小鼠不同组织及缺氧损伤后的大鼠心肌细胞中RIP3的表达
摘要：目的：检测小鼠组织中受体相互作用丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶家族（RIPs）表达谱，并检测RIP3在大鼠心肌细胞缺氧损伤后的表达。方法：①采用荧光实时定量PCR分别检测RIPs家族基因在小鼠组织（心、肝、肺、肾、脑、小肠、骨骼肌、脾和主动脉）中的mRNA表达谱，并采用Westernblot进一步检测RIP3在小鼠组织的蛋白表达谱。②将培养的大鼠心肌细胞分为缺氧组和对照组，缺氧组置于缺氧环境中培养48h，采用westernblot检测其中RIP3的表达变化。结果：①mRNA水平：RIPImRNA在脑组织中表达最高，心脏、肺、肾、骨骼肌较低；RIP2在心脏和肺表达量较其他组织高；RIP3在肠中表达较其他组织高出4倍以上，脑组织中未检测到RIP3表达；RIP4的表达以肺最高，而骨骼肌、脑和血管中表达量低。②蛋白水平：在小鼠组织中，RIP3表达以脑、骨骼肌中最高，心脏、肝、肺中表达较低。③培养的大鼠心肌细胞中，缺氧组心肌细胞的RIP3表达量显著高于对照组（P〈0．05）。结论：RIPs在小鼠组织中呈现差异表达，而在培养的大鼠心肌细胞缺氧损伤后RIP3表达升高。脾加骨髓细胞移植治疗小鼠大肠癌的实验研究
摘要：目的：探讨半相合脾加骨髓细胞移植治疗小鼠大肠癌的效果及其对嵌合体水平和移植物抗宿主病（GVHD）的影响。方法：以接种CT26大肠癌细胞的BALB／c×C57BL／6杂交F1代雌性小鼠为受鼠，以健康雌性F1、雄性C57BL／6、雄性C3H小鼠为MHC全相合、半相合、不相合供鼠，观察移植后的抑瘤情况；另设5只化疗联合半相合脾加骨髓细胞移植的小鼠为监测组，用来作嵌合体的分析，观察各组GVHD的情况。结果：经化疗预处理的脾加骨髓细胞移植组小鼠肿瘤明显缩小，与单纯化疗未进行移植组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；化疗联合半相合脾加骨髓细胞移植的小鼠于移植3周后达完全供者植入，于移植后第10天左右出现纳差、倦怠、步态不稳、脱毛、腹泻、体重明显下降等GVHD的症状。结论：化疗预处理联合脾加骨髓细胞移植能对CT26大肠癌细胞产生GVT效应，并伴随着GVHD及嵌合率的变化。介绍一种兔VX2肿瘤的传代和接种方法及其应用经验和体会
摘要：目的：介绍一种兔VX2肿瘤的传代和接种方法及其应用经验和体会，从而更好的利用此模型进行生物医学研究。方法：从荷瘤新西兰大白兔取活性良好的肿瘤组织块，制备肿瘤细胞悬液，过滤后接种于健康成年新西兰兔左后肢肌肉内。通过一般观察、MRI和大体及病理学切片对肿瘤进行验证。结果：肿瘤传代和接种后生长良好，MRI、大体及组织学验证保持了VX2的肿瘤特点。结论：本研究介绍的兔VX2肿瘤的传代与接种方法稳定、可靠，值得大家推广和应用。PXD101对口腔鳞癌HN-6细胞增殖及凋亡的初步研究
摘要：目的：本实验探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂PXD101对口腔鳞癌HN-6细胞的增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：PXD101对口腔鳞癌HN-6细胞进行干预，倒置相差显微镜观察细胞形态学改变；MTT法检测PXD101对HN-6细胞的增殖影响；Annexin—V-FITC／PI双染流式细胞仪定量检测细胞凋亡；流式细胞仪分析细胞周期。结果：PXD101可明显抑制HN-6细胞的生长（P〈0．05），呈时间刑量依赖性。倒置相差显微镜下观察对照组细胞贴壁，形态呈多边形，生长活跃；实验组细胞脱壁，变小，细胞核皱缩。绘制细胞生长曲线示，随着PXD101的浓度和作用时间的增加，HN-6细胞生长明显受到抑制，各实验组细胞生长抑制率与对照组比较，P〈0．05差别有统计学意义。1μmol／LPXD101作用24h，48h细胞总凋亡率分别为20．9％、38．6％，与对照组相比有统计学意义（P〈0．05）；HN-6细胞周期阻滞于G0／G1期，与对照组相比，P〈0．05差别有统计学意义。结论：PXD101体外实验能显著抑制人口腔舌癌HN-6的细胞增殖，诱导细胞凋亡。建立同时分离培养小鼠肝细胞及肝星状细胞的技术
摘要：目的：建立一种简便、经济、高产的同步分离培养肝细胞以及肝星状细胞的方法。方法：在参照国内外方法的基础上加以改良，首先采用肝脏原位胶原酶灌注消化的方法，获得总细胞悬液，经多次低速离心分离肝细胞；再用Nycodenz作为分离介质，通过密度梯度离心法从非实质细胞中得到肝星状细胞。通过台盼蓝染色方法鉴定细胞的活力，用倒置相差显微镜、立体显微镜、CK-18、白蛋白免疫荧光细胞化学染色对培养的肝细胞形态以及功能进行捡测。使用Desmin、α—SMA免疫荧光细胞化学对肝星状细胞进行鉴定。结果：成功的在体外同步分离、培养肝细胞及肝星状细胞，肝细胞产率为5—6×10^7／只小鼠，两只小鼠肝星状细胞产率达1×10^6个。细胞存活率及纯度均可达90％。肝细胞在培养24h后呈不规则铺路石样形态，此为典型的肝细胞形态，其标志分子CK-18以及白蛋白免疫荧光染色阳性。倒置相差显微镜下可见贴壁后的肝星状细胞呈典型的星形细胞形态，且其标志分子Desmin、α—SMA免疫荧光染色阳性。结论：改良的原位灌注以及分离方法可以同时分离并且培养具有高活性和功能的肝细胞和肝星状细胞。藏红花素对c6胶质瘤细胞生长及Survivin和Livin表达的影响
摘要：目的：研究藏红花素对大鼠c6胶质瘤细胞生长及凋亡蛋白抑制因子Survivin和Livin表达的影响。方法：体外培养C6胶质瘤细胞，加入不同浓度的藏红花素培养液，并于不同时间点进行观测，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法绘制细胞生长曲线，观察C6细胞的生长活性；通过相差显微镜和Hoechst荧光染色法观察C6细胞的形态学变化；采用Westernblot法检测Survivin和Livin蛋白的表达水平。结果：c6胶质瘤细胞经藏红花素作用后细胞生长受到明显抑制，用含2、4和8mg／ml藏红花素的培养液作用48h后各组C6细胞的OD值分别为0．732±0．013、0．421±0．010和0．289±0．017，细胞生长抑制率分别为26．8±0．01％、58．0±0．02％和71．1±0．02％，其中4mg／ml和8mg／ml藏红花素实验组细胞生长抑制率与阴性对照组均有显著性差异（P均〈0．05）；相差显微镜和Hoechst荧光染色法观察显示实验组C6细胞出现典型的凋亡形态学改变；Westernblot检测显示实验组C6细胞Survivin和Livita蛋白表达明显下调。结论：藏红花素能明显抑制C6胶质瘤细胞的体外生长，其抑制作用与诱导C6细胞发生凋亡和下调凋亡蛋白抑制因子Survivin和Livin的表达有关。阿魏酸钠对人动脉平滑肌细胞和内皮细胞作用的机制研究
摘要：目的：研究阿魏酸钠（SF）对人主动脉平滑股（HASMC）和内皮细胞（HAEC）的影响，探讨sF成为抑制支架内再狭窄药物的机制。方法：HASMC和HAEC经SF处理后（0-1000μg／m1），用CCK-8试剂和划痕愈合试验检测不同药物浓度对两种生长和细胞迁移能力的影响；采用免疫细胞化学和Westernblot检测HAECs中FoxM1和VEGF的表达。结果：sF对两种细胞的作用呈剂量依赖性，sF在10—1000μg／ml浓度时，HASMC的生长活力明显降低，在0．1-100μg／ml HAECs生长活力显著增强（P〈0．05）。在1-1000μg／ml浓度下HASMcs迁移能力受到抑制，HAECs的迁移能力明显增加（0．1-100μg／m1）（P〈0．05）。同时HAECs内FoxM1和VEGF表达明显增高（P〈0．05），程度与sF浓度有剂量依赖关系。结论：阿魏酸钠能抑制血管平滑肌的增值和迁移；同时增加内皮细胞FoxM1和VEGF的表达，促进内皮细胞的增值和迁移，这些特征使其可能成为抑制支架内再狭窄的药物。柴半六合汤对慢性肾衰竭模型大鼠血清胃泌素、胃动素及生长抑素的影响
摘要：目的：观察柴半六合汤对慢性肾衰竭（CRF）模型大鼠血清胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）、生长抑素（ss）水平的影响，探讨其作用机制。方法：采用5／6肾切除的方法复制CRF大鼠模型，设立假手术组、模型组、柴半六合汤高剂量组、低剂量组、尿毒清对照组，检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）．TL生长抑素（ss），取胃粘膜行HE染色，光镜下观察其组织病理变化。结果：用药各组大鼠治疗后Scr、BUN低于模型组；柴半六合汤高剂量组大鼠Scr、BUN、GAS、MTL低于低剂量组、Ss高于低剂量组；柴半六合汤高、低剂量组大鼠GAS、MTL低于尿毒清对照组、ss高于尿毒清对照组。结论：柴半六合汤通过降低CRF模型大鼠GAS、MTL水平、SS升高水平，改善胃肠道症状。改良手术方法治疗耳廓假性囊肿的疗效分析
摘要：目的：评价改进耳廓假性囊肿手术方法后治疗耳廓假性囊肿的疗效。方法：选择2011年2月至2012年7月在我科住院治疗耳廓假性囊肿患者56例，并将其随机分为常规手术组和改进手术组，观察和比较两组患者手术治疗后的痊愈率、显效率及总有效率。结果：所有病人经门诊随访半年以上。常规组1例痊愈（4．6％），4例显效（18．2％），16例有效（72.3％），1例无效（4．6％），总有效率95．5％（21／22）；改进组24例痊愈（70．6％），9例显效（26．5％），1例有效（2．9％），总有效率100％（34134），两组的痊愈率比较差异有显著性意义（P〈0．05），改进手术组的痊愈率显著高于常规手术组；两组的显效率比较差异有显著性意义（P〈0．05），改进手术组的显效率显著高于常规手术组；两组的总有效率比较差畀没有有显著性意义（P〉0．05）。结论：改进耳廓假性囊肿手术方法后，术后术腔的渗液明显减少，缩短了换药时间，加快了伤口愈合的速度，避免了手术后因反复换药刺激引起耳廓机化、皮肤增厚而导致的耳廓变形。早期经皮气管切开对重型脑血管意外患者的影响
摘要：目的：评估早期经皮气管切开（percutaneousdilationaltracheotomy，PDT）对重型脑血管意外患者的影响。方法：对我院2007年5月至2012年12月采用PDT行气管切开的87例重型脑血管意外患者进行回顾性分析。根据经口插管机械通气（mechanicalventilation，MV）时间将患者分成早期气管切开组（≤7dEarlytracheotomy，ET）共42例，晚期气管切开组（〉7dLatetracheotomy，LT）共45例，其中ET组男性23例，平均年龄41．36±14．12岁，LT组男性26例，平均年龄46.38±13．87岁。观察两组患者的一般情况、经口插管MV时间、PDT后MV时间、PDT后住重症医学科（intensivecareunit，ICU）时间、总住院时间、28d病死率和呼吸机相关性肺炎（ventilator—associatedpneumonia，VAp）发生率等。结果：两组患者在一般情况如年龄、性别、急性生理学和慢性健康状bL（AcutephysiologyandchronichealthevaluationII，APACHEII）评分以及格拉斯哥昏迷（Glasgowcomascale，GCS）评分比较，差异均无统计学意义（P均〉0．05），ET组显著缩短了经口插管MV时间、PDT后MV时间、PDT后住ICU时间，差异均有统计学意义（P均〈O．05），但两组在总住院时间、28d病死率和VAP发生率比较，差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论：虽然ET不影响患者预后及VAP发生率，但可缩短患者经口插管MV时间、PDT后MV时间、PDT后住ICU时间，故对于重型脑血管意外患者应采取早期PDT。miRNA-105在胃癌组织中的表达情况
摘要：目的：分析胃癌组织与癌旁正常胃黏膜组织中miRNA的差异表达情况。方法：收集胃癌组织和其相应癌旁正常胃黏膜组织共33对，经抽提、纯化RNA后，反转录合成荧光分子Hy3的cDNA探针，将其与miRCURYTMLNAArray（v．16．0）（Exiqon公司）芯片进行杂交，应用AxonGenePix4000B芯片扫描仪来扫描miRNA芯片的荧光强度，GenePixPro6．0软件（Axon）把图像转化为数字信号，以差异大于2倍的为标准来确定胃癌黏膜组织中差异袁达的miRNA。再用实时荧光定量PCR方法验证芯片结果中表达异常增高的miR-105在33例胃癌组织中的表达情况。结果：miRNA表达谱芯片结果显示：胃癌组织共中有51种miRNA表达异常，其中miR-105、miR-548n、miR．214＊、miR-4309等31种miRNA表达上调，miR-31、miR-1275、miR-26b＊、miR-744等20种miRNA表达下调；实时荧光定量PCR证实与癌旁正常胃黏膜组织相比，胃癌组织中miR-105表达显著上调（P〈0．01）。结论：miR-105在胃癌组织的表达明显高于正常胃黏膜组织，可能与胃癌的发生、发展相关。我们的研究为胃癌的发病机制和诊断治疗提供了-个新的研究方向。肝移植术后肝脏淋巴回流淤滞的影像学特征
摘要：目的：分析肝移植术后病人肝脏淋巴回流淤滞（intrahepaticlymphaticstasis，IHLS）的计算机断层扫描（computedTomography，CT）及磁共振（MagneticResonanceImaging，MRl）影像学特征。方法：回顾性收集我院自2004-2012年肝移植术后病人66例，分析其术后CT及MRI图像，对IHLS的阳性次数、持续时间及其影像学特征进行观察分析。结果：66病人中IHLS病人22例。肝移植术后IHLS的直接征象为血管周围项圈征（perivrdcularcollar，PC），CT和MRI可清晰显示且可根据PC的部位分型。结论：肝移植术后IHLS的CT及MRI具有特定的影像学特征，对其识别具有一定的临床意义。护理干预对妊娠糖尿病患者血糖控制的影响
摘要：目的：研究并分析护理干预对妊娠糖尿病患者血糖控制的影响，以最大限度的确保妊娠糖尿病患者与胎儿的生命健康。方法：以我院收治的妊娠糖尿病患者320例，将患者进行随机分组，对照组的160例患者进行常规护理，干预组的160例患者在常规护理的基础上进行科学与系统的护理干预，对比两组患者的临床治疗效果。结果：干预组患者空腹及餐后2小时的血糖控制均明显优于对照组患者，差异具有显著性（P〈0．05）；干预组患者并发症发生率明显低于对照组，差异具有显著性（P〈0．05）。结论：给予妊娠糖尿病患者积极的护理干预，不仅可有效控制患者的血糖水平，且可在一定程度上降低患者的妊娠期并发症，保障新生儿的身心健康，是一种积极、可行的护理措施，值得推广。不同评分标准对急性胰腺炎严重程度评估价值的比较
摘要：目的：分析和评价Ranson、Glasgow、APACHEⅡ和BISAP4种临床评分标准对急性胰腺炎严重程度的评估价值。方法：回顾性研究急性胰腺炎患者225例，分别应用APACHEⅡ、Ranson、Glasgow及BISAP评分标准对急性胰腺炎患者进行评分，比较分析不同评分标准对该类患者诊断的敏感性、特异性，以及对合并脏器功能不全的预测情况。结果：225例患者中，轻型胰腺炎188例，重型胰腺炎37例，在轻型和重型胰腺炎患者中，4种评分标准分值差异均有统计学意义（P〈0．01）。47例患者存在器官功能不全，4种评分标准与患者合并脏器功能不全均显著相关。各评分标准中，APACHEⅡ对急性重症胰腺炎评估的敏感性、特异性最好，分别为76％和72％。结论：4中评分方法各有特点，综合应用可能更准确的评估疾病严重程度及预后。低分子肝素对早发型重度子痫前期治疗对母婴结局的影响分析
摘要：目的：探讨低分子肝素对早发型重度子痫前期治疗情况，并分析治疗对母婴结局的影响。方法：选择我院2012年1月～12月收治的早发型重度子痫前期患者120例，随机分为观察组和对照组，每组60例。对照组给予常规治疗，观察组在对照组治疗基础上加用低分子肝素。比较两组血压、24h尿量、尿蛋白定量、尿酸、血常规、凝血功能及孕周延长时间、围产儿结局和产妇并发症。结果：两组患者临床指标无差异（P〉0．05），治疗后两组血压、24h尿量、尿蛋白定量均显著改善，观察组红细胞压积、纤维蛋白原降低明显高于对照组，而观察组患者的产妇并发症和围产儿不良结局发生率均低于对照组，且产妇孕周延长时间明显多于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组患者的血小板、凝血酶原时间等治疗前后均无明显变化（P〉0．05）。结论：低分子肝素对早发型重度子痫前期的治疗能有效抑制高凝状态，改善肾功能，延长孕周时间，可有效减少患者并发症的发生，改善母婴预后，值得临床推广应用。间断切口与长切口获取大隐静脉在冠状动脉旁路移植术中作用的对比研究
摘要：目的：比较冠状动脉旁路移植术（CABG）中采用间断切口与长切17获取大隐静脉作为静脉桥材料的优缺点。方法：选择2011年12月至2012年12月宁夏医科大学总医院心脏大血管外科111例行CABG的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者为研究对象。根据术中获取大隐静脉方法的不同，随机将其分为两组，长切口组64例，在cABG中采用长切口法获取大隐静脉，间断切17组47例，在CABG中采用间断切口法获取大隐静脉。比较两组大隐静脉获取时间、下肢切口缝合时间、下肢手术时间、大隐静脉桥长度、下肢切口长度和下肢切口并发症发生率的差异。结果：间断切口组大隐静脉桥长度及下肢手术时间（45．4±6．7）cm，（65．8±10．3）min与长切口组（47．5±6．7）cm，（65．8±10．3）min比较无统计学差异（P〉0．05）。间断切口组获取大隐静脉的时间（48．9±8．3）min显著长于长切口组（37．3±5．8）min，下肢切口长度与缝合时间（17．0±3．5）cm，（16．9±3．4）min明显短于长切口组的（43．5±6．4）min，（31．7±5．9）min，差异均有统计学意义（P〈0．05）。两组大隐静脉壁的损伤情况比较无统计学差异（P〉0．05），但间断切口组术后下肢切口延迟愈合、感染、渗出、下肢血肿等并发症的发生率低于长切口组（P〈0．05）。结论：在冠状动脉旁路移植术中，间断切口获取大隐静脉能够显著缩短下肢手术切口长度，有助于减少术后下肢切口感染、延迟愈合、渗出、下肢血肿等并发症的发生。血清胱抑素C和尿微量白蛋白在慢性肾小球肾炎早期肾功能损害评估中的意义
摘要：目的：探讨血清胱抑素C和尿微量白蛋白在慢性肾小球肾炎早期肾功能损害评估中的意义。方法：选取2010年9月至2013年7月我院收治的86名慢性肾小球肾炎患者，设为观察组。另选取同期在我院体检的年龄、性别等资料与之匹配的66名健康者设为对照组。分别对患者的CysC以及mALB的含量进行测定，并进行统计分析。结果：观察组和对照组的CysC含量分别为（2．68±1．19）mg／L、（0．83±1．04）mg／L，观察组明显高与对照组；mALB的含量观察组为（38．16±4．25）mg／L，相比于对照组的（6．87±3．93）mg／L明显升高；CysC及mALB阳性指标的检出率分别为75．58％、76．74％，而CysC与mALB进行联合检测，检出率为91．86％，相比于单指标的检出率明显提高。差异具有统计学意义（P〈0．05）。通过对慢性肾小球肾炎患者的两项指标进行相关性分析，发现血清CysC和尿mALB的含量呈显著的正相关（r=0．941，P〈0．05）。结论：将CysC与mALB相结合检测用以对慢性肾小球肾炎患者早期肾功能损害进行评估，检出率和敏感性均明显高于单指标检测。胆管癌组织中SNCG的表达及其临床意义
摘要：目的：观察γ-synuclein（SNCG）在胆管癌和正常胆管组织中的表达，并探讨其在胆管癌发生、发展中的临床意义。方法：采用免疫组化方法检测SNCG蛋白在72例胆管癌组织及41例胆管正常组织中的表达水平，并分析其与胆管癌临床病理特征的关系。结果：SNCG蛋白在胆管癌组织中的阳性表达率为73．61％（53／72），高于其在胆管正常组织中的阳性表达率（4．88％，2／41），其差异有统计学意义（P〈0．01）。SNCG蛋白的表达与肿瘤的淋巴结转移相关（P〈0．01），但与患者的年龄、性别及肿瘤分化程度无关（P〉0．05）。结论：SNCG蛋白的表达与胆管癌的发生、发展正相关，并对胆管癌的浸润转移发挥重要的促进作用。对SNCG蛋白的研究将可能为胆管癌的早期诊断提供新的肿瘤标志物，并为胆管癌的预后判断和诊治提供重要理论依据。
