中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2008年第07期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

神经干细胞移植治疗脑出血大鼠模型时间窗的研究625-628

摘要：目的研究神经干细胞移植治疗脑出血的时间窗。方法分离、培养大鼠海马神经干细胞，经Nestin免疫荧光鉴定，Brdu标记；25只SD大鼠制作脑出血模型，随机分为5组（1、2、3、4d移植组、模型组），分别在造模后第1、2、3、4d移植Brdu标记的神经干细胞于脑出血大鼠的患侧侧腔室下区（SVZ），模型组不移植，测试大鼠运动功能，14d时处死，取全脑固定、冰冻切片、Brdu免疫荧光染色，Brdu阳性细胞计数。结果各移植组大鼠神经功能缺损明显改善，2d移植组明显优于其他组（P〈0．01）；2d移植组Brdu阳性细胞数明显高于其它组（P〈0．05）。结论神经干细胞移植治疗脑出血能有效改善脑出血动物运动功能；脑出血后2d可能是神经干细胞移植的最佳时间点。

人HER2／neu胞外区在毕赤酵母中的表达及鉴定631-633

摘要：目的在毕赤酵母中高效表达HER2／neu胞外区，制备具有与天然HER2／neu相同结构和生物学活性的重组人HER2／neu胞外区（rhHER2／neu ECD）。方法用RT-PCB法自人mBNA中克隆her2／neu ECD基因，构建真核表达载体pPICZα/her2/neu ECD。经核酸测序确证后，电转化毕赤酵母菌株X-33。用PCB法筛选基因转染后Zeocin抗性阳性的克隆，用SDS-PAGE法筛选高表达HER2／neu ECD工程菌，用Western印迹法鉴定甲醇诱导的培养上清液中的HER2／neu ECD。结果经BT-PCB法克隆的her2／neu ECD基因序列与GenBank登录的cDNA序列一致。将her2／neu ECD基因定向插入pPICZα，构建pPICZα/her2/neu ECD真核表达载体，经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆。SDS-PAGE和Western印迹法分析证实了甲醇诱导的培养基上清中含有HER2／neu ECD，分子量110kDa。HER2／neu ECD表达量达120mg／L。结论克隆her2／neu ECD基因并构建和筛选出高效表达HER2／neu ECD的毕赤酵母工程菌。

灵芝孢子对2型糖尿病大鼠模型肾脏线粒体氧自由基损伤的保护作用634-636

摘要：目的探讨灵芝孢子对糖尿病（DM）大鼠肾脏线粒体氧自由基损伤的保护作用。方法将清洁级Wistar大鼠50只，随机分成对照组、模型组和灵芝孢子组。模型组及灵芝孢子组以25mg／kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ），对照组腹腔注射等量柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。正常饮食喂养2w后，进行糖耐量试验，模型组和灵芝孢子组保留糖耐量异常者，余去除，并改喂高脂高糖饮食，灵芝孢子组另加灵芝孢子粉（250mg·kg^-1·d^-1）持续10w，动物均单独喂养，实验结束前1d做糖耐量试验，取肾脏，检测肾脏线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量。结果模型组肾脏组织的SDH、SOD和GSH-Px活性明显低于对照组和灵芝孢子组（P〈0．05），MDA含量明显高于对照组和灵芝孢子组（P〈0．05），灵芝孢子组与对照组差异无显著性（P〉0．05）。结论灵芝孢子能保护自由基对肾脏线粒体的损伤，提高SDH活性，从而对DM大鼠肾脏起保护作用。

洛铂术前化疗后乳腺癌组织中Syk表达及其分子机制的研究636-640

摘要：目的探讨乳腺癌洛铂术前化疗后组织病理改变及其Syk表达变化的分子机制。方法60例乳腺癌患者随机分组为实验组（术前24h应用洛铂化疗和洛铂药物作用24h的人乳腺癌细胞株）、对照组（未行化疗或未用洛铂药物作用的人乳腺癌细胞株）。两组均应用H-E法、免疫组织化学染色法、荧光PCR法分别检测两组人乳腺癌细胞株、乳腺癌组织中Syk、c-myc、P53、PCNA等分子生物学指标变化。结果洛铂药物作用24h后，人乳腺细胞株中Syk及其蛋白表达均为阳性，SykmRNA表达值均增高，MCF-7中Syk mRNA由1．41×10^4升高到3．13×10^4；MDA-MB-231洛铂作用后则由阴性转为阳性表达，SykmRNA由0升高到1．11×10^4；实验组SYK蛋白染色较对照组乳腺癌组织中明显增强，染色深，颗粒粗。Syk阳性表达率显示，实验组86．7％（26／30）明显高于对照组的63．3％（19／30）。SykmRNA均值实验组[（26．39±0．017）×10^4]明显高于对照组[（6．17±0．065）×10^4]（P〈0．001）。实验组乳腺癌患者肿瘤细胞坏死明显。细胞空泡变性增多，核固缩、凝固性坏死显著，肿瘤组织及其周围组织中可见大量淋巴细胞和嗜酸性细胞浸润。实验组乳腺癌组织中Syk、IL-2Rβ、CD4β、c-myc均表达增强，其阳性表达率分别为86．7％、100％、60％、70％；Syk、c-myc较对照组的阳性表达率增高有显著差异（P〈0．05）。结论洛铂术前化疗可提高乳腺癌组织Syk表达，IL-2 Rβ及其CD4 Rβ是与Syk PTK相关联所必需的，也是IL-2诱导激活的SykPTK、c-myc及其细胞信号转导增殖所必需的区域。同时IL-2诱导的Syk PTK激活可能导致c-myc基因的表达。

乳铁蛋白对口腔鳞癌细胞增殖的影响643-645

摘要：目的探讨乳铁蛋白（LF）对体外培养的舌癌细胞Tca8113增殖的影响。方法MTT法评定LF对中国仓鼠CHO、人胚肾293T及舌癌细胞Tca8113细胞系的生长抑制作用。结果LF对Tca8113细胞具有直接的细胞毒作用且呈剂量依赖性，但对正常细胞系增殖无抑制作用。结论LF作为新的口腔肿瘤的化学预防剂，可抑制舌癌细胞Tca8113增殖。

RNAi沉默PTTG基因对恶性胶质瘤U251细胞的影响645-647

摘要：目的探讨垂体瘤转化基因（PTTG）siRNA干扰质粒对人脑胶质瘤细胞株U251体外增殖、周期和凋亡的影响。方法利用脂质体将pGenesi1-2 PTTG siRNA干扰质粒转染U251细胞，通过MTT法观察转染后24h,48h和72h细胞增殖的变化、流式细胞术PI单染观察转染后48h细胞凋亡和细胞周期的变化。结果pGenesi1-2 PTTG siRNA干扰质粒转染U251细胞48h后。PTTG mRNA和蛋白的抑制率分别约为69％和71％；阻滞U251细胞由G1期进入S期，抑制细胞的生长，增加了细胞的凋亡。结论PTTG siRNA表达载体可以特异高效地抑制胶质瘤U251细胞PTTG基因的表达，从而调控肿瘤细胞周期，抑制肿瘤细胞增殖。

As2O3对兔Vx2软组织肿瘤VEGF表达和肿瘤细胞凋亡的影响648-650

摘要：目的探讨不同剂量As2O3对Vx2软组织肿瘤细胞凋亡及血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响及As2O3抗肿瘤的作用机制。方法32只大白兔皮下软组织内肿瘤种植2W后，随机分为实验组和对照组。实验组根据As2O3用药量不同分为1、2、4mg·kg^-1·d^-1 3个亚组，每组8只，对照组注射生理盐水，连续给药7d，停药后继续观察3W后处死大白兔，采用MRI测量治疗前后肿瘤最大直径，分别于给药前及处死前行肝肾功能检查，检测As2O3对肝肾毒性作用；采用原位末端标记法（TUNEL法）检测肿瘤细胞的凋亡指数及VEGF染色法观测As2O3抑制肿瘤细胞VEGF表达的程度。结果MRI显示对照组肿瘤随观察时间延长呈持续增大；实验组随着用药剂量增加，肿瘤增长缓慢（与对照组相比P〈0．05）；1、2mg·kg^-1·d^-1亚组与4mg·kg^-1·d^-1亚组组间差异较明显（P〈0．05），1mg·kg^-1·d^-1与2mg·kg^-1·d^-1亚组组间差异不明显（P〉0．05）。给药前及处死前行耳缘静脉取血，测定ALT、AST、BUN、Cr水平，给药前各组间差异不明显（P〉0．05），处死前基本恢复正常。组间差异不显著（P〉0．05）。HE染色显示对照组肿瘤周围组织浸润明显，实验组周围组织浸润不明显；TUNEL法对照组肿瘤坏死周围细胞凋亡与治疗组比较差异显著（P〈0．05），1、2mg·kg^-1·d^-1与4mg·kg^-1·d^-1亚组组间差异较明显（P〈0．05），1mg·kg^-1·d^-1与2mg·kg^-1·d^-1亚组组间差异不明显（P〉0．05）。VEGF染色法显示肿瘤细胞内VEGF表达随药物浓度增加而减少，与对照组相比差异显著（P〈0．05）。结论经腹腔注射As2O3能够控制Vx2软组织肿瘤增长，同时诱导肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成，并与剂量相关，其对肝肾功能毒性作用不明显。

黄花石蒜抗阿尔茨海默病活性部位的筛选650-651

摘要：目的研究黄花石蒜乙醇提取物不同萃取部位对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠学习记忆能力的影响。方法选用昆明种小鼠，皮下注射东莨菪碱（2mg／kg）制备AD小鼠模型，通过Y型水迷宫实验来观察提取物不同部位对AD模型小鼠学习记忆的影响。结果与模型组比较，黄花石蒜生物碱高剂重组（66．7g生药／kg）和低剂量组（33．3g生药／kg）均能明显缩短AD模型小鼠Y水迷宫测试的潜伏期（P〈0．05），减少其上岸错误次数（P〈0．05），明显改善小鼠学习记忆。结论黄花石蒜抗AD活性的有效部位是生物碱部位。

体外培养大鼠软骨细胞退变现象的连续观察652-655

摘要：目的对体外培养大鼠软骨细胞退变现象进行连续观察，为进一步研究软骨退变机制实验及药物干预实验提供基础资料。方法进行大鼠软骨细胞取材并传代培养，对各代次细胞进行连续性观察。采用倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态与微结构，免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA），阿力新蓝染色检测胞外基质硫酸糖氨多糖（GAG）含量和结构，反转录-聚合酶链式反应方法检测软骨细胞Ⅱ型胶原和Aggrecan表达，观察软骨细胞退变。结果第四代软骨细胞出现长梭形改变，电镜下超微结构出现核固缩或水肿、细胞器减少或变形等退变表现，PCNA表达百分率明显减少（P〈0．01），GAG含量、长链分子百分比显著减少（P〈0．01），Ⅱ型胶原及Aggrecan mRNA表达显著减少（P〈0．01）。结论体外培养软骨细胞第四代出现明显功能退变。

榄香烯乳对大鼠脑缺血模型纹状体内TNFα、IL-1β和NO的影响655-657

摘要：目的研究榄香烯乳对脑缺血区纹状体内TNFα、IL-1β、NO的影响。方法通过逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测TNFα、IL-1βmRNA表达的变化，以ELISA方法测定IL-1β、TNFα含量，以微透析技术检测缺血部位细胞外液中NO代谢产物亚硝酸盐的含量。结果榄香烯乳对脑缺血后纹状体内NO2^T-、IL-1β及TNFα、IL-1βmRNA的表达没有影响，与生理盐水组[（12．68±1．39）μg/g蛋白]相比，给予10mg／kg的榄香烯乳[（7．79±1．24）μg/g蛋白]可以降低缺血侧纹状体内TNFα的水平。结论脑缺血后给予适宜的小剂量榄香烯乳可降低缺血侧纹状体内TNFα水平，可能对缺血损伤产生一定的保护作用。

雌激素对去卵巢大鼠拔牙创骨愈合影响的电镜观察657-659

摘要：目的研究雌激素对去卵巢大鼠拔牙创骨愈合的影响。方法取55只雌性SD大鼠随机分为3组：模型组及雌激素组大鼠行去势手术，制备去卵巢大鼠骨质疏松模型，假手术组行假手术。假手术组和模型组仅予生理盐水，雌激素组予雌二醇至实验结束。所有大鼠手术后8w拔除左侧上颌第一磨牙，拔牙术后第7、30、60天分3批处死大鼠，上颌拔牙创口处行扫描电镜观察。结果拔牙术后第7天扫描电镜观察3组大鼠拔牙创内新生骨骨表面相差不大，拔牙术后第30、60天时模型组拔牙创面新生骨较其他两组明显纤细、量少。模型组拔牙创愈合过程中，剩余牙槽嵴整个长度有一层与其他两组表面结构不同的组织。结论骨质疏松可能导致拔牙创愈合过程中骨形成方式不同，延长成年大鼠拔牙创愈合时间，而雌激素治疗能明显减少骨质疏松对拔牙创骨愈合的影响。

苦碟子对高同型半胱氨酸血症ICAM-1、VCAM-1、MCP-1表达的影响660-661

摘要：目的观察苦碟子及叶酸、维生素B12对高同型半胱氨酸血症（HHcy）致兔动脉粥样斑块局部单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM．1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）表达的影响。方法32只新西兰兔随机分为空白对照组、HHcy模型组、叶酸、维生素B12干预组和苦碟子干预组，每组8只。SP法检测各组兔胸主动脉MCP-1、ICAM-1、VCAM-1的表达和血浆半胱氨酸（Hcy）水平。结果模型组兔血同型半胱氮酸（Hcy）水平明显高于空白对照组（P〈0．01），胸主动脉MCP-1、ICAM-1和VCAM-1表达较空白对照组明显上调（均P〈0．01）。苦碟子及叶酸、维生素B12干预组血Hcy浓度较模型组明显下降（均P〈0．01），而胸主动脉MCP-1、ICAM-1和VCAM-1的表达较模型组明显下调（均P〈0．01）。结论高蛋氨酸饮食可诱发HHcy,动脉粥样斑块中可见MCP-1、ICAM-1和VCAM-1表达上调。苦碟子及叶酸、维生素B12可以下调动脉粥样斑块中MCP-1、ICAM-1和VCAM-1的表达，对HHcy致AS具有明显疗效。

本刊启事666-666

五味子纳米微粒水提液对衰老小鼠脑线粒体能量代谢的影响667-668

摘要：目的探讨五味子水提液及纳米微粒水提液对衰老模型小鼠脑细胞线粒体能量代谢的影响。方法以D-半乳糖建立人工致衰小鼠，观察五味子及其纳米微粒水提液对脑线粒体锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）、NADH脱氢酶及H^＋-ATP酶活性、丙二醛（MDA）含量的影响。结果衰老小鼠脑线粒体Mn-SOD、NADH脱氢酶和H^＋-ATP酶的活性均降低，MDA含量升高；五味子及其纳米微粒水提液可升高Mn-SOD、NADH脱氢酶和H^＋-ATP酶的活性（P〈0．05，P〈0．01），降低MDA含量（P〈0．01）。结论五味子及其纳米微粒水提液可延缓衰老小鼠脑线粒体能量代谢的改变，保护脑线粒体。

罗格列酮对兔髂动脉球囊内膜剥脱术后基质金属蛋白酶及其抑制物表达的影响668-670

摘要：目的探讨罗格列酮预防血管再狭窄的可能机制。方法柏只雄性新西兰兔随机分为对照组（普通饲料）、模型组（球囊内膜剥脱术＋高胆固醇饮食）、瑞舒伐他汀组（球囊内膜剥脱术＋高胆固醇饮食＋瑞舒伐他汀）和罗格列酮组（球囊内膜剥脱术＋高胆固醇饮食＋罗格列酮）。12w后测定血脂水平，取兔髂动脉标本行病理形态学观察，采用免疫组化方法分析MMP-2和TIMP-2的表达。结果①与模型组相比，罗格列酮组血清TC、TG和LDL-C均明显降低；②罗格列酮组较模型组内膜厚度、内膜面积、内膜厚度与中膜厚度比及内膜面积与中膜面积比均显著减少；③与模型组比较，MMP-2表达明显减少，而TIMP-2无显著变化。结论罗格列酮可有效抑制血管损伤后的内膜增生，其机制可能与MMP-2／TIMP-2失衡有关。

中国老年学杂志临床研究

肺癌组织中低氧诱导因子1α和糖转运蛋白1的表达及其临床意义671-673

摘要：目的探讨肺癌组织中低氧诱导因子1α（HIF1α）和糖转运蛋白1（GLUT1）的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测42例（男28例，女14例，平均年龄54、7岁，其中小细胞癌2例，鳞癌21例，腺癌16例，细支气管肺泡癌3例）肺癌组织中HIF-1α、GLUT1的表达。结果42例肺癌组织中HIF-1α阳性表达35例（83．3％）；GLUT1阳性表达36例（85．7％）。肺癌组织T3、T4组与T1、T2组相比HIF-1α、GLUT1高表达率均明显增加，差异有显著性（分别P〈0.025，P〈0．05）。肺癌组织有淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比，HIF-1α、GLUT1高表达率均明显增加，差异有显著性（分别P〈0．025，P〈0．05）。肺癌组织中HIF-1α表达与GLUT1表达有显著正相关性（P〈0．01）。结论肺癌组织中HIF1α与GLUT1蛋白高表达，两者显著正相关，HIF1α可能对GLUT1的表达起上调作用。HIF-1α与GLUT1高表达与肺癌的浸润程度和淋巴结转移有关。

脑卒中后痴呆患者血胰岛素样生长因子-1与磁共振波谱的相关性研究674-676

摘要：目的了解胰岛素样生长因子-1（IGF-1）与脑卒中后血管性痴呆（VD）发生的关系及与磁共振波谱（MRS）的相关性。方法脑卒中后VD组：男性29例，女性8例，年龄63～81（平均72．4±6．8）岁。脑卒中后非VD组：男性31例，女性11例，年龄64～80（平均71.1±7．3）岁。选择非脑卒中患者作为对照组：男性30例，女性10例，年龄62-79（平均71.8±6．1）岁。脑卒中者在起病时予测定血IGF-1水平及头颅磁共振（MR）检查，对照组在人组时测定血IGF-1水平及头颅MR检查。MRS感兴趣区取中脑水平处的双侧颞叶海马区，分别计算左、右两侧各感兴趣区平均NAA／Cr、Cho／Cr比值。结果3组IGF-1间差异显著（F=8．63，P=0．004）。脑卒中后VD组[（110．6．0±27．5）ng／ml]较脑卒中后非VD组[（154．1±59．3）ng／ml]和对照组[（161.3±60．5）ng／ml]明显减低且差异显著（t=6．74，6．98，均P〈0．001），脑卒中后非VD组与对照组间则无差异（t=0．37，P=0．72）。NAA／Cr比值在脑卒中VD组最低，对照组最高；Choline／Creatine（Cho／Cr）比值在脑卒中VD组最高，对照组最低。脑卒中VD组颞叶海马区NAA／Cr、Cho／Cr比值与血IGF-1水平存在一定的相关性（γ=0．14，P=0．038；γ=-0．16，P=0．022）。此外，脑卒中VD组MMSE评分与颞叶海马区NAA／Cr呈正相关，与Cho／Cr呈负相关（P〈0．05）。结论对于低血IGF-1水平、颞叶海马区NAA／Cr比值降低、Cho／Cr比值增高的脑卒中患者，应在认知功能方面给予密切观察和随访，及早进行认知功能方面的训练。

脑梗死复发危险因素分析676-677

摘要：目的探讨复发性脑梗死的危险因素，并提出预防措施。方法对1996-2006年7月本院收治的119例复发性脑梗死（复发组）与121例初发脑梗死（初发组）的危险因素，应用多因素Logistic回归分析方法进行比较。结果多因素分析显示高血压、心脏病、年龄与脑梗死复发的关系最为密切，OR值分别为2．324、3．525、3．382（均P〈0．05）。结论脑梗死复发的危险因素主要是高血压病史、心脏病史、年龄。