现代生物医学进展杂志 统计源期刊

现代生物医学进展 2016年第19期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志论著

KLF4siRNA慢病毒载体构建和鉴定3601-3604

摘要：目的：构建上皮锌指蛋白4（K rüppel-like factor 4,K L F 4）si R N A慢病毒载体并进行初步鉴定,为研究K L F 4在宫颈细胞癌中的分子机制奠定基础。方法：利用公用网站中提供的R N A干扰序列设计原则,设计4个R N A干扰靶点序列,合成含干扰序列的单链D N A oligo,然后退火配对产生双链,再通过其两端所含酶切位点直接连入酶切后的R N A i慢病毒载体上;将连接产物转入制备好的细菌感受态细胞,PC R鉴定阳性重组子后,送测序验证,测序结果经比对确认正确的克隆,制备编码慢病毒颗粒的重组病毒质粒及其两种辅助包装原件载体质粒,共转染293T细胞,收集富含慢病毒颗粒上清液,对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定并标定病毒滴度。收集上清液感染宫颈癌H e L a细胞,通过q R T-PC R及W estern B lot鉴定K L F 4 si R N A慢病毒干扰效果。结果：成功构建K L F 4 si R N A慢病毒载体。K L F 4 si R N A慢病毒感染H e L a细胞后,q R T-PC R及W estern B lot测定结果显示,K L F 4表达明显降低。结论：K L F 4 si R N A慢病毒载体构建及包装成功,可有效抑制K L F 4表达,为研究K L F 4生物学功能奠定基础。

聚四氟乙烯微针模具的性能考察3605-3609

摘要：目的：考察用聚四氟乙烯（PTFE）制作相转化水凝胶微针模具的性能。方法：聚四氟乙烯模具经过粉末的过筛、压制、烧结、制孔而得。实验制备了不同聚四氟乙烯粉料粒度、不聚四氟乙烯粉料用料量、不同生料板压制压力的聚四氟乙烯微针模具,向模具中浇注以PVA为基质的聚合物溶液,通过冷冻解冻制得相转化水凝胶微针,考察模具的孔径、载料量以及微针的揭膜难易程度和完形率。结果：80目以上细度的模具透光性能均一;随着聚四氟乙烯用料量的增加和生料板压制压力的增大,模具的孔径和载药量减小,揭膜更容易、完形率更高。结论：聚四氟乙烯模具的性能与其密度密切相关,密度越大的模具,蠕变的随意性越大,因而孔洞均一性下降,但是揭膜性能变好,完形率提高。这两个相反的趋势提示我们,四氟乙烯模具的优劣是相转化水凝胶微针中的第一个控制性因素,聚四氟乙烯是制作微针模具的可接受材料,有进一步研究的价值。

羟基磷灰石Zeta电位对其蛋白吸附性能的影响3610-3613

摘要：目的：为了寻找羟基磷灰石（HA）颗粒的蛋白吸附性能与其Zeta电位之间的关系,为研发具有优秀骨修复能力的HA材料提供理论依据。方法：本文采用水热反应法,合成了形状规则的带状HA颗粒,并采用SEM、BET、XRD对其进行表征。检测了HA颗粒在不同p H、PO_4^3-浓度中的Zeta电位;选择小牛血清白蛋白（BSA）、溶菌酶（LYS）两种蛋白作为模型蛋白,测试了HA颗粒在不同p H、PO_4^3-浓度环境中对BSA或LYS的吸附量。结果：随着吸附体系的p H值逐渐增大,HA颗粒表面负电性迅速增加,HA颗粒对BSA的吸附能力逐渐减弱,对LYS的吸附能力逐渐增强。随着吸附体系中PO_4^3-浓度逐渐增大,HA颗粒表面负电性呈先增大后减小的变化趋势,对BSA、LYS的吸附性能均逐渐减弱。结论：p H和PO_4^3-浓度的变化,都能引起HA颗粒Zeta电位的变化,前者引起静电作用类型、强度的变化而改变HA蛋白吸附性能;后者引入竞争吸附,蛋白吸附量随竞争离子浓度增多而逐渐减少。

血管紧张素Ⅱ持续皮下灌泵诱导Apo E^-/-小鼠建立腹主动脉瘤模型的探讨3614-3618

摘要：目的：探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）皮下灌泵诱导Apo E^-/-小鼠建立腹主动脉瘤模型的特点和可行性。方法：选取8-10周龄雄性Apo E-/-小鼠,通过植入式微量渗透释放泵皮下泵入AngⅡ（1000 ng/kg·min）,持续泵入28天;对照组小鼠泵入生理盐水28天。取材后,测量小鼠腹主动脉直径,固定包埋做石蜡切片进行HE及弹力纤维染色,用Real-time PCR方法检测腹主动脉中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和骨桥蛋白（OPN）的表达。结果：AngⅡ处理组小鼠成瘤率为80%,腹主动脉直径较生理盐水对照组明显增加（P〈0.05）;病理染色显示炎症细胞明显增多,弹力纤维断裂增多,胶原合成增多。小鼠腹主动脉α-SMA m RNA表达较对照组显著降低（P〈0.05）,而OPN m RNA表达较对照组明显增高（P〈0.05）。结论：通过AngⅡ连续灌注28天可以诱导Apo E^-/-小鼠发生腹主动脉瘤,腹主动脉平滑肌细胞由收缩型向分泌型转化可能作为小鼠腹主动脉瘤发生的鉴定及治疗靶点之一。

嗜热菌Anoxybacillus sp.产淀粉酶培养基优化及产酶条件研究3619-3624

摘要：目的：对产淀粉酶嗜热菌Anoxybacillus sp.菌株进行培养基优化及产酶条件研究,以便提高菌株的产酶能力,并为下一步菌株的诱变育种研究提供基础。方法：常规方法液体培养菌株,用平板初筛和DNS法复筛选择产淀粉酶能力较高的菌株;单因素筛选培养基最适的碳源、氮源、Ca^2＋浓度和Mg^2＋浓度,对单因素筛选的最佳碳源、氮源、Ca^2＋和Mg^2＋的三个较佳浓度进行四因素三水平正交试验优化培养基;对培养基不同p H值及不同培养温度进行培养条件研究。结果：产淀粉酶菌株筛选结果显示：六株菌中淀粉酶酶活力值最大的是菌株DL4,差异有统计学意义（P〈0.05）。培养基单因素筛选结果显示：最适碳源为麦芽糖、最适氮源为硝酸铵、最适Ca^2＋、Mg^2＋浓度均为0.02%,差异有统计学意义（P〈0.05）。培养基优化结果显示：C源0.1%,N源0.2%,Mg^2＋0.04%,Ca^2＋0.04%为最佳的培养基成分组合。产酶条件筛选结果显示：培养基p H值为6、培养温度为55℃时菌株产酶水平最高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：培养基的优化及最适的产酶条件能提高嗜热菌Anoxybacillus sp.DL4产淀粉酶能力,Ca^2＋、Mg^2＋离子对菌株产淀粉酶有促进作用。

变异性分化抗原簇44（CD44v17）对宫颈癌的临床诊断意义3625-3628

摘要：目的：探讨CD44v17对宫颈癌的临床诊断意义。方法：将CD44v17si RNA、CD44v17、生理盐水转染至传代后的人宫颈癌细胞。检测细胞转染后存活率;检测细胞凋亡率。在裸鼠左肩背部注入人宫颈癌细胞悬液,随机分为CD44v17组、CD44v17si RNA组、对照组。在CD44v17组、CD44v17si RNA组裸鼠瘤体内分别注入CD44v17病毒颗粒、CD44v17si RNA病毒颗粒。检测瘤体的质量与体积。选取疑有宫颈病变患者阴道镜下活检组织80例,正常宫颈组织15例、宫颈上皮内瘤变（CIN）I级组织l5例、CIN II级15例、CIN III级组织15例和宫颈癌组织20例。检测CD44v17在不同组织中的表达量。结果：CD44v17si RNA转染的宫颈癌细胞凋亡率（19.20±2.14%）高于CD44v17转染的宫颈癌细胞凋亡率（6.13±1.08%）（P〈0.05）。CD44v17组裸鼠瘤体质量（15.9±3.4）g高于对照组裸鼠瘤体质量（11.8±2.7）g（P〈0.05）。CD44v17在不同组织中的表达量,按正常宫颈、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级、宫颈癌发展过程呈递增趋势（P〈0.05）。结论：CD44v17能抑制宫颈癌细胞凋亡,促进宫颈癌细胞的生长、增殖。通过降低CD44v17表达量可能是遏制CIN向宫颈癌发展的一个手段。

胚胎肝细胞用于肝组织工程的体外培养研究3629-3633

摘要：目的：观察三维受控组装系统下,胚胎肝细胞在三维立体结构的体外生长状态,探讨胚胎肝细胞在肝组织工程中应用的可行性。方法：用清华大学机械工程系研制的＂三维受控组装系统＂,将第15 d小鼠胚胎肝细胞作为肝组织工程的种子细胞,与以明胶为主的复合材料混合,构建成复杂三维立体结构,观察其体外生长发育状态。对体外培养1周及4周的三维类肝组织标本进行苏木精-伊红（HE）染色,免疫组织化学方法检测甲胎蛋白（AFP）及白蛋白（ALB）的表达,并对体外培养4周的三维类肝组织用PAS显色法检测肝糖原表达。结果：HE染色结果显示体外培养的胚胎肝细胞在三维支架材料中,可形成含有类血管和肝组织样结构;体外培养1周的类肝组织AFP表达呈阳性,体外培养4周的三维类肝组织ALB表达呈阳性,PAS显色亦呈阳性。结论：在三维受控组装系统的构建下,呈立体状生长的胚胎肝细胞,可逐渐形成肝组织样结构,并显示一定的肝脏功能。

壳聚糖/有机累托石微球的合成及表征3634-3637

摘要：目的：以牛血清白蛋白（BSA）作为模型药物,制备壳聚糖/有机累托石复合物微球,建立一种安全有效的药物控释传递系统。方法：壳聚糖（CS）/有机累托石（OREC）和海藻酸钠,按照不同的混合比例交联,在Ca^2＋水溶液中包裹BSA而形成壳核结构的微球。采用傅立叶红外光谱（FTIR）、动态光散射（DLS）、原子力显微镜（AFM）、X-衍射（XRD）、扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）观察研究微球的形态、CS和OREC的插层结构、BSA的包封率和控释效果。结果：口光学显微镜和扫描电镜观察显示,形成了壳核结构的微球。傅里叶变换光谱和X-射线能量分散显示,OREC存在于微球中。小角X-射线衍射证实,CS链成功的插入OREC插层中。BSA的包封率和控释检测结果显示,与纯的CS/ALG形成的微球相比较,CO复合物所形成的微球药物释放率明显提高。结论：OREC-HTCC纳米粒子是良好的蛋白药物载体,具有包封率高、缓释效果好等优点,为CS-OREC作为潜在的药物给药系统的进一步应用提供科学依据。

黑木耳多糖提取物对肝纤维化大鼠肝功能及MPO,MDA,TGF-β的影响3638-3641

摘要：目的：探究黑木耳多糖提取物对肝纤维化大鼠血清髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）及转化生长因子β（TGF-β）的影响及肝功能的保护作用。方法：将健康的Wistar大鼠30只随机分为3组：对照组、模型组、黑木耳多糖提取物组,利用胆总管结扎术制备肝纤维化动物模型,术后分别用生理盐水0.1 m L/（kg·d）、黑木耳多糖提取物0.1 mg/（kg·d）灌胃1次/d。21 d后腹主动脉采血,测肝功能指标,取肝组织测MDA、MPO、TGF-β,Masson染色。结果：肝纤维化动物模型成功制备。黑木耳多糖提取物组总胆红素（STB）、谷氨酸转移酶（ALT）、天门冬氨酸转移酶（AST）、MPO、MDA较模型组明显降低,TGF-β含量降低。Masson染色可见：模型组肝小叶结构破坏,较对照组汇管区可见大面积胶原纤维的形成;黑木耳多糖提取物组肝细胞轻度水肿、肝索排列欠整齐,肝汇管区及各部位胶原纤维形成量略少。结论：黑木耳多糖提取物可减轻胆总管结扎大鼠脂质过氧化损伤,MPO含量使TGF-β因子释放减少,从而减少胶原纤维形成,减轻或延缓大鼠肝纤维化。

Girdin表达与非小细胞肺癌侵袭转移及预后的关系3642-3645

摘要：目的：探讨肌动蛋白结合蛋白Girdin与非小细胞肺癌（Non small cell lung cancer,NSCLC）侵袭转移的关系及其对预后的影响。方法：应用免疫组织化学法检测167例非小细胞肺癌患者的病理组织标本中Girdin蛋白和MMP-9的表达。结果：在167例组织标本中Girdin蛋白高表达率为38.9%,其表达水平与患者分期、淋巴结转移、远处转移及生存状况密切相关,差异有统计学意义（P〈0.05）,而与患者性别、年龄、吸烟指数、评分、病理类型及分化程度均无关（P均〉0.05）。Girdin蛋白的高表达往往伴有MMP-9的高表达,两者显著相关,且差异有统计学意义（P〈0.05）。Kaplan-Meier单因素生存分析显示Girdin高表达为非小细胞肺癌患者预后的不良因素（P〈0.05）。COX多因素回归分析显示Girdin的表达水平和分期是判断预后的独立指标（P〈0.05）。结论：Girdin蛋白在非小细胞肺癌的侵袭和转移中可能发挥着重要的作用,在判断非小细胞肺癌患者预后方面具有一定的价值。

紫草素对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响3646-3649

摘要：目的：观察紫草素对体外培养的人脑胶质瘤U251细胞的增殖和凋亡的影响。方法：应用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分别检测2.5、5、10μM/L的紫草素对U251细胞的体外抑杀作用以及凋亡诱导作用,进一步应用Western blot方法检测紫草素对凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达水平的影响。结果：紫草素对人U251胶质瘤细胞具有明显的增殖抑制作用,且呈一定的剂量依赖性和时间依赖性。紫草素可明显上调U251细胞Bax的表达,下调Bcl-2的表达,与对照组相比存在显著性差异（P〈0.05）。结论：紫草素对人胶质瘤U251细胞具有明显的抑制增殖和促进凋亡作用。

河南栽培罗勒和丁香罗勒的香气成分差异分析3650-3653

摘要：目的：分析河南栽培罗勒（Ocimum basilicum L.）和丁香罗勒（Ocimum gratissimum L.）成龄叶香气成分的差异。方法：于2015年7月在云南师范大学呈贡校区随机采取长势健壮、无病虫害的河南栽培罗勒和丁香罗勒的成龄叶（自下而上第5、6片叶）,采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）进行检测;根据峰面积归一化法测定各个组分的相对百分含量。结果：河南栽培罗勒中检出24种香气物质,丁香罗勒中有26种。其中,1,3-二甲氧基苯、石竹烯、乙苯等是2种罗勒共有的主要香气成分。香叶醛、β-蒎烯、薄荷二烯是河南罗勒的主要特有香味成分;蒿脑、桉树脑及异龙脑是丁香罗勒的特有成分。结论：河南栽培罗勒和丁香罗勒种的叶片中香气成分的种类和含量存在明显差异。

去甲斑蝥素对白血病Jurkat细胞增殖的影响3654-3657

摘要：目的：观察不同浓度去甲斑蝥素（NCTD）对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat增殖的影响。方法：体外培养的Jurkat细胞,用0、5、10、20、40 mg/LNCTD作用6、12、24、48、72 h后,通过倒置显微镜观察细胞形态、密度变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,确定其最佳作用浓度及时间。然后将细胞分为NCTD组、长春新碱组、NCTD＋长春新碱组,作用24、48、72 h后观察细胞形态、密度变化,MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：倒置显微镜显示：随NCTD浓度增加、作用时间延长,细胞形态不规则,胀大、固缩,分布稀疏,大量死亡;MTT法显示：随NCTD浓度增加、作用时间延长,细胞增殖抑制率渐升高,20 mg/L作用72 h时最高（59.24%）。NCTD组与长春新碱组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,NCTD＋长春新碱组抑制率（77.40%）明显高于NCTD组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：NCTD可以浓度和时间依赖性方式抑制Jurkat细胞的增殖,与长春新碱联合后作用增强。

现代生物医学进展杂志临床研究

43例HIV/AIDS患者抗病毒治疗情况分析3658-3660

摘要：目的：研究来第四军医大学唐都医院传染科就诊的人类免疫缺陷病毒/艾滋病（Human immunodeficiency virus/Acquired immuno deficiency syndrome,HIV/AIDS）患者感染状况及抗病毒治疗效果。方法：采用前瞻性随访研究的方法,收集来我院就诊的HIV/AIDS患者的基本信息,并对其实验室检查结果、治疗方案及后续随访结果进行分析。结果：随访观察的43例HIV/AIDS患者治疗前平均基线CD4^＋T淋巴细胞计数为（330.74±176.35）cells/μL,CD8^＋T淋巴细胞计数为（1177.80±321.49）cells/μL,CD4^＋,CD8^＋T淋巴细胞比值为0.30±0.19;治疗一年后平均CD4^＋T淋巴细胞计数为（482.74±217.77）cells/μL,CD8＋T淋巴细胞计数为（861.53±282.85）cells/μL,CD4^＋,CD8^＋T淋巴细胞比值为0.59±0.28。所有患者治疗一年后血浆HIV-RNA载量均达到检测限以下（〈500copies/m L）。结论：规范的抗病毒治疗对于改善HIV/AIDS患者预后至关重要;基线CD4＋T淋巴细胞计数越低,抗病毒治疗效果越差。

抽动障碍患儿实验室检查及其诊断意义的分析3661-3664

摘要：目的：统计抽动障碍住院患儿相关实验室检查,分析其对于抽动障碍诊断与鉴别诊断的意义。方法：抽取2013年1月至2014年9月在上海交通大学医学院附属新华医院中医科住院治疗的98例抽动障碍患儿各项主要实验室检查结果进行统计分析。结果：抗＂O＂异常率为17.35%,与对照组比较P〉0.05,铜蓝蛋白均值为0.2719±0.0477,与对照组比较P〉0.05,血沉异常率为4.08%,与对照组比较,P〉0.05。炎症因子均存在一定异常,异常率最高为IL-2r达14.29%,免疫球蛋白只有Ig M存在1例（1.02%）,T细胞亚群各项均存在异常,其中CD4/CD8异常率达25.51%,CD3异常率为12.24%。肝肾功能、血尿常规各项异常率统计基本正常,仅仅少数存在少量异常;结论：抗＂O＂、血沉和铜蓝蛋白等对TD的诊断和鉴别诊断具有重要意义,同时也应该关注患儿的免疫情况。肝肾功能、血尿常规等项目的监测对选择用药具有指导意义。

急性重症病毒性心肌炎的临床特征分析3665-3667

摘要：目的：探讨急性重症病毒性心肌炎的临床特征及心脏彩超和血清心肌损伤标志物对重症病毒性心肌炎的早期临床诊断价值。方法：回顾性分析2013年6月至2015年8月入住我院心脏科的临床诊断为急性心肌炎的患者27例,其中符合急性重症心肌炎诊断标准的患者10例,其余17例为非重症心肌炎,另选取10例入院检查后排除心血管疾病的患者为健康对照组。对三组患者的一般临床资料、心脏彩超结果及心肌损伤标志物结果进行分析,选取有统计学差异的指标行ROC曲线分析得出预测重症心肌炎的效能。结果：重症心肌炎组左室室间隔厚度、左室后壁厚度、左房内径、血浆B型尿钠肽较其余两组显著增高,进一步行ROC曲线分析提示左室室间隔厚度、左室后壁厚度预测重症心肌炎的敏感性分别为80%、70%,特异性均为94%,临界值分别为0.855 cm、0.875 cm。结论：急性心肌炎患者室壁厚度增加,当左室室间隔厚度〉0.855 cm或左室后壁厚度〉0.875 cm时需引起重视,警惕患者可能进展至重症病毒性心肌炎。

2D导航辅助经皮骶髂螺钉治疗骨盆后环骨折经验分析3668-3672

摘要：目的：观察C型臂透视2D导航引导下经皮骶髂螺钉治疗骨盆后环不稳定型骨折的手术安全性和临床效果。方法：2011年1月-2013年12月采用二维透视导航辅助经皮置入骶髂螺钉治疗C型（Tile分型）骨盆骨折患者22例,其中交通伤16例,坠落伤4例,重物砸伤2例。伤后就诊时间5 h~12d（平均20 h）。按照骨盆骨折Tile分型：B3.3型1例,C1.2型8例,C1.3型12例,C3.3型1例。其中伴有休克2例,腹部损伤3例,尿道损伤4例,脊柱损伤5例,骶神经损伤1例,胫骨骨折2例。结果：建立导航系统耗时13~30 min（平均18.50±6.20 min）,每枚螺钉置入耗时15~25 min（平均17.50±7.20 min）,置入每枚螺钉出血量约20 m L。所有患者螺钉置入位置均较满意,无穿透椎弓根或椎体骨皮质进入骶孔、骶管和前方的盆腔等现象出现,无伤口感染发生。采用Matta评分标准评价骨折复位情况：优15例,良5例,可2例。采用Majeed评分行功能评价：优13例,良6例,可3例。结论：采用导航下骶髂螺钉固定技术能够有效恢复骨盆后环稳定性,但需要手术者熟练掌握骨盆解剖结构及生物力学特点,有效增加手术准确性,避免副损伤。

现代生物医学进展杂志重要信息

美国《化学文摘》（2014年）收录本刊入库论文1030篇3672-3672

摘要：根据中国高校科技期刊研究会对外联络委员会、中国科学技术期刊编辑学会国际交流工作委员会国际检索系统咨询部（http：//www.cessp.org.cn/ch/index.aspx）日前所公布的统计结果显示,2014年美国《化学文摘（网络版）》共收录本刊《现代生物医学进展》论文入库1030篇,在1813种期刊中名列第5位（前四位分别是世界胃肠病学杂志2904篇、食品工业科技1699篇、中国中药杂志1281篇、食品科学1108篇）。