叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞Nespas DMR区甲基化修饰的影响
摘要：目的：探讨叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞（ESCs）中Nespas差异甲基化区域（Differentially Methylated Region,DMR）甲基化修饰的影响以及叶酸浓度与甲基化水平的关系。方法：多种不同浓度叶酸处理小鼠ESCs,化学发光免疫分析法检测ESCs细胞内叶酸浓度。利用MassARRAY技术平台检测三种不同叶酸浓度处理后的ESCs中Nespas DMR启动子区,外显子区和内含子区甲基化修饰状态,并且分析Nespas DMR启动子区,外显子区和内含子区甲基化水平与叶酸浓度之间的关系。结果：无叶酸组（FF）小鼠ESCs细胞内叶酸浓度显著低于低叶酸组（FD）与正常叶酸组（FN）（P〈0.05）。Nespas DMR中启动子区、外显子区以及内含子区甲基化水平在FF组显著低于FD和FN组（P〈0.05）,并且Nespas DMR中启动子区以及内含子区甲基化水平与叶酸浓度存在显著的正相关（P〈0.05）。结论：叶酸缺乏影响小鼠ESCs中Nespas DMR区甲基化修饰的建立。脂多糖通过自噬作用促进氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞的形成
摘要：目的：研究脂多糖（LPS）促进氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的泡沫细胞形成的机制。方法：人源性THP-1细胞的培养,经ox-LDL诱导形成泡沫细胞。采用油红O染色鉴定泡沫细胞的形成,免疫荧光和Western blot方法检测自噬活性,观察自噬作用对泡沫细胞脂质沉积的影响。结果：①经形态学观察,脂多糖可以促进ox-LDL诱导的泡沫细胞的形成。②脂多糖可以激活自噬作用,并且自噬活性在16h达到最强。③脂多糖可以增强自噬激活剂雷帕霉素（Rap）的促自噬作用（P〈0.05）,并且削弱自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）的作用。④Rap单独作用不能影响泡沫细胞中脂质的累积,然而脂多糖能够增强Rap的作用,显著促进脂滴在泡沫细胞中的累积（P〈0.05）;3-MA可以抑制基础水平和脂多糖诱导后泡沫细胞中脂滴的积累。结论：脂多糖通过增强自噬作用促进泡沫细胞的形成。人参皂甙Rd通过调节SNI大鼠背根神经节钠、钾电流抑制痛敏
摘要：目的：观察人参皂甙Rd（ginsenoside Rd）对大鼠坐骨神经分支选择性损伤（spared sciatic nerve injury,SNI）引起的痛敏的影响及其作用机制。方法：坐骨神经分支选择性损伤术后7天,观察腹腔注射不同浓度人参皂甙Rd后大鼠后足的机械性缩足反应阈值（paw withdrawl mechanical threshold,PWMT）的变化;在术后7天,急性分离并取出大鼠腰4和腰5段背根节,对整节DRG上的中小型神经元运用全细胞膜片钳技术进行记录。结果：坐骨神经分支选择性损伤术后7天,大鼠出现明显的机械性痛敏,腹腔注射5 mg/ml和10 mg/ml的人参皂甙Rd能剂量依赖性的翻转大鼠机械性痛敏;坐骨神经分支选择性损伤能明显地增大SNI大鼠DRG中小型神经元上的钠电流以及减小电压依赖性钾电流,而100μM人参皂甙Rd能有效翻转该钠、钾电流的变化。结论：人参皂甙Rd能有效地改善坐骨神经分支选择性损伤引起的机械性痛敏,其机制可能与人参皂甙Rd明显地调节SNI大鼠DRG中小型神经元上的电压依赖性钠、钾电流有关。高浓度葡萄糖通过p38MAPK-TXNIP/TRX-ROS通路抑制MC3T3-E1细胞成骨分化
摘要：目的：研究高浓度葡萄糖抑制MC3T3-E1细胞成骨分化的机理。方法：建立MC3T3-E1细胞成骨分化诱导体系,观察不同浓度葡萄糖（5.5mM和22mM）对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响;用不同浓度的p38 MAPK抑制剂Fr167653（0.1μM、1.0μM和10μM）进行药物干预,观察MC3T3-E1细胞在22mM葡萄糖浓度下成骨分化的变化情况。通过钙含量检测、Real time PCR检测相关分化的变化;用Western Blot方法检测MC3T3-E1细胞分化过程中p38 MAPK磷酸化状态、TXNIP表达水平的变化;使用胰岛素二硫键还原法检测细胞内TRX活性水平;使用活性氧检测试剂盒检测细胞内自由氧生成水平。结果：体外诱导条件下,高浓度（22mM）葡萄糖通过升高p38 MAPK磷酸化水平,上调TXNIP表达水平,同时降低TRX活性,使细胞内自由氧生成增加,抑制MC3T3-E1细胞的成骨分化;Fr167653通过抑制p38 MAPK磷酸化,下调TXNIP表达同时升高TRX活性,抑制细胞内自由氧生成,解除高浓度葡萄糖对细胞成骨分化的抑制作用。结论：高浓度葡萄糖通过p38 MAPK-TXNIP/TRX-ROS信号通路抑制MC3T3-E1细胞成骨分化。大鼠心肌梗塞后心室重构中miRNA的差异表达
摘要：目的：筛选大鼠急性心梗后的心室重构过程中差异表达的微小RNA（microRNA,miRNA）,为miRNA调控心室重构的机制研究提供靶标。方法：20只成年雄性Wistar大鼠,分组如下：心肌梗死组（MI组,n=10）和假手术组（Sham组,n=10）。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支构建急性心梗模型建模。4周后对大鼠进行超声心动图检查和梗死边缘区心肌HE染色观察心室重构程度。利用miRNA芯片对心梗边缘区的miRNA进行差异表达检测,采用实时定量PCR验证芯片结果的可靠性。结果：心脏超声显示MI组大鼠左室重构明显,心梗边缘区心肌HE染色可见细胞间质大量胶原纤维沉积。miRNA芯片结果显示15个miRNA在心梗4周后呈差异表达,其中11个miRNA（miR-21、miR-23a、miR-125b、miR-132、miR-146b、miR-181b、miR-199a、miR-320、miR-324、miR-328和miR-499）表达上调,4个miRNA（miR-29、miR-30c、miR-133a和miR-208）表达下调。实时定量PCR验证结果与芯片结果一致。结论：这些差异表达的miRNA可能与心梗后心室重构相关,进一步深入研究特定miRNA的调控机制有望为基因治疗提供新靶点。不同压力智能型人工肛门封堵装置封堵效果试验
摘要：目的：比较不同压力智能型人工肛门封堵装置的效果。方法：选用8-10月龄西藏小型猪进行动物试验。先进行结肠造口动物模型制备,再设计为3个不同气囊压力组分别接受试验。观察动物一般情况、造口泄露率、造口处肠壁粘膜组织中性粒细胞和淋巴细胞及肠管局部血流灌注量,并对应进行各影响因素的综合分析。结果：33.33 mmHg的压力组较之于其它两组,一般情况较差,体重下降明显（p=0.004）;造口泄漏率最低,但造口处肠壁粘膜组织中性粒细胞和淋巴细胞显著上升（p=0.000）;肠管局部血流灌注量显著下降（p=0.000）,提示压力太大易致使造口处血运变差及并发感染。结论：压力过大时对周围组织及肠管压迫严重,容易引起缺血、坏死、感染等并发症。压力过小时又易发生泄漏,无法达到封堵目的。以气囊压力约18 mmHg较为适宜。CHFR基因在B细胞淋巴瘤细胞中的表达及意义
摘要：目的：探讨CHFR基因在B细胞淋巴瘤Raji细胞中的表达,以及CHFR基因甲基化对Raji细胞增殖和凋亡中所产生的影响。方法：体外培养人B细胞淋巴瘤细胞株Raji细胞,用不同浓度的去甲基化试剂5-氮杂-2脱氧胞苷处理Raji细胞株,通过RT-PCR检测CHFR基因表达水平的变化,通过MS-PCR检测CHFR基因甲基化变化,CCK法及流式细胞术检测Raji细胞增殖及凋亡变化。结果：CHFR基因在Raji细胞中出现弱表达,经去甲基化试剂处理后CHFR基因表达水平增高,随药物浓度增加Raji细胞的抑制率及凋亡率增高。结论：5-氮杂-2脱氧胞苷可以恢复CHFR基因表达水平,抑制Raji细胞的增殖,促进凋亡。CHFR基因在细胞增殖起负向调控的作用。通过整体消化法分离具有集落形成能力的胰腺上皮样细胞
摘要：目的：胰腺上皮细胞能诱导成表达胰岛素的细胞,成为细胞替代疗法治疗糖尿病的重要来源。胰腺细胞的分离多采用机械剪切后胶原酶消化,本文在以往研究基础上,探索一种能分离得到更纯净的胰腺上皮样细胞的新方法。方法：本研究采用胰腺整体消化的方法,将成体小鼠整个胰腺取下,摘除系膜及大的血管,置于胶原酶中消化20min,用PBS吹打胰腺组织,得到的细胞悬液,离心后去除上清与细胞碎片,用培养基重悬实质细胞,接种于6 cm培养皿中,培养7-10天后得到单细胞集落。结果：整体消化法不剪碎胰腺组织,从而避免多种胰腺细胞的参与,得到较为纯净的胰腺上皮细胞悬液,细胞总体数量小于部分消化法,但是单细胞比率远远高于部分消化法,得到的细胞集落更纯净,不需要去除成纤维细胞,方便筛选及进一步扩大培养。结论：整体消化法能够分离纯化出一群在离体条件下具有强增殖能力、形成大的上皮样集落的细胞。该分离方法方便、快捷,为今后进一步研究成体胰腺干细胞增殖与分化调控机制等问题奠定基础。miRNA-125b在膀胱癌中的表达和意义
摘要：目的：探讨膀胱癌组织中miR-125b的表达在膀胱癌发生发展中的作用及其临床意义。方法：采用应用茎环RT-PCR的方法检测66例膀胱尿路上皮癌组织标本的miR-125b的表达,另有16例正常膀胱黏膜组织作对照,并结合临床病理资料进行统计学分析。结果：miR-125b在膀胱癌组织中的表达显著高于非肿瘤的正常膀胱黏膜组织（p〈0.05）,miR-125b的水平还与表达水平与膀胱癌的组织学分级、肿瘤转移、术后复发均明显相关性（P〈0.05）。结论：miR-125b在膀胱癌组织中表达量升高,且与组织学分级、肿瘤转移、术后复发相关,可能作为膀胱癌诊断和预后指标。喉癌组织中类高内皮微静脉形态学及蛋白多糖表达的研究
摘要：目的：通过对喉癌组织中类高内皮微静脉的分布、超微结构和蛋白多糖表达的观察,探讨淋巴细胞归巢的抗肿瘤意义及蛋白多糖对淋巴细胞归巢的调节作用。方法：应用透射电镜及阳性胶体铁染色方法,观察和研究32例喉癌组织中的类高内皮微静脉的分布、超微结构和蛋白多糖的表达。结果：（1）早期病变肿瘤周边组织内可见大量类高内皮微静脉,其内皮细胞高大,胞浆突起增多,细胞核大,细胞器丰富,有大量淋巴细胞穿越管壁,可见大量肿瘤浸润淋巴细胞存在;晚期病变组织内类高内皮微静脉少见,淋巴细胞穿越管壁不活跃,肿瘤浸润淋巴细胞明显减少。（2）类高内皮微静脉壁,特别是邻近管腔侧与阳性胶体铁呈强阳性反应,在有淋巴细胞穿越的部位反应更加明显,而内皮扁平的血管基本不反应或反应微弱。结论：（1）喉癌组织中部分毛细血管后微静脉可演变为类高内皮微静脉,是淋巴细胞向癌组织中浸润（淋巴细胞归巢）的重要场所;（2）肿瘤组织中的淋巴细胞归巢与抗肿瘤密切相关;（3）蛋白多糖于淋巴细胞归巢旺盛的类高内皮微静脉呈强表达,可能对归巢淋巴细胞穿越类高内皮微静脉有调节作用。TP新辅助化疗方案治疗Ib-Ⅱa期局部晚期宫颈癌的临床效果观察
摘要：目的：观察并探讨宫颈癌术前行TP与PF两种新辅助化疗方案的临床效果,优选新辅助化疗方案。方法：将2008年1月-2010年12月间入选的91例Ib-Ⅱa宫颈癌患者随机分为A（n=46）、B（n=45）两组,A组患者子宫切除术前予TP新辅助化疗方案,B组予PF方案,各2个周期,对比化疗结束后两组临床疗效、化疗期间药物毒性反应及术后2年内宫颈癌复发率。结果：①A、B两组总体有效率分别为89.1%、82.2%,差异不具有统计学意义（P〉0.05）,但前者化疗后瘤体直径明显小于B组（P〈0.05）;②两组药物毒性反应构成不具有统计学差异（P〉0.05）,但A组胃肠道反应与肝脏毒性发生率明显低于B组（P〈0.05）;③A、B两组组术后2年内宫颈癌复发率分别为2.2%、11.9%,复发率无统计学差异（P〉0.05）。结论：宫颈癌术前TP新辅助化疗方案较之BIP方案具有比较优势,更具备临床推广价值。冠状动脉CT造影对冠心病的临床诊断价值研究
摘要：目的：探讨研究冠状动脉CT造影检查对冠心病的临床诊断价值。方法：收集我院2012年1月至2013年10月共计70例临床怀疑为冠心病的患者,对这些患者分别进行冠状动脉CT造影检查和数字减影冠状动脉造影（DSA）检查,记录这两项检查所得结果及数据,以检查数据为基础对冠状动脉CT造影和数字减影冠状动脉造影检查的临床实验效果进行对比研究。结果：70例病人均可顺利完成以上两种检查,按照数字减影冠状动脉造影检查的标准,冠状动脉CT造影的敏感度为92.2%,特异度为97.4%、阳性预测率为90.5%、阴性预测率98%。结论：相对于数字减影冠状动脉造影检查,冠状动脉CT造影检查是一种更加安全、可靠、无创且更具临床指导意义的检测技术,因此可以推荐作为冠心病诊断的首选方法。锁定钢板治疗胫骨平台骨折的临床疗效分析
摘要：目的：探讨锁定钢板内固定治疗胫骨平台骨折的临床疗效及安全性。方法：回顾性分析本院2010年1月～2013年1月接受锁定钢板内固定治疗的50例胫骨平台骨折手术后患者的临床资料。其中男性36例,女性14例,骨折类型按Schatzker分型分为Ⅱ型20例、Ⅲ型6例、Ⅳ型5例、Ⅴ型7例、Ⅵ型12例,均采用开放复位锁定钢板螺钉内固定治疗。采用Rasmussen膝关节功能分级系统评价其临床疗效。结果：本组50例患者均获得随访,平均随访时间18个月（8～36个月）,Rasmussen膝关节功能分级结果为：优38例,良9例,可2例,差1例,优良率达94%。结论：开放复位锁定钢板内固定治疗胫骨平台骨折具有固定可靠,骨折愈合率高的优点,且并发症少,是一种治疗胫骨平台骨折的有效内固定方法。内支架对大肠癌急性梗阻一期切除吻合疗效的探讨
摘要：目的：探讨内支架对大肠癌急性梗阻一期切除吻合的疗效。方法：选择2010年7月至2012年7月来我院急诊治疗确诊为大肠癌导致急性肠梗阻的患者98例,随机分为观察组和对照组各49例,观察组患者植入内支架,一周后行一期吻合切除术,对照组行急诊切除手术。观察和比较两者患者一期切除率、治疗效果和并发症的情况。结果：观察组一期切除率为95.7%（47例）较对照组分71.4%（35例）高;两组比较差异均有统计学意义（χ^2=22.9,P〈0.05）;实验组症状缓解48例（缓解率98%）,对照组症状缓解33例（缓解率67.3%）,两组临床疗效比较有显著性差异（χ^2=33.3,P〈0.001）,实验组术后并发症发生率（10.2%）要明显小于对照组（26.5%）（χ^2=9.6,P〈0.01）。结论：大肠癌急性梗阻术前植入内支架能有效提高患者的一期手术吻合率和治疗效果,降低术后并发症,值得在临床推广。右美托咪定与咪达唑仑用于肠镜检查患者镇静效果比较
摘要：目的：比较右美托咪定与咪达唑仑用于肠镜检查患者效果比较。方法：肠镜检查的患者60例,随机分为两组：D组静脉输注右美托咪定0.6μg/kg,M组静脉输注咪达唑仑0.08 mg/kg,均用生理盐水10 mL稀释,10 min输注完毕后进行肠镜检查。观察患者血流动力学指标及呼吸指标的变化,是否完成肠镜,患者的满意度以及检查过程中的不良反应。结果：右美托咪定组所有患者镇静满意,均能很好耐受肠镜检查,并且检查过程中MAP、HR和SpO2稳定（P〉0.05）。咪达唑仑组镇静时有轻度呼吸抑制,肠镜检查过程中MAP和HR升高（P〈0.05）,插管耐受率低于右美托咪定组（P〈0.05）。结论：右美托咪定用于肠镜镇静有效,无呼吸抑制,血流动力学稳定,是理想的辅助药。乌鲁木齐妇女乳腺自查行为与认知现况分析
摘要：目的：了解乌鲁木齐妇女乳腺自查行为及认知情况。方法：采用自行设计的问卷对2041名来我院进行妇女病普查的受访者进行乳腺自查行为与认知情况调查。结果：定期、不定期、从不做乳腺自查的比例分别为28.7%、53%、18.3%。定期做乳腺自查受访者对相关知识认知情况较好于其它组,定期自查的受访者的乳腺自检各条目应答率高于不定期自查受访者。结论：乌鲁木齐妇女的乳腺自查率有待提高,自查行为存在不规律、不规范现象,应加强由医务人员主导的健康教育。鼻内镜下行鼻中隔矫正术对鼻腔鼻窦微创治疗的临床效果及意义
摘要：目的：探讨鼻内镜下鼻中隔矫正术的效果及其对鼻腔鼻窦微创手术的临床意义。方法：2010年3月至2013年3月对102例伴有鼻中隔偏曲的鼻腔鼻窦疾病患者,随机分为研究组（n=78）和对照组（n=24）,分别施行了鼻内镜下鼻中隔矫正术和传统手术。结果：对照组患者治愈率为64.29%、总有效率78.57%,治疗组分别为83.78%和95.95%;两组临床疗效比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。研究组患者的术中的出血量和手术时间均明显少于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。术后研究组患者的出血量和并发症总数均明显少于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。研究组患者的平均住院时间明显短于对照组,差异显著具有统计学（P〈0.05）。结论：鼻内镜下鼻中隔矫正术较传统鼻中隔矫正术安全,效果可靠,手术并发症少,患者恢复快,更有利于同期鼻腔鼻窦微创手术的实施,提高了其手术治疗效果。P波离散度对房颤消融术后复发的预测价值
摘要：目的：探讨P波离散度对心房颤动（房颤）导管消融术后复发的预测价值。方法：连续收集经导管消融的房颤患者120例,根据是否复发分为复发组与对照组,分别测定和比较两组术后心电图最大P波时限（Pmax）及最小P波时限（Pmin）并计算P波离散度（Pd）。结果：房颤消融术后,53例病人复发,复发组最大P波时限（132±23mm VS 102±25mm）及P波离散度（33±9mm VS 29±10mm）均显著高于非复发组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：P波离散度可用于辅助预测房颤导管消融术后是否复发。
