鼠伤寒沙门氏菌诱导昆明小鼠肠道感染模型的建立
摘要：目的：建立鼠伤寒沙门氏菌诱导昆明小鼠肠道感染模型。方法：先用5 mg/mL链霉素预处理2 d,提高小鼠对鼠伤寒沙门氏菌的敏感性,然后正常饲养1 d,攻毒前禁水禁食4 h,再分别以不同剂量灌胃攻毒2次,间隔24 h。观察小鼠临床症状,并通过组织病理切片、透射电镜和免疫组织化学的方法,分别观察小鼠肠道组织病理变化、小肠上皮细胞超微结构变化及肠道淋巴细胞增殖状况。结果：攻毒后昆明小鼠会出现昏睡、食欲不振、寒颤,甚至死亡的现象,解剖后发现小鼠肠道充血膨胀。组织病理切片显示小鼠肠粘膜受损,小肠绒毛肿胀,排列杂乱,炎性细胞浸润;透射电镜观察超微结构显示小肠上皮细胞线粒体空泡化,嵴和膜发生融合消失,粗面内质网发生扩张;免疫组织化学的方法显示肠道感染后,淋巴结肿大,T淋巴细胞大量增殖。结论：该模型对探索鼠伤寒沙门氏菌引发肠炎的发病机制、病理生理、免疫等方面作用具有重要意义,并为特异性卵黄抗体被动免疫保护效果的后续评价奠定基础。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978-7-117-13344-9/R·13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述,充分体现了国际分子影像学的最新进展。FXR1真核表达载体的构建与表达及其对神经节苷脂浓度的影响
摘要：目的：构建脆性X相关基因1（FXR1）的真核表达载体并检测其对神经节苷脂（GM1）浓度的影响。方法：以pYESTrp3-FXR1为模板,利用PCR扩增FXR1基因,PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切后插入真核表达载体pcDNA3.1（-）中,获得的阳性克隆进一步酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1（-）-FXR1转染SH-SY5Y细胞后,采用Western blot检测FXR1的表达情况,同时采用ELISA试剂盒检测细胞内GM1的浓度。结果：PCR扩增产物为1.9 Kb的片段,与FXR1基因大小相符,阳性克隆经双酶切后获得两条分别为5.4 Kb和1.9 Kb的片段,测序结果与GeneBank中序列相同。构建成功的重组质粒pcDNA3.1（-）-FXR1转染SH-SY5Y细胞后,细胞中FXR1的表达增加,同时有效提高了细胞内GM1的浓度（P〈0.05）。结论：成功构建了真核表达载体pcDNA3.1（-）-FXR1,FXR1的表达增加可以提高SH-SY5Y细胞中的GM1浓度,这些为后续深入研究FXR1基因在神经组织发育中的调控功能及其在脆性X综合征（FXS）中的作用机制奠定了基础。229例流产绒毛染色体核型分析及两种长期培养方法比较
摘要：目的：探讨早期自然流产绒毛染色体核型分析在自然流产病因检测中的应用价值,并比较两种长期培养方法的差别。方法：选择孕早期自然流产的孕妇229例,在无菌条件下,从宫腔内取出绒毛,同时或单独经胰酶消化法与切碎贴壁法进行细胞培养,传代之后常规进行G显带,在显微镜下做核型分析。结果：229例流产胎儿绒毛,培养成功206例,成功率为89.96%。异常核型105例,异常率为50.97%,数目异常者101例,占异常核型的96.19%,以16三体最为多见。胰酶消化法的培养成功率及收获时间都显著优于直接贴壁法,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：自然流产绒毛染色体核型分析对流产查因具有实用价值。胰酶消化法较切碎贴壁法对流产绒毛长期培养及染色体核型分析更具实用性。PCR在HBV核酸定量检测中的应用
摘要：目的：探索一种简便定量分析系统,通过检测HBV携带者血清中的HBV X区DNA,fRNA和trRNA拷贝数,为提高隐匿性感染期低复制状态HBV检测效果提供可能。方法：从血清中提取HBV DNA和RNA,对Core区、X区DNA进行PCR扩增,使用半巢式PCR法对fRNA、trRNA在同一离心管中进行反转录并扩增,选取大小相近的质粒作为竞争模板对其进行定量。并对拉米夫定干预治疗14周前后的患者血清中HBV XDNA、Core DNA、fRNA和trRNA拷贝数进行检测与比较。所有检测结果均通过southern杂交进行验证。结果：建立了针对DNA的定量分析系统及针对RNA的RT-PCR定量分析系统,并且阐明了阿米夫定治疗前后HBV DNA和X区RNA结构和数量的变化。治疗前治疗后DNA和RNA的拷贝数均下降。Core DNA下降显著,为103-104倍,而XDNA拷贝数下降102倍。而fRNA和trRNA仅有小幅下降,为10倍左右。结论：可以通过竞争性PCR方法对血清中HBV DNA和RNA进行定量检测,以期为HBV病毒的诊断提供更充足依据。MMP-16与骨巨细胞瘤临床相关性的初步研究
摘要：目的：研究复发与未复发骨细胞瘤细胞中MMP-16的变化,初步探索MMP-16与骨巨细胞瘤复发之间的联系,进而讨论MMP-16对于骨巨细胞瘤的临床意义。方法：对临床中复发和未复发共50例骨巨细胞瘤患者切除的骨巨细胞瘤组织进行标本采集。首先应用免疫组化荧光染色直观观察复发组和未复发组骨巨细胞瘤组织中MMP-16的表达情况,再运用real-time PCR技术检测MMP-16 mRNA的表达情况,最后应用western blot技术测定MMP-16的含量。从形态、基因表达和蛋白三个方面全面比较复发组和未复发组骨巨细胞瘤组织中MMP-16的表达情况。结果：免疫组化结果显示复发组中MMP-16的表达要明显高于未复发组;real-timePCR结果显示复发组中的MMP-16 mRNA的表达量要明显高于未复发组;western blot结果显示复发组中MMP-16蛋白的表达量要高于未复发组（P〈0.05）。结论：MMP-16与骨巨细胞瘤存在密切联系,MMP-16的表达增强是骨巨细胞瘤的复发的重要标志,通过对MMP-16的测定对骨巨细胞瘤的预后判断和治疗方法的选择具有指导意义。新城疫病毒（NDV）D90抑制口腔鳞癌细胞系迁移和侵袭的研究
摘要：目的：证明NDV D90是否具有抑制口腔鳞癌细胞系迁移和侵袭的能力。方法：免疫荧光染色法检测D90对细胞微管和微丝形态的改变;Transwell法检测D90对HN-6细胞迁移和侵袭率的抑制作用;蛋白印迹法检测D90对于SP1、RECK、MMP-2和MMP-9表达的影响;明胶酶谱法用于检测MMP-2和MMP-9活性的改变。结果：实验结果表明,D90通过改变细胞的微管和微丝形态来抑制细胞的能动性;D90具有抑制HN-6细胞的迁移和侵袭的功能。同时,D90通过下调SP1和上调RECK的表达来抑制MMP-2和MMP-9的表达和活性。结论：NDV D90能够有效地抑制口腔鳞癌细胞系HN-6的迁移和侵袭,为一种新的抗肿瘤制剂提供了临床试验基础。兔肝VX2肿瘤射频消融术后残癌中基质金属蛋白酶9表达
摘要：目的：探讨兔肝脏VX2肿瘤射频消融术（radio-frequency ablation,RFA）后残余肿瘤组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达。方法：超声引导下将VX2肿瘤组织块接种于23只新西兰大白兔肝脏中,造模成功后随机分为5组,对照组（A组,n=3）,不行RFA治疗;余20只为实验组行RFA治疗,在超声引导下射频针插入肿瘤偏心位置,展开电极致损毁范围最大为肿瘤总体积的2/3,人为造成残存肿瘤组织。根据治疗结束后不同时间点分为4组：0小时组（B组,n=5）、术后1周组（C组,n=5）、术后2周组（D组,n=5）、术后4周组（E组,n=5）,行超声检查结束后处死大白兔,取肿瘤组织采取免疫组化法观察残存肿瘤组织中及未治疗肿瘤组中MMP-9的表达情况。结果：RFA术后0小时、1周、2周、4周残存肿瘤组织中MMP-9的表达均较对照组明显降低（P〈0.05）。结论：RFA治疗后残存肿瘤细胞中MMP-9水平表达减低。血管内皮生长因子（VEGF）乳液法电纺纤维膜的体外研究
摘要：目的：研究担载血管内皮生长因子（VEGF）的乳液法电纺纤维膜的亲水性能、外观形态和机械性能,纤维膜中VEGF的包封率和体外释放动力学,为评价其能否应用于血管再生领域的研究奠定基础。方法：将VEGF水溶液通过W/O乳液法制备成缓释VEGF的生物可降解的丙交酯-乙交酯共聚物（PLGA）静电纺丝纤维膜,对该纤维膜的接触角、外观形态、机械性能进行表征,Elisa法测定该纤维膜的体外14天的释放行为,分别观察纤维膜释放0天、7天、14天后的电镜图。结果：加入VEGF后,纤维膜的接触角由140.0°减小到136.1°,亲水性增强,具有类似细胞外基质（ECMs）网状结构和良好的力学性能,纤维膜第1天的突释不超过载药量的50%,电镜图下显示纤维膜释放1周时纤维发生断裂。结论：通过乳液法制备的担载VEGF的电纺纤维膜具有良好的物理性能,能够持续缓释VEGF,可作为血管再生的组织工程支架进行深入研究。周细胞覆盖率与胃癌侵袭相关性的分析
摘要：目的：探讨周细胞在胃癌血管周围的覆盖率是否可以作为判断胃癌预后的一个指标。方法：利用免疫组织化学双染的方法同时标记内皮细胞（抗CD34抗体）和周细胞（抗α-SMA抗体）,检测48例胃癌石蜡标本当中微血管壁周细胞覆盖率（microvessel pericyte coverage index,MPI）,应用SPSS11.5统计软件分析MPI与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、临床分期、以及脉管内是否有癌栓等临床病理参数之间的关系。结果：MPI与胃癌的分化程度呈正相关（P=0.002）,与脉管内是否有癌栓呈负相关（P=0.002）,而与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、临床分期、淋巴结转移等无关（P均〉0.05）。结论：利用免疫组织化学双染的方法可以清晰标记胃癌的微血管结构,血管的不成熟即周细胞覆盖率低成为胃癌患者预后差的重要因素。骨涎蛋白在大鼠磨牙第三期牙本质形成过程中的表达
摘要：目的：观察大鼠牙髓修复第三期牙本质形成过程中骨涎蛋白（bone sialoprotein,BSP）的表达变化及意义。方法：选取6周龄雄性Wistar大鼠10只,建立实验大鼠模型,利用免疫组化法检测大鼠第三期牙本质中骨涎蛋白的表达情况。结果：盖髓2周后,在盖髓处下方有第三期牙本质形成。与原发性牙本质（PD）相比,第三期牙本质小管数目少且形态不规则。BSP在原发性牙本质中没有表达,但在盖髓下方和髓角下第三期牙本质中都有表达。结论：BSP可能通过参与羟基磷灰石（HA）的形成以及调节新分化的成牙本质细胞向新形成的牙本质基质的粘附来参与早期的第三期牙本质的生成。丹皮酚对TNF-α诱导的人牙龈成纤维细胞黏附分子表达水平的影响
摘要：目的：研究丹皮酚（Paeonol,Pae）对TNF-α诱导的人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts,HGF）黏附分子表达水平的影响。方法：使用50 ng/mL的肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α诱导刺激人牙龈成纤维细胞,后分别加入浓度为0、50、100、200 mmol/L的Pae孵育培养2、4、6天后,用Western blot法检测细胞间黏附分子（intercellular adhesion molecule,ICAM）-1以及血管细胞黏附分子（vascularcell adhesion molecule,VCAM）-1的蛋白表达水平,用逆转录多聚酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测黏附分子的mRNA表达水平。结果：TNF-α诱导的人牙龈成纤维细胞ICAM-1和VCAM-1的蛋白和mRNA表达水平均显著高于空白对照组（P〈0.05）;不同浓度的丹皮酚可显著降低TNF-α诱导的人牙龈成纤维细胞ICAM-1和VCAM-1的蛋白和mRNA表达（P〈0.05）,且随Pae浓度的升高逐渐减少。当Pae浓度达到100 mmol/L,蛋白和mRNA表达水平的抑制效果达到稳定程度（P〉0.05）,当Pae浓度达到200 mmol/L时,ICAM-1和VCAM-1 mRNA抑制效果达到诱导前的水平（P〉0.05）。诱导时间的长短对蛋白和mRNA表达水平抑制效果没有显著影响（P〉0.05）。结论：丹皮酚可显著降低TNF-α诱导的人牙龈成纤维细胞黏附分子表达水平。DDR2基因缺失对小鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响
摘要：目的：骨髓间充质干细胞（Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）是骨再生工程中重要的种子细胞,它对骨组织缺损的修复有着良好的效果。但是BMSCs向成骨细胞分化并修复骨组织缺损是是由细胞外因子共同作用产生的结果。DDR2（Discoidin Domain Receptor 2）作为I型胶原的特异性受体在成骨细胞的分化中发挥重要的调节作用。而对于其在BMSCs向成骨细胞的分化过程中的所起到的作用还鲜有研究,对其作用机理尚不明确。因此我们希望通过分离、培养并鉴定比较DDR2基因缺失小鼠与野生型小鼠来源的骨髓间充质干细胞了解其生物学特性,为后续的实验奠定理论基础。方法：采用改良型的全骨髓贴壁细胞分离方法分离培养两种小鼠来源的骨髓间充质干细胞,采用流式细胞技术鉴定其表面标记物的表达,并利用诱导培养液诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞和成脂肪细胞分化。结果：分离培养的两种骨髓间充质干细胞形态一致,增殖能力和自我更新能力强,流式细胞术检测其表面标记物CD29,Sca-1均表达阳性,CD105,CD45表达为阴性,分离得到的两种细胞均有向成骨细胞和成脂肪细胞分化的能力,但可以明显观察到DDR2基因缺失小鼠的骨髓间充质干细胞的成骨分化能力减弱。结论：本实验通过对于DDR2基因缺失小鼠BMSCs分离、培养和鉴定,初步探索DDR2基因缺失在在成骨过程中的作用结果,为进一步研究提高BMSCs的成骨分化能力奠定理论基础。经实验证明,DDR2基因缺失小鼠来源的骨髓间充质干细胞虽然仍具备干细胞的生物学特性,但其向成骨细胞的分化能力明显减弱,说明DDR2基因缺失对其骨髓间充质干细胞的成骨分化等有着重要的影响。常染色体显性多囊肾病合并颅内动脉瘤的临床特征及其随访研究
摘要：目的：探讨常染色体显性多囊肾病（Autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD）合并颅内动脉瘤的临床特征及其预后情况。方法：选择355例2007年11月至2008年11月上海长征医院收治的被诊断为ADPKD的患者为研究对象,分析其临床资料及头部动脉瘤MRA筛查的结果,并对合并颅内动脉瘤的患者进行随访。结果：355例ADPKD患者颅内动脉瘤的发病率为12.4%,发病率随年龄的增加而升高,60-69岁组的发病率为23.3%,有脑卒中家族史的患者发病率明显高于无明确脑卒中家族史的患者（P〈0.05）。大部分动脉瘤较小（平均直径3.85±3.25mm）,且都位于前循环,其中颈内动脉最常见（占48.1%）。对44位合并颅内动脉瘤的患者进行随访,共随访21位患者（27枚动脉瘤）,平均随访43.5±4.3月,未发现新生动脉瘤;2枚动脉瘤有明显增大,扩大率为7.4%,其余25枚动脉瘤无明显增大,无动脉瘤破裂。结论：年龄≥30岁和具有脑卒中家族史的ADPKD患者易并发颅内动脉瘤,大多直径较小且位于前循环,随访期间大多无明显增大或破裂。冠心病合并缺血性二尖瓣关闭不全的手术方案探讨
摘要：目的：探讨适用于冠心病合并缺血性二尖瓣关闭不全的手术方法及临床效果,为心外科手术提供参考。方法：选取2012年2月至2013年5月在我院心脏外科接受手术治疗的冠心病合并缺血性二尖瓣关闭不全的患者31例。根据手术方式的不同,将所选病例分为二尖瓣成形术组和二尖瓣置换术组。术后随访6-24个月,观察并比较患者手术前后的左心房内径（LAD）、舒张末期直径（LVEDD）、收缩末期直径（LVESD）、左心室射血分数（LVEF）及二尖瓣返流面积。结果：围术期死亡1例,手术成功率为96.7%。30例成功获得随访,随访率为98.8%。二尖瓣成形术组并发症的发生率为22.7%,二尖瓣置换术组并发症的发生率为23.3%,两组术后并发症的发生率无显著差异（P〉0.05）。与手术前相比,两组患者术后的左心房内径变小,左室舒张末直径和收缩末直径增加,左室射血分数升高,二尖瓣反流面积缩少,差异显著且具有统计学意义（P〈0.05）。结论：对于冠心病合并重度缺血性二尖瓣关闭不全的患者行二尖瓣成形术或置换术应根据患者的实际情况和病理特点选择最佳的手术方案,以提高手术的成功率和安全性。COVDP方案治疗成人急性淋巴细胞白血病疗效分析
摘要：目的：探讨不同诱导方案治疗成人急性淋巴细胞自血病的疗效及合并症情况。方法：采用COVDP及DVLP诱导治疗方案将我科（2005-2011年）62例急性淋巴细胞白血病患者分为两组,A组采用COVDP诱导方案,B组采用DVLP诱导方案。比较两种不同诱导方案治疗成人急性淋巴细胞白血病的初治缓解率、感染率、是否延迟化疗及骨髓抑制时间。结果：两组方案骨髓缓解率差异无统计学意义（P〉0.05）,巩固治疗期间感染率差异有统计学意义（P〈0.05）,A组骨髓抑制时间为（15.51±0.82d）长于B组（9.63±0.71 d）（P〈0.05）,A组化疗延迟率为44.5%,高于B组（23.1%）（P〈0.05）。结论：与COVDP诱导方案相比,DVLP诱导方案缩短了骨髓造血恢复时间,降低了感染率及化疗合并症的发生。EMT标志分子Vimentin在胃癌中的表达和临床意义
摘要：目的：探讨EMT标志分子Vimentin在胃癌中的表达和临床意义。方法：利用免疫组化染色的方法检测Vimentin在120例胃癌及其相应癌旁组织中的表达,统计分析Vimentin的表达水平与年龄、性别、组织学类型、TNM分期、淋巴结转移等临床病理特征间的相关性。结果：Vimentin在胃癌中的表达阳性率为55.8%,远高于相应癌旁组织的22.5%（P〈0.01）,进一步分析研究发现Vimentin的表达水平在Ⅲ和Ⅳ期的胃癌中（TNM分期）的表达明显高于Ⅰ和Ⅱ期的胃癌,差异具有统计学意义（P=0.009）,在发生淋巴结转移胃癌中表达明显高于未发生淋巴结转移的胃癌,差异具有统计学意义（P〈0.000）。结论：Vimentin在胃癌中高表达,其表达水平与TNM分期、淋巴结转移密切相关,提示Vimentin在胃癌的转移过程中可能发挥重要作用。尿道等离子电切和弹道超声碎石治疗前列腺增生症并膀胱结石的临床疗效观察
摘要：目的：探讨尿道等离子电切和弹道超声碎石治疗前列腺增生症并膀胱结石临床效果及安全性。方法：选择本院2012年1月~2013年8月本院泌尿外科收治的84例前列腺增生症并膀胱结石患者,观察患者的手术时间、术中出血量、住院时间、并发症、IPSS评分、QOL、PVR、Qmax。结果：84例患者手术均获成功,平均出血量（118.94±11.57）mL;平均手术时间（74.19±5.68）min;平均导尿管拔除（7.38±1.17）d;住院时间（18.65±2.41）d。术后3个月,患者IPSS评分、QOL、PVR、Qmax分别为（7.18±1.40）分、（1.54±0.32）、（19.01±4.26）mL和（23.06±4.19）mL/s,术前分别为（23.61±3.24）分、（4.44±0.81）、（108.52±9.37）mL和（5.82±0.74）mL/s,差异具有显著性统计学意义（P〈0.05）。结论：尿道等离子电切和弹道超声碎石治疗前列腺增生症并膀胱结石安全、有效、手术彻底且术后恢复快。
