实验用西藏小型猪CYP3A基因的克隆及序列分析

作者:卢康荣; 白静; 张嘉宁; 顾为望; 黄黎珍; 王万山

摘要:目的:克隆西藏小型猪CYP3A基因并与人及其它小型猪品种进行序列比对分析。方法:根据Genebank数据库设计引物,取西藏小型猪新鲜肝脏组织,Trizol法提取肝脏总RNA,应用RT-PCR反转获得肝脏cDNA。分别扩增基因CYP3A46、CYP3A22、CYP3A29及CYP3A39,PCR片段回收后分别连接pMD-18T载体,获得重组质粒pT-CYP3A,阳性重组克隆送测序。采用NCBI Blast及vector NTI软件进行序列比对分析。结果:CYP3A46、CYP3A22、CYP3A29及CYP3A39基因编码序列全长1512 bp,编码503个氨基酸,与人CYP3A4相同。其中CYP3A22和CYP3A39与NCBI记录巴马小型猪序列相同;CYP3A46与巴马小型猪CYP3A46(NM001134824.1)有6个位点碱基不同。CYP3A29与巴马小型猪CYP3A46(EU918131.1)亦有6个位点碱基不同。对来自2个母本后代猪的基因经过PCR扩增后测序发现CYP3A46、CYP3A29序列完全一致。结论:成功克隆西藏小型猪CYP3A的4个基因,其中CYP3A46与人CYP3A4的序列相似性最高。所得CYP3A46与CYP3A29序列可能为西藏小型猪独有。

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关键词:
  • 细胞色素p450酶
  • 西藏小型猪
  • 克隆
  • 序列分析

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期刊名称:现代生物医学进展

期刊级别:统计源期刊

期刊人气:12750

杂志介绍:
主管单位:黑龙江省卫生厅
主办单位:黑龙江省红十字医院;黑龙江省森林工总医院
出版地方:黑龙江
快捷分类:医学
国际刊号:1673-6273
国内刊号:23-1544/R
邮发代号:14-12
创刊时间:2011
发行周期:旬刊
期刊开本:A4
下单时间:1-3个月
复合影响因子:0.76
综合影响因子:1.59