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摘要:目的:探讨Cidea和Cidee对肝脏中脂滴大小和脂类积累的影响。方法:首先,检测ob/ob肥胖小鼠的脂肪肝中Cidea和Cidee的表达情况。然后,采用腺病毒系统在野生型小鼠肝脏中过表达Cidea和Cidee,以及在ob/ob小鼠肝脏中基因沉默Cidea和Cidee,检测肝脏中脂滴大小和脂积累情况。结果:Cidea和Cidec在脂肪性肝脏中高表达。肝脏细胞中过表达Cidea和Cidec促进大脂滴的形成并能促进小鼠肝脏中的脂积累,且二者有协同作用。在脂肪肝中沉默Cidea和Cidee能缓解脂肪肝的程度,且脂合成基因的下调,线粒体活性增加。Cidea和Cidec的共沉默能进一步降低肝脏中的脂类积累。结论:Cidea和Cidee在促进肝脏的脂积累中起重要作用,并且二者有协同作用。
摘要:目的:观察中药复方天香胶囊对晕动病模型大鼠行为学与前庭核c-los蛋白表达的影响。方法:选择雄性SD大鼠并将其随机分为正常组、模型组、阳性药组、天香胶囊低、中、高剂量组。灌胃预给药3天后,采用双轴旋转刺激法建立大鼠晕动病模型,通过晕反应指数评分、自发活动实验、异嗜高岭土实验检测各组大鼠行为学变化,Western blotting法与免疫组化法检测各组大鼠前庭核c-fos蛋白的表达。结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠晕反应指数和高岭土摄入量均显著增高,自发活动总路程与次数均显著减少,前庭核c-fos蛋白表达水平显著增高;与模型组相比,天香胶囊可显著降低晕动病模型大鼠晕反应指数与高岭土摄入量,提高自发活动总路程与活动次数,降低大鼠前庭核组织c.fos蛋白表达。结论:天香胶囊可有效改善晕动病模型大鼠的行为学变化,其作用机制可能与下调前庭核c-fos表达有关,提示降低前庭核兴奋性可能是天香胶囊抗晕动病的内在机制之一。
摘要:目的:研究γ-生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4生长的抑制作用及可能的分子机制。方法:采用CCK-8、细胞周期实验检测细胞增殖、利用激光共聚焦显微镜、Annexin V/PI染色、Caspase活性检测、Western Blot等方法测定细胞凋亡。采用1μmol/LATO及不同浓度(0、15、30、45wmol/L)的γ-生育三烯酚处理NB4细胞24、48和72小时,通过CCK-8检测细胞的增殖情况,流式细胞术、激光共聚焦显微镜检测细胞周期和凋亡情况,检测Caspase3,8,9的活性,Western Blot检测细胞中c-cas.pase-3、Bcl-2和survivin的蛋白表达。结果:γ-生育三烯酚联合亚砷酸显著抑制NB4细胞增殖(P〈0.01),且随着作用时间延长和γ-生育三烯酚浓度的增加,其增殖抑制作用增强;细胞周期阻滞在S期,S期的比例由38.21%±2.99上升到50.31%±5.03;γ-生育三烯酚联合亚砷酸诱导NB4细胞凋亡,1ixmol/LATO联合15、30μmol/L的γ-生育三烯酚处理48h后,细胞活率分别为82.27%±3.16、66.97%±3.17、12.63%±2.66;1μmol/LATO联合30μmol/L的γ-生育三烯酚处理后,NB4细胞caspase-3,-8,-9的活性均较ATO单独用药组显著增高,c-caspase-3表达增高而Bcl-2和survivin蛋白的表达无明显变化。结论:生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4的生长具有抑制作用,此作用可能与抑制增殖并诱导凋亡相关,其作用靶点可能与促进Cas-pase诱导的凋亡有关。
摘要:目的:通过建立体外脑缺血模型,探讨沉默信息因子3(SIRT3)在小鼠皮层神经元氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤后的表达和意义。方法:C57BL/6J小鼠皮层神经元原代培养7天后,以氧糖剥夺不同时长(2h、4h、6h、8h)再灌注24h作为观察时间点,利用细胞增殖一毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞活力;小鼠乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放;蛋白印迹法(Western blot WB)观察微管相关蛋白1轻链3(LC3-II)、活化凋亡蛋白3(Cleavedcaspase-3)、以及SIRT3的表达变化;免疫荧光下进一步观察LC3-II、SIRT3表达。结果:与正常组比,随着氧糖剥夺时间的延长,LDH释放量呈台阶式升高(P〈0.01),而神经元活性进展性下降(P〈0.01);蛋白印迹结果发现在缺血损伤后LC3-II整体上调,并于OGD4h达峰值,SIRT3分子表达趋势与LC3-II相似均呈抛物线状,而Cleavedcaspase-3整体上调;相应的,细胞免疫荧光结果显示缺血损伤后神经元胞体和突起中LC3呈点状高表达,与此同时SIRT3荧光强度亦增高。结论:神经元缺血时间越长损伤越重;LC3-II和SIRT3表达呈现相似性;SIRT3可能通过调控线粒体自噬参与了拮抗神经元缺血损伤的作用。
摘要:目的:探讨斑马鱼麻醉过程中三卡因浓度对其心脏手术后生存率的影响。方法:以经典实验方法中的三卡因(MS-222)浓度150mg/L为对照,分别用浓度为20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L的MS-222麻醉液麻醉,观察斑马鱼术后行为及术后生存率的差异。结果:随着MS-222浓度的提高,斑马鱼表现为入麻时间的逐渐减少、苏醒时间的逐渐增加。MS-222麻醉斑马鱼成鱼的有效浓度为40~160mg/L,在此浓度范围内,鱼体能够在3min内达到可施行手术操作的麻醉状态(Ⅱ或Ⅲ期),10min内可苏醒恢复;随着浓度的增大,呼吸频率的下降速率增大;MS-222浓度为40mg/L时斑马鱼的术后存活率最高(98.3%)。结论:当MS-222浓度为40mg/L时,斑马鱼入麻及苏醒较为平稳,术后斑马鱼复苏时间较短,且保持了较高的术后生存率。在实验操作或者生产应用时推荐MS.222麻醉药液最佳麻醉浓度为40mg/L,所对应的麻醉时间约为15min左右。
摘要:目的:对蓝莓浓缩汁进行抗疲劳功效评价,并对其所涉及的作用机制进行初步探究。方法:小鼠通过预筛选和强制游泳预处理后,以生理盐水为对照组,蓝莓浓缩汁高、低剂量和V。分别作为实验组。经给药及游泳处理后,观察各组小鼠的行为学特征,测定力竭游泳时间,检测血浆和脑组织匀浆中T—SOD活力、MDA含量、LDH活性及血浆中BUN含量的变化,并经HE染色察看小鼠组织病变状况。结果:与S对照组相比,高剂量蓝莓浓缩汁可明显改善疲劳小鼠的行为学特征,延长力竭游泳时间;在血浆和脑组织匀浆中,可增加T—SOD活性((136.92±10.39)%,(50.31±7.26)%),降低MDA含量((58.32±2.91)%,(50.89±2.91)%),提高LDH活性((72.79±19.11)%,(65.11±6.55)%),并减少血浆中BUN((46.92±3.36)%)的产生,(P〈0.01);还可防止细胞病变间隙的发生。低剂量蓝莓浓缩汁和VC处理组的改善效果不如高剂量组明显。结论:蓝莓浓缩汁有明显抗疲劳功效,所涉及的机制可能与其增强抗氧化酶活性,提高机体有氧代谢能力及改善机体物质代谢等有关。
摘要:目的:探讨海马ghrelin对GD敏感神经元放电和弓状核ghrelin对胃运动的影响。方法:在细胞外记录海马的放电情况,并且检测清醒大鼠的胃运动。通过PCR免疫印迹和免疫荧光组织化学染色等方法来测定GHSR—1a在海马中的表达。用逆行追踪和免疫荧光组织化学染色检测ghrelin神经元的投射情况。Ghrelin况荧光金双标记的神经元以及GHSR-1a的表达分别可以在ARC和海马中观察到。结果:Ghrelin或者ARC电刺激可以兴奋海马区的胃牵张敏感神经元。Ghrelin受体拮抗剂[d-Lys-3]-GHRP-6预处理可以完全或者部分阻断这种兴奋作用。海马注射ghrelin可以显著促进胃运动,并且呈现剂量依赖关系,而且这种作用可以被【d-Lys-3】-GHRP-6所阻断。电刺激ARC能够促进胃运动。然而,预处理时[d-Lys-3]-GHRP-6可以减弱这些作用。电损毁海马可以减弱胃运动的兴奋作用,这个作用通过电刺激ARC产生的。结论:通过海马促进胃运动中ghrelin起着重要的作用。ARC可能参与调节海马对胃动力的影响。
摘要:目的:探讨二甲双胍联合放射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1增殖的影响。方法:分别给予鼻咽癌细胞CNE-1二甲双胍(5mM)、2Gy放射线照射、二甲双胍(5mM)联合2Gy放射线照射处理后,采用MTT实验、克隆形成实验检测和比较其细胞增殖抑制率和克隆形成抑制率。结果:MTT实验结果显示:与二甲双胍组或2Gy放射线照射组相比,二甲双胍联合放射线照射组细胞增殖抑制率显著升高,差异具有统计学意义(P〈0.05);克隆形成实验结果显示,与二甲双胍组或2Gy放射线照射组相比,二甲双胍联合放射线照射组细胞克隆形成抑制率显著升高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:二甲双胍联合放射线照射能够有效的抑制鼻咽癌细胞CNE-1的增殖。
摘要:目的:探讨姜黄素预处理对沙漠干热环境腹部枪弹伤动物模型生存时间的影响。方法:将24头长白仔猪随机分为2组(n=12):姜黄素预处理组和对照组。姜黄素预处理组给予长白仔猪姜黄素100mg/kg拌料饲养,每天1次,连续7天,对照组给予常规饲料喂养。第8天,将两组猪放入西北特殊环境人工实验舱内,设置环境温度(40.5±0.5)℃,相对湿度(10±2)%,禁食水,放置3小时后建立腹部枪弹伤模型,模型成功后继续放在沙漠干热环境中,每10分钟检测体温变化,并计算长白仔猪的存活时间。结果:姜黄素预处理组平均存活时间为(85.27±2.39)min,对照组的动物模型平均生存时间为(60.10±3.25)min,姜黄素预处理组的生存时间平均比对照组延长约25min,两组的Kaplan—Meier生存曲线经LogRank检验具有显著性差异(P〈0.01)。建立腹部枪弹伤模型后,在相应时间点,姜黄素预处理组的体温明显低于未处理组(P〈0.01),姜黄素预处理组70min时的体温与对照组50min体温比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:姜黄素预处理可明显提高干热环境下猪腹部枪弹伤模型的生存时间,体温升高可能是反映干热环境腹部枪弹伤后病程进展的重要指标。
摘要:目的:探讨肝脏中lamp2a对plin5表达及其功能的影响。方法:利用Western blot及免疫组化检测正常人和脂肪肝患者肝脏中lamp2a与plin5表达相关性。利用HepG2细胞构建lamp2a敲减的细胞系HepG2-L2A,通过给予油酸刺激、溶酶体抑制剂处理等进一步在细胞水平证实其相关性。结果:Western-Blot及免疫组化检测显示脂肪肝患者肝组织中lamp2a的表达明显下降,而plin5表达显著升高。Western-Blot试验提示正常培养的HepG2-L2A细胞中plin5表达较HepG2细胞中升高,Bodipy染色提示HepG2-L2A细胞中脂滴数量也明显增加(124±15.3VS273±19.1)。在分解试验中,HepG2细胞中plin5明显降低,脂滴数量也明显减少(282±24.1vs192±17.5);而HepG2-L2A细胞中plin5仍然处于高水平,脂滴数量仍然较多(325±24.0VS286±28.7)。当给予溶酶体抑制剂处理时,HepG2细胞中plin5降解明显抑制,而HepG2-L2A中plin5水平未见明显改变。结论:肝脏中lamp2a的异常表达影响plin5的表达,进而影响了脂质的分解。
摘要:目的:考察在不同温度下储存时间和反复冻融对粪便中人基因组DNA含量的影响。方法:1.将粪便样本在室温、4℃、40℃和-70℃条件下分别放置不同时间和-40℃条件下保存并反复冻融后,使用QIAamp DNA Stool Mini Kit试剂盒提取得到粪便DNA,通过实时荧光定量PCR体系对人KRAS基因定量确定人基因组DNA含量,评价粪便样本不同冻存条件对其中人基因组DNA含量的影响。2.将粪便DNA样本在4℃和-40℃条件下分别放置不同时间和.40℃条件下保存并反复冻融后,评价粪便DNA样本不同冻存条件下对其中人基因组DNA含量的影响。结果:1).粪便样本常温放置2小时,其中人基因组DNA即发生明显降解(P〈0.01),4℃可保存3天左右,-40℃可保存4周,-70℃可保存3个月以上,粪便反复冻融第3次,其中人基因组DNA降解具有统计学意义(P〈0.05)。2).粪便DNA4℃可保存3天,-40℃可保存4周,粪便DNA反复冻融第4次,其中人基因组DNA降解具有统计学意义(P〈0.05)。结论:符合大肠癌早期无创分子诊断要求的粪便DNA贮存条件:粪便样本室温收集后尽快保存;短期可处理的粪便样本存放在4℃条件下(3天内);暂无法处理则存于-40℃(1个月内);粪便样本长期保存在.70℃条件下,可保存3个月。
摘要:目的:探讨黄连解毒汤(HLJDT)对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=10)和用STZ诱导的模型组。将成功造模的大鼠随机分为模型组(n=12)、低、中和高剂量组(每组n=12),分别给予对照组和模型组灌胃饮用水,而给其他三组分别灌胃HLJDT(60、120和240g·kg^-1·d^-1)。12周后处死大鼠并测量生化指标,实时荧光定量PCR和western blot检测TGF—β1,p38MAPK和Caspase-3的基因和蛋白表达。结果:与模型组比较,HLJDT中高剂量组体重、肾脏重、肾重体重比和FBG显著提高。与对照组比较,模型组的TG、BUN、Scr和UP24h均显著提高;而与模型组比较,HLJDT高剂量组均显著降低TG、BUN、Scr、UP24h和MDA的水平,升高NO,SOD的水平。另外,TGF—β1,P38MAPK和Caspase-3的表达,模型组显著高于对照组,但经过HLJDT的治疗后,与模型组比较有显著降低。(所有取值为P〈0.05。P〈0.01)。结论:我们的研究提供了HLJDT是通过调控血糖、降低氧化应激的水平和下调TGF—β1,p38MAPK和Caspase-3的表达来保护DN大鼠的实验依据。
摘要:目的:评价模糊与噪声对不同图像识别算法在人耳图像识别过程中的影响。方法:对500个清晰图像进行模糊和热噪声处理,比较方向梯度直方图(HOG)、局部相位量化(LPQ)和局部二值模式(LBP)三种不同的特征提取算法对生物识别性能的影响。结果:HOG、LPQ和LBP算法对清晰人耳图像的识别率都很高,在无噪声和模糊等信号衰减的情况下,识别率分别达到了85.96%、95.62%和91.36%。在这三种算法中,模糊和热噪声对人耳识别能力均有不同程度的下降。热噪声对人耳识别能力的影响显著高于模糊,但是当模糊和热噪声同时存在图像中时,模糊和噪声会互相加强,导致三种人耳识别算法均不能获得好的识别结果。结论:LPQ算法对模糊有较好的识别性,并且在人耳图像的获取和处理过程中可尽量减少热噪声的产生。
摘要:目的:探讨肺鳞癌和肺腺癌FGFR融合基因状态及其临床病理意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和直接测序的方法检测2011年1月到2013年12月在我科行手术切除治疗的肺鳞癌和肺腺癌样本的FGFR融合基因,分析患者的临床病理学资料如性别、年龄、吸烟状况、肿瘤大小、病理类型、分化程度,并与对应样本的EGFR、KRAS、HER2、BRAF等常见驱动基因突变进行比较研究。结果:入组患者共512例,包括119例鳞癌和393例腺癌。FGFR融合基因的发生频率为1.2%(6/512),该分子亚型好发于病理证实为肺鳞癌(66.7%,p=0.029)、直径大于3厘米(83.3%,p=0.029)的男性(83.3%,p=0.028)吸烟患者(83.3%,p=0.038)。腺癌融合基因样本均含有实体病理亚型。结论:FGFR融合基因是肺鳞癌和肺腺癌的重要分子亚型,可能起驱动基因作用,具有该特征的肺癌亚群患者很可能将受益于FGFR靶基因研究与靶向治疗。
摘要:目的:比较静脉滴注不同剂量盐酸右美托咪定对大脑额α1、θ频率定量脑电图(quantitative electroencephalography,QEEG)和血流动力学的影响。方法:选择择期下肢手术行椎管内麻醉患者60例并将其随机分为静脉输注盐酸右美托咪定0.6μg/kg的高剂量组(H组,n=30)和0.3μg/kg的低剂量组(L组,n=30),麻醉方式均采用腰-硬联合阻滞麻醉,入室后监测脑电图至手术结束,选取患者入室5min时(T0)、给药30min时(T1)、手术结束时(T2)三个时刻前后无伪差脑电图60,观察并记录额α1和θ。频段的功率。结果:H组血管活性药给药比例及阿托品给药次数≥2次的比例均显著高于L组(P〈0.05),而两组手术时间、术中失血量及术中输液量比较差异无统计学意义(P〉0.05)。与T0时刻相比,两组T1时α1频段均下降,θ波频率升高,差别有统计学意义(P〈0.05),两组T2时α1频段和θ波频率均无明显变化。高剂量组低血压和心动过缓的发病率均高于低剂量组,差别有统计学意义(P〈0.05)。结论:高、低剂量的盐酸右美托咪定对脑额叶α1和θ频率的影响相当,提示均可以预防术后认知功能障碍,但低剂量的盐酸右美托咪定对血流动力学影响更小。
摘要:目的:探讨血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、淀粉样蛋白(SAn)、外周血白细胞计数(WBC)及中性粒细胞比例(N)在新生儿感染中的临床应用价值。方法:随机选取2015年10月-2017年6月在我院治疗并确诊感染的出生三日内的新生儿106人,以及未感染新生儿57人,将其分为未感染组、一般感染组及败血症组,比较其血清PCT、CRP、SAA、WBC及中性粒细胞比例。结果:败血症组的N、PCT均高于未感染组(P〈0.05),而败血症组的WBC高于或者低于未感染组(P〈0.05);一般感染组的N、PCT均高于未感染组(P〈0.05);败血症组PCT高于感染组(P〈0.05)。WBC、N、PCT用于鉴别诊断一般感染和败血症的ROC曲线的曲线下面积依次为0.551、0.580、0.815,当PCT的值设为6.785ng/mL时,其鉴别诊断一般感染和败血症的灵敏度50.0%,特异度为97.7%。结论:PCT对于诊断败血症有较高的诊断价值,能有效鉴别一般感染和败血症,中性粒细胞比例和白细胞在诊断细菌感染方面是PCT的补充,三者联合诊断可以提高新生儿细菌感染的诊断准确性。
摘要:目的:探讨剖宫产产妇并发医院感染的临床特征及相关影响因素,并提出相应的防控措施。方法:选取自2014年1月至2016年12月间在我院妇产科进行剖宫产手术的产妇4112例,记录产妇感染发生的情况(感染率、感染部位及病原菌分布),并统计分析产妇的基本情况,包括年龄、体质量指数(BMI)、住院时间、基础疾病等基本情况。结果:进行剖宫产的产妇合并发生医院感染的感染率为4.89%(201/4112);感染部位主要为手术切口感染、泌尿道感染、生殖道感染、盆腔感染、呼吸道感染及皮肤感染,其中手术切口感染所占比例为45.77%;医院感染病例中共培养出5种病原菌共51株,包括金黄色葡萄球菌、葛兰氏阴性杆菌、副流感嗜血菌、粪肠球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;感染因素中年龄、BMI、住院时间、基础疾病情况、医护人员操作的熟练程度、手术时间、术中出血量、术后尿管留置时间及抗菌药物应用与剖宫产产妇并发医院感染之间具有紧密联系(P〈0.05),而首次剖宫产手术与剖宫产产妇并发医院感染之间无联系(P〉0.05)。结论:剖宫产产妇并发医院感染的发生率较高,而且多种感染因素影响其发生,因此在临床上应采取相应的防控措施,降低感染率,保证产妇和新生儿的身心健康。
摘要:目的:探讨序贯血液净化(SBP)对严重创伤合并多器官功能障碍综合征(MODS)患者血清炎性因子及血流动力学的影响。方法:选取2015年7月-2017年5月第三军医大学新桥医院收治的严重创伤合并MODS患者48例,根据患者的治疗方式分为对照组21例以及观察组27例,其中对照组接受常规内科治疗,观察组在对照组的基础上进行SBP治疗,在治疗前后对两组患者的肝肾功能、血清炎性因子水平、血流动力学指标进行检测,并对比两组患者ICU住院时间、病死率、机械通气时间。结果:治疗后两组患者的总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平均较治疗前降低,且治疗后观察组患者各指标低于对照组(P〈0.05);治疗后两组患者血清C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均较治疗前显著降低,且治疗后观察组患者各炎性因子水平显著低于对照组(P〈0.05);治疗后两组患者的心率(HR)、中心静脉压(CVP)较治疗前降低,平均动脉压(MAP)、心脏指数(CI)较治疗前升高,且治疗后观察组患者的HR、CVP显著低于对照组,MAP、CI显著高于对照组(P〈0.05);观察组患者的ICU住院时间、机械通气时间均较对照组缩短,病死率较对照组明显降低(P〈0.05)。结论:SBP应用于严重创伤合并MODS患者的治疗可以有效减轻患者的炎性反应,并可以显著改善患者血流动力学以及预后。