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摘要:目的:研究热休克蛋白60(HSP60)敲低对结肠癌SW480细胞增殖的影响,并进一步探究其作用机制。方法:通过含HSP60sh RNA载体的慢病毒感染加上流式细胞仪无菌分选的方法构建结肠SW480 HSP60基因稳定RNA干扰(RNAi)单克隆细胞系,利用Western blot和q-PCR验证结肠癌细胞中HSP60的敲低效率;使用CCK-8试剂检测结肠癌细胞增殖能力,并用流式细胞仪检测其HSP60敲低对细胞周期的影响。结果:Western blot和q-PCR结果验证了HSP60在结肠癌细胞中的敲低效率,与对照组细胞相比,实验组细胞HSP60的m RNA水平和蛋白水平均降低了60%以上。CCK-8实验结果表明,敲低HSP60后SW480细胞的增殖能力下降了约70%;流式细胞周期实验显示敲低HSP60后SW480细胞中G0/G1期、S期、G2/M期的分布比例变化不大。结论:敲低HSP60能够显著抑制SW480细胞的增殖能力,而SW480细胞周期并没有发生明显变化,推测HSP60的敲低引起的线粒体损伤导致细胞生长速度变慢。
摘要:目的:研究不同烟熏强度对SD大鼠骨骼肌组织抗氧化能力及氧化应激损伤的影响,探讨COPD骨骼肌功能障碍的机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、实验1组、实验2组、实验3组,每组各10只。实验1组、实验2组、实验3组分别给予4周、12周、20周的烟熏强度,烟熏结束后取大鼠双侧伸趾长肌,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)方法检测各组大鼠的伸趾长肌组织匀浆谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的浓度,伸趾长肌组织蛋白质提取液羰基化蛋白(PC)的浓度、伸趾长肌组织DNA中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)的含量。结果:与对照组相比,实验1组、实验2组、实验3组GSH、GSH/GSSG、SOD显著降低(P〈0.05 P〈0.01),GSSG显著升高(P〈0.05),实验1组GPx显著降低(P〈0.05),实验1组CAT显著升高(P〈0.05),实验2组、实验3组MDA、8-OHd G显著增高(P〈0.05 P〈0.01),实验3组PC显著增高(P〈0.05)。结论:烟熏可使大鼠骨骼肌组织抗氧化/氧化失衡,导致氧化应激损伤,并与烟熏强度相关。
摘要:目的:为构建大鼠压疮缺血-再灌注损伤模型提供简易模型装置及有效的造模方法。方法:自制简易压疮缺血-再灌注损伤模型装置,对120只雌性大鼠腿部近膝关节骨隆突处进行为期3日的压疮造模,5个循环/日,每个循环分别实现120 min的缺血期及30 min的再灌注期,分别于造模第1 d、2 d、3 d及造模结束第1 d观察大鼠病灶创面的颜色、形态、水肿、结痂、渗出以及大鼠行为学状况、并于造模结束第1 d统计存活率及成模率。结果:造模第1 d,Ⅰ期压疮100只,Ⅱ期压疮17只,死亡3只;造模第2 d,Ⅰ期压疮26只,Ⅱ期压疮84只,死亡7只;造模第3 d,Ⅰ期压疮11只,Ⅱ期压疮95只,死亡4只;造模结束第1 d,Ⅰ期压疮5只,Ⅱ期压疮101只,死亡0只。120只实验大鼠,共14只大鼠死亡,造模存活率达88.33%,Ⅱ期压疮造模成功率达84.17%。结论:本造模装置可有效制备大鼠压疮缺血-再灌注动物模型,具有接近临床,操作简便,无需麻醉,Ⅱ期压疮成模率较高、避免铁片植入带来的皮肤负损伤等优势,这将为皮肤压疮、乃至慢性损伤组织的机制研究、修复及愈合相关研究提供重要理论和实验依据。
摘要:目的:研究尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)在铁皮石斛不同组织中的表达情况,探讨其与石斛多糖累积的关系。方法:根据铁皮石斛原球茎转录组数据中的Do UGPase1序列设计引物,并利用RACE技术克隆该基因;用生信分析软件预测其蛋白结构,并进行系统发育分析;利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术研究该基因在铁皮石斛不同年份,不同组织中的表达。结果:通过RACE技术得到1个3054 bp基因,命名为Do UGPase1,其ORF长1530 bp,编码510个氨基酸残基,与油棕(Elaeis guineensis)和波斯枣(Phoenix dactylifera)有一定的同源性,且Do UGPase1在3年生的植株中相对表达量整体较高(P〈0.05)。结论:我们预测在铁皮石斛的生长发育过程中Do UGPase1基因与多糖累积的活跃程度成正比例。
摘要:目的:检测SOX2在胃癌组织中的表达,探讨SOX2对胃癌干细胞自我更新、增殖和转移能力的影响。方法:采用免疫组化检测SOX2在胃癌及癌旁组织中的表达情况。通过肿瘤球形成实验富集、分离胃癌干细胞。构建SOX2过表达慢病毒并感染胃癌干细胞中,通过实时定量PCR和western bolt检测感染慢病毒后胃癌干细胞中SOX2表达情况。分别利用肿瘤球形成实验检测SOX2对胃癌肿瘤干细胞自我更新能力的影响,CCK-8实验检测SOX2对胃癌干细胞增殖能力的影响,流式细胞术分析SOX2对胃癌干细胞的细胞周期的影响,Transwell实验检测SOX2对胃癌干细胞转移能力的影响。结果:SOX2在胃癌组织中表达显著低于癌旁组织。肿瘤球形成实验能够有效富集胃癌细胞SGC-7901和BGC-823的干细胞。慢病毒载体感染能够显著增强SOX2在胃癌干细胞中的表达。过表达SOX2能够抑制胃癌干细胞的自我更新、增殖和侵袭能力。结论:SOX2在胃癌中发挥抑癌基因的功能,其机制可能通过抑制肿瘤干细胞的自我更新、增殖和侵袭转移能力而抑制胃癌的发生发展。
摘要:目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast growth factor,b FGF)对热射病大鼠模型ET21、VWF、VEGF水平的影响。方法:选择SD大鼠36只随机分为6组,每组个6只,建立热射病大鼠模型后分为模型组、常温组、常温b FGF组、降温组、降温b FGF组,建模后0 h、2 h,比较不同级别生命征、血管功能因子。结果:建模后0 h,模型组Tr、HR、RR、MAP明显高于空白组(P〈0.05);建模后2 h,常温b FGF组、降温b FGF组明显低于常温组、降温组,降温组、降温b FGF组明显低于常温组、常温b FGF组(P〈0.05)。建模后0 h,模型组ET21、VWF的含量均明显高于空白组,VEGF含量明显低于热空白组(P〈0.05);建模后2 h,常温组ET21、VWF明显升高,VEGF明显降低,常温b FGF组、降温组、降温b FGF组ET21、VWF明显降低,VEGF明显升高(P〈0.05);降温组、降温b FGF组ET21、VWF明显低于常温组、常温b FGF组,VEGF明显高于常温组、常温b FGF组(P〈0.05);常温b FGF组、降温b FGF组ET21、VWF明显低于常温组与降温组,VEGF明显高于常温组与降温组(P〈0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子有助于改善热射病大鼠生命体征,调节血管功能因子含量,提高热射病大鼠预后。
摘要:目的:探讨易洛魁家族同源盒基因IRX1(Iroquois homeobox gene)在胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:收集4位胶质瘤患者的胶质瘤组织和癌旁/正常组织各1例,收集54例胶质瘤组织(WHO I级5例,II级16例,III级14例,IV级19例),采用PCR方法检测IRX1基因在胶质瘤细胞(U87、U373、LN229和T98G)中的表达,Western Blot检测4组同一患者来源的胶质瘤组织中IRX1的表达,免疫组织化学法(IHC)检测IRX1在胶质瘤组织中的表达及临床特征。结果:PCR结果表明以正常脑组织为对照,IRX1基因在多种胶质瘤细胞中均有表达(P〈0.05);Western Blot结果显示IRX1蛋白在胶质瘤组织中的表达显著高于癌旁组织或正常组织(P〈0.05);IHC结果显示IRX1蛋白在良性胶质瘤组织中主要定位于胞浆,而在恶性胶质瘤组织中定位于细胞核,且其表达量与胶质瘤的恶性程度相关,恶性程度越高,其在细胞核中的表达量越高(P〈0.05)。结论:IRX1可能参与调控恶性胶质瘤的发生发展过程,IRX1的表达与胶质瘤的恶性程度有关,暗示了IRX1可作为判断胶质瘤预后以及肿瘤靶向分子治疗的指标。
摘要:目的:探讨侧脑室注射orexin-A对大鼠昼夜摄食的影响。方法:将Wistar大鼠随机分组,采用单剂量侧脑室注射和连续侧脑室注射以及外周注射法,分别于日间和夜间给药,测量大鼠24小时内各阶段的摄食量以及相应生化指标。结果:在光照期间,侧脑室微量注射orexin-A,大鼠4小时内摄食量显著增加(P〈0.05),且呈剂量依赖关系(P〈0.05)。在夜间初期(18:00)侧脑室注射orexin-A,大鼠食物摄入量无显著差异(P〉0.05)。但在中午12:00给予侧脑室注射orexin-A,注射后4小时内大鼠摄食量显著高于NS对照组(P〈0.05)。连续8日给予orexin-A侧脑室注射,可使注射后日间摄食量显著增加(P〈0.05),而夜间摄食量显著减少(P〈0.05),但24小时内总的摄食量不变(P〉0.05)。orexin-A并未改变棕色脂肪组织温度、末梢血糖、血浆瘦素等指标的水平。结论:orexin-A对大鼠摄食的调节具有昼夜节律性。
摘要:目的:观察血糖波动对2型糖尿病大鼠心肌组织形态的影响并探讨其可能机制。方法:选取45只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,按随机数字法分成正常对照组(CON组)和糖尿病组(DM组)。DM组给予4周高糖高脂饲料喂养后,予小剂量链脲佐菌素35 mg/Kg腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。将成模大鼠按随机数字法分成糖尿病对照组(CDM组)和波动血糖组(FDM组)。FDM组大鼠每天定时皮下注射短效胰岛素并错时给予葡萄糖,建立糖尿病血糖波动模型,CON组、CDM组予等量生理盐水皮下注射。每周测血糖值2天,4次/天,动态观测各组大鼠外形、进食量、饮水量等变化。造模成功12周后取腹主动脉血测定糖化血红蛋白(Hb Alc),取大鼠心脏组织行Masson染色观察心肌纤维化水平,免疫印记法分别检测心肌组织AKT、p-AKT蛋白的表达,免疫组织化学法分析各组大鼠心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达。结果:(1)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠Hb A1c、血糖变异系数(CV)水平升高,差异具有统计学意义(P〈0.05);与CDM组相比,FDM组Hb A1c水平差异无统计学意义(P〉0.05),CV值进一步升高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。(2)与CON组相比,CDM组、FDM组大鼠心肌组织形心肌纤维化水平升高,差异具有统计学意义(P〈0.05);与CDM组相比,FDM组心肌组织心肌纤维化水平进一步升高,差异具有统计学意义(P〈0.05)。(3)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌p-AKT蛋白表达水平均减少,差异具有统计学意义(P〈0.05);与CDM组相比,FDM组p-AKT蛋白表达水平均进一步减少,差异具有统计学意义(P〈0.05)。而三组大鼠心肌组织AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P〉0.05)。(4)与CON组相比,FDM组、CDM组大鼠心肌Caspase-3蛋白表达水平均升高,差异具有统计学意义(P〈0.05);与CDM组相比,FDM组Caspase-3蛋白表达水平进一步升�
摘要:目的:探讨外源精胺在柯萨奇B3病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)诱导的乳鼠心肌细胞损伤中的保护作用及其调控机制。方法:CVB3感染原代培养的乳鼠心肌细胞,将细胞随机分为3组:对照(control)组;病毒感染(CVB3)组;精胺干预(CVB3+Sp)组。MTT试剂检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、GRP78、CHOP、Caspase-12、p-PERK、PERK、p-e IF2α和e IF2α的蛋白表达。结果:与control组相比,CVB3组的细胞增殖率显著降低(P〈0.05);凋亡率显著增加(P〈0.05);Bcl-2的表达下调,Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达增加(P〈0.05);GRP78、CHOP和Caspase-12的表达显著上调(P〈0.05);p-PERK和p-e IF2α的表达显著上调(P〈0.05)。与CVB3组相比,CVB3+Sp组的细胞增殖率显著上升(P〈0.05);凋亡率显著下降(P〈0.05);Bcl-2的表达上调,Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达下调(P〈0.05);GRP78、CHOP和Caspase-12的表达显著下调(P〈0.05);p-PERK和p-e IF2α的表达显著下调(P〈0.05)。结论:外源精胺可以缓解CVB3诱导的乳鼠心肌细胞增殖降低和细胞凋亡增多等损伤,这可能与精胺抑制PERK-e IF2α信号通路介导的内质网应激有关。
摘要:目的:比较抗精神病药物奥氮平联合复经颅磁刺激(r TMS)或改良电休克(MECT)治疗精神分裂症的疗效。方法:将84例精神分裂症患者随机分为r TMS组(42例)与MECT组(42例),两组分别在奥氮平的基础上联合MECT或r TMS进行治疗。在治疗2、4、8周末后,采用阳性症状和阴性症状量表PANSS、治疗时出现症状量表TESS评估临床治疗效果及不良反应,同时采用修订韦氏记忆量表(WMS-RC)和威斯康星卡片分类测验(WCST)评定认知功能。结果:治疗后,两组总有效率比较无统计学差异(P〉0.05)。两组治疗后PANSS总分、阳性症状、阴性症状和一般病理分值均显著低于治疗前(P〈0.05,P〈0.01),但组间比较无统计学差异(P〉0.05)。两组TESS评分及不良反应的发生情况比较无统计学差异(P〉0.05)。与治疗前相比,两组患者治疗后认知功能均显著改善(P〈0.05,P〈0.01),且r TMS联合组在改善患者记忆功能、执行能力方面效果优于MTCT组(P〈0.05)。结论:奥氮平联合MECT或r TMS对精神分裂症状的疗效相当,但联合r TMS可更显著改善患者的认知功能。
摘要:目的:研究和比较经皮椎体椎弓根固定术与开放手术治疗多椎体压缩性骨折的临床疗效及安全指标。方法:回顾性分析我科自2013.06至2015.06诊断为多椎体压缩性骨折并行内固定外科手术治疗的共计56例患者。根据手术方法的不同,分为实验组(经皮椎弓根固定组,32例)和对照组(开放手术固定组,24例)。对患者在术前即术后的各项临床指标进行随访和统计,对其VAS疼痛指标、JOA功能评分及患椎的前缘高度比进行比较。并比较两组患者的切口愈合,内固定松动等并发症。并比较两组患者的手术时间,出血量、下地时间等围手术期指标。结果:本次研究结果显示:经皮和开放椎体椎弓根固定术治疗的患者在术后及6月,12月的VAS及JOA评分中均获得了良好的改善,且两组之间并无统计学差异。在椎体前缘高度比值的比较中,术后开放组优于经皮固定组,但两者之间并无统计学差异。在并发症的比较中,经皮固定组显著优于开放手术组。在围手术期指标的比较中,经皮手术组在手术时间,出血量,下地时间等指标中都显著优于开放手术组。结论:对于多椎体压缩性骨折,经皮椎体椎弓根固定术能够达到与开放手术相似的临床治疗效果,但能够有效的减少并发症,并在手术时间,出血量,下地时间等指标中充分体现微创手术的优势。在多椎体骨折的治疗中可以进一步的进行推广。
摘要:目的:探究强骨胶囊对老年股骨头近段骨折延迟愈合患者血清骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及胰岛素生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选择我院收治的股骨近端骨折延迟愈合的老年患者41例,随机分为实验组及对照组。对照组19例予钙片;实验组22例予强骨胶囊。对比两组的临床疗效及治疗前后血清BMP-2及IGF-1水平的改变。结果:实验组总有效率(95.5%)高于对照组(78.9%),差异具备统计学意义(P〈0.05)。两组血清BMP-2及IGF-1水平均较治疗前显著升高(P〈0.05),且实验组血清BMP-2和IGF-1水平较对照组高(P〈0.05)。治疗后,两组血浆粘度均下降、骨密度值(BMD)均升高(P〈0.05);与对照组相较,实验组血浆粘度降低、BMD较高(P〈0.05)。结论:强骨胶囊能够有效改善老年股骨头近段骨折延迟愈合,促进骨折断端的愈合,推测其机制与增加患者血清BMP-2及IGF-1水平有关。
摘要:目的:探讨观察儿童朗格汉斯细胞组织增生症临床治疗方案和效果。方法:选取我院2007年4月-2014年11月收治的儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症65例,按随机数字表法分为观察组(32例)和对照组(33例)。对照组给予朗格汉斯细胞组织细胞增生症-III(LCH-III)治疗方案,观察组给予难治性2008方案。观察两组患者临床疗效、复发率、并发症、生存率。结果:观察组完全缓解率显著高于对照组(P〈0.05),而两组患者的复发率和总有效率之间的差异无统计学意义(P〉0.05);两组治疗后9个月、12个月、24个月生存率差异无统计学意义(P〉0.05);观察组不良反应发生率为9.38%,对照组为24.24%,观察组稍低于对照组,但两组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:采用难治性2008方案治疗儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症较LCH-III方案疗效更佳,且远期生存率明显改善,还可减少不良反应,值得在临床治疗中推广应用。
摘要:目的:分析生物反馈联合电刺激对女性盆底功能障碍性疾病(PFD)的治疗效果。方法:选择2011年1月至2016年3月我院收治的1000例PFD患者为研究对象,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组各500例。实验组给予生物反馈联合电刺激,对照组给予功能性电刺激治疗。比较两组治疗前后盆底肌肉肌力分级的变化,测定盆底功能相关指标的改善及患者治疗前后排尿情况。结果:治疗后2组盆底肌力分级均呈明显上升趋势(Z=52.587,37.581;P〈0.001),且观察组改善效果优于对照组(Z=27.588,P〈0.001);治疗后实验组盆底肌肉肌力正常率高于对照组,差异有统计学意义(x2=68.323,P〈0.05);治疗后实验组最大收缩压、持续收缩压提升幅度较大,膀胱颈移动度明显减小,与对照组各项指标对比差异有统计学意义(P〈0.05),且治疗后两组排尿情况均有所好转,实验组效果优于对照组(P〈0.05)。结论:生物反馈联合电刺激对女性PFD具有较好的效果,能提高患者盆底最大收缩压、持续收缩压,减小膀胱颈移动度,改善患者排尿功能。
摘要:目的:探讨罗哌卡因复合舒芬太尼在潜伏期分娩镇痛中的应用效果。方法:择取2015年1月~2016年1月我院收治的产妇102例,随机分为A、B、C组,各组34例,A组产妇宫口开至1 cm时采取罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外自控分娩镇痛,B组产妇宫口开至3 cm时采取罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外自控分娩镇痛,C组产妇未采取分娩镇痛,比较两组第一产程潜伏期、活跃期及第二产程持续时间及宫缩时视觉模拟评分(VAS)评分,比较各组产妇出血量、新生儿体质量及胎儿娩出后1 min、5 min Apgar评分,记录各组治疗30 d后不良反应。结果:A组、B组第一产程潜伏期持续时间明显较C组延长,活跃期持续时间较C组明显缩短,差异有统计学意义(P〈0.05);A组产妇宫颈口开至2 cm和cm时VAS评分低于B组和C组,差异有统计学意义(P〈0.05);A组、B组产妇在活跃期、第二产程时VAS评分低于C组,差异有统计学意义(P〈0.05);各组产妇出血量、新生儿体质量、Apgar评分比较均无统计学意义(P〉0.05);C组抑郁症发生率均高于较A组和B组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:从产妇潜伏期开始应用罗哌卡因复合舒芬太尼进行分娩镇痛的效果较好,具有良好的应用价值。
摘要:目的:比较四种胃蛋白酶原检测试剂的性能。方法:使用Beckman Coulter AU5800全自动生化分析仪,采用免疫比浊法,对两种国产和两种进口蛋白酶原检测试剂的校准和质控、精密度、线性范围、检测灵敏度、前带反应影响和抗干扰能力进行比较。结果:四家公司的校准和质控指标均达到合格标准,两家进口试剂变异系数较小,在线性、准确性、灵敏度、前带反应等指标全面领先。结论:综合各项指标判断,目前使用的胃蛋白酶原检测试剂以两种进口产品性能为佳,国产品尚有一定差距。
摘要:目的:研究内镜下穿孔修补术对肝硬化合并消化道穿孔的临床疗效。方法:选择2010年1月-2015年12月在我院进行诊治的肝硬化合并消化道穿孔患者82例,随机分为观察组和对照组,各41例。观察组给予内镜下穿孔修补术治疗,对照组给予传统的手术切除治疗。观察两组的术中出血量、手术时间、术后住院时间和术后下床活动时间等围手术期指标;检测两组手术前和手术后的谷草转氨酶、谷丙转氨酶和γ-谷氨酰转移酶等肝功能指标;观察两组的并发症发生情况和生存情况。结果:观察组的术后出血量明显少于对照组(P〈0.05),术后住院时间和术后下床活动时间明显短于对照组(P〈0.05);两组治疗后的肝功能指标AST、ALT、γ-GT水平均比治疗前明显降低(P〈0.05),且观察组治疗后肝功能水平的下降幅度比对照组更为明显(P〈0.05);观察组的并发症发生率为4.88%(2/41),明显低于对照组的26.83%(11/41)(P〈0.05);观察组的平均生存时间和1年生存率均明显高于对照组(P〈0.05)。结论:内镜下穿孔修补术对肝硬化合并消化道穿孔患者手术创伤小,可促进肝功能的恢复,且术后并发症少,从而可改善患者的远期生存情况。