现代生物医学进展杂志 统计源期刊

现代生物医学进展 2017年第16期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志论著

天麻素对CUS大鼠抑郁样行为和海马BDNF／GDNF水平的影响3001-3004

摘要：目的：探讨天麻素对慢性不可预见应激（CUS）大鼠抑郁样行为的改善作用及对海马脑源性神经营养因子（BDNF）72．胶质原纤维酸性蛋白（GDNF）表达的影响。方法：将64只SD大鼠随机分为对照组（Sham），Sham＋天麻素低、中、高剂量组，模型组（CUS），模型（COS）＋天麻素低、中、高剂量组，每组8只。对照组每天腹腔注射生理盐水（1mL／kg），连续14天；Sham＋天麻素低、中、高剂量组每天腹腔注射不同剂量的天麻素（50、100或者200mg／kg），连续14天；模型组接受CUS造模，并且在造模结束后每天腹腔注射生理盐水（1mL／kg），连续14天；模型＋天麻素低、中、高剂量组在CUS造模结束后每天腹腔注射不同剂量的天麻素（50、100或者200mg／kg），持续14天。随后，通过糖水偏好实验和强迫游泳实验检测各组大鼠的抑郁样行为，在行为学检测结束后处死大鼠，通过Elisa检测海马GFAP和BDNF的表达情况。结果：（1）慢性不可预见应激（cus）可以导致明显的抑郁样行为，包括糖水偏好减少（P〈0．05）和强迫游泳不动时间增加（P〈0．01），CUS组大鼠海马GFAP和BDNF水平下降（P〈0．01）。（2）一定剂量（100和200mg／Kg）天麻素干预可以缓解CUS大鼠的抑郁行为，cus与CUS＋GAS（M）组（P〈0．05）以及Cus与Cus＋GAS（H）组之间（P〈0．01）存在显著性差异。（3）中高剂量的天麻素可以恢复CUS大鼠海马的BDNF和GDNF水平．CUS与CUS＋GAS（M）组（P〈0．05）以及CUS与CUS＋GAS（H）组之间（P〈0．05）的BDNF和GDNF水平存在显著性差异。结论：天麻素可以缓解CUS模型大鼠抑郁样行为，恢复CUS模型大鼠海马的BDNF和GDNF水平。

人参皂苷Rg1抑制大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化3005-3007

摘要：目的：观察人参皂苷Rg1对大鼠心肌梗死后心脏纤维化发生的影响。方法：通过结扎SD大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型，并将40只雄性SD大鼠随机分单纯手术组与人参皂苷Rgl治疗组。治疗组的大鼠造模1h后将预先配成药液的人参皂甙Rg1按5mg／（kg·d）剂量腹腔注射，1／日至处死当日。对照组则腹腔注射等量生理盐水1／日至处死当日。分别于手术后l、2周时对比两组大鼠的基本生命指标，后通过马松染色对比观察各组大鼠心脏细胞形态特征以及瘢痕形成情况。结果：①无论是手术后1周还是2周，两组大鼠的体重、心脏重量、心重／体重、鼠尾收缩压、心率比较均没有统计学意义（P〉0．05）；②无论是手术后1周后还是2周后，人参皂苷ag1治疗组心脏瘢痕形成要明显少于对照组。结论：人参皂苷Rg1能够有效抑制大鼠急性心肌梗后心脏纤维化的发生。

Egr-1基因沉默对A549细胞放射敏感性的影响3008-3011

摘要：目的：探讨Egr-1基因沉默对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影v向。方法：选用A549细胞株作为研究对象，将其分成A、B、C三组，即空白对照组（只加入RPMI-1640培养）、阴性对照组（加入LV3。NC-shRNA）、实验组（加入EGRl．homo-2294-shRNA），采用慢病毒介导的shRNA干扰技术使实验组细胞Egr-1基因沉默表达。利用荧光显微镜、自动化荧光定量细胞成像分析系统分析shRNA转染，利用FQ-PCR分析Egr-1表达，再利用细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性参数的差异．结果：慢病毒介导的shRNA成功转染阴性对照组、实验组细胞；空白对照组与阴性对照组Egr-1表达无差异（P〉0．05），实验组与空白对照组、阴性对照组比较Egr-1均受到明显抑制（P〈0．05）；克隆形成实验中细胞放射敏感性参数DO、SF2实验组细胞与空白对照组、阴性对照组比较均存在明显差异（P〈0．05）。结论：Egr-1基因沉默使A549细胞放射敏感性降低，Egr-1表达可能与肿瘤细胞对放射的敏感性有关，

NAC-1在膀胱癌中的表达及其与血管生成的相关性研究3012-3015

摘要：目的：检测NAC-1在膀胱癌及癌旁组织中的表达，及其与膀胱癌临床病理的相关性研究，并进一步探讨其与血管生成的关系，为阐明膀胱癌的发生发展机制提供基础。方法：采用免疫组化法检测88例膀胱癌和30倒癌旁组织石蜡块中NAC-1的表达情况，用Si-RNA干扰技术下调膀胱癌细胞系T-24中NAC-1的表达，然后通过qRT—PCR方法检测干扰组及对照组中促血管生成因子（VEGF、bFGF、EGFR）的表达。结果：膀胱癌组织和癌旁组织中NAC-1的阳性表达率分别为79．54％和13.33％，膀胱癌组织显著高于癌旁组织（P〈0．01）；NAC-1表达与膀胱癌的肿瘤级别、肌肉浸润程度及淋巴结转移显著相关（P〈0．05），在高级别、肌肉浸润及淋巴结转移的膀胱癌中呈现高表达，细胞实验发现NAC-1下调能够抑制促血管生成因子（VEGF、bFGF、EGFR）的表达。结论：NAC-1作为肿瘤相关基因在膀胱癌中高表达，并与膀胱癌的临床病理密切相关，其能调节促血管生长因子，可能会在肿瘤的血管生成及转移中具有重要的作用。

细胞因子人脂联素全序列蛋白的真核表达及晶体生长3016-3019

摘要：目的：找寻适用于脂联素全序列蛋白的结晶条件，为解析其空间结构奠定基础，从而研究脂联素聚合体的内在构成模式。为开发高活性脂联素类衍生细胞因子提供参考。方法：首先构建脂联素全序列蛋白的真核表达载体，对其进行诱导表达，然后通过经亲和层析和凝胶过滤分离纯化后，得到高纯度的脂联素全序列蛋白，最后尝试使用坐滴法和悬滴法以及多种温度环境和结晶液条件，从而找寻适于脂联素全序列蛋白质的结晶条件。结果：通过纯化后的脂联素蛋白纯度可以达到91.3％，在溶液中的粒径分布于2nm到4nm。在线性变温条件下（24h内，由277K线性升温至313K，再线性降温至277K），通过悬滴法于48h可获得脂联素全序列蛋白的针状晶体。结论：本研究选择真核载体，以亲和层析和凝胶过滤为分离纯化手段，得到了纯度高，粒径均一的脂联素全序列蛋白。随后通过尝试多种结晶方法、条件和环境，初步确定获得脂联素全序列蛋白晶体的条件，为后续获得高质量单晶提供了参考。

近红外荧光染料IR-783在膀胱癌中的成像研究3020-3024

摘要：目的：观察研究近红外荧光染料IR-783在膀胱癌中的特异性成像。方法：通过染料与膀胱癌细胞及正常细胞共孵育，观察近红外荧光染料IR-783是否能够实现膀胱癌细胞的选择性成像。利用细胞器示踪剂观察近红外荧光染料在膀胱癌细胞内的共定位；使用IR-783检测循环血液中及尿液中的膀胱癌细胞。结果：近红外荧光染料IR-783可被膀胱癌细胞选择性摄取。IR-783可选择性聚集在膜性细胞器如线粒体和溶酶体内，这种选择性聚集作用使IR-783可以保持较长的染色效果。近红外染料可以检测到血液或尿液极少量的膀胱癌细胞。结论：近红外荧光染料IR-783能够被膀胱癌细胞特异性吸收，可用于血液和尿液中膀胱肿瘤细胞的特异性诊断，具有重要的临床应用前景。

高氧对雄激素敏感的前列腺癌细胞移植瘤生长及其缺氧诱导因子-1α表达的影响3025-3030

摘要：目的：探讨高氧对雄激素敏感的前列腺癌细胞移植瘤生长及其缺氧诱导因子-1α表达的影响。方法：将前列腺癌前列腺淋巴结癌（LNCaP）细胞接种于36只Foxnl小鼠的双侧腹，并将其随机放置于含氧量不同的气室中并分组如下：缺氧组11例，常氧组16例，高氧组9例。处理28天后进行称重，麻醉处死，从左心室取血样；分离出移植瘤并进行称重。采用Westernblotting、免疫荧光分析、血红蛋白测定的方法对各组移植瘤生长、血管生成及血管化、缺氧诱导因子-1（HIF-1α）表达以及细胞信号转导因子表达进行检测。结果：缺氧组的移植瘤生长较常氧组快（P〈0．05）；高氧组移植瘤生长与常氧组相比差异不具有统计学意义（P〉0．05）。高氧组移植瘤的HIF-1α血管内皮生长因子（VEGF）和血管内皮生长因子受体2（VEGF-R2）表达均较常氧组高，而缺氧组移植瘤的HIF-1α表达与常氧组基本相似。缺氧组移植瘤的血[HB]增长率（175％）高于常氧组（45％）。高氧组的Nrf2的表达水平较常氧组明显增加（P〈0．05）。结论：体内高氧诱导HIF-1α在LNCaP肿瘤高表达的同时，不会加快肿瘤的生长。

高压电场对A549细胞中ABCG2和V-ATPase的表达及其耐药性的影响3031-3034

摘要：目的：探讨高压电场对A549细胞中ABCG2和V—ATPase表达量的影响；探讨高压电场对A549细胞耐药性的影响。方法：MTT法测细胞生长曲线，明确能导致细胞可逆性电穿孔的最高电场强度。慢病毒构建ABCG2和V—ATPase低表达的A549细胞系，并用电场处理，用q-RT-PCR和Western—blot法检测处理前后ABCG2和V—ATPase的mRNA和蛋白表达量的变化。最适强度的高压电场处理各组细胞，在处理前后的细胞中分别加入阿霉素，用高效液相色谱法检测各组细胞中阿霉素浓度。结果：当电场强度为1500V／cm时，肿瘤细胞增殖最慢；电场强度为1500V／cm时，肿瘤细胞中ABCG2和V-ATPase的mRNA和蛋白的表达量分别降至对照组的58％和61％，具有统计学差异；1500V／cm强度的电场可以提高肿瘤细胞内阿霉素的浓度3-4倍。结论：高压电场可以显著降低肿瘤细胞中V-ATPase和ABCG2的mRNA和蛋白的表达量并降低肿瘤细胞的耐药性。

非小细胞肺癌CD166＋干细胞的分离和鉴定3035-3038

摘要：目的：分选人非小细胞肺癌中的CD166＋细胞，并验证其肿瘤干细胞的特性。方法：收集手术切除的15例非小细胞癌组织标本以及患者的临床资料，并通过流式细胞术对组织中CD166＋的表达水平进行检测，对CD166十细胞进行原代培养，对比CD166＋细胞和CD166-细胞的成球能力和集落形成能力；并将CD166＋细胞和eD166-细胞注射到小鼠体内，比较其体内肿瘤形成能力。结果：在15例临床样本中均检测到CD166＋细胞，CD166阳性表达率最高为12.1％，最低为0.3％。CD166的高表迭与肿瘤TNM分期、肿瘤转移、以及肿瘤分型密切相关（P均〈0．05）。CD166＋细胞的成球彤成能力和集落形成能力显著的高于CD166．细胞，且CD166＋细胞在裸鼠体内肿瘤形成能力显著高于CD166-细胞（P均〈0.05）。结论：非小细胞肺癌CD166＋细胞具有肿瘤干细胞的特征，CD166在非小细胞肺癌的发生发展中可能具有重要的作用。

miR-24对心脏成纤维细胞生长和迁移的影响及机制研究3039-3044

摘要：目的：探讨miR-24对心脏成纤维细胞的生长和迁移的影响及机制。方法：采用RT—PCR检测心肌细胞和心脏成纤维细胞中miR．24的表达水平。在心脏成纤维细胞中转染miR-24mimics、mimicscontrol、miR-24inhibitors、inhibitorscontrol后，通过Westernblot检测细胞中Col-1、α-SMA的表达，MTT检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Transwell小室检测细胞迁移能力。通过靶基因预测库预测miR-24的靶基因，荧光素酶鉴定靶基因的正确性，并通过RT-PCR和Westernblot检测转染后细胞中Furin的表达。结果：心脏成纤维细胞HEH2中miR-24的表达水平与心肌细胞H9C2相比差异显著（P〈0．01），心脏成纤维细胞中miR-24表达上调。miR-24mimics组中Col-1、α-SMA的表达水平明显低于mimicscontrol组（P〈0．01）。miR-24mimics组中细胞OD值较mimicscontrol组显著降低（P〈0．01），miR-24inhibitors组中细胞0D值较inbibitorscontrol纽显著升高fP〈O．01）。miR-24mimics组、mimicscontrol组、miR．24inhibitors组、inhibitorscontrol组细胞凋亡无显著性差异（P〉0．05）。miR-24mimics组细胞迁移数目明显低于mimicscontrol组，差异显著（P〈0．01），miR-24inhibitors纽细胞迁移数目高于inhibitorscontrol纽，差异显著（P〈0．05）。miR-24mimics组细胞中Furin蛋白和mRNA水平明显降低，野生型Furin和miR-24mimics共转染的细胞中荧光素酶活性最低。结论：miR-24在心脏成纤维细胞中高表达，通过靶基因Furin抑制心脏成纤维细胞合成Col-1、α-SMA，抑制心脏成纤维细胞增殖和迁移。

神经生长导向因子SLIT2抑制结肠癌细胞迁移的作用研究3045-3048

摘要：目的：研究SLIT2基因对结肠癌细胞迁移能力的影响。方法：通过wcstcmblot技术检测SLIT2在各种结肠癌细胞系中的表达，采用小干扰RNA转染技术，在低转移细胞系RKO中沉默SLIT2基因表达，并采用PCR和westernblot技术验证其干扰效率。采用质粒转染技术，在高转移细胞系LOVO中上调SLlT2基因表达后，通过Transwell迁移实验和划痕愈合实验检测SLIT2表达变化对结肠癌细胞系迁移能力的影响。结果：SLIT2在高转移细胞系LOVO和HCT116中表达明显低于低转移细胞系RKO和HT-29。在低转移细胞系RKO中敲减SLIT2后，Tmnswell结果显示细胞的迁移能力得到了明显增强（P〈0．05）。在高转移细胞系LOVO中过表达SLIT2后，细胞的划痕愈合能力和迁移能力则均受到明显抑制（P〈0．05）。结论：神经生长导向因子SLIT2的表达与结肠癌细胞的迁移潜能相关，体外实验表明SLIT2可抑制结肠癌细胞系LOVO、RKO的迁移能力。

使用透明质酸钠复合海藻酸钠水凝胶球3D培养软骨细胞抑制细胞去分化的研究3049-3053

摘要：目的：验证海藻酸钠（Alginate，Alg）水凝胶球添加透明质酸钠（Sodiumhyaluronate，HA）后，对大鼠膝软骨细胞体外3D培养时软骨细胞去分化的抑制情况。方法：用Ⅱ型胶原酶消化法获取2周龄SD大鼠膝关节原代软骨细胞，体外培养传代至P2。细胞分为2组，1组用2％海藻酸钠水凝胶球3D培养（Alg组），另一组用2％海藻酸钠＋1％透明质酸钠的水凝胶球3D培养（Alg／rtA组），采用正交法制作海藻酸钠水凝胶球。培养14天后，两组各取水凝胶球进行死活细胞染色观察细胞状态。其他水凝胶球收集后用4％多聚甲醛固定，30％蔗糖溶液脱水，OCT（Optimalcuttingtemperaturecompound）包埋剂包埋切片，采用苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosinstaining，HE染色）、甲苯胺蓝染色观察软骨细胞形态；采用阿利新蓝染色观察对比糖胺聚糖（Glycosaminoglycan，GAG）含量；采用免疫荧光染色对比Ⅱ型胶原（CollagentypeⅡ，ColⅡ）含量；采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测软骨细胞ColⅡ和聚蛋白多糖（Aggrecan，ACAN）的表达情况。结果：死活细胞染色显示两组水凝球内软骨细胞状态良好，几乎无死细胞；阿利新蓝染色显示Alg／HA组与Alg组相比软骨细胞分泌更多的GAG；免疫荧光染色显示Alg／rtA组比Alg组软骨细胞内含更多的Ⅱ型胶原；Westernblot显示Alg／HA组软骨细胞比Alg组ColⅡ的蛋白表达更多。结论：含透明质酸钠的海藻酸钠水凝胶可以更好地维持软骨细胞的表型。抑制软骨细胞去分化。

宫颈癌患者行根治性子宫切除术且保留盆腔自主神经的效果观察3054-3056

摘要：目的：探讨宫颈癌患者行保留盆腔自主神经的根治性子宫切除术的临床效果。方法：按照随机数字表法将入选的48例宫颈癌患者随机分为对照组和试验组两组，每组患者各24例，其中对照组患者均采用传统的宫颈癌根治手术治疗，而试验组患者则采用保留盆腔自主神经的根治性子宫切除术进行治疗，比较两组患者的术中情况和术后恢复情况等。结果：两组患者的子宫切除出血量和术中总出血量以及术中输血率均无明显差异（均P〉0．05），但是试验组患者的子宫切除时间和手术总时间显著长于对照组患者（t=2．934，P〈0．05；t=-3．121，P〈0．05）。两组患者之间的术后排气、排便时间均无明显差异（均P〉0．05）。提示两组患者术后直肠功能无明显差异；对照组患者的术后残余尿量〈100ml时间与术后残余尿量〈50ml时间均显著高于试验组患者（t=-2．891，P〈0．05；t=3．092，P〈0．05）。术后试验组患者的首次排尿感和急迫排尿感以及最大腹压等均显著低于对照组患者（t=4．283，P〈0．05；t=4．027，P〈0．05；t=3．137，P〈0．05）；而最大膀胱压和最大尿流量以及最大逼尿肌压等则显著高于对照组（F3．192，P〈0．05；t=2．938，P〈0．05；t=-3．572，P〈O．05）。结论：采取保留盆腔自主神经的根治性子宫切除术能够较好地减少宫颈癌患者临床并发症的出现，具有较好的治疗效果，值得加以推广和运用。

胎盘多肽注射液对慢性湿疹患者血清TNF-2α，INF-γ和ECP水平的影响3057-3059

摘要：目的：探讨胎盘多肽注射液治疗慢性湿疹的疗效观察及对血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（INF）-γ嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）水平的影响。方法：选择2014年5月至2016年5月我院接诊的86例慢性湿疹患者，通过随机数表法分为观察组（n=43）和对照组（n=43）。对照组给予常规治疗，观察组在对照组基础上加用胎盘多肽注射液。观察并比较两组患者治疗前后血清TNF-2α，INF-γ及ECP水平、临床疗效及复发率。结果：治疗后，观察组TNF-2α、INF-γ ECP水平均比对照组低（P〈0．05）；观察组红斑、丘疹、表皮脱落、苔藓化症状得分均优于对照组（P〈0．05）；观察组总有效率比对照组高（P〈0．05）；在随访的3个月中，观察组复发率比对照组低（P〈0．05）。结论：在慢性湿疹患者中应用胎盘多肽注射液效果显著，可有效缓解临床症状，增加机体免疫力，提高预后，值得应用推广。

显微手术在矢状窦镰旁脑膜瘤中的治疗效果分析3060-3063

摘要：目的：研究显微手术在矢状窦镰旁脑膜瘤中的治疗效果。方法：选取2014年7月至2015年6月本院收治的150例矢状窦镰旁脑膜瘤患者，根据投硬币法分为观察组和对照组，每组75例。观察组采取显微手术进行治疗，对照组采用常规开颅手术方式进行治疗，比较两组患者的手术指标、手术切除率、临床疗效及并发症的发生率。结果：观察组的术中输血量、出血量均显著少于对照组（P〈0．05），两组患者手术时间、手术切除程度、改善率、致残率及死亡率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。观察组总的并发症发生率显著低于对照组（P〈0．05）。结论：经显微手术治疗矢状窦镰旁脑膜瘤患者术中输血量和出血量较少，手术效果良好，安全性高。

脑室出血合并脑积水行脑室外引流高危因素的临床分析3064-3067

摘要：目的：探讨脑室出血后未立即行脑室外引流术发生脑积水的指征和时机。方法：回顾性分析2009年1月到2015年9月我院收治的98例脑室内出血患者的临床资料。结果：98例患者中，28例（28．6％）患者需要行脑室外引流术。全脑室出血是最常见的类型（49例，50％），这些患者中24例（49％）需要行脑室外引流术。在脑室外引流术组和非脑室外引流术组平均mGS分别是17±5．1（12-28）和8±4．2（2—20）（P〈0．001）。与脑室外引流术相关的因素包括影像学表现为脑积水、中线移位〉5mnl、GCS评分〈8分、mGS〉13分、三脑室mGS=5及四脑室mGS=5分。多因素回归分析中，raGS〉13分、GCS评分〈8分和四脑室mGS=5分仍是重要的影响因素。大部分患者（24例，85．7％）在有脑积水症状时很快行脑室外引流术，有4例患者在48小时后行脑室外引流术。结论-昏迷、mGS〉13分和四脑室扩大使行脑室外引流术的风险增大。大部分患者在脑室出血后一天内行脑室外引流术，很少一部分患者在48小时后行脑室外引流术。

鼻息肉与鼻咽癌标本VEGF水平及微血管密度对比及其临床意义3068-3071

摘要：目的：对比研究鼻咽癌和鼻息肉标本中VEGF表达强度及MVD差异，同时分析VEGF、MVD和鼻咽癌临床特征的相关性。方法：纳入我科就诊的鼻咽癌患者57例，鼻息肉患者50例。采用免疫组化SABC法检测癌组织、癌旁组织、及息肉组织中中VEGF蛋白的表达，及MVD强度。分析VEGF、MVD和鼻咽癌患者性别、临床分期、颈部淋巴结转移、远处转移、血清EBV-IgA阳性、WHO病理分型相关性。统计分析随访结果，对可能影响鼻咽癌预后的因素进行Cox回归模型分析。结果：鼻咽癌组织、鼻咽癌旁组织、鼻息肉组织中VEGF表达、MVD强度具有明显差异（p〈0．05）。不同鼻咽癌临床分期、是否发生远处转移、不同WHO病理分型和VEGF表达、MVD强度具有明显差异（p〈0．05）。Cox回归方程显示，远处转移、病理分型、VEGF表达强度是影响鼻咽癌生存的独立危险因素（p〈0．05）。结论：鼻咽癌高表达VEGF，促进新生血管，形成高密度微小血管，和鼻咽癌远处转移密切相关，降低其生存率。

重组脑钠肽对急性失代偿性心力衰竭患者炎症因子及肾素系统的影响3072-3075

摘要：目的：探讨重组脑钠肽对急性失代偿性心力衰竭患者炎症因子及肾素系统的影响。方法：选择2014年7月～2016年7月于我院就诊的急性失代偿性心力衰竭患者160例，80例对照组行硝普钠治疗，80例实验组行重组脑钠肽治疗，观察两组治疗前后肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超敏c反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、脑钠肽（BNP），醛固酮、血管紧张素Ⅱ、血浆肾素活性，血流动力学变化及心功能情况。结果：治疗前，实验组TNF-α、hs-CRP、IL-6、BNP低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组醛固酮、血管紧张素Ⅱ、血浆肾素活性低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组血流动力学低于对照组（P〈0．05）。实验组心功能较对照组改善更明显（P〈0．05）；实验组副反应少于对照组（P〈0．05）。结论：急性失代偿性心力衰竭患者应用重组脑钠肽治疗可降低患者炎症因子，改善肾索系统。