（Fins）、血脂，计算胰岛素敏感指数（ISI），并与对照组比较。结果急性期脑血栓组、腔隙性脑梗死组和脑出血组的ISI均显著低于对照组；恢复期脑血栓组、腔隙性脑梗死组的ISI较对照组明显降低，脑出血组ISI较对照组无明显差别。结论高血压合并脑梗死存在胰岛素抵抗。