现代生物医学进展杂志 统计源期刊

现代生物医学进展 2017年第09期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志论著

低浓度CO暴露促进大鼠肝前体细胞增殖的体外研究1601-1605

摘要：目的：观察低浓度一氧化碳暴露对营养相对匮乏情况下大鼠肝前体细胞系生长的影响并探索其作用机制。方法：分别在营养充足（10%胎牛血清,10%FBS）和营养相对匮乏（4%胎牛血清,4%FBS）条件下对大鼠肝脏前体细胞系WB-F344进行体外培养,观察细胞的生长情况;同时,在不同两组4%FBS培养基中分别加入无活性的一氧化碳释放分子i CORM-2和有活性的一氧化碳释放分子CORM-2,两者的浓度均为100μM,观察比较低浓度一氧化碳暴露是否有利于WB-F344的生长和增殖;利用吖啶橙染色观察不同组别培养细胞酸性自噬小体的形成情况,并进行Western-Blot,检测自噬相关蛋白LC3-I和LC3-II的转化情况,探讨其可能的作用分子机制。结果：在含有10%FBS的培养基中,WB-F344细胞生长良好,呈指数生长,并在第5天达到生长高峰;与其相比,4%FBS培养基对WB-F344的生长有明显抑制,细胞生长相对缓慢,并且相同时间点的细胞增殖数量明显不足。在进行浓度为100μM的一氧化碳分子暴露后,WB-F344细胞生长情况有明显改善,细胞增殖的峰值有显著增加。吖啶橙染色显示,4%FBS培养基条件下培养的WB-F344细胞,细胞内出现橘红色荧光,在暴露于低浓度的一氧化碳分子后,橘红色荧光的强度有明显增加。进一步的Western-Blot检测发现,营养相对匮乏的培养基（4%FBS）能使WB-F344细胞在生长过程产生LC3-I向LC3-II的转化,在暴露于低浓度的一氧化碳分子后,LC3-II的量进一步增加,LC3-II/LC3-I的比值显著增大（P〈0.05）;进一步的研究显示在此过程中伴随着p-AKT和m TOR蛋白的表达降低,同时,HO-1蛋白的表达增加。结论：低浓度一氧化碳暴露能促进WB-F344细胞产生自噬,有利于大鼠肝前体细胞系的生长和增殖,同时这和AKT/m TOR信号途径的抑制及HO-1的表达增加有关。

前列腺素D2在小鼠哮喘模型中表达水平的研究1606-1609

摘要：目的：探讨前列腺素D2在小鼠哮喘模型中的表达水平。方法：24只小鼠随机均分为四组：正常对照2周组,正常对照4周组,哮喘模型2周组,哮喘模型4周组。以卵白蛋白和氢氧化铝混悬液致敏,并予以卵白蛋白雾化激发建立哮喘小鼠模型。末次激发24h后,ELISA法检测其血清及支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中前列腺素D2水平;收集BALF行嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）计数;HE染色观察其肺组织病理改变。结果：与正常对照2周及4周组相比,哮喘模型组小鼠肺组织病理损害明显加重,EOS计数哮喘组显著高于正常组,差异有统计学意义（P〈0.05）,血清及BALF中的前列腺素D2水平明显高于正常组,差异有统计学意义（P〈0.01）,而且随着哮喘病程的延长,即哮喘模型4周组较2周组的肺组织病理损害更为严重,EOS计数升高更为显著,血清及BALF中的前列腺素D2增多更为明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。但正常对照4周组与2周组比较,未见明显变化。结论：炎性介质前列腺素D2水平在哮喘模型中有一定的表达水平,而且随着哮喘病程的延长,前列腺素D2表达水平也逐渐升高。

蜕皮激素诱导MIIP基因的表达对肝癌细胞增殖迁移的影响1610-1614

摘要：目的：探讨蜕皮激素诱导迁移侵袭抑制蛋白基因（migration and invasion inhibitory protein,MIIP）基因的表达对肝癌细胞SK-Hep-1增殖和迁移能力的影响。方法：采用PCR扩增MIIP基因,连入T载体测序正确后,插入到蜕皮激素可诱导真核表达载体p IND中。将p IND-MIIP和含蜕皮激素受体基因的表达载体p Vg RXR以脂质体转染法转染到SK-Hep-1中,经G418和Zeocin双抗生素筛选获得稳定转染细胞株。蜕皮激素Ponasterone A诱导后,采用Western blot检测MIIP表达,CCK-8实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移。结果：蜕皮激素诱导MIIP表达上调后,SK-Hep-1细胞的增殖能力显著下降（P〈0.05）,细胞的迁移能力明显减弱。结论：建立了MIIP基因可诱导表达系统,证实在肝癌细胞SK-Hep-1中MIIP过表达可抑制细胞的增殖及迁移能力。

一种从PAXgene全血RNA管内提取基因组DNA的方法1615-1618

摘要：目的：从同一生物样本同步提取RNA和DNA,能提高样本的利用率,而且对于基因组学、转录组学和表观遗传学检测数据之间的比对和匹配分析也十分重要。本研究在不影响RNA样品制备的前提下,建立一种从PAXgene全血RNA管内提取基因组DNA的方法。方法：取一定量PAXgene全血RNA管血液样本,使用QIAamp DNA试剂盒提取血细胞基因组DNA,系统优化提取过程中的离心参数、洗脱量以及初始血液样本量等实验参数,并对提取的基因组DNA质量进行检测。结果：用PAXgene全血RNA管3 m L血液样本能够提取出8.918±1.100μg基因组DNA,紫外分光光度计检测DNA样品的OD 260/280比值为1.89±0.09,琼脂糖凝胶电泳结果显示DNA样品完整无降解。结论：利用本方法提取的DNA样品能够满足下游DNA芯片、DNA甲基化测序等实验要求。该方法有助于从有限的临床血液样本中获取全面的遗传信息,并且提高后续不同实验方法所生成数据之间的可比性和匹配度。

激活Notch1通过促进自噬改善高温高湿条件下心肌缺血/再灌注损伤1623-1627

摘要：目的：明确Notch1通路在高温高湿条件下小鼠心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤中的作用及其潜在机制。方法：将成年C57小鼠随机分为（1）假手术组;（2）I/R组;（3）高温高湿组;（4）高温高湿＋I/R组;（5）高温高湿＋Jagged1（Notch1激动剂）＋I/R组;（6）高温高湿＋溶剂＋I/R组。采用超声心动图检测心功能,伊文氏蓝/2,3,5-三苯基氯化四氮唑双染法检测心肌梗死面积,Western blot检测Notch1细胞内段（Notch1 intracellular domain,Notch1 ICD）、Hairy和分裂增强子（Hairy and enhancer of split,Hes1）、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3）、Beclin1和p62的蛋白表达水平。结果：与假手术组对比,I/R组心功能下降,心肌梗死面积增加,Notch1 ICD、Hes1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1（p62相应降低）表达升高,而高温高湿组心功能下降,心肌梗死面积增加,Notch1 ICD、Hes1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1（p62相应升高）表达降低;和I/R组或高温高湿组对比,高温高湿＋I/R组心功能进一步下降,心肌梗死面积进一步增加,Notch1 ICD、Hes1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1（p62进一步升高）表达进一步降低;和高温高湿＋I/R组对比,加入Notch1激动剂Jagged1后,心功能提高,心肌梗死面积缩小,Notch1 ICD、Hes1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1（p62相应降低）表达升高。结论：激活Notch1通路可能通过促进自噬从而缓解高温高湿所致的心肌缺血/再灌注损伤。

模拟海拔4500米高原环境致大鼠肾脏适应性损伤的评估1628-1630

摘要：目的：探讨模拟海拔4500米高原环境致大鼠肾适应性损伤的情况。方法：通过检测模拟海拔4500米高原环境下大鼠血清肌酐（Scr）、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）及尿蛋白,选择成年雄性SD大鼠130只,实验组80只大鼠通过低压氧舱模拟海拔4500米高原缺氧环境,对照组50只给予常规饲养,于0、14、28 d留取大鼠血液、尿液,测定Scr、NGAL及尿蛋白水平。结果：实验组14、28 d Scr、NGAL及尿蛋白水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）,实验组内28 d Scr、NGAL及尿蛋白水平均14 d下降趋势明显,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：急性缺氧早期大鼠肾发生一定适应性损伤,后期有所降低。

氟对人成骨细胞和小鼠骨组织caspase14表达影响1631-1634

摘要：目的：初步探讨氟对人成骨细胞saos-2和小鼠骨组织中caspase14表达的影响。方法：体外建立人成骨细胞染氟模型,以不加入氟入培养基者为空白对照,实验组培养基内分别含氟化钠5、10、20、40 mg/L。以氟化钠加入饮水中,建立小鼠染氟模型。应用Western blot法检测不同剂量氟（0、5、10、20、40 mg/L）对成骨细胞saos-2中caspase14的表达,再用免疫组织化学检测不同染氟剂量（0、50、100、150 mg/L）染氟小鼠骨骼上caspase14的表达情况。结果：Caspase14在成骨细胞saos-2中各实验组表达明显上调（均P〈0.01）,5 mg/L组表达最高。染氟小鼠模型骨组织中亦有表达,染氟组表达均高于对照组（均P〈0.05）,且有逐渐增高趋势。结论：Caspase14在染氟成骨细胞和骨组织中的高表达参与了氟诱导细胞凋亡的过程。

长期低浓度七氟醚吸入对雄性小鼠生殖功能的影响1635-1638

摘要：目的：探讨长期低浓度七氟醚吸入对雄性小鼠生殖功能的影响。方法：雄性C57小鼠20只随机分为吸醚组和对照组,吸醚组给予连续45 d,每天4 h吸入0.2%七氟醚。吸醚第36 d起每只雄性小鼠与4只雌性小鼠合笼交配。合笼结束后,雄性小鼠称重,计算睾丸指数,观察睾丸形态学变化,检测附睾精子活力和血清激素水平,统计子代小鼠数量和性别比例。结果：长期低浓度七氟醚吸入后雄性小鼠体重增长明显减少,精子活力显著降低,血清卵泡刺激素（FSH）,促黄体生成素（LH）,瘦素（LEP）显著升高,雄激素（T）水平无显著差异。雌性小鼠受孕率、子代数量及性别比例无显著差异。结论：长期低浓度七氟醚吸入对雄性小鼠具有一定的生殖毒性,影响其血清激素水平和精子活力,但受孕率和子代性别比无显著差异。

不同性别成年四川白兔血液生理生化指标的研究1639-1642

摘要：目的：为给成年四川白兔的肉质研究、保种育种、饲养管理和临床诊疗提供依据,从血液理化特性等方面研究四川白兔的种质特征。方法：选择健康成年四川白兔20只,雌雄各半,体重1.5~3 Kg,在普通环境中饲养观察一周,试验前禁食12h,自由饮水,清晨空腹耳缘静脉采血,采用全自动血液分析仪和全自动生化仪对成年四川白兔的血液生理生化指标进行测定,并将雌雄四川白兔血液生理生化指标进行比较。结果：血液生理指标中只有血小板表现为雌雄差异显著（P〈0.05）,其他指标均差异不显著（P〉0.05）;雌雄四川白兔生化指标中,碱性磷酸酶、总胆固醇、肌酐、差异显著（P〈0.05）,其他指标均差异不显著（P〉0.05）。结论：所测成年四川白兔各项血液生理生化指标雌雄间多数指标差异不显著,说明了成年四川白兔雌雄间多数生理生化值基本一致,不受性别因素的影响。

黄芪丹参不同配伍对气虚血瘀模型大鼠血液流变学和血管内皮因子的影响1643-1647

摘要：目的：研究黄芪丹参不同配伍对气虚血瘀证大鼠血液流变学和血管内皮因子的影响。方法：将SD大鼠随机分为对照组、模型组、丹参组、黄芪组、黄芪丹参1：1组、2：1组、4：1组,采用限食、游泳、皮下注射肾上腺素方法建立气虚血瘀证大鼠模型,对照组与模型组给予蒸馏水,用药组分别给予不同剂量的丹参、黄芪及不同比例黄芪丹参配伍灌胃给药治疗,连续27日。测定血液流变学指标,内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）、血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素-F1α（6-keto-PGF1α）含量。结果：模型组大鼠血液流变学参数和血管内皮因子与对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0.01）。与模型组比较,黄芪丹参1：1组、2：1组、4：1组血液流变学参数显著降低（P〈0.05或P〈0.01）,NO、6-keto-PGF1α、6-keto-PGF1α/TXB2明显升高（P〈0.01）,ET-1、TXB2明显降低（P〈0.01）。与1：1组比较,2：1组血液流变学参数显著下降（P〈0.05或P〈0.01）,NO、6-keto-PGF1α、6-keto-PGF1α/TXB2显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,TXB2明显降低（P〈0.05）。2：1组大鼠血液流变学参数和血管内皮因子与4：1组比较,差异具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：黄芪丹参配伍对气虚血瘀证大鼠模型具有改善血液流变及保护血管内皮作用,其中以黄芪丹参2：1组最佳。

现代生物医学进展杂志临床研究

盐酸达泊西汀联合他达拉非治疗原发性早泄的临床研究1648-1650

摘要：目的：探讨盐酸达泊西汀联合他达拉非治疗原发性早泄的疗效。方法：将100例患者随机分成治疗组和对照组,每组50例。治疗组口服他达拉非片5 mg,每天1次,性交前按需口服盐酸达泊西汀片30 mg。对照组只按需口服盐酸达泊西汀片30 mg。疗程2个月。治疗期间嘱患者进行规律的性生活,每周1-2次,并做好相关记录。治疗前后行阴道内射精潜伏期（intravaginal ejaculation latency,IELT）IELT测评、患者及配偶性生活满意度评分。结果：与治疗前相比,两组治疗后IELT、患者及配偶满意度均有明显改善,差异具有统计学意义（P〈0.05）。而且治疗后治疗组与对照组比较,治疗组的IELT、患者及配偶满意度改善更为明显,差异亦具有统计学意义（P〈0.05）。常见不良反应有颜面潮红、头晕、鼻塞,无需特殊处理,症状均自行缓解。结论：盐酸达泊西汀联合他达拉非治疗原发性早泄安全有效。

PHILOS钢板治疗老年肱骨近端冠状面骨折初探1651-1654

摘要：目的：探讨采用PHILOS钢板治疗肱骨近端冠状面骨折手术治疗的早期临床疗效。方法：对2005年4月至2014年5月我院收治的9例肱骨近端冠状面骨折患者予以切开复位钢内固定治疗,采用DASH评分,生活质量评价量表（SF-36）,Constant-Murley评分以及加利福尼亚洛杉矶大学肩关节评分（UCLA Score）对患者进行功能评价。结果：纳入患者平均年龄为63.5±3.2岁（53~82岁）,男性2例,女性7例,根据Neer分型,单纯二部分骨折5例,二部分骨折伴肩关节脱位4例。术后随访12~22个月,平均14.2±3.2个月。9例患者均得到随访。所有患者肱骨近端骨折均愈合,骨折愈合时间12~18周,平均12.7±2.5周,末次随访时,7例无明显肩关节疼痛,2例有轻微疼痛,Constant评分平均87.0±4.2分;DASH评分平均20.9±2.5分,加州大学肩关节评分系统（UCLA）平均31.3±2.1;SF-36评分平均分,影像学结果显示：末次随访肱骨头高度平均丢失1.7±0.4 mm,颈干角度平均为126±13°。结论：采用切开复位钢板内固定对于肱骨近端冠状面骨折早期临床疗效良好,远期疗效有待进一步评价。

超声弹性成像与超声造影对肝肿瘤的诊断效果对比1655-1658

摘要：目的：分析超声弹性成像与超声造影对肝肿瘤的诊断效果。方法：收集我院2015年3月至2016年3月收治的肝肿瘤患者76例,术前均行超声弹性成像和超声造影检查,比较超声弹性成像和超声造影与病理诊断（黄金标准）的结果。结果：超声弹性成像与病理检查结果比较无统计学差异（P〉0.05）;超声造影与病理检查结果无统计学差异（P〉0.05）;超声弹性成像和超声造影的敏感性、特异性、准确性无统计学差异（P〉0.05）。结论：超声弹性成像、超声造影对肝肿瘤诊断中均有重要价值,建议二者联合检测,提高肝肿瘤检出准确率。

电针内关对冠心病患者围术期细胞炎性因子的影响1659-1662

摘要：目的：探讨电针刺激内关穴对冠心病患者围术期细胞炎性因子的影响。方法：选取择期行开腹全子宫及双附件切除术的冠心病患者60例,并将患者随机分为E组（电针组）、C组（对照组）,E组用韩式电针刺激仪（HANS-B100B）在麻醉诱导前20 min开始针刺内关穴,并维持针刺至术毕,C组不做任何处理。两组患者分别记录插管前（T0）、插管后即刻（T1）、手术结束时（T2）、拔管后即刻（T3）、拔管后10 min（T4）时的血压（SBP）、平均动脉压（MAP）、心率（HR）,并留T0~T4时刻的静脉血,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α的水平。结果：两组患者组内比较：E组各时点SBP、HR、MAP较同组T0时点比较差异无统计学意义（P〉0.05）,C组T1-T4时点HR、SBP、MAP较同组T0时点明显升高（P〈0.05）;组间比较：E组T1-T4时HR、SBP、MAP、明显低于C组（P〈0.05）,E组患者T1~T4静脉血中的IL-1β、IL-6、TNF-α均明显低于C组（P〈0.05）。结论：电针刺激内关穴能抑制冠心病患者围术期的炎性反应改善心肌缺血,对心肌的保护作用显著。

炎症评分与晚期胰腺癌患者预后相关性研究1663-1666

摘要：目的：评估炎症评分对接受放化疗（CRT）的局部晚期胰腺癌患者的无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）的预测价值。方法：选取235例晚期胰腺癌患者,接受治疗前,所有患者均进行临床评估、实验室检查和影像学检查。比较两组患者的PFS和OS;评估与患者预后差、肿瘤减少率、6个月内肿瘤转移相关的预测因子。结果：患者平均PFS和OS分别为10.2个月和18.8个月。格拉斯哥预后评分（GPS）2、血浆纤维蛋白原（FIB）≥400 mg/d L为PFS和OS较差的的独立预测因素;小野寺预后营养指数（OPNI）是CRT后肿瘤减少率提高的预测因子（P〈0.05）;GPS 2、FIB≥400 mg/d L的患者的早期转移发生率显著提高（P〈0.05）。结论：格拉斯哥预后评分、纤维蛋白原、小野寺预后营养指数是评估接受放化疗治疗的局部晚期胰腺癌患者有效的治疗和预后预测因子。

高血压患者血压控制水平、血脂水平及颈动脉斑块与冠脉病变的关系1667-1670

摘要：目的：探讨血压控制水平、血脂水平和颈动脉斑块与高血压患者冠脉病变程度和病变支数的关系。方法：回顾性分析2014年01月至2016年05月收住于南京中医药大学附属江苏省中西医结合医院心血管科的原发性高血压患者273例,按血压控制水平分为达标组和未达标组。按颈动脉超声结果判断有无斑块,冠状动脉造影结果使用Gensini评分和病变支数表示,并检测血脂指标。结果：血压控制达标者130人（47.61%）,颈动脉有斑块者193例（70.70%）。与血压控制达标患者相比,血压控制不达标者冠脉病变支数及冠脉狭窄程度得分均明显增加（P〈0.05）。血压不达标合并斑块患者冠脉病变支数和狭窄程度与血压达标无斑块、血压达标合并斑块及血压不达标无斑块患者相比均明显增加（P〈0.001）。患者HDL-C水平与冠状动脉狭窄程度呈负相关（r=-0.139,P=0.022）,AI与冠状动脉狭窄程度呈正相关（r=0.136,P=0.025）,LDL/HDL-C和AI与冠脉病变支数均呈正相关,分别为（r=0.128,P=0.035）和（r=0.137,P=0.023）。结论：血压控制不佳,高血脂和颈动脉斑块形成可增加高血压患者冠脉病变的严重程度。

炎症性肠病患者的自主神经功能研究1671-1673

摘要：目的：探讨炎症性肠病患者的自主神经功能状态。方法：选取炎症性肠病（IBD）患者60例作为观察组,包括活动期溃疡性结肠炎（UC）37例,活动期克罗恩病（CD）23例,同期健康体检者50例作为对照组。交感神经功能采用握力试验以及卧立位血压差的方式进行检查;迷走神经功能则采用卧立位心率变化和Valsalva动作反应指数检查方法。结果：（1）观察组卧立位心率变化均值明显低于对照组,其中溃疡性结肠炎和克罗恩病心率变化均值均明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;溃疡性结肠炎与克罗恩病心率变化均值差异无统计学意义（P〉0.05）;溃疡性结肠炎和克罗恩病Valsalva动作反应指数与对照组相比差异无统计学意义（F=1.06,P〉0.05）。（2）观察组卧立位血压差均值明显高于对照组,握力试验的血压反应均值明显低于对照组,溃疡性结肠炎和克罗恩病卧立位血压差均值均明显低于对照组,握力试验的血压反应均值均明显低于对照组差异有统计学意义（P〈0.05）;而溃疡性结肠炎和克罗恩病卧立位血压差均值及血压反应均值比较均无统计学差异。结论：炎症性肠病患者存在自主神经功能紊乱,交感神经功能增强而迷走神经功能相对减弱。

神经节苷脂联合高压氧对重度脑外伤急性期患者凝血功能的影响及促醒作用1674-1677

摘要：目的：分析神经节苷脂联合高压氧对重度脑外伤急性期患者凝血功能的影响及促醒作用。方法：收集我院2014年2月至2015年2月收治的重度脑外伤急性期患者120例,对照组60例行常规治疗,研究组60例在常规治疗基础上联合神经节苷脂及高压氧治疗,比较两组治疗后内皮功能、凝血功能、Barthel指数及格拉斯哥加昏迷量表（GCS）评分变化,清醒时间、并发症及预后情况。结果：治疗后,研究组内皮功能明显优于对照组,D-二聚体（D-D）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）低于对照组,Barthel生活指数及GCS评分高于对照组,清醒时间短于对照组,并发症率低于对照组,预后良好率高于对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：神经节苷脂联合高压氧可有效改善重度脑外伤急性期患者的凝血功能,促进患者苏醒,改善患者的预后。