中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2007年第09期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

叔丁基羟基茴香醚对衰老大鼠肾脏缺血／再灌注损伤的保护作用809-811

摘要：目的观察老年大鼠肾脏缺血／再灌注（I／R）模型中肾小管上皮细胞的损伤变化，探讨ROS清除剂对I／R损伤的保护作用。方法27月龄大鼠分别随机分为假手术组、I／R模型组、活性氧清除剂——叔丁基羟基茴香醚（BHA）干预组。夹闭双侧肾动脉30min再灌注18h制成I／R模型。观察肾功能、肾脏病理改变、肾小管上皮细胞凋亡情况，检测肾组织caspase-3，测定肾组织脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果（1）肾脏I／R损伤时，老年大鼠肾功能明显减退，肾组织病理改变比较明显，大量肾小管上皮细胞凋亡，肾组织caspase-3、肾组织中MDA含量增加、SOD活性下降（P〈0．05）。（2）BHA能明显的改善肾功能、组织病理改变和凋亡相关指标（P〈0、05）；BHA能减少组织中MDA含量，部分恢复组织中SOD含量。结论老年大鼠肾脏I／R损伤时肾小管上皮细胞凋亡增加，肾功能减退。ROS堆积后，线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡。清除ROS可以抑制肾小管上皮细胞凋亡，减轻I／R损伤。

骨髓间充质干细胞条件培养液对心脏成纤维细胞的影响812-814

摘要：目的探讨体外2％氧条件下培养骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）培养液对成年大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成情况的影响。方法分离Wistar大鼠下肢骨获取MSCs进行培养，收集培养3、6、9、24h培养液，用其刺激成年Wistar大鼠的心肌成纤维细胞30h，采用MTT法和^3H-脯氨酸掺入法检测心肌成纤维细胞的增殖及胶原合成情况。结果经3、6、9h的MSCs条件培养液刺激后的心肌成纤维细胞^3H-脯氨酸掺入量与无血清对照组比较显著增加，分别增加23％（P〈0．01）、44％（P〈0．01）和31％（P〈0．01），而24h组与无血清对照组比较差异无显著性：MSCs条件培养液刺激后的心肌成纤维细胞MTT结果与对照组比较差异无显著性。结论MSCs低氧条件培养液可以促进心肌成纤维细胞胶原合成，改善心功能。

万寿菊提取物改善老龄大鼠抗氧化功能的研究814-816

摘要：目的研究万寿菊提取物（叶黄素）对D-半乳糖致衰老大鼠抗氧化能力的影响。方法用D-半乳糖注射Wistar雄性大鼠5个月，建立衰老模型。对衰老模型组、叶黄素组血清丙二醛（MDA）含量、肝脏匀浆MDA含量和血液超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH．Px）活性进行测定及比较。结果叶黄素组血清MDA含量和肝脏匀浆MDA含量均比衰老模型组有所降低，而血液SOD、GSH—Px酶活性有所升高（P〈0．01）。结论摄入适量万寿菊提取物可以有效地增强大鼠机体抗氧化能力，从而延缓D-半乳糖诱发的大鼠衰老。

人骨髓间充质干细胞体外纯化及心肌样细胞定向诱导分化后的特征分析817-820

摘要：目的在体外将人骨髓间充质干细胞（hMSCs）进行纯化、扩增及向心肌样细胞定向诱导分化，并对诱导后的细胞进行心肌样细胞相关特性分析。方法采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs在体外经5μmoL／L5-杂氮胞苷诱导24h后继续培养8W，相差显微镜下观察细胞形态变化，免疫组化方法鉴定心肌特异性蛋白心房钠尿肽（ANP）和连接蛋白（CX43）的表达，流式细胞仪检测诱导前后细胞表面抗原（CD31、CD34、CD45、CD90）的表达情况，应用RT—PCR技术分析肌球蛋白重链（β—MHC）和肌钙蛋白T（cTnT）等相关基因在分化过程中的动态表达。结果hMSCs诱导前为纺锤形，诱导后第2天部分细胞即开始发生形变，呈球形或短棒状，1w后胞浆中颗粒增多，约20％～30％细胞呈毛刷样变化；hMSCs表面抗原CD31、CD34、CD45在诱导前后差异无统计学意义，CD90未诱导时表达呈弱阳性，诱导后明显增高（P〈0．05）；ANP和CX43在诱导前无表达，诱导后第2周开始表达且表达随时间逐渐增强，但CX43在诱导后第5周表达量开始降低。β—MHC和CTNT基因分别在诱导后第1周和第4周时表达开始增强。在第6周时均达到高峰，第8周时表达开始衰减。结论hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性，可为hMSCs临床移植治疗提供可靠、安全的细胞来源。

快速老化鼠和自然衰老鼠中超氧化物歧化酶的比较研究820-822

摘要：目的通过比较快速老化鼠（SAM—P／8）和昆明种自然衰老鼠中超氧化物歧化酶（SOD）表达情况，探讨两种衰老鼠之间异同及SOD在衰老过程中所起的作用。方法选用快速老化鼠（SAM—P／8）3月龄和6月龄各10只，昆明种小鼠3月龄和15月龄各10只，采用生物化学方法检测SOD蛋白活性和MDA含量；免疫组化对SOD蛋白的表达定位；蛋白印迹法检测SOD蛋白的含量变化；RT—PCR方法检测SOD基因的表达变化。结果两种衰老小鼠肝脏中SOD基因表达，SOD蛋白表达和活性均呈增龄性降低，MDA含量均呈现增龄性增加。结论快速衰老鼠和自然衰老鼠的SOD变化趋势相同，SOD在衰老过程中起了重要作用。

丹参单体对肿瘤坏死因子损伤的血管平滑肌细胞炎症介质IL-1β表达的影响823-824

摘要：目的探讨丹参主要单体成分丹酚酸B和丹参酮ⅡA在动脉粥样硬化（AS）发病过程中发挥作用的物质基础和作用靶点。方法通过体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞，建立肿瘤坏死因子（TNF—α）损伤的细胞模型，并运用放射免疫方法，检测上清液中IL-1β的表达。结暴高剂量丹参酮IIA对IL-1β表达抑制作用最强（P〈0．01），其余中药组抑制作用次之（P〈0．05）。结论丹酚酸B和丹参酮ⅡA均可以通过抑制AS时炎症介质的表达达到防治AS的目的。

齐墩果酸对HL60细胞周期调控因子影响的实验研究825-827

摘要：目的探讨齐墩果酸（Olcanolic Acid，OA）对人急性早幼粒细胞白血病细胞（HL60）细胞周期相关基因表达的影响。方法体外常规培养HL60细胞，分为空白对照组；二甲基亚砜（DMSO）对照组用80μmol／LOA处理细胞48h和72h用药组RT—PCR法检测p57^kip2，cyclinD1，cyclinE mRNA的表达。结果与空白和DMSO对照组比较，OA处理细胞后，细胞生长受抑制，增殖能力减弱；OA用药组p57^kip2基因mRNA含量增加，cyclinD1基因和cyclinE基因mRNA含量减少。结论OA可以通过改变细胞周期蛋白的表达而抑制白血病细胞增殖。

荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型的建立827-828

摘要：目的通过细胞移植法建立模拟人的膀胱原位癌荷瘤裸鼠模型，为临床膀胱癌的防治提供新的思路。方法将人膀胱移行细胞癌株T24原位移植到裸鼠膀胱内后定期用磁共振成像（MRI）检测，并进行解剖，组织病理学和免疫细胞学检查。结果裸鼠膀胱内的癌发生率为94．0％（47／50），组织病理学检查：Ⅰ级23例，Ⅱ级15例，Ⅲ级9例，免疫细胞学证实该模型具有人膀胱移行细胞癌株T24的特性。结论模拟人的荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型符合临床上膀胱肿瘤向膀胱内生长的过程，具有很强的实用性。

Zn^2＋改性羧甲基纤维素预防腹腔黏连的实验研究828-829

摘要：目的探讨Zn^2＋改性羧甲基纤维素对术后腹腔黏连的预防作用。方法将45只大鼠随机分为3组，均先行制作肠黏连模型，A组为对照组，B、C组于腹腔内损伤部位分别注入羧甲基纤维素钠及Zn^2＋改性羧甲基纤维素，术后10d处死动物，观察各组腹腔黏连情况。结果3组黏连分级有显著差异（P〈0．01）。结论Zn^2＋改性羧甲基纤维素明显减轻术后腹腔黏连程度，其作用优于羧甲基纤维素钠。

N-乙酰半胱氨酸对高浓度氧和通气机联合所致大鼠急性肺损伤的防护作用830-832

摘要：目的研究N-乙酰半胱氨酸对高浓度氧和通气机联合所致大鼠急性肺损伤的防护作用。方法将36只健康雄性SD大鼠随机分为三组。A组实施空气大潮气量通气，B组实施高氧大潮气量通气，C组为N-乙酰半胱氨酸干预组。每小时行1次动脉血气分析，计算氧合指数（PaO2／FiO2）。测定左肺W／D值，支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞及中性粒细胞计数、TNF-α、IL—1β、MIP-2含量以及肺组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果C组大鼠氧合指数较B组显著增加，左肺W／D值、BALF白细胞及中性粒细胞计数、TNF-α、IL-1β、MIP-2含量、肺组织MDA水平较B组显著下降，而SOD水平较B组显著增加。结论N-乙酰半胱氨酸对高浓度氧和通气机联合所致大鼠急性肺损伤有较明显的防护作用。

小鼠胸腺结构的增龄性变化832-835

摘要：目的观察小鼠增龄过程中胸腺结构的形态学改变以及胸腺中CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数目的变化。方法运用HE染色和电镜方法对1、6、12和16月龄小鼠胸腺形态进行观察；用免疫组化方法对不同月龄小鼠CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋胸腺细胞进行抗体标记，观察其随增龄的变化情况。结果增龄过程中，小鼠胸腺内胸腺细胞逐渐减少，基质细胞相对增多，并发生形态学改变，主要表现为胸腺大小、胸腺重量指数逐渐减小，胸腺细胞和胸腺上皮细胞的不同程度破坏，而胸腺中巨噬细胞随鼠龄增加而增多。随着鼠龄增加，胸腺成熟T细胞总数减少，CD4^＋细胞变化始终不明显，CD3^＋细胞从12个月开始逐渐减少，16个月时CD4^＋／CD8^＋比值已上升。结论随着鼠龄增加，小鼠胸腺结构呈退化趋势。

谷红注射液对心脏骤停大鼠心、脑组织形态学改变的影响836-838

摘要：目的探讨谷红注射液对心脏骤停心肺脑复苏大鼠心、脑组织形态学改变的影响。方法用缺氧窒息方法制作大鼠心脏骤停模型，在光镜和电镜下观察大剂量肾上腺素治疗时，谷红注射液对心肌和脑组织结构改变的影响。结果给药组大鼠心、脑组织形态学改变较对照组轻。结论谷红注射液能明显改善心脏骤停后大鼠心肌和脑细胞的缺氧性损害，有利于心脑复苏。

Aβ1～42促进体外培养神经干细胞增殖与存活838-840

摘要：目的探索β淀粉样蛋白1-42（Aβ1～42）对神经干细胞（neuml stem cells，Nscs）增殖的影响。方法体外培养新生小鼠神经干细胞，实验分为溶媒对照组、阳性组及Aβ1～420．5、0．1、0．02μmol／L3个剂量组，通过对神经球的形态观察、神经干细胞分化试验、Brdu标记试验、特异性蛋白质免疫细胞化学染色和MTT比色法鉴定NSCs，并以这些指标来判断物质的促NSCs增殖作用。结果在Aβ1～420．1μmol／L剂量组中有大量神经球生成，与对照组有显著差异（P≤0．01），神经干细胞BrdU标记、特异性蛋白质（nesnn）免疫细胞化学染色均呈阳性。结论低浓度（0．1μmol）Aβ1～42可促进体外培养的NSCs增殖、分裂。

脑脉通促进老龄大鼠脑缺血再灌注微血管再生作用841-843

摘要：目的证实脑脉通促进老年脑缺血再灌注（I／R）脑微血管再生的作用。方法将SD雄性的老龄大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、脑脉通组，测定各组神经功能评分、脑组织含水量、梗死面积、脑组织病理改变、细胞凋亡和脑组织微血管密度（MVD）及血管场面积变化。结果脑脉通组I／R3d微血管超微结构改善明显，仅见毛细血管周围轻度水肿，吞饮泡减少，微绒毛减少，线粒体水肿减轻，基底膜仅有轻度缺损，局部水肿，到I／R12d血管超微结构基本恢复正常。脑脉通组I／R3、6、12d神经功能评分均低于模型组（P〈0．01）。脑脉通组I／R6、12d神经功能评分低于尼莫地平组（P〈0．05），脑脉通组I／R6、12d神经功能评分低于I3h、1、3d（P〈0．01，P〈0．05）。与模型组比较，尼莫地平组和脑脉通组I／R 1、3、6、12d凋亡细胞数减少（P〈0．01）；与尼莫地平组比较，脑脉通组I／R3、6d凋亡细胞数减少（P（0．01）。脑脉通组I／R3d细胞凋亡数多于I／Rld（P〈0．05）。与模型组比较，脑脉通组I3h、I／R1、3、12dMVD增多（P〈0．01）；脑脉通组I／R12dMVD增多较尼莫地平组显著（P〈0．01）；脑脉通组I／R6d微血管数低于脑脉通组I3h、I／R1、3d（P〈0．01，P〈0．05），脑脉通组I／R12dMVD高于脑脉通组I／R6d（P〈0．01）。与模型组比较，脑脉通组I3h、I／R3、6、12d血管场面积增加（P〈0．01，P〈0．05）；与尼莫地平组比较，脑脉通组I3h血管场面积增多（P〈0．01）。结论脑脉通对老年脑I／R损伤具有明显保护作用，抑制细胞凋亡和促进脑微血管再生。

胸腺五肽基因转化烟草及其表达的研究843-845

摘要：目的研究在烟草中表达胸腺五肽（Thymopentin，TP5）。方法合成TP5基因，构建重组载体pB1121＋TP5，以烟草叶盘为外植体，通过根癌农秆菌介导转染烟草，取卡那霉素抗性植株用PCR方法筛选转染阳性植株及RT—PCR、质谱检测阳性植株叶片外植体中的TP5表达。结果抗性植株整合并表达TP5。结论成功构建了含TP5的植物表达载体pB1121＋TP5，并能在烟草中表达。

血浆溶血磷脂酸对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响845-846

摘要：目的观察溶血磷脂酸（LPA）在蛛网膜下腔出血（SAH）发病后脑血管痉挛（CVS）发病中的作用。方法采用自体动脉血注入大鼠枕大池的方法制SAH模型80只，通过动态检测血浆LPA浓度，观察SAH后伴CVS和不伴CVS大鼠的血浆LPA变化。结果SAH后CVS发病时间平均为7．3d；SAH后继发脑出血的大鼠血浆LPA浓度与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）；SAH后死亡的大鼠血浆LPA浓度与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）；伴CVS的SAH组在发生CVS前1～3d血浆LPA浓度与不伴CVS的SAH组比较有显著差异（P〈0．05）。结论血浆LPA的动态检测有可能作为预测SAH后发生CVS的实验指标。

颅高压豚鼠脑组织中水通道蛋白4表达水平的变化847-848

摘要：目的探讨豚鼠弥漫性颅高压模型中脑内水通道蛋白（AQP）-4表达水平的动态变化．及其与脑组织水肿之间的相关性。方法应用脑池内注入脂多精（LPS）的方法建立豚鼠弥漫性颅高压模型（模碰组），并设正常对照组。Westem印迹法检测脑组织AQP-4 mRNA表达变化。结果对照组各时间点AQP-4 mRNA表达量之间无显著差异。模型组造模1h后AQP-4 mRNA表达开始增强，3h达高峰（P〈0．01），6h开始下降（P〈0．05）。对照组脑组织无明显异常。模型组动物脑组织严重水肿，神经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞明显肿胀，血管周围间隙增加。结论脑池内注入LPS的方法建立豚鼠弥漫性颅高压模型早期可使AQP-4 mRNA表达增加，且与脑水肿程度有明显相关性。

实验性帕金森病中线粒体顺乌头酸酶表达的研究849-850

摘要：目的探讨线粒体顺乌头酸酶（ACOz）在实验性帕金森病（PD）发病中的表达。方法采用Wistar大鼠6-OHDA右侧内侧前脑束定位注射，制备实验性PD动物模型。在4W后分别进行假手术组和实验组的纹状体定位分离，脑蛋白质提取，荧光差异双向凝胶电泳（DIGE）。通过的Decyder^TM分析软件进行蛋白变化比对，其中AV比〉1．2或〈1．2，并且配对t检验P〈0．05为有意义的蛋白点，针对发现的差异表达的蛋白点进行质谱分析。结果DIGE分析发现表达明显降低的3个差异蛋白质点，经质谱分析确认均为ACO2。结论ACO2在纹状体的表达明显降低，提示线粒体功能障碍在PD发病过程中发挥重要作用。