中国老年学杂志 北大期刊

中国老年学 2007年第07期杂志 文档列表

中国老年学杂志基础研究

人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建601-603

摘要：目的克隆人肺新型抗蛋白酶性保护因子elafin基因cDNA，构建该基因的真核高效表达载体。方法抽提人肺总RNA进行RT-PCR法扩增，产物由pUCm-T载体装载、DNA测序确定后，用双酶切将Elafin cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1，转化于大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆，双酶切鉴定重组质粒。结果经RT-PCR获得400b的产物，经DNA测序，确定所扩增片段为人elafin基因cDNA，进而成功筛选出真核表达载体pEGFP-N1-elafin。结论成功构建人elafin基因cDNA真核表达载体，为进一步深入研究慢性阻塞性肺疾病的发病机制奠定了技术基础。

老年大鼠血管平滑肌细胞对氧化应激反应的研究603-604

摘要：目的观察老年大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）对氧化应激损伤的反应。方法贴块法培养雄性Wistar大鼠胸主动脉VSMC，采用50umol／L H2O2处理细胞6h形成氧化应激，比较老年组和成年组VSMC对氧化应激反应的差异。RT—PCR法检测单核细胞趋化因子-1（MCP-1）mRNA的表达，比色法测定细胞丙二醛（MDA）含量。结果给予H2O2氧化应激前，老年组VSMC的MCP-1mRNA表达及MDA含量无显著差异（P〉0．05）；给予H2O2氧化应激后，老年组VSMC的MCP-1mRNA表达及细胞MDA含量的显著高于成年组VSMC。结论老年大鼠VSMC对氧化应激有着更强烈的反应，这可能是老年期易患动脉粥样硬化性血管疾病的重要机制之一。

NT-3基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究605-607

摘要：目的检测神经营养素-3（NT-3）基因转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）后的表达情况。方法采用密度梯度离心法获取SD大鼠BMSCs，体外培养、传代。取第4代细胞，用脂质体介导法将NT-3真核重组表达质粒pIEGFP-NT-3转染BMSCs，G418筛选获得阳性细胞，用免疫细胞化学法检测NT-3转染效果。结果在阳性细胞中能够检测到NT-3基因表达，但细胞形态并没有因为NT-3的转入而有明显改变。结论通过质脂体介导法可将NT-3基因转入BMSCs中，并能稳定表达。

大鼠脑线粒体和突触体外周型苯二氮[艹卓]受体的增龄变化607-609

摘要：目的探讨衰老过程大鼠脑组织线粒体和突触体外周型苯二氮[艹卓]受体（PBRs）的动态变化。方法雌性SD大鼠分为乳鼠组、3、12、15、18、24和30月龄组。动物断头后迅速取脑，采用梯度离心法提取大脑皮质线粒体和海马突触体，应用放射配基结合实验测定PBRs结合活力。结果7组比较，皮质线粒体和海马突触体PBRs结合活性差异显著（均P〈0．05～0．001）。15月龄以前皮质线粒体和海马突触体PBRs结合活性逐渐下降（P〈0．01），15～24月龄PBRs结合活性有下降趋势，但变化不显著（P〉0．05）。30月龄组皮质线粒体和海马突触体PBRs结合活性显著高于3月龄组（P〈0．01），低于乳鼠组（P〈0．05）。结论大脑皮质线粒体、海马突触体PBRs结合活性呈明显增龄性改变，PBRs参与了脑老化过程。

胰高血糖素样肽-1类似物对糖尿病大鼠细胞免疫功能的影响610-612

摘要：目的探讨胰高血糖素样肽-1（GLP-1）类似物对实验性糖尿病的细胞免疫功能的影响。方法84只Wistar大鼠，采用高脂饲料饲养和注射40ms／kg STZ方法建立实验性糖尿病动物模型。GLP-1类似物治疗2w后，采用酶化学方法检测空腹血糖；称量动物的体重和胸腺、脾脏的重量。计算胸腺指数和脾指数；通过MTY法观察淋巴细胞增殖，计算刺激指数（SI）。结果GLP—1类似物治疗2w后，糖尿病模型组和各治疗组与正常对照组和高脂饲料组相比较胸腺指数存在显著性差异（P〈0．01）；各组动物的脾指数之间没有显著性差异（P〉0．05）。GLP-1类似物治疗2W后，各组动物之间相比较淋巴转化指数无显著性差异（P〉0．05）。结论GLP—1类似物对糖尿病动物的细胞免疫功能没有明显的影响。

衰老大鼠主动脉增龄性重塑及其规律分析612-614

摘要：目的探讨年龄对主动脉结构及功能的影响，分析主动脉增龄性重塑的主要表现及变化规律。方法健康Wistar大鼠60只，依月龄分为青年组、成年组、中年组和老年组。各组应用超声方法分别进行主动脉壁厚（ADT）和内径检测，离体动脉环试验测定胸主动脉环对乙酰胆碱（Ach）的最大舒张反应性，以及主动脉形态学和比色法检测主动脉一氧化氮（NO）及活性氧（ROS）水平。结果ADT、主动脉内径变化率（AAD）、收缩压（SBP）、脉压（PP）、NO、ROS、内膜中膜厚度（T）、血管内径（D）、中膜平滑肌相对含量[SMC（Aa％）]、胶原纤维相对含量（Aa％）；血管羟脯氨酸含量（HC）、乙酰胆碱诱导的最大舒张百分比（Emax）与年龄明显相关，并且上述指标在各年龄组随增龄变化速率存在差异。结论增龄性动脉重塑过程并非恒速进行，存在一个缓慢起始、加速进展、减速维持的过程。动脉增龄性重塑表现为功能重塑与结构重塑，功能重塑与结构重塑并非同步变化，功能重塑在成年期已经开始；结构重塑主要发生在中年期。

微米中药胰腺康合剂对H22荷瘤小鼠存活时间的影响615-616

摘要：目的探讨微米中药胰腺康合剂的抑瘤作用和可能机制。方法将H22肿瘤细胞接种到昆明种小鼠的腹腔，建立H22小鼠腹水瘤模型，并对小鼠H22腹水瘤模型进行微米中药及其提取液的处理。结果小鼠体内实验显示微米中药可明显减少腹水的产生，延长小鼠的存活时间。生命延长率为43．75％。结论微米中药胰腺康与其提取液相比，能更有效地抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，延长H22肿瘤小鼠的存活时间。

毛冬青甲素对动脉球囊损伤后的保护作用616-618

摘要：目的观察毛冬青甲素（ilexonin A，IA）对实验兔颈动脉球囊损伤后血栓素A2（TXA2）与前列环素（PGI2）血浆浓度变化及对颈动脉壁增生的影响。方法取新西兰大耳白兔39只，高胆固醇饲养4W，随机分组。Ⅰ组：仅右颈外动脉结扎；Ⅱ组：右颈外动脉内膜球囊损伤；Ⅲ组：右颈外动脉内膜球囊损伤并给予毛冬青甲素10mg·kg^-1·d^-1皮下注射4W。术前1d、术后1、2,4W取静脉血测定TXA2与PGI2在血浆中代谢产物TXB2及6-K-PGk的水平。术后4w处死动物，作损伤动脉HE染色，观察动脉管壁增生情况。结果Ⅰ组术前后TXB2、6-K-PGF1α血浆浓度及动脉内膜形态无改变，与Ⅱ组比较Ⅲ组TXB2降低，6-K-PGF1α升高尤其术后2W更明显。Ⅱ组动脉内膜增厚较Ⅲ组明显。结论IA可使TXA2降低、PGI2升高并可阻止TXA2诱导的动脉内膜增厚。

酵母多糖致老年大鼠多器官功能不全模型细胞因子的变化618-619

摘要：目的研究酵母多糖（Zym）致老年大鼠多器官功能不全综合征（MODSE）模型细胞因子的变化。方法成年和老年SD大鼠。腹腔注射不同剂量Zym制作MODS模型。采用放射免疫分析法（Ru）和酶联免疫法（EusA）分别进行血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）的检测。结果与成年和老年正常对照组相比，成年和老年不同剂量Zym组TNF-α、IL-6和IL-10均出现不同程度的升高；老年Zym0．5g／kg组TNF-α高于相应成年组，IL-10则低于成年组。结论Zym腹腔注射可致成年和老年大鼠MODS炎症紊乱，在相同剂量下，老年模型组比成年模型组更易发生全身炎症反应综合征（蜘陷）和MODS。

溶血磷脂酸对豚鼠心室肌动作电位及延迟整流钾电流的影响620-622

摘要：目的观察溶血磷脂酸（LPA）对离体豚鼠心室乳头肌动作电位及心室肌细胞延迟整流钾电流的影响。方法采用标准玻璃微电极技术记录豚鼠乳头肌动作电位。应用全细胞电压钳方法记录心室肌细胞延迟整流钾电流（Ik）。结果LPA0．1、1．0、10umol/L可浓度依赖性增加心室肌动作电位幅度（APA）（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．01），延长动作电位50％、90％时程（APD50、APD90）（P〈0．05），钾通道阻断剂TEA可部分阻断LPA对APD50的延长作用。LPA0．1、1．0、10umol／L可明显抑制Ik（P〈0．05）。结论LPA可增加豚鼠心脏乳头肌动作电位幅值、延长动作电位时程，并抑制豚鼠心室肌细胞Ik。

VEGF基因转染同种异体骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的实验研究622-625

摘要：目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）基因转染同种异体骨髓间充质干细胞（MSCs）对猪急性心肌梗死（AMI）血管再生和心功能的影响。方法体外分离、纯化、培养猪骨髓MSCs，以PCNA染色标记细胞；制备、抽提、纯化质粒pd—VEGF。用球囊堵闭及拉伤冠状动脉法建立AMI模型1W后，随机将其分为4组（n=4），进行经冠状动脉途径移植MSCs和／或Ⅵ犯F转染。组Ⅰ：给予转染VEGF腺病毒的MSCs移植；组Ⅱ：单纯MSCs移植；组Ⅲ：VEGF转染；组Ⅳ：DMEM对照组。4W后行免疫组化和超声心动图检查。结果组Ⅰ及组Ⅱ在梗死区及缺血区均可见较大量的PCNA标记的移植细胞。Ⅶ因子染色阳性的新生血管密度：组Ⅰ〉组Ⅲ〉组Ⅱ〉组Ⅳ。4W后LVEF值：组Ⅰ〉组Ⅱ〉组Ⅲ〉组Ⅳ（均P〈0．01）。结论VEGF基因转染同种异体骨髓MSCs移植猪心肌梗死区及缺血区促进血管再生及心肌细胞的再生，改善心功能。

6-羟基多巴胺诱导PC12细胞帕金森病模型中CaBP1表达的研究625-626

摘要：目的应用蛋白质组学技术研究6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导PC12细胞帕金森病（PD）模型中钙结合蛋白1（CaBP1）的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森病模型的基础上，分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白，应用荧光差异双向凝胶电泳（DIGE）技术获得蛋白点的差异表达信息，运用基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱仪（MAID1-TDF MS）鉴定出差异蛋白质。结果DIGE分析发现6-OHDA组表达明显增高的一个蛋白质点，经质谱分析鉴定确认为CaBP1。结论6-OHDA诱导PC12细胞的帕金森病模型中CaBP1表达增高，提示CaBP1增高可能与PD的发病机制有关。

神经生长因子预处理对拟AD模型大鼠海马CA1区神经元自发放电和NFT的影响627-629

摘要：目的探讨NGF预处理对拟AD模型大鼠海马CA1区神经元自发放电和NFT的影响。方法海马CA1区微量多次注射OA建立拟AD大鼠模型，侧脑室注射NGF进行预处理，通过细胞外玻璃微电极记录的方法和Bielschowsky染色，观察NGF预处理组海马CA1区神经元的变化。结果NGF预处理组海马CA1区神经元放电频率明显增加（P〈0．01），海马CA1区NFT数量减少（P〈0．01）。结论NGF可提高海马神经元的自发放电活动，其机制可能是NGF可抑制NFT的形成，提高受损神经元的功能。

兔脊髓空洞前状态神经细胞凋亡与Bcl-2、Bax蛋白表达的关系629-631

摘要：目的探讨实验性脊髓空洞前状态（presyinx state）神经细胞凋亡及其与Bcl-2，Bax蛋白表达的关系。方法制作动物模型，用TUNEL法和免疫组化技术检测上颈髓神经细胞凋亡趋势和Bcl-2，Bax表达变化。结果Kaolin（高龄土、白陶土）组动物神经细胞凋亡于术后第1天出现增加。7—14d达高峰。以后逐渐降低，21d仍可见到凋亡发生；Bcl-2和Bax表达则于术后第1天开始增加。第7天达高峰。持续至第14天后下降。但主要以Bax表达增高为著。结论实验性脊髓空洞前状态演变过程中。主要上调其靶基因Bax诱导神经细胞凋亡。参与了脊髓的神经功能损害。

O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶含量及CYP2D6、CYP3A4活性的影响632-633

摘要：目的研究O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体内细胞色素P450（CYP450）含量及CYP2D6、CYP3A4活性的影响。方法生理盐水为对照，大鼠灌胃22·90mg·kg^-1·d^-1的O-去甲基文拉法辛琥珀酸盐-水合物，连续7d，然后测定其肝微体中CYP450含量及CYP2D6、CYP3A4活性。结果与生理盐水组比较，ODV组CYP450含量和CYP3M活性无变化（P〉0．05），CYP2D6活性明显被抑制（P〈0．01）。结论ODV对CYP450含量和CYP3A4活性无影响，但对CYP2D6活性有抑制作用。

骨髓单核细胞移植促进大鼠急性心肌梗死后局部血管新生634-636

摘要：目的探讨大鼠急性心肌梗死（AMI）后骨髓单核细胞（BMMNCs）移植对心功能和梗死局部血管新生的影响及其可能的机制。方法利用密度梯度离心法获取BMMNCs，并用4’，6-二脒-2-苯基吲哚（4’，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）标记，结扎大鼠左冠脉前降支血管，建立AMI动物模型，分别于心肌梗死后1h及1W于梗死中央及周边局部注射BMMNCs（2×10^7个／ml，0．2ml），对照组AMI后1h局部注射等量生理盐水，AMI后8W心脏超声检测3组大鼠心脏功能，然后取材，进行荧光检查及组织学检查。结果心梗1W移植组左室收缩功能明显高于其他两组，荧光检查结果显示所有切片中均未发现DAPI标记的细胞；HE染色血管计数结果显示心梗1W移植组梗死局部毛细血管密度明显高于其他两组。结论大鼠AMI1W后BMMNCs移植可以增加梗死局部血管新生，改善心梗后心功能，而心功能改善及血管新生与BMMNCs的横向转化无关。

维生素C对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型的影响637-639

摘要：目的从mtDNA缺失改变，线粒体呼吸酶活力和氧化应激水平的角度研究维生素C（Vc）对D-半乳糖诱导亚急性衰老小鼠模型的影响。方法建立衰老小鼠模型，PCR法检测实验小鼠mtDNA固定片段的缺失情况，氧电极法检测肝线粒体呼吸酶琥珀酸脱氢酶（SUCOX）和NADH氧化酶（NADHOX）活力，荧光法检测肝和脑MDA含量和GPX活性，化学法检测SOD的活性。结果模型组和Vc保护组小鼠都出现mtDNA固定片段缺失，但Vc保护组荧光强度明显低于模型组。与模型组相比，对照组线粒体呼吸酶琥珀酸脱氢酶和NADH氧化酶活性显著降低，Vc保护组线粒体呼吸酶琥珀酸脱氢酶和NADH氧化酶活性显著升高；对照组和Vc保护组小鼠肝脑MDA含量和SOD活性降低。结论Vc可以减轻D-半乳糖诱导亚急性衰老动物模型的氧化损伤，保护mtDNA和增强线粒体氧化呼吸酶活性。

褪黑素对阿尔茨海默病模型大鼠NOS、Ca^2＋和神经元凋亡的影响639-640

摘要：目的研究褪黑索（melatonin，MT）对阿茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的NOS、Ca^2＋及神经元凋亡的影响。方法Wistar大鼠48只随机分为AD组、AD-MT大剂量干预组、AD-MT小剂量干预组和假AD组。应用β-淀粉样蛋白（AB）注入大鼠海马CAI区，建立大鼠AD模型。AD-MT干预组以MT灌胃，每日一次直至试验结束。应用电迷宫检测大鼠学习记忆情况，用比色法，硝酸还原法和Tunel法检测海马钙离子（Ca^2＋），一氧化氮合酶（NOS）含量以及海马神经元凋亡情况。结果MT可以明显改善AD大鼠的学习记忆能力，同时可不同程度的抑制因AB在脑内的沉积所导致海马的Ca^2＋超载，NOS的异常增高以及海马神经元的凋亡。结论MT对AD有显著的脑保护作用。