蛋白聚糖在维持牙本质胶原空间形貌和水合性能方面的作用
摘要：目的：评价牙本质蛋白聚糖对脱矿牙本质胶原纤维形貌和水合性能的影响。方法：新鲜拔除无龋坏人磨牙牙本质酸蚀后分别用胰蛋白酶和硫酸软骨素酶ABC孵育去除牙本质蛋白聚糖和糖胺聚糖侧链，对照组与实验组处理方法相同，但孵育液中不添加酶。然后在牙本质表面不同润湿状态下用场发射扫描电镜和激光共聚焦扫描电镜分别观察牙本质的微观形貌并评价脱矿牙本质的水合性能。结果：硫酸软骨素酶ABC 和TRY酶处理改变了牙本质的微观形貌，使胶原纤维间距增大。酶处理、牙本质表面润湿性及两者的交互作用均会显著影响脱矿牙本质的厚度（P〈0.0001）。结论：牙本质蛋白聚糖和糖胺聚糖侧链在维持牙本质胶原纤维网的空间结构和水合作用方面均发挥着重要作用。蛋白聚糖、胶原纤维- 蛋白聚糖以及蛋白聚糖-蛋白聚糖间的的亲水性是影响脱矿牙本质围观形貌和厚度的重要因素。真核表达质粒pcDNA3．1-CSRP2-HA的构建及鉴定
摘要：目的：构建并鉴定真核表达质粒PcDNA3.1-CSRP2-HA。方法：据GeneBank 中人CSRP2 CDS序列设计并合成引物，提取A549 细胞总RNA，并将其逆转录成cDNA作为模板,进行PCR 扩增，获得CSRP2 目的基因后,再与PcDNA3.1-HA载体进行连接重组，构建PcDNA3.1-CSRP2-HA 真核表达质粒，经限制性内切酶消化、PCR 及DNA 序列测序分析等方法鉴定后, 瞬时转染入A549细胞，Western blot 法检验CRP2 蛋白表达。结果：成功构建PcDNA3.1-CSRP2-HA 真核表达质粒，Western-blot 结果显示PcDNA3.1-CSRP2-HA 能够在A549 细胞中表达。结论：PcDNA3.1-CSRP2-HA真核表达质粒构建并鉴定成功，为后续研究CRP2在炎症诱发氧化损伤机制中的转录调控作用奠定了基础。MicroRNA-145在肾癌中的临床意义及其分子机制探讨
摘要：目的：探讨miRNA-145 在肾癌中的临床意义及其分子机制。方法：通过实时定量PCR 检测和比较16例肾癌患者的肿瘤组织及癌旁正常肾组织中miRNA-145 的表达，并分析miRNA-145 的表达水平与肾癌患者病理特征及临床分级的相关性。进一步采用实时定量PCR 检测和比较肾癌细胞株786-O、769P 及正常肾细胞株HK2 中miRNA-145 表达量，通过转染miRNA-145 mimics和阴性对照miRNA 至769P、786-O 肾癌细胞株后观察癌基因（bcl-2、e2f3、cdk6、ccnd1）mRNA的表达。结果：肾癌组织中miRNA-145 的表达显著低于癌旁正常肾组织（P〈0.05），且与肾癌的直径、病理核分级及临床分级呈显著负相关（P〈0.05）。肾癌细胞株769P、786-O 中miRNA-145 的表达显著低于正常HK-2 肾细胞（P〈0.05），而转染miRNA-145 mimics 的769P、786-O 细胞中多个癌基因（bcl-2、e2f3、cdk6、ccnd1）的mRNA表达均较阴性对照组显著降低（P〈0.05）。结论：MiRNA-145 在肾癌中呈低表达，可能通过调控多个癌基因的表达在肾癌的发生发展过程中发挥重要的作用。曲妥珠单抗修饰的阿霉素免疫脂质体的制备及体外性质研究
摘要：目的：制备表面键合曲妥珠单抗（trastuzumab，TMAB）的阿霉素免疫脂质（Doxorubicin-loadedimmunoliposome，DOX-IML），并对其体外性质进行研究。方法：将磷脂酰胆碱、胆固醇、阿霉素、DSPE-MPEG2000 以一定比例混合，采用薄膜超声分散法制备阿霉素脂质体，将聚乙二醇衍生物（1, 2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- [succinimidyl （polyethylene glycol）-3400]、DSPE-PEG3400-NHS）连接到TMAB；再与阿霉素脂质体连接得到DOX-IML。研究不同浓度的TMAB 对DOX-IML 入胞能力及细胞毒性的影响；测定免疫脂质体的包封率、载药率、粒径、电荷及稳定性等性质；动态透析法模拟体外释药特性，激光共聚焦观察免疫脂质体对AU565 细胞抗体介导的入胞作用；MTT 法研究DOX-IML抑制肿瘤细胞的生长。结果：成功制备了表面键合TMAB 的阿霉素免疫脂质体，配体载入率分别是53 %、75.5 %、84 %；每毫克DOX-IML中抗体的含量分别是37、83、108 μg·mg^-1；阿霉素的包封率为76.85%、载药量为8.03%；粒径131.8nm；表面电荷-27mV。抗体含量83 μg·mg^-1的DOX-IML组的细胞存活率最低，细胞内荧光强度最高，且该免疫脂质体稳定性良好，具有一定缓释作用。DOX-IML 具有较强的特异性靶向作用，其入胞能力和细胞毒性均高于阿霉素脂质体。结论：DOX-IML 具有较强的特异性靶向作用，其入胞能力和细胞毒性均高于阿霉素脂质体，抗体含量适中时其入胞能力和细胞毒性最强。LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤细胞中的表达研究
摘要：目的：明确LRIG2蛋白在人催乳素腺瘤细胞中的表达与定位。方法：采用免疫细胞化学方法检测LRIG2 蛋白在人催乳素腺瘤原代细胞中表达情况，人胶质瘤细胞系U87细胞设为阳性对照。结果：LRIG2 蛋白在原代培养的人催乳素腺瘤细胞中高表达（86.6± 2.15）%，与其在U87 细胞中表达率无明显统计学差异；同时免疫细胞化学结果提示LRIG2 蛋白在人催乳素腺瘤细胞中定位于胞浆，也与其在U87 细胞中表达一致。结论：LRIG2 蛋白在人催乳素腺瘤细胞中高表达，定位于胞浆，提示其可能在垂体腺瘤发生、发展过程中发挥作用，为进一步研究垂体腺瘤发生机制奠定基础。肝素对血浆和组织microRNA的PCR扩增效率的影响
摘要：目的：研究肝素对血浆和组织microRNA（miRNA）提取及PCR扩增效率的影响。方法：将杂种犬9 只, 雌雄不分, 随机分为两组,对照组（n=5）和实验组（n=4），实验组静脉注射肝素十分钟后取静脉血（用不含肝素的真空采血管采集）及左心室组织，对照组注射相对应量的生理盐水后步骤同实验组，应用miRNA 试剂盒分别提取实验组和对照组血浆和组织的miRNA, 逆转录成cDNA后进行实时定量PCR 分析。结果：实验组与对照组比较血浆miRNA Ct 值明显增高，其差异具有统计学意义（P＜0.01），组织miRNA Ct 值无明显变化。结论：静脉注射肝素短时间内对血浆miRNA 的PCR 扩增效率造成明显影响，对组织miRNA 提取及PCR扩增效率无明显影响。碲化镉量子点对PC-12细胞的细胞毒性研究
摘要：目的：探讨碲化镉（CdTe）量子点的生物安全性。方法：以水热法制备的、巯基丁二酸（MSA）包被的碲化镉（CdTe）量子点为研究对象，作用于体外培养的鼠神经元细胞（PC-12）。实验设立对照组和不同浓度CdTe QDs作用组。CdTe QDs作用于细胞后，采用倒置荧光显微镜分别观察量子点作用下的细胞形态与细胞对量子点的摄取情况；使用alamarBlue 检测CdTe QDs对细胞存活率的影响；Hoechst 33342 单染法观察CdTe QDs 对PC-12 细胞核形态的影响；Annexin V-FITC 单染检测CdTe QDs 对PC-12 细胞凋亡的影响。结果：CdTe 量子点作用后，低浓度实验组细胞变化不明显，高浓度实验组中的细胞的形态发生改变，引起细胞肿胀变圆，细胞数量减少,存活率显著下降；在染色下可见明显的细胞凋亡。结论：量子点与细胞接触后会通过胞吞途径进入细胞，汇聚于多种细胞器，对细胞器的功能造成损害，进而引发多种途径的细胞凋亡机制并引发细胞死亡。一株降解O，O-二甲基-O-（2，2-二氯乙烯基）磷酸酯的土壤微生物的分离与鉴定
摘要：目的：有机磷农药和杀虫剂广泛应用于众多国内和国外生产的，其数量已超过100 种。大量使用的有机磷农药会增加农业生产，而且还造成了不可估量的环境污染。研究降解敌敌畏的微生物，为微生物以降低产品敌敌畏农药残留，恢复敌敌畏污染土壤中的研究奠定基础。方法：本文从种植蔬菜的温室大棚的土壤中分离了一株降解O,O- 二甲基-O-（2,2- 二氯乙烯基）磷酸酯（敌敌畏）的细菌，根据该菌的形态学、生理生化特征及16S rDNA 序列比对。结果：该菌鉴定为荧光假单胞菌（菌株P）。该菌的最适生长温度为27 ℃，其培养基的最适初始pH为7.0, 4天内该菌可将培养液中61.24%的降解。结论：本实验从蔬菜大棚的土样中筛选出一株能降解敌敌畏的菌株，并鉴定为荧光假单胞菌。本研究将为基于微生物以降低产品敌敌畏农药残留，恢复敌敌畏污染土壤中的研究打下基础。局部亚低温联合硫酸镁对局灶性脑缺血大鼠的保护作用
摘要：目的：探讨联合应用局部亚低温（32-35 ℃）及硫酸镁对局灶性脑缺血大鼠的保护作用及其可能机制。方法：通过线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型，将40 只雄性Wistar 大鼠随机分为假手术组、常温组、亚低温组、硫酸镁组、亚低温＋ 硫酸镁组，每组8 例，采用Longa 神经功能评分、TTC 染色、TUNEL 技术，检测和比较各组脑缺血后大鼠的神经功能、脑梗死体积、凋亡细胞数。结果：与常温组相比，亚低温组与亚低温＋硫酸镁组的梗死体积、神经功能评分、凋亡细胞数均明显降低，差异有显著意义（P〈0.05）；而与亚低温组相比，亚低温＋硫酸镁组局灶脑缺血大鼠的脑梗死体积、神经功能评分、凋亡细胞数均显著减少，差异有显著意义（P〈0.05）。结论：与单独应用亚低温相比，局部亚低温与硫酸镁联合应用，对局灶性脑缺血大鼠可发挥更有效的脑保护作用，其机制可能与抑制脑缺血后凋亡有关。损伤控制性手术在野战条件下腹部严重创伤治疗中的应用价值
摘要：目的：损伤控制性手术（Damage Control Operation, DCO）是针对严重创伤患者进行阶段性修复的外科策略，本文通过观察DCO在野战条件下严重腹部创伤治疗中的效果，探讨其应用价值，为野战外科手术提供参考。方法：对2012 年2 月-2013 年3 月我院收治的90 例重症肝胆外伤患者的临床资料进行回顾性分析。将所选病例随机分为对照组和DCO 组，每组45 例。其中对照组实施常规手术治疗，DCO 组实施损伤控制性手术进行治疗。对比两组患者的手术时间，术中出血量、死亡率、术后感染及并发症等。结果：DOC组手术时间为（62.59± 8.61） min，术中出血量为（306.48± 23.54） mL，死亡率为20%，术后感染率为8.89%，并发症的发生率为11.11%；对照组术时间为（90.35± 7.86） min，术中出血量为（600.32± 34.21） mL，死亡率为53.33%，术后感染率为24.44%，并发症的发生率为35.56%；DCO组患者的各项指标均优于对照组，差异显著且具有统计学意义（P〈0.05）。结论：在肝胆外科治疗中采用损伤控制性手术具有明显的临床效果，不但缩短了手术时间，减少出血量，提高手术成功率，而且降低了术后并发症的发生率，值得推广。厄洛替尼联合多烯紫杉醇-卡铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究
摘要：目的：探讨厄洛替尼联合多烯紫杉醇和卡铂对晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的临床疗效及毒副反应。方法：选择2010 年1 月-2012年1 月我院收治的Ⅲb 或Ⅳ期非鳞状非小细胞肺癌患者共92 例。所有病例均给予多烯紫杉醇（100mg/m^3）＋卡铂（AUC 5.5,浓度-时间曲线下面积5.5）治疗2 个周期，完成2 个周期治疗后，将病人随机分为对照治疗组（多烯紫杉醇＋卡铂治疗）和厄洛替尼治疗组（厄洛替尼联合多烯紫杉醇＋ 卡铂治疗），每组各46 例，厄洛替尼组给予口服厄洛替尼150mg/dl/天剂量治疗。两组均继续治疗2 个周期，观察厄洛替尼联合多烯紫杉醇- 卡铂治疗对晚期非小细胞肺癌患者的疗效、患者中位生存期及毒副反应。结果：两组患者治疗客观有效率对照治疗组为26.1%，厄洛替尼治疗组为45.6%，差异具有统计学意义（P〈0.05）。厄洛替尼治疗组患者中位生存期为6.9 个月。与对照治疗组相比，厄洛替尼治疗组中患者3/4 级中性粒细胞降低的发生率显著降低，差异具有统计学意义（P 〈 0.05）。结论：厄洛替尼能增强多烯紫杉醇＋卡铂治疗方案对晚期非小细胞肺癌的疗效，减轻化疗的毒副反应。不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌患者骨髓抑制及免疫功能的影响
摘要：目的：探讨不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌患者骨髓抑制及免疫功能的影响。方法：选取2011 年1 月至2013年12月收治的130例晚期非小细胞肺癌患者，按照知情同意原则随机分为三组：NP（长春瑞滨＋顺铂）组45 例、GP（吉西他滨＋顺铂）组43例、TP（紫杉醇＋顺铂）组42 例，分别于化疗前及化疗2 个周期后检测患者的骨髓抑制及免疫水平。结果：三种化疗方案进行治疗后骨髓抑制水平由高到低排列为GP组、TP组、NP组，差异有统计学意义（P〈0.05）；GP 组血小板减少发生率高于其他两组，TP 组白细胞下降发生率高于其他两组，差异有统计学意义（P〈0.05）；三组患者化疗后的免疫功能指标均较化疗前低，差异有统计学意义（P〈0.05）。三种化疗方案进行治疗后免疫功能抑制水平由高到低排列为GP组、TP组、NP组，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：GP 组患者血小板下降更明显，TP 组白细胞下降更为明显，NP 组对骨髓抑制及免疫功能抑制较缓和，更适于老年人，因此临床选择化疗方案时要综合考虑患者骨髓状况、免疫功能情况及年龄等。胆囊癌组织中IL-8表达及TAM计数的临床病理意义
摘要：目的：检测胆囊腺癌组织中白细胞介素-8（IL-8）mRNA的表达、肿瘤相关巨噬细胞（TAM）计数并探讨其临床病理意义。方法：收集中南大学湘雅二医院及湖南省人民医院近五年胆囊腺癌手术切除标本36 例及慢性胆囊炎手术切除标本10 例，采用原位分子杂交方法检测IL-8 表达，ABC免疫组化法进行TAM 计数。比较胆囊腺癌和慢性胆囊炎标本组织中IL-8 mRNA 表达和TAM计数的差异，并分析其与胆囊腺癌临床病理特征之间的关系。结果：胆囊腺癌组织中IL-8 mRNA表达阳性率及其评分均明显高于慢性胆囊炎（P〈0.01），IL-8 mRNA表达阳性率及其评分与其侵犯胆总管及发生淋巴结转移显著相关（P〈0.05）。胆囊腺癌组织中TAM 计数（24.89± 0.84）明显高于慢性胆囊炎组织（16.19± 0.66），差异有统计学意义（P〈0.01）；侵犯胆总管、肝脏及发生淋巴结转移的胆囊腺癌组织中TAM 计数高于未侵犯胆总管、肝脏及发生淋巴结转移的胆囊腺癌组织TAM计数，其中侵犯胆总管和发生淋巴结转移之间差异显著（P〈0.01）。IL-8 mRNA阳性病例的TAM 计数均明显高于阴性病例（P〈0.01），TAM计数与IL-8 mRNA评分间也存在显著正相关（r=0.748，P〈0.001）。结论：IL-8 和TAM计数与胆囊癌的发生和发展密切相关，IL-8 可能在促进TAM向胆囊癌组织迁移浸润中起作用。振幅整合脑电图aEEG对新生儿缺氧缺血性脑病患儿病变程度及远期预后的监测分析
摘要：目的：研究振幅整合脑电图aEEG对新生儿缺氧缺血性脑病（Hypoxic ischemic encephalopathy，HIE）患儿病变程度及远期预后的监测分析。方法：从2012 年3 月到2013 年3 月，48 例胎龄在37至41周的HIE 患儿，作为观察组。另选同期50 例住院治疗的非颅脑病症足月儿作对照组。分别对两组行aEEG 诊断，对比两组连续性及SWC。并分析aEEG的监测结果和HIE 相关性，以及远期预后情况。结果：观察组脑电图呈现为连续型者占比33.33%（16/48），SWC为成熟者占比20.83%（10/48），均显著低于对照组的100%（50/50）及100%（50/50）。差异均有统计学意义（均P＜0.05）。观察组的最高电压为56.54± 19.33 LV，显著高于对照组的37.77± 2.79 LV；最低电压为4.26± 1.25 LV，显著低于对照组的7.75± 0.67 LV。差异均有统计学意义（均P＜0.05）。依据Spearman法行相关性分析后发现，aEEG的监测结果和HIE 临床分级呈正相关。随访6 个月，48 例患儿中，有11 例伤残（含智力缺陷及脑瘫），占比22.92%。结论：aEEG 操作简便，诊断有效，且可连续监测，能够反应出新生儿HIE 病变程度以及远期预后。效果显著，值得临床推荐。肌钙蛋白I和肌红蛋白在急性心肌梗死患者血清中的变化特点及其诊断价值
摘要：目的：探讨肌钙蛋白I、CKMB 的即时检测技术在急诊科心肌梗死患者中的应用及其临床意义。方法：研究对象为2012 年10月至2013 年8 月于我急诊科急诊的急性心肌梗死患者，按就诊时间分为对照组和实验组。对照组患者采用常规化验室检测肌钙蛋白I、CKMB，实验组采用急诊科即时检测方法检测肌钙蛋白I、CKMB。对比两组患者从就诊到确诊的时间、住院天数、治愈率、心功能不全发生率和死亡率。结果：实验组患者的确诊时间为（25.5± 5.6）min，住院天数为（9.89± 1.5）天，治愈率为80.8%，心功能不全发生率为15.4%。对照组患者的确诊时间为（66.8± 10.0）min，住院天数为（12.6± 2.5）天，治愈率为56.0%，心功能不全发生率为32.0% P均〈0.05，有统计学意义。两组患者死亡率分别为12%和3.8%，无明显差异。结论：对心肌梗死患者采用肌钙蛋白I、CKMB 的即时检测对于提高患者治愈率，减少确诊时间和住院时间，降低心功能不全发生率有很大帮助。血流阻断的缺血预处理技术在肝癌切除术中的临床应用价值
摘要：目的：探讨血流阻断的缺血预处理技术在肝癌切除术中的临床应用价值。方法：选取2010 年4 月至2013 年7 月我院收治的96 名原发性肝癌并采用肝脏部分切除术进行治疗的患者，将患者随机分为观察组和对照组，每组各48 例，观察组在肝脏部分切除术阻断肝门血流前先分别给予1 个5 min 缺血和再灌注的处理。对照组不采取任何干预措施。术前、术后1 天、3 天、7 天时分别进行生化检查，并于术前及术后1h 对Fas-mRNA表达、Caspasc-3 活性及AI进行测定，观察记录患者术后的并发症情况、手术时间、术中出血量以及住院时间。结果：术后1 天、3 天、7 天时两组间的AST、ALT、TBIL等生化指标的含量情况相比，观察组均显著优于对照组（P＜0.05）；术后l d，两组患者ALB 均有不同程度的降低，对照组低于观察组（P＜0.05）；术后住院时间观察组为13.28± 3.85 天，对照组为19.48± 4.92 天，观察组明显低于对照组（P＜0.05）；术后1h，两组患者的Fas-mRNA 表达、Caspasc-3 活性相比于阻断前均显著提高，但观察组提高幅度明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组阻断前均未见肝细胞凋亡，术后l h时，两组组均可见肝细胞凋亡，且对照组明显高于观察组组（P＜0.05）。结论：血流阻断的缺血预处理技术具有操作简便、副作用小的重要特点，应用于肝癌切除术中在保护肝功能方面具有显著的优势。锁定钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折的疗效观察
摘要：目的：探讨锁定钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折的临床疗效。方法：选择2011 年2 月～2013 年2月期间我院收治的复杂胫骨平台骨折92 例，按照数字随机法分为观察组（50例）和对照组（42 例）。观察组采用锁定钢板内固定治疗；对照组采用传统钢板固定治疗，所有患者术后随访1 年以上，观察两组患者临床疗效。结果：①两组患者均顺利完成手术，观察组住院时间、骨折愈合时间和完全负重时间显著低于对照组（P〈0.05）。②治疗后两组患者胫骨平台后倾角（Posterior tibial angle, PA）、膝关节活动度逐渐升高，内翻角（Tibial plateau angle, TPA）逐渐降低（P〈0.05），治疗6、12 个月观察组PA、膝关节活动度显著高于对照组，TPA 显著低于对照组（P〈0.05）。③所有患者术后随访1 年，均获得满意随访。观察组膝总有效率为86.0%；对照组总有效率为66.7%，观察组膝关节总有效率显著高于对照组（P〈0.05）。结论：锁定钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折具有固定牢靠，骨折愈合时间短，愈合率高等特点，其临床效果较好。不同麻醉方案在小儿烧伤中的应用分析
摘要：目的：探讨不同麻醉方案对儿童烧伤患者的效果及意义。方法：将60 例烧伤患儿随机均分为AB两组。A组患儿采用七氟醚与瑞芬太尼联合麻醉的方案进行，B 组患儿采用丙泊酚与瑞芬太尼联合的方案进行麻醉。观察并比较两种不同麻醉方案对患儿的作用及对手术效果的影响。结果：A 组T4时的SpO2明显高于B 组，具有统计学意义（P〈0.00001）；A组患儿的自主呼吸恢复时间、拔管时间和苏醒时间均明显高于B 组，差异具有统计学意义（P〈0.01）；两组的麻醉时间、呕吐、体动、支气管痉挛例数和患儿苏醒期躁动评分相似，无统计学意义（P〉0.05）。结论：相较丙泊酚联合瑞芬太尼麻醉方案，七氟醚联合瑞芬太尼麻醉方案用于小儿烧伤手术麻醉可明显缩短患儿自主呼吸的恢复时间、拔管时间和苏醒时间。
