现代生物医学进展杂志 统计源期刊

现代生物医学进展 2016年第31期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志基础研究

miR-9在卵巢癌细胞上皮间质转化中的初步研究6001-6004

摘要：目的：研究miR-9在卵巢癌细胞上皮间质转化（EMT）中的作用。方法：上调或者下调miR-9后,在RNA水平上通过RT-qPCR检测卵巢癌细胞系SKOV3和A2780中上皮指标E-cadherin表达变化;在蛋白水平,通过western blotting方法检测2株细胞系中上皮指标E-cadherin和间质指标vimentin蛋白表达变化。生物信息学预测可能靶向E-cadherin 3’UTR的miR NA,双荧光素酶报告系统进一步验证miR-9靶向结合E-cadherin的3’UTR区。结果：上调miR-9后,卵巢癌细胞系中E-cadherin表达受到明显抑制,vimentin表达明显增加;反之,下调miR-9后,E-cadherin表达明显增高,vimentin表达明显降低。通过生物信息学预测发现miR-9可以直接靶向E-cadherin的3’UTR区,荧光素酶报告系统验证预测结果正确。结论：miR-9促进卵巢癌细胞上皮间质转化。

核质双向转运受体Importin13在翼状胬肉中的表达及意义6005-6009

摘要：目的：探讨核质双向转运蛋白Importin13（IPO13）在翼状胬肉中的表达及意义。方法：收集2015年1月至2015年6月在中南大学湘雅医院眼科门诊确诊为＂翼状胬肉＂并行手术切除患者标本5例作为翼状胬肉组,收集人正常球结膜组织5例作为人正常结膜组织组,采用免疫组织化学方法检测两组结膜上皮和翼状胬肉组织IPO13、核转录因子p63、ABCG2、CD133的表达。结果：IPO13及p63表达定位于结膜上皮和翼状胬肉组织上皮基底细胞核内,ABCG2表达定位于结膜上皮和翼状胬肉上皮基底细胞层细胞浆及细胞膜,CD133表达定位于结膜上皮和翼状胬肉上皮基底细胞层细胞膜。IPO13、p63、ABCG2及CD133在人正常结膜组织中均呈低表达（光密度OD值IPO13：0.43±0.30;p63：139.09±40.15;ABCG2：63.63±22.56;CD133：70.31±33.41）;在翼状胬肉中表达均明显增高（OD值IPO13：155.1±21.80;p63：617.35±87.43;ABCG2：214.03±34;CD133：201.05±46.38）。两组之间差异显著（IPO13：t’=15.87,P〈0.005;p63：t’=11.92,P〈0.005;ABCG2：t=8.15,P〈0.005;CD133：t=5.08,P〈0.005）。结论：IPO13、p63、ABCG2及CD133在翼状胬肉中高表达提示其可能在翼状胬肉异常增殖性病变中起着正向调控作用。

钛-载药纳米复合材料的组装及其性质的研究6010-6014

摘要：目的：构建一种能结合钛表面的载药纳米粒及钛-载药纳米复合材料的组装和性质研究。方法：（1）多巴胺修饰的非离子表面活性剂多巴胺-泊洛沙姆188（Dop-Poloxamer188）的合成和检测;（2）Dop-Poloxamer188作为表面活性剂、PLGA作为油相基质,制备纳米粒及纳米粒载药和表征;（3）钛片的预处理及钛片与修饰后的纳米粒的结合;（4）纳米粒修饰后的钛表面的表征。结果：新合成的Dop-Poloxamer188在285 nm左右有紫外吸收峰,说明多巴胺成功的修饰在Poloxamer188的两端;Dop-Poloxamer188能和PLGA制备出很好的纳米粒,平均粒径在110 nm左右,PDI小于0.1;多巴胺修饰的纳米粒与钛片通过简单的浸渍过程结合后,通过水接触角、场发射扫面电镜（Fe-SEM）、荧光显微镜、X射线光电子能谱（XPS）等仪器检测都显示多巴胺修饰的纳米粒成功且牢固的修饰在钛片表面。结论：成功达到钛表面的载药纳米粒修饰的目的,为钛种植体的载药系统提供了新的思路和方法。

大鼠内侧前额叶皮质内ERK1/2活化参与脊髓损伤后抑郁情绪6015-6018

摘要：目的：观察细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）的活化在脊髓损伤引起抑郁中的作用。方法：应用Western blot和行为药理学方法,观察脊髓损伤后（SCI）大鼠内侧前额叶皮质内（mPFC）ERK1/2及磷酸化-ERK1/2（p-ERK1/2）的表达情况及ERK1/2磷酸化抑制剂U0126对抑郁样行为的影响。结果：脊髓损伤后的第2天到第8周,SCI模型大鼠的BBB评分均显著低于假手术组,差异具有统计学意义（p〈0.05）。脊髓损伤后8周-12周,SCI模型大鼠强迫游泳不动时间与假手术组相比明显缩短,mPFC内pERK1/2蛋白表达水平明显升高,总ERK 1/2的蛋白水平则未见组间差异,而给予U0126的大鼠的不动时间与给药之前相比明显延长增加,mPFC内pERK1/2蛋白表达水平较SCI模型大鼠明显降低,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：内侧前额叶皮质内ERK1/2的激活参与了脊髓损伤后引起的突触可塑性,在相关的抑郁样行为的产生中发挥了重要的作用。

DLL4和VEGFR表达与肝细胞癌临床特征的相关性研究6019-6022

摘要：目的：探讨DLL4和血管内皮生长因子受体（Vascular Endothelial Growth Factor Receptor,VEGFR）基因表达与临床特征的相关性,为肝细胞癌的防治提供新的靶点。方法：采用荧光定量PCR检测DLL4和VEGFR基因的表达,DLL4与VEGFR基因表达的关系采用Spearman相关系数分析。DLL4与肝癌临床病理特征的相关性分析采用Knlskal-Wallis H方法。结果：DLL4和VEGRR在肝细胞癌组织中呈高表达,且VEGFR随着DLL4基因表达的升高而升高,呈正相关关系。DLL4基因的高表达与有无包膜、肿瘤结节数目、肿瘤直径、Edmondson-Steiner分级及有无静脉浸润均有显著的相关性（P〈0.05）。结论：DLL4和VEGFR在肝细胞癌组织中的高表达与临床病理特征均有显著相关性。

顺铂化疗对下丘脑、血浆ghrelin和orexin表达的影响6023-6027

摘要：目的：观察顺铂化疗对下丘脑、血浆ghrelin、orexin表达和摄食量的影响。方法：Real-time PCR、ELISA法观察顺铂对大鼠下丘脑、血浆ghrelin、orexin表达及摄食量的影响;19名接受顺铂经导管动脉灌注化疗（TAI）的肝细胞患者（HCC）,ELISA法检测化疗前和化疗后血浆ghrelin、orexin的变化,用直观类比标度（VAS）（0-10）评估食欲和摄食量。结果：每日腹腔注射顺铂6 mg/kg,1-5 d大鼠摄食量均显著减少（P〈0.05）,且1-4 d血浆酰化ghrelin显著降低（P〈0.05）,5d时浓度仍低于对照组,但无统计学意义。血浆非酰化ghrelin和总的血浆ghrelin没有明显变化（P〉0.05）,而1-5天血浆orexin水平均明显降低（P〈0.05）;顺铂注射1 d后,大鼠下丘脑ghreilin和orexin的mRNA表达量均显著减少（P〈0.05）,ghrelin mRNA变化持续3 d,orexin mRNA在化疗后5 d仍低于对照组（P〈0.05）;肝细胞癌患者化疗后1至8 d的摄食量明显降低,1 d和2 d时的血浆酰化ghrelin显著低于化疗前水平（P〈0.05）。3 d时逐渐恢复,化疗后3 d、4 d和7 d时血浆酰化ghrelin浓度与化疗前无统计学差异（P〉0.05）。血浆非酰化ghrelin和总的血浆ghrelin没有明显变化（P〉0.05）;化疗后1~4 d时血浆orexin浓度均显著降低（P〈0.05）,化疗后7 d时orexin基本恢复到化疗前水平（P〉0.05）。结论：顺铂可降低大鼠下丘脑和血浆ghrelin、orexin的mRNA表达,HCC的TAI会降低血浆酰化ghrelin、orexin、和摄食量。

氧化苦参碱对大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护机制研究6028-6030

摘要：目的：探讨氧化苦参碱（OMT）对大鼠缺血再灌注心肌损伤（MIRI）的保护机制。方法：随机将60只成年Wistar大鼠分成对照组、MIRI组和OMT组,每组20只,除对照组外,其他两组结扎30 min后松解结扎线灌注60 min。结扎前10 min,OMT组股静脉输入苦参注射液120 mg/kg,对照组、MIRI组则输入等容量生理盐水。造模后,记录两组心率（HR）、左心室收缩压（LVSP）、左室内压最大上升或下降速率（＋dp/dtmax或-dp/dtmin）及血清乳酸脱氢酶（LDH）,检测两组心肌组织中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）水平。结果：与MIRI组相比,OMT组HR、LVSP和＋dp/dtmax、-dp/dtmin均显著升高（P〈0.05）,且OMT组上述指标与对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。与MIRI组相比,OMT组的NO、NOS、SOD、GSH-PX水平均显著升高,而MDA、血清LDH水平显著降低,比较差异均有统计学意义（均P〈0.05）,且OMT组上述指标与对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论：OMT对MIRI大鼠具有心肌保护作用,其机制可能与提高抗氧自由基活性、改善微循环及舒张冠脉血管有关。

基于CRISPR/Cas9系统构建精准调控Wnt信号通路的表达载体及其效果的验证6031-6037

摘要：目的：构建基于CRISPR/cas9系统调控Wnt信号通路的载体,并在细胞水平验证其调控基因表达的效率。方法：选取Wnt信号中负性调控分子,设计并合成能够表达靶向上述分子gRNA的互补DNA克隆序列,BsmBI限制性内切酶酶切载体后,采用分子克隆的方法将上述序列克隆至目的载体lenti-sgRNA-Ms2-zeo,测序正确的克隆通过Lipofectamine2000与lenti-Ms2-P65-HSF1-Hygro和lenti-dcas9-VP64-blastine共同转染入293细胞;转染24h后收集细胞,qRt-PCR检测目的基因的表达。结果：筛选了Wnt信号通路中已知的19个负性调控基因;针对每个基因设计了两对gRNA序列,并构建了能够表达gRNA和MS2融合序列的载体,测序结果显示重组质粒的DNA序列与预期完全相符。随机挑选了4个表达载体与lenti-Ms2-P65-HSF1-Hygro和lenti-dcas9-VP64-blastine共转进入细胞,qPCR结果显示构建的目的载体联合lenti-Ms2-P65-HSF1-Hygro和lenti-dcas9-VP64-blastine载体可以协同促进靶分子表达。结论：本研究成功构建了基于CRISPR/cas9基因编辑系统调控Wnt信号的载体。

CD11c在新生儿及成人指皮组织表达的免疫组织化学研究6038-6041

摘要：目的：研究新生儿及成人指皮组织CD11c阳性细胞的数量、形态和分布情况。方法：取7例尸检新生儿及5例成人无名指指皮组织样本,CD11c标记,行免疫组织化学染色,光镜观察阳性细胞的表达、分布情况并进行统计学分析。结果：人指皮组织中,CD11c阳性细胞和阳性突起呈棕褐色,胞体大小不等、形态多样;胞核呈圆形或椭圆形,突起长短粗细不等,可相互连接。阳性细胞呈散在或灶带状分布,灶带状分布常见于表皮乳头周围、血管神经分叉周围,血管外膜、环层小体被囊结缔组织内可见散在的CD11c阳性细胞。新生儿组CD11c阳性细胞的表达率为（31.0±9.4）%,高于成人组（6.0±2.7）%（P〈0.01）。结论：CD11c分子可能也是人指皮组织细胞分化过程中的阶段性标志物,其表达量的降低与年龄的增长有关。

PACE4对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制6042-6046

摘要：目的：研究前体蛋白转化酶枯草溶菌素（PACE4）对异丙肾上腺素（ISO）诱导的心肌细胞凋亡的作用及其可能的作用机制。方法：构建pFLAG-PACE4重组表达载体并转染H9c2心肌细胞。将心肌细胞分为四组：正常对照组（无任何干预因素）、ISO组（10μmol/L ISO）、ISO＋pFLAG组（空载质粒pFLAG转染＋10μmol/LISO）、ISO＋pFLAG-PACE4组（pFLAG-PACE4重组表达质粒转染＋10μmol/LISO）。采用AnnexinV-FITC/PI双染法测定心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测活性半胱氨酸蛋白酶（caspase）-3、caspase-12、钙网蛋白、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、活化转录因子4（ATF4）和PERK的表达以及真核起始因子2α（eIF2α）的磷酸化水平。结果：与正常对照组相比,ISO组中PACE4表达水平明显降低,而转染pFLAG-PACE4质粒后,其表达水平显著增加。PACE4过表达可以显著抑制ISO诱导的细胞凋亡和caspase-3以及caspase-12的蛋白表达。ISO处理显著增加内质网应激分子钙网蛋白、GRP78和CHOP的表达,而PACE4过表达则可以抑制这些蛋白的表达。ISO诱导的PERK、eIF2α和ATF4的表达可以显著被PACE4过表达抑制。结论：PACE4过表达可以抑制ISO诱导的H9c2心肌细胞凋亡,其机制可能与PERK信号通路介导的内质网应激反应有关。

现代生物医学进展杂志临床研究

胸腔镜肺癌根治术与开胸肺癌根治术对肺癌患者临床疗效的影响及机制6047-6050

摘要：目的：比较胸腔镜肺癌根治术和传统开胸肺癌根治术治疗肺癌的临床疗效并探讨其可能作用机制。方法：选取2011年3月至2015年3月于本院进行肺癌根治术的120例患者为研究对象,随机分为观察组（胸腔镜手术组）60例与对照组（开胸手术组）60例,比较两组的手术时间、术中出血量、术后引流量和引流管留置时间;并比较两组患者术前1 d及术后1 d、3 d、7 d的血清炎症因子和疼痛物质水平的变化。结果：两组患者在手术时间、手术出血量和术后引流等临床指标方面差异无明显统计学意义（P〉0.05）;两组肺癌患者术前1 d的血清炎症因子和疼痛物质水平比较无明显统计学意义（P〉0.05）,而术后1 d、3 d及7 d胸腔镜手术组的细胞炎症因子及疼痛物质血清表达水平均低于对照组（P〈0.05）,血液流变指标较小,存在显著差异（P〈0.05）。结论：相较于传统开胸根治术,胸腔镜肺癌根治术不仅减少了患者体表创口,亦减小了患者的炎症反应和应激反应,且对血液循环的影响亦较小。

2型糖尿病合并高血压患者发生心房颤动的相关因素分析6051-6054

摘要：目的：探讨2型糖尿病合并高血压住院患者发生心房颤动的相关因素。方法：选取我院收治的2型糖尿病合并高血压发生心房颤动的患者112例为研究对象（房颤组,n=112例）,同期选取与房颤组年龄及性别相匹配的未发生房颤的2型糖尿病合并高血压患者150例为对照组（n=150例）,比较两组患者的一般临床资料、实验室检查指标等的差异,用Logistic回归方程分析患者并发房颤的相关因素。结果：与对照组比较,房颤组患者收缩压（SBP）较高,高血压比例高、服用ACEI/ARB类药物偏低（P〈0.05）、左室射血分数（LVEF）偏低（P〈0.05）、左房内径（LAD）长（P〈0.05）、甘油三酯（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1c）、血肌酐（Scr）、B型脑钠肽（BNP）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、尿酸均较高（P〈0.05）;多因素Logistic回归方程分析提示：LAD、HbA1c、BNP、hs-CRP、尿酸是患者并发房颤的独立危险因素（P〈0.05）,而服用ACEI/ARB类药物为保护性因素。结论：LAD、HbA1c、BNP、hs-CRP、尿酸均可能是2型糖尿病合并高血压患者发生心房颤动的独立危险因素。

microRNA-21表达水平对新疆地区食管癌患者早期诊断及预后评估的临床价值6055-6059

摘要：目的：探讨microRNA-21表达水平对新疆地区食管癌早期诊断及预后评估的临床价值。方法：收集我院收治的100例食管癌患者,其中哈萨克族患者50例,汉族患者50例,采用RT-PCR以及RT-qPCR的方法对患者血清microRNA-21表达水平进行检测并比较。结果：食管癌患者癌组织中microRNA-21表达水平均高于癌旁组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）;有淋巴结转移、ⅡB＋Ⅲ期、低分化癌组织中的miRNA-21相对表达量高于无淋巴结转移、I＋ⅡA期以及高分化癌组织患者,差异具有统计学意义（P〈0.05）;miRNA-21在不同民族、性别、年龄分组中表达无明显差异（P〉0.05）。结论：microRNA-21表达水平对新疆地区食管癌患者癌组织中表达水平较高,在有淋巴转移、ⅡB＋Ⅲ期以及低分化癌组织中表达水平较高,民族、性别以及年龄对microRNA-21水平的影响较小,因此microRNA-21检测对食管癌的早期诊断及预后判断具有指导意义。

完全性Kartagener综合征2例外科治疗及疗效评价6060-6064

摘要：目的：探讨Kartagener综合征的外科治疗及评价疗效。方法：回顾性分析2013年1月至2015年12月我院收治的Kartagener综合征的临床资料,2例患者年龄分别为27岁、20岁。1例为完全性Kartagener综合征,接受胸腔镜下左中下肺叶＋左上肺前段部分切除术,另1例为终末期Kartagener综合征,预计生存期不足两年,进行了双肺移植术。结果：两例手术均成功完成,例1术后康复出院,生活质量良好,肺功能得到改善,无咳嗽、咳痰;例2双肺移植手术顺利,术后加强抗感染处理,康复出院,随访23月,生活质量良好。结论：内科难治性的Kartagener综合征,肺部支气管扩张病灶局限,可行手术切除,效果较好,终末期患者可行双肺移植术,术后能获得长期生存。

贝那普利联合肾炎四味片对慢性肾小球肾炎患者临床疗效的影响及机制研究6065-6068

摘要：目的：探讨贝那普利联合肾炎四味片对慢性肾小球肾炎患者临床疗效的影响及其作用机制。方法：收集我院收治的慢性肾小球肾炎患者120例,随机分为观察组和对照组,每组各60例。对照组给予肾炎四味片治疗;观察组在对照组的基础上给予贝那普利片。治疗结束后,比较两组患者白细胞诱素1（Lkn-1）、尿酸、TNF-α、收缩压、舒张压、24小时蛋白尿水平的变化及临床总有效率。结果：与治疗前相比,两组患者治疗后Lkn-1、尿酸、TNF-α、收缩压、24小时蛋白尿水平均显著降低（P〈0.05）;与对照组比较,观察组患者Lkn-1、尿酸、TNF-α、收缩压、24小时蛋白尿水平较低（P〈0.05）,临床总有效率较高（P〈0.05）。结论：贝那普利联合肾炎四味片可有效治疗慢性肾小球肾炎,推测其机制与降低Lkn-1、尿酸、TNF-α、收缩压、24小时蛋白尿水平有关。

乌司他丁对慢性阻塞性肺疾病患者血清COX-2,PLA-2及肺功能的影响6069-6071

摘要：目的：探讨乌司他丁对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血清环氧合酶-2（COX-2）、磷脂酶A2（PLA-2）及肺功能的影响。方法：选取2015年1月至2016年1月我院收治的82例COPD患者,随机分为观察组和对照组。对照组患者采取COPD常规处理,观察组在对照组的基础上给予乌司他丁,检测两组患者治疗前后的COX-2、PLA-2以及肺功能指标FEV1、FVC及FEV1/FVC。结果：治疗前,观察组和对照组的COX-2、PLA-2水平均无统计学差异（P〉0.05）;治疗后,观察组和对照组的COX-2、PLA-2均比治疗前显著降低,且观察组低于同期对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。治疗前,两组患者各项肺功能指标均无统计学差异（P〉0.05）;治疗后,观察组的FEV1、FVC及FEV1/FVC均优于对照组（P〈0.05）。结论：乌司他丁能够有效降低COPD患者血清COX-2、PLA-2浓度,改善肺功能。

带腓肠腱膜的腓肠神经营养皮瓣修复KuwadeⅣ型跟腱缺损6072-6075

摘要：目的：回顾性分析带腓肠肌腱膜的腓肠神经营养皮瓣修复KuwadeⅣ型跟腱缺损的临床病例,探讨其手术注意事项及治疗经验。方法：总结2008年5月-2013年8月收治的KuwadeⅣ型跟腱缺损19例,应用带腓肠肌腱膜的腓肠神经营养皮瓣进行一期修复。7例为新鲜损伤,12例为陈旧性缺损。19例跟腱缺损均伴有皮肤及软组织坏死,皮肤缺损范围为4.0 cm×6.0 cm-6.0cm×12.0 cm,跟腱缺损长度为5-9 cm,术中皮瓣切取范围为6.0 cm×5.5 cm-12.0 cm×8.0cm,腓肠腱膜切取范围5.5 cm×6.0cm-10.0 cm×6.0 cm;供区游离植皮修复。客观性评价指标包括关节跖屈、背伸动度及形态学,主观性评价采用AOFAS评分。结果：术后17例跟腱功能重建良好,2例感染控制不良,跟腱移植体部分坏死。皮瓣完全成活13例,创面Ⅰ期愈合。2例术后6天皮瓣远端表皮坏死,经换药后愈合。2例术后10天皮瓣远端部分坏死,经局部皮瓣移位修复愈合,2例感染控制不良者,皮瓣未愈合,移植跟腱部分坏死,经再次清创后,行阔筋膜条修复术,局部皮瓣移位修复。术后19例均获随访,随访时间6~24个月,平均18个月。术后皮瓣略臃肿,但不影响穿鞋,行走功能恢复良好,术后1年AOFAS评分平均80.31分。结论：带腓肠肌腱膜的腓肠神经营养皮瓣用于治疗KuwadeⅣ型跟腱缺损,可以同时修复皮肤及跟腱缺损,是一种较为理想的一期修复方法。

阿托伐他汀对心肌梗死患者的保护作用及其机制研究6076-6079

摘要：目的：观察阿托伐他汀对心肌梗死患者的保护作用并探讨其可能的机制。方法：抽取我院2013年3月~2015年3月收治的急性心肌梗死（AMI）患者78例（标记为观察组）及行健康体检人员50例（标记为对照组）。采用随机双盲法将观察组患者分为常规组与治疗组各39例,常规组采取常规治疗,治疗组在常规组基础上加以阿托伐他汀口服,20 mg/次,治疗28 d,比较两组患者治疗前后血清炎症因子和血脂水平、心功能及不良事件的发生情况。结果：治疗前,观察组患者的血清IL-6、IL-8、CRP水平均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后,治疗组血清IL-6、IL-8、CRP、TC、TG、LDL-C水平均明显低于常规组,LVEF、CO水平明显高于常规组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。治疗28d,治疗组心律失常的发生率、死亡率分别为12.8%、2.6%,均显著低于常规组的38.5%、17.9%（P〈0.05）。结论：阿托伐他汀可有效改善急性心肌梗死患者的心功能,减少不良心血管事件,这可能与其降低血清IL-6、IL-8、CRP及血脂水平有关。