葛根素对极低频电磁辐射下HFSF细胞中MMP-2与COL1A1的影响
摘要：目的：研究葛根素对极低频电磁场（ELF-EMFs）诱导的人胚胎眼巩膜成纤维细胞（HFSFs）中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）与I型胶原（COL1Al）的影响。方法：体外培养HFSF细胞,并将其分为对照组、辐射组、葛根素组,通过明胶酶谱法检测MMP-2的活性,Western-Blot检测MMP-2、COL1A1蛋白的表达。结果：暴露于0.2 mT、50Hz的电磁辐射系统24 h后,HFSF细胞（辐照组）MMP-2酶活性较对照组增高20%,MMP-2蛋白表达升高45%,而COL1A1的蛋白表达下降40%,差异有统计学意义（P〈0.05）;而与辐射组比较,葛根素组HFSF细胞MMP-2酶活性下降33%,MMP-2蛋白表达降低44.1%,COL1A1蛋白升高80%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：极低频电磁辐射可提高HFSF细胞中MMP-2的活性与蛋白表达,抑制COL1Al的合成,葛根素可在一定程度上逆转这一作用。5-Aza-C对鼻咽癌细胞端粒长度及细胞增殖的影响
摘要：目的：研究去甲基化药物5-氮杂胞嘧啶核苷（5-Azacytidine,5-Aza-C）对鼻咽癌细胞端粒长度及细胞生长增殖的影响。方法：常规培养鼻咽癌CNE,CNE1,CNE2及5-8F细胞系,5-Aza-C处理鼻咽癌细胞后,甲基化测序聚合酶链反应（MSP）法检测亚端粒区D4Z4甲基化,端粒限制性片断检测端粒长度,CCK-8检测细胞增殖。结果：2.5μM浓度的5-Aza-C处理后,亚端粒区D4Z4序列的甲基化水平明显下降,约在15-20%之间,与处理前的甲基化水平（35-48%）有明显差异,差异均有统计学意义（P〈0.05）。在1μM和2.5μM浓度的5-Aza-C处理后,四种细胞的端粒长度明显缩短,长度在2-4.5kb之间,差异具有统计学意义（P〈0.05）。5μM的5-Aza-C处理72 h后,CNE,CNE1,CNE2和5-8F的生存率分别为51.27%,50.46%,48.85%,48.83%,10μM的5-aza C处理72h后,CNE,CNE1,CNE2和5-8F的生存率分别为31.64%,32.34%,30.01%,32.10%,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：5-Aza-C能缩短端粒长度,抑制鼻咽癌细胞生长增殖活性。超声微泡介导hVEGF165基因靶向转染糖尿病鼠缺血骨骼肌
摘要：目的：探讨超声介导微泡破裂法促进血管内皮生长因子（VEGF）基因在糖尿病鼠缺血骨骼肌内转染的作用,评估其转染效率和安全性。方法：建立糖尿病鼠缺血骨骼肌动物模型,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,观察接受超声及微泡治疗组h VEGF165基因在糖尿病鼠缺血骨骼肌内表达,并与对照组相比。同时取糖尿病鼠缺血骨骼肌进行HE染色行组织学检查。结果：在超声介导微泡破裂组内,h VEGF165基因表达明显增强（42.87±5.12）,与单纯接受质粒治疗组（5.02±1.21）和接受质粒和超声治疗组（8.16±2.43）相比,差异具有统计学意义（P〈0.001）,HE切片未发现肌组织结构的改变。结论：超声介导微泡破裂法能有效促进外源基因在糖尿病鼠缺血骨骼肌中表达,为糖尿病周围血管疾病的基因治疗提供了实验依据。黄芪水提取物促进小鼠胚胎干细胞向血管平滑肌细胞分化的实验研究
摘要：目的：研究黄芪水提取物（Astragalus radix extract,ARE）对小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cells,ESCs）来源的血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）分化的影响。方法：将ESCs直接接种到IV型胶原包被的培养皿中建立VSMC分化模型,向培养液中添加不同剂量ARE（对照组不添加ARE,ARE低剂量组60 g/m L ARE,ARE高剂量组（120 g/m L ARE）,将3组细胞连续培养14天。分别应用免疫荧光染色、实时定量PCR及Western Blot技术检测各组VSMC分化标志物表达情况。应用胆碱能受体激动剂卡巴可刺激各组细胞检测收缩反应。应用实时定量PCR技术检测调控VSMC分化的重要因子的变化。结果：与对照组相比,ARE处理后VSMC分化标志物表达显著增加,且呈剂量依赖性。ARE处理可提高VSMCs的收缩能力。此外,ARE处理后,转化生长因子（Transforming growth factor）的表达显著增加。结论：黄芪水提取物可能通过激活TGF-促进ESCs向VS MCs分化。丹参素抑制RANKL诱导的破骨细胞分化
摘要：目的：研究丹参素对RANKL诱导的破骨细胞分化的影响。方法：运用冲洗法从股骨、胫骨中获得小鼠骨髓源性单核巨噬细胞用于体外RANKL诱导的破骨细胞分化,同时,施加不同剂量的丹参素干预,经TRAP染色法在形态学上观察观,蛋白印迹法检测蛋白水平的变化,实时定量PCR检测m RNA水平变化来研究丹参素对RANKL诱导的骨髓源单核巨噬细胞破骨分化的影响。结果：1不同剂量丹参素干预组与对照组相比,TRAP阳性破骨细胞数量得到了明显抑制（P〈0.05）。2不同剂量丹参素干预组与对照组相比,磷酸化Akt的上调量被明显的降低。磷酸化p38 MAPK,JNK和ERK的变化则不明显。3不同剂量丹参素干预组与对照组相比,c-fos,TRAP,CTSK等参与破骨细胞分化的重要基因表达减少,NFATc1变化不明显。结论：丹参素通过下调磷酸化Akt水平的途径抑制了RANKL诱导的破骨细胞分化。蜂花烧烫伤膏对深Ⅱ度烧伤大鼠TNF-α、IL-10含量的影响
摘要：目的：探究蜂花烧烫膏对深Ⅱ度烧伤大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）含量的的影响。方法：采用沸水烧伤的方法,创建大鼠深Ⅱ度烧伤的模型,大鼠分成空白对照组、烧伤复苏组、京万红组和蜂花烧烫伤膏组。并检测烧伤后1、3、6、12、24、48 h六个时间点TNF-α和IL-10的含量变化。结果：与空白对照组比较,烧伤复苏组在烧伤后1 h血浆TNF-α、IL-10的含量明显升高,具有显著统计学意义（P〈0.01）,TNF-α的含量在12 h达峰值,IL-10的含量在24 h达峰值,之后逐渐下降,但仍保持较高水平。蜂花烧烫伤膏组与烧伤复苏组比较,血浆TNF-α的含量六个时间点明显减少,血浆IL-10的含量在1,3,6,12 h时间点变化趋势基本一致,在24,48 h低于烧伤复苏组,具有显著统计学意义（P〈0.01）;与京万红组血浆TNF-α、IL-10的含量对应时间点趋势基本一致,但含量差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：深Ⅱ度烧伤大鼠血浆TNF-α、IL-10含量有明显升高,蜂花烧烫伤膏可通过降低血浆TNF-α和升高IL-10水平而发挥抗炎作用。成体心脏干细胞经静脉移植后在心梗小鼠体内的分布研究
摘要：目的：观察心肌梗死小鼠静脉移植成体心脏干细胞后,细胞在小鼠体内各器官的分布情况。明确心梗后静脉移植成体心脏干细胞在小鼠体内的分布和归巢情况。方法：分离培养小鼠心脏成体干细胞,采用流式细胞仪鉴定细胞,通过亲脂性染料CM-DiI标记细胞后行小鼠急性心肌梗死模型建立和细胞移植,分别在细胞移植后7、14、8天取小鼠心脏、肝脏、脑、脊髓、肺脏,行冰冻切片,在荧光显微镜下观察移植细胞在各组织器官存活和分布情况。结果：成体心脏干细胞分离培养后呈贴壁生长,流式细胞仪检测显示细胞纯度〉80%。CM-DiI标记后荧光显微镜下观察可见标记的细胞胞浆胞核均被染成呈明亮的红色。心肌梗死后经静脉移植成体心脏干细胞,细胞在各组织中分布呈变化过程,7天时,在肺脏和肝脏分布较多,至14天和28天时,肺脏和肝脏分布减少,心脏分布逐渐增多,表现出向心脏的＂归巢＂现象,而脑和脊髓在28天的观察时间内分布较少。结论：采用CM-Di I标记心脏成体干细胞,操作简单,标记效果好,可用于短期的细胞体内追踪。小鼠心肌梗死后行经静脉成体心脏干细胞移植,28天后细胞在心脏的分布逐渐增多,表现出向心脏的＂归巢＂现象。过表达CREG抑制ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖
摘要：目的：探讨E1A激活基因阻遏子（Cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG）在氧化型低密度脂蛋白（Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL）引起的人血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell,VSMC）增殖中的作用及可能机制。方法：用60μg/m L ox-LDL处理人胸主动脉VSMC,在不同时间点（0 h,12 h,24 h,48 h）计数细胞并绘制生长曲线;在48 h时间点进行Brd U染色检测增殖细胞的比率;采用Western Blot检测各时间点CREG表达。通过向VSMC中转染携带CREG基因的质粒载体,筛选获得过表达CREG的VSMC（VSMCCREG）。进一步用ox-LDL处理VSMCCREG,采用前述方法绘制生长曲线、进行48 h时间点Brd U染色并检测CREG和磷酸化Erk1/2的表达。结果：与未经处理的对照组VSMC相比,ox-LDL处理的VMSC细胞总数及Brd U阳性细胞比率显著增加;并且,CREG表达随处理时间延长逐渐降低。此外,与ox-LDL处理的VSMC组相比,ox-LDL处理的VSMCCREG组细胞总数及Brd U阳性细胞比率均显著下降;并且CREG表达增加、磷酸化Erk1/2水平下降。结论：过表达CREG可能通过降低Erk1/2磷酸化抑制ox-LDL诱导的人VSMC增殖。脑利钠肽后处理对兔急性心肌梗死的保护作用
摘要：目的：脑利钠肽后处理对兔急性心肌梗死的保护作用及可能机制。方法：30只兔随机分为3组,每组10只,左冠状动脉的左室支缺血30分钟,再灌注120分钟。AMI（急性心肌梗死）组：再灌注期间静脉滴注生理盐水;BNP（脑利钠肽）组：再灌注期间静脉滴注rh BNP（重组人脑利钠肽）;BNP＋GLY（脑利钠肽＋格列苯脲）组：再灌注期间静脉滴注rh BNP,同时舌下静脉注射GLY。连续监测心电变化,统计再灌注120 min室性心动过速（VT）、心室颤动（VF）的发生率。心肌再灌注120 min后,分别测定SOD（超氧化物歧化酶）、MDA（丙二醛）、c Tn I（肌钙蛋白I）、CK-MB（肌酸激酶同工酶）。各组随机抽取2只兔,分别于再灌注1小时和2小时末取心尖组织,HE染色。结果：（1）再灌注心律失常：BNP组与AMI组比较,VT和VF发生率均明显升高（均为P〈0.01）;BNP＋GLY组与BNP组比较,VT和VF发生率均明显升高（均为P〈0.01）。（2）SOD、MDA、c Tn I和CK-MB水平：BNP组与AMI组比较,MDA、c Tn I和CK-MB均明显降低（均为P〈0.01）,而SOD明显升高（P〈0.01）;BNP＋GLY组与BNP组比较,MDA、c Tn I和CK-MB均明显升高（分别为P〈0.01,P〈0.05和P〈0.01）,而SOD明显降低（P〈0.01）。（3）心肌HE染色：AMI组和BNP＋GLY组心肌损伤明显,BNP组心肌损伤轻微。结论：脑利钠肽后处理对兔急性心肌梗死（缺血-再灌注损伤）具有保护作用,可能与KATP通道相关。不同移植物对兔前叉韧带重建术后血运变化的影响
摘要：目的：比较自体和同种异体半肌腱重建兔前叉韧带对血管生成的影响。方法：选择48只骨骼发育成熟的新西兰种属兔作为研究对象,将其随机分为自体组（A组）和异体组（B组）,每组24只,分别接受半肌腱重建前叉韧带手术。从手术日期开始,分别记录手术后第3周、第6周、第12周和第24周重建韧带的血管生成情况同时对血管生成数量进行定量。结果：手术后两组实验兔关节均无肿胀,关节囊无炎性反应发生。在手术后第3周,两组血管生成无明显差异（P〉0.05）;术后第6周和第12周,自体移植组新生血管数量明显高于异体移植组（P〈0.05）;术后第24周,异体组新生血管数量明显高于自体组（P〈0.05）。结论：在兔前叉韧带的重建过程中,异体移植物重建的血管生成速度和数量明显慢于自体移植物,提示在临床上选择自体移植物对术后恢复更理想。Fluvoxamine对危重症患者外周血单核细胞功能的影响
摘要：目的：研究sigma-1受体的激动剂fluvoxamine对危重症患者外周血单核细胞功能的影响。方法：收集健康体检者和危重症患者外周血,并采用淋巴细胞分离液离心,分离外周血单核细胞。将分离的单核细胞种植于96孔细胞培养板中,种植密度为106/孔。然后,加入不同的浓度的fluvoxamine,共培养24小时。在部分培养板中,同时加入1μM sigma-1受体拮抗剂BD1047。采用MTT、ELISA和荧光定量PCR分别检测体检者与危重患者外周血单核细胞的细胞活性、炎症因子TNF-α、IL-1β及抗炎因子IL-10水平的表达及fluvoxamine对细胞活性、炎症因子TNF-α、IL-1β及抗炎因子IL-10水平的影响;采用Western blot检测fluvoxamine对sigma-1受体表达的影响。结果：Fluvoxamine在极高剂量下才影响危重症患者外周单核细胞的活性。其IC50值为217.9μM（95%可区区间：188.5-251.8μM）。危重症患者的外周单核细胞分泌的促炎症因子TNF-α、IL-1β的水平明显高于健康体检患者,而fluvoxamine能够抑制危重症患者单核细胞中TNF-α、IL-1β等炎症因子的表达,促进抗炎症因子IL-10的表达。但是fluvoxamine对健康人群的细胞因子没有影响。经1μM BD1047预处理以后,fluvoxamine处理的单核细胞与未经fluvoxamine处理的细胞处于同样的活化状态。另外,fluvoxamine和BD1047并不影响sigma-1受体的表达。结论：Fluvoxamine能够抑制危重症患者的炎症活化状态,其效应可能与其激活sigma-1受体有关。基于三维彩色血管能量成像的子宫肌瘤射频消融的临床研究
摘要：目的：探讨三维彩色血管能量成像（three-dimensional color power angiography,3D-CPA）在射频消融（radiofrequency ablation,RFA）子宫肌瘤中的应用价值。方法：回顾性分析于我院行RFA治疗的48例子宫肌瘤患者,比较3D-CPA、CDFI（color Doppler flow imaging）两种方法指导下肌瘤血流分级、血管形态显示、初次消融时间、消融针数、完全消融率。根据超声造影（contrast-enhanced ultrasound,CEUS）结果对两组瘤体中消融不全的部分补充消融,记录两组的消融时间、消融针数并比较整个治疗过程的消融时间、消融针数。结果：3D-CPA、CDFI在显示血流分级、血管形态上差异有统计学意义（P〈0.05）。初次治疗后,3D-CPA组92.3%（21/24）瘤体无造影剂灌注,CDFI组有68.2%（15/22）瘤体无造影剂灌注。二者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。整体消融过程中两组瘤体均达到完全消融时,3D-CPA组消融时间为（22.42±0.68）min,消融针数为（5.04±0.27）针,而CDFI组消融时间为（27.0±2.34）min,消融针数为（6.09±0.46）针,两组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：基于3D-CPA可以显示子宫肌瘤内外血管数目、形态用以指导射频消融治疗子宫肌瘤的价值优于CDFI指导射频消融术。中药熏蒸联合推拿治疗腰椎间盘突出症的临床效果
摘要：目的：探讨中药熏蒸联合推拿治疗腰椎间盘突出症的临床效果。方法：选择2013年12月到2015年1月我院收治的112例腰椎间盘突出症患者为研究对象,根据治疗方法的不同分为研究组和对照组。对照组给予常规推拿治疗措施,研究组给予常规推拿措施联合中药熏蒸治疗。比较两组患者的住院时间,下肢放射痛、麻木、腰痛的发生率及临床疗效。结果：研究组患者的住院时间及下肢放射痛、麻木、腰痛的发生率均较对照组明显缩短或降低,其治疗总有效率为92.9%,显著高于对照组,均有统计学差异（P〈0.05）。结论：中药熏蒸联合推拿方法治疗腰椎间盘突出症的临床效果优于单一推拿治疗措施,可有效改善患者的临床症状,缩短疗程,提高治疗有效率,值得临床推广使用。枯草杆菌二联活菌制剂鼻饲给药治疗昏迷患者抗生素相关性腹泻的疗效观察
摘要：目的：研究枯草杆菌二联活菌制剂经鼻饲给药治疗昏迷患者抗生素相关性腹泻的临床疗效。方法：收集以2011年1月至2014年1月本院确诊的76例患抗生素相关性腹泻的昏迷患者作为研究对象,按随机数字表法分为对照组（38例）和试验组（38例）,对照组在基础治疗的基础上给予鼻饲蒙脱石散收敛止泻治疗,而试验组在对照组的基础上,同时给予枯草杆菌二联活菌胶囊（美常安）鼻饲给药治疗。对比治疗前后两组患者的症状改善情况以及粪便实验室检查指标,记录两组不良反应。结果：除治疗过程中死亡4例、意识转清停止鼻饲8例外,试验组33例,对照组31例完成试验。试验组治疗有效率明显高于对照组的（X2=2.627,P〈0.05）。给药第6d试验组的白细胞转阴率为81.8%,明显高于对照组的30%（P〈0.05）,给药第6 d及治疗后试验组的肠道菌群纠正率分别为84.2%、94.7%,明显高于对照组的41.2%、64.7%,差异均有统计学意义（P〈0.05）。对照组患者不良反应的发生率明显高于试验组（P〈0.05）。结论：枯草杆菌二联活菌制剂鼻饲给药可显著改善昏迷患者抗生素相关性腹泻的症状,使肠道菌群更快得以纠正、缓解使肠道炎症,且安全性高,值得临床推广使用。创伤性椎体骨折行椎体成形术后复发的危险因素评估
摘要：目的：对创伤性椎体骨折患者使用椎体成形术治疗后可能再次引起骨折的多个因素进行评估。方法：选取本院收治的经皮椎体成形术（Percutaneous vertebroplasty,PVP）或经皮椎体后凸成形术（Percutaneous kyphoplasty,PKP）治疗的患者161例,其中再次发生骨折的患者113例（131椎）,根据治疗方法（PVP或PKP）和再次发生骨折的部位（手术椎体或非手术椎体）不同,将患者分成A1和A2（再发骨折部位是手术椎体）、B1和B2（骨折部位为非手术椎体）、C1和C2（手术椎体和非手术椎体）以及D组（未再次发生骨折）共七组,A1,B1,C1三组使用PVP,A2,B2,C2三组使用PKP,记录各组患者可能导致再发骨折风险的因素并和D组比较,分析PVP或PKP治疗后椎体再次发生骨折的高危因素。结果：患者身高、体重、年龄等一系列因素之间的差异没有统计学意义（P〉0.05）;而骨水泥注入的体积在再发骨折患者和D组之间差异有统计学意义（P〈0.05）;椎间盘骨水泥是否渗透和是否使用抗骨质疏松药物治疗的差异有统计学意义（P〈0.05）;再发骨折患者和D组患者25-（OH）D的浓度之间的差异有统计学意义（P〈0.05）。多因素Logistic分析显示,椎间盘水泥渗透、低浓度的25-（OH）D和未使用抗骨质疏松药物治疗是椎体成形术治疗后复发骨折的危险因素（P〈0.05）。结论：PVP或PKP治疗后椎体再次发生骨折的三个危险因素是椎间盘骨水泥渗透、较低的25-（OH）D浓度和未使用抗骨质疏松药物治疗。慢性支气管炎住院患者机械通气的危险因素分析
摘要：目的：分析慢性支气管炎住院患者进行辅助机械通气的危险因素。方法：采取回顾性统计分析方法,收集2009-2014年5年中共1746例慢性支气管炎住院患者的临床资料,应用SPSS 17软件分组对年龄、性别、肺气肿、慢性肺源性心脏病、肺性脑病、肺大泡、肺炎、支气管扩张、哮喘、冠心病、高血压病、糖尿病、低蛋白血症、贫血、肝功能异常、肾功能异常等因素进行卡方检验及危险因素分析。结果：1746慢性支气管炎患者中,进行辅助机械通气治疗者626人（无创辅助通气613人、有创辅助通气187人）,未进行辅助机械通气治疗者1120人。辅助机械通气治疗者中有439人单纯行无创辅助通气、13人单纯行有创辅助通气、174人为两种通气方式序贯。统计分析显示：高龄（〉65岁）、慢性肺气肿、慢性肺源性心脏病、肺性脑病、糖尿病、低蛋白血症、肝功能异常、肾功能异常是慢性支气管炎患者行无创辅助通气的危险因素（OR〉1,P〈0.05）;高龄（〉65岁）、男性、慢性肺源性心脏病、肺性脑病、肺炎、糖尿病、低蛋白血症、贫血、肝功能异常、肾功能异常是慢性支气管炎患者行有创辅助通气的危险因素（OR〉1,P〈0.05）。结论：高龄、性别以及一些肺内外合并疾病是慢性支气管炎住院患者行辅助通气的危险因素,提示在临床工作中对这一类患者加强教育、积极控制合并症具有重要的意义。醋酸钙联合左卡尼汀对维持性血液透析患者钙磷代谢的影响
摘要：目的：研究并评价醋酸钙联合左卡尼汀对维持性血液透析患者钙磷代谢的影响,为临床治疗提供参考依据。方法：以2013年8月至2015年2月在我院进行维持性血液透析的50例患者作为研究对象,按照随机法分为两组,其中对照组患者给予醋酸钙治疗,研究组患者给予醋酸钙联合左卡尼汀治疗,比较两组患者治疗前后全段甲状旁腺素、血钙、血磷、钙磷乘积的变化。结果：与对照组比较,研究组患者全段甲状旁腺素、血钙、血磷、钙磷乘积水平均在正常范围内,较对照组有明显改善（P〈0.05）;研究组全段甲状旁腺素、血钙、血磷、钙磷乘积达标率分别为68.00%、84.00%、64.00%、80.00%,与对照组比较,血磷达标率不具有统计学差异（P〉0.05）;全段甲状旁腺素、血钙及钙磷乘积达标率差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：醋酸钙联合左卡尼汀对维持性血液透析患者甲状旁腺素、钙磷代谢的改善效果较单用醋酸钙更佳。BMP-7在子痫前期肾脏损伤中的表达及临床意义
摘要：目的：探究BMP-7在子痫前期肾脏损伤中的表达及临床意义。方法：选取2012年3月到2013年12月我院妇产科收治的98例子痫前期肾脏损伤患者作为研究对象,以30例健康孕妇为对照,分别采用ELISA方法检测血液、尿液中BMP-7蛋白、尿β2微球蛋白（β2-MG）浓度,以苄索氯胺比浊法测定24 h尿蛋白定量。结果：1与对照组相比,子痫前期肾脏损伤患者尿液及血清BMP-7蛋白浓度显著降低（P〈0.05）;2随着病程进展,子痫前期组尿液血清BMP-7蛋白浓度、尿白蛋白定量、β2-MG显著升高（P〈0.05）;3子痫前期组尿液、血清BMP-7蛋白浓度分别与尿白蛋白定量、β2-MG成正相关（P〈0.05）。结论：子痫前期肾脏损伤患者血清BMP-7蛋白水平显著降低,可用于评估子痫前期肾脏损伤进展,对临床具有指导意义。
