现代生物医学进展杂志社
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现代生物医学进展杂志

《现代生物医学进展》杂志在全国影响力巨大,创刊于2011年,公开发行的旬刊杂志。创刊以来,办刊质量和水平不断提高,主要栏目设置有:述评、研究快报、基础研究、临床研究、专论与综述、技术与方法、研究简报、生物磁学等。
  • 主管单位:黑龙江省卫生厅
  • 主办单位:黑龙江省红十字医院;黑龙江省森林工总医院
  • 国际刊号:1673-6273
  • 国内刊号:23-1544/R
  • 出版地方:黑龙江
  • 邮发代号:14-12
  • 创刊时间:2011
  • 发行周期:旬刊
  • 期刊开本:A4
  • 复合影响因子:0.76
  • 综合影响因子:0.318
期刊级别: 统计源期刊
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服务介绍

现代生物医学进展 2014年第08期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志基础研究

富血小板纤维蛋白对兔骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

摘要:目的:观察自体富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)对体外培养的兔骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)成软骨分化的影响。方法:兔心脏采血制备PRF,电镜观察其超微结构;分离培养兔BMSCs,取第3代细胞用于实验.分为PIuF组、阳性对照组、空白对照组。诱导培养21d后,对三组细胞分别进行形态学观察,成软骨鉴定染色(甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫组化染色),软骨相关基因表达检测(Ⅱ型胶原、Aggrecan、SOX9)。结果:PRF组和阳性对照组中BMSCs经诱导后,细胞由长梭形变为三角形、多角形、圆形;甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫组化染色均为阳性;Ⅱ型胶原、Aggrecan、SOX9基因表达水平均较高,两组比较无统计学差异,空白对照组未见相关分化现象。结论:PRF在体外可促进兔BMSCs成软骨分化,可作为自体生物材料,在构建组织工程软骨中发挥更好的作用。
1407-1410

TGF-β1诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排的机制

摘要:目的:牙周病是由多种因素引起的,特别是人牙周膜细胞的缺失。转化生长因子-β1(TGF—β1)是一种多功能细胞因子,在治疗牙周病中发挥重要的作用,但很少有人清楚地研究TGF-β1对人牙周膜细胞的影响。因此,本研究的目的是探讨TGF—p1诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排的信号通路。方法:人牙周膜细胞取自健康的前磨牙,并向同步化处理的细胞中加入10ng/m1的TGF-β1,并通过相差显微镜观察它们的形态学变化。通过免疫组化和共聚焦显微镜观察F-肌动蛋白重排。用Westernblot分析蛋白表达情况。结果:我们发现TGF-β1诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排,激活ROCK蛋白的表达,并增加p-IIMK和p-cofilin的蛋白表达。ROCK抑制剂Y-27632使ROCK,p-IIMK和p-cofilin的蛋白表达下降。结论:TGF-β1可以诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排,并且是通过上凋ROCK,P.IlMK和p-cofilin的活性完成的。本研究可以增强对TGF-β1在治疗牙周疾病方面的作用机制的了解。
1415-1419

高脂培养抑制LPS诱导的HSC-T6细胞活化

摘要:目的:鉴定高脂培养对肝星形细胞活化的影响。方法:培养HSC-T6细胞系,加入含有游离脂肪酸的高脂培养基处理,利用LPS处理活化,通过检测α-SMA的表达分析星形细胞的活化程度,通过Q—PCR分析HSCs细胞胶原的表达,通过Q-PeR实验分析LPS相关通路靶基因表达情况情况。结果:高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC-T6细胞增殖,降低HSC-T6细胞α-SMA和胶原I和TIMP-1表达的水平,Q.PCR的分析表明,高脂培养能够抑制HSCs活化后的NF.KB通路下游靶基因MCP-I和IL-6的表达。结论:在体外培养实验中,高脂培养能够抑制LPS诱导的HSC—T6细胞活化。
1420-1422

白藜芦醇对氧糖剥夺/再灌注损伤的PC12细胞的保护作用及其作用机制

摘要:目的:探讨白藜芦醇对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)损伤的PCI2细胞的保护作用及其机制。方法:体外培养PCI2细胞,分为对照组,白藜芦醇组,OGD/R组及OGD/R+白藜芦醇组。以改良的噻唑蓝法测定细胞活性,采用AnnexinV—FITC/PI双染法检测细胞的凋亡率,用双氯罗丹明(DHR)检测细胞内活性氧簇(Ros)的水平,采用蛋白印迹法(westemblot)分析SIRTl的蛋白表达情况。结果:与对照组相比,经过OGD/R损伤后,细胞活力显著降低。而在OGD/R的同时给予10μmol/L的白藜芦醇处理。可以明显提高细胞活力。流式细胞仪检测发现,10μmol/L的白藜芦醇可以显著地减少OGD/R引起的细胞凋亡,抑制细胞内的ROS产生。westemblot的结果提示,与对照组比较,白藜芦醇可提高SIRTl的蛋白表达水平。结论:白藜芦醇可以通过抑制ROS的产生和上调SIRTl的表达等机制而发挥其对抗氧糖剥夺/再灌注损伤的神经保护性作用。
1423-1427

大鼠门静脉分支残端置管模型构建及细胞移植途径的评价

摘要:目的:大鼠肝部分切除模型被广泛的应用于肝脏疾病的研究,随着干细胞治疗肝损伤及护肝药物研究的发展,对大鼠肝损伤模型也提出了很多新的要求。本实验拟在大鼠肝部分切除术的基础上改进以建立大鼠肝断面门静脉分支残端的静脉置管模型,并进行细胞移植实验,对比分析新模型的优劣。方法:60只F344大鼠分为三组。A、B组行行85%肝切除术;C组行85%肝切除术+肝断面门静脉分支残端置管术。术中B组经门静脉注入4×105个表达GFP(greenfluorescenceprotein,GFP)的胎肝干细胞(fetalliverstern/progenitorcells,FLSPCs)。c组经留置导管注射入同等量的FLSPCs,A组注射同等剂量的培养液。72小时取血清,测定肝功能ALT、AST,统计死亡率;取肝脏组织切片观察其修复情况。统计学采用方差分析和LSD—t检验。结果:B、C组F344大鼠72小时肝功指标(ALT、AST)均明显优于A组;B组、C组肝脏组织学的病理损伤的恢复分别较A组快。B、C组间肝功指标无统计学意义。结论:经门静脉分支残端置管途径移植FLSPCs效果等同于经门静脉穿刺途径,且该模型具有可反复、可选时、减少创伤等优点。
1428-1430

利用eQTL构建基因-基因网络挖掘类风湿性关节炎风险基因

摘要:目的:类风湿性关节炎是一种全身的慢性炎症型疾病,可能影响许多组织和器官,主要发作于灵活的关节。全世界人群中大约有1%会患有类风湿性关节炎。目前已经证实了一些基因与类风湿性关节炎相关,但是这些基因只能解释一小部分遗传风险,因此我们需要新的策略和方法来解决这个问题。方法:表达数量性状位点(eQTL)是指能够调控基因或蛋白质表达的基因组位点,本文采用了eQTL数据构建基因一基因网络并挖掘候选类风湿性关节炎风险基因。结果:首先,利用eQTL数据,基于基因之间的共调控系数,建立基因-基因网络,我们建立了5个不同阈值(0、O.2、0.4、0.6和0.8)的基因-基因网络;然后,在OMIM和GAD数据库中搜索已经证实的与类风湿性关节炎相关的186个基因;最后我们将已证实与类风湿性关节炎相关的186个基因分别投入到这5个网络中,利用基因与基因之间的相关性来挖掘到一些可能与类风湿性关节炎相关的候选风险基因。结论:本文基于eQTL构建了基因.基因网络,结合已知类风湿性关节炎风险基因,挖掘未知风险基因,得到了较好的结果,证明了本方法的有效性,且对于类风湿性关节炎的发病机制研究具有重要价值。除了类风湿性关节炎外,本方法还可推广到其它复杂疾病中,因此本方法对人类复杂疾病的研究具有很强的学术理论价值和应用价值。
1431-1434

GDNF的生物学效应对脂筏中胞膜蛋白定位的重要性研究

摘要:目的:探讨GDNF的生物学效应对胞膜蛋白在脂筏的定位的影响。方法:首先以PBS或GDNF预处理体外培养的真核细胞,提取脂筏,以免疫印迹方法检测三种胞膜蛋白(RET,NCAMl40及integrinβ1)在脂筏的含量变化。结果:GDNF预处理组RET和NCAMl40蛋白在脂筏的含量增加,而integrinlM蛋白的含量无显著性变化。在脂筏中也可检测到integrinβ1蛋白。结论:GDNF可影响某些胞膜蛋白在细胞膜上的定位,使其招募到脂筏,这可能是GDNF的一种重要生物学效应。
1435-1437

胚胎与成人三叉神经节细胞形态对比观察

摘要:目的:探讨胚胎与成人三叉神经节细胞的形态学特征。方法:采用常规HE染色,运用电子显微超微结构技术及特殊染色,对比观察二者的形态学特征。结果:胚胎与成人三叉神经节细胞大体分布及形态一致,与胚胎三叉神经节细胞相比,成人最突出的特点是节细胞大,核仁清晰,居中。电镜下节细胞的细胞器较丰富,发育完善。且成人三又神经节神细胞明暗区别明显。结论t三叉神经节细胞结构与功能完善是在成年之后,成人三又神经节细胞存在明暗两类细胞。
1438-1441

hBMP-7基因转染对原代培养兔髓核细胞生物学活性的影响

摘要:目的:探讨原代培养的兔髓核细胞转染腺病毒载体介导的人骨形态发生蛋白-7(hBMP-7)基因后对其生物学活性的影响。方法:根据兔髓核细胞转染方式的不同,分为hBMP7组、Lacz组、未转染组三组,hBMP7组采用腺病毒载体介导的hBMP7进行转染,LacZ组转染LacZ基因,未转染组不转染任何基因。比较三组细胞增殖、硫酸糖胺多糖(GAG)产量、Ⅱ型胶原产量有无差异。结果:处理方式和转染后时间对细胞增殖、GAG产量、Ⅱ型胶原产量有交互作用(P〈0.05),hBMP7组细胞增殖、GAG产量、Ⅱ型胶原产量高于LacZ组、未转染组,差异有统计学意义(P〈0.05),LacZ组和未转染组细胞增殖、GAG产量、Ⅱ型胶原产量差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:hBMP.7基因转染可提高髓核细胞增殖能力,促进其产生细胞外基质。
1442-1445

老年慢性心力衰竭患者肿瘤坏死因子、脑钠肽水平变化及其相关性分析

摘要:目的:探讨老年慢性心力衰竭(CHF)肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及脑利钠肽水平的变化,并对其进行相关性分析。方法:选择老年CHF患者59例,根据心功能分级,Ⅱ级19例,Ⅲ级25例,Ⅳ级15例;另选心功能正常的老年人36例。所有入选者予以血清BNP、TNF-α测定,并采用彩色多普勒超声测定左心室舒张末内径并计算左室射血分数(LVEF)。结果:与对照组比较,CHF组心功能Ⅲ、Ⅳ级患者TNF-α水平明显升高(P〈0.05),心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者血BNP水平明显升高(P〈0.05),并随心功能分级加重而增加。血TNF-α水平与BNP呈正相关(r=0.57,P〈0.05)。CHF患者中血清TNF-α和BNP水平与LVEF比较均呈负相关(F-0.48,r=-0.64,P〈0.05)。结论:老年CHF患者血TNF-α显著升高,并与BNP及LVEF关系密切,是反应CHF患者心功能恶化的重要预测指标。
1446-1448

内毒素诱导非小细胞肺癌细胞增殖及其机制

摘要:目的:研究内毒素对体外培养非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549细胞增殖的影响及其机制。方法:不同浓度脂多糖(LPS)进行8-48h干预,MTT及细胞计数法检测其对A549细胞增殖的影响;EGFR中和抗体或COX.2抑制剂与LPS联合干预,检测其对A549细胞增殖及PGE2的影响。结果iLPS可引发A549细胞MTT活性和细胞计数显著增加,且呈现时间和剂量依赖性。LPS还可诱发PGE2水平显著升高。药物干预结果显示,抑制COX-2或EGFR可明显逆转LPS所引发的细胞增殖和PGE2水平升高趋势。结论:LPS可能通过激活EGFR和COX-2信号途径,诱导体外培养的非小细胞肺癌细胞增殖分化。肺部感染可能会加速非小细胞肺癌进展,并可能造成不良预后。
1449-1451

黄芪甲苷对人骨髓间充质干细胞体外增殖及细胞因子表达的影响

摘要:目的:探讨黄芪甲苷对人骨髓间充质干细胞体外增殖及细胞因子表达的影响。方法:采用Percoll密度离心法和贴壁法分离纯化hBMSC;流式细胞术检测hBMSC表面标志;MTT法检测不同浓度黄芪甲苷干预72h后hBMSC的增殖情况;Real-timePCR法检测经黄芪甲苷干预后hBMSC对SCF、VEGF、SDF-1、GM-CSFmRNA的表达水平。结果:成功分离培养出laBMSC;不同浓度(20、40、80、160、320mg/mL)的黄芪甲苷可促进hBMSC增殖(P〈0.05),其中160mg/mL组促增殖最明显;黄芪甲苷可促进hBMSC对SCF、VEGF、SDF-1mRNA的表达,而GM—CSFmRNA表达无明显变化。结论:黄芪甲苷可促进hBMSC体外增殖,可能与其促进hBMSC对SCF、VEGF、SDF-1mRNA表达有关。
1452-1455

DPC4/Smad4基因RNA干扰靶点设计和慢病毒载体制备

摘要:目的:DPC4/Smad4基因RNA干扰靶点的设计和RNA干扰靶点慢病毒载体制备。方法:针对DPC4/Smad4基因序列,并利用网站设计程序,依据RNA干扰序列设计的原则,设计多个RNA干扰靶点序列。根据设计经验和设计软件将其进行评估测定,选择最佳动力学参数靶点进入其后续的实验流程;生工生物合成含干扰序列的DNAoligo,具有严格的检测体系(PAGE纯化体系),其两端含酶切位点粘端,直接连入酶切后的RNA干扰载体上。将连接好的产物转入制备好的细菌感受态细胞,并且对长出的克隆进行酶切鉴定。然后挑选出阳性克隆测序,进行测序比对后,鉴定阳性的克隆即为构建成功的目的基因RNA干扰慢病毒载体。将构建的慢病毒载体以及辅助包装载体质粒共转染到293T细胞。收获含有病毒的细胞培养上清,浓缩后进行滴度测定,并检测其感染性。另外应用荧光实时定量PCR检测在感染的293T细胞中敲减效果。结果:成功构建DPC4/Smad4shRNA的慢病毒载体LVshSmad4,并成功制备DPC4/Smad4shRNA慢病毒,三株病毒感染细胞后均具有有效的敲减效应,其中SHl最为显著。结论:DPC4/Smad4基因RNA干扰靶点的成功设计和RNA干扰靶点慢病毒制备,为以后探讨DPC4/Smad4基因与肿瘤的相关性治疗提供了实验基础。
1456-1459

DADS对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系增殖抑制的研究

摘要:目的:研究二烯丙基二硫(diallyldisulfide,DADS)对人小细胞肺癌NCI.H446细胞增殖的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:体外培养NCI-H446细胞,采用MTT、细胞计数实验方法检测DADS抑制NCI—H446细胞增殖;通过HE染色和AO—EB荧光染色方法,观察DADS处理后NCI—H446细胞的形态学改变。结果:MTT结果显示:DADS作用于NCI—H446细胞48h后,代谢MTT的能力明显降低,显示出较强的细胞毒性反应,IC50值介于20-40μg/ml之间。细胞计数结果表明:DADS作用于NCI—H446细胞后,随DADS浓度增加NCI—H446细胞倍增时间延长。HE染色显示:NCI—H446细胞经DADS处理24h后,与对照组相比,细胞体积变小,胞浆丰富,细胞核变小,染色变淡。AO-EB荧光染色显示:NCI-H446细胞经DADS处理24h后,与对照组相比,细胞皱缩、呈圆形,胞质黄色或橘红色,细胞核或细胞质内可见致密浓染的黄绿色或橘红色荧光,并可见橘红色碎片且随DADS浓度增加,随DADS浓度增加细胞密度逐渐减少。结论:DADS能抑制体外培养的NCI—H446细胞增殖,作用效果与药物浓度及作用时间相关。
1460-1463

熊果苷对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响

摘要:目的:本研究旨在探讨中药熊果苷对缺血再灌注损伤后脑细胞的影响,为中药熊果苷的临床应用提供理论依据。方法:昆明种小鼠40只,随机分成4组,即空白组、模型组、药物预防组和药物治疗组。根据缺血时脑损伤原理制成脑缺血再灌注损伤模型,以TTC染色、HE染色观察细胞形态学变化,并检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化。结果:与模型组相比,药物预防组和药物治疗组分别TTC染色缺血区域都不如模型组坏死明显,HE染色显示细胞损伤程度减轻,SOD、GSH—Px活性提高有显著性差异,MDA含量减少(均P〈0.05)。结论:药物熊果苷具有抗氧化作用,能有效地预防和保护脑细胞损伤。
1464-1466
现代生物医学进展杂志临床研究

Cdk1在浆液性卵巢癌中的表达及其与化疗耐药及预后的相关性

摘要:目的:卵巢癌是女性生殖致死率最高的恶性肿瘤。Cdkl作为细胞周期依赖性激酶中的核心分子,对肿瘤细胞的发生发展具有重要作用。本文旨在探讨Cdkl蛋白在上皮性浆液性卵巢癌中的表达情况,并分析其表达水平与患者临床病理特征、化疗反应及预后之间的关系。方法:采用免疫组化法检测68例浆液性卵巢癌中Cdkl蛋白的表达情况,并结合临床资料分析Cdkl蛋白的表达水平在浆液性卵巢癌患者中的意义。结果:Cdkl在浆液性卵巢癌患者中具有不同程度的阳性表达,其表达水平和患者的年龄、病理分化程度、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关性(P〉0.05),但是其高表达与化疗耐药明显相关(P=0.040)。化疗耐药的卵巢癌患者中Cdkl的蛋白表达明显高于化疗敏感组,并且生存分析发现,高表达Cdkl的患者预后较差。结论:本研究证明Cdkl在浆液性卵巢癌中有较高表达,并且Cdkl的表达与卵巢癌化疗后复发有关,高的Cdkl表达预示着较差的预后。Cdkl可能是晚期浆液性卵巢癌治疗的新靶点。
1467-1470

54例慢性淋巴细胞白血病的临床回顾性分析

摘要:目的:本研究旨在探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)的实验室检查特点及特征性临床表现。方法:利用血细胞分析仪、流式细胞术、骨髓形态分析及R显带技术等对我院2002年4月.2012年4月收治的54例慢性淋巴细胞白血病患者的相关临床资料如血细胞计数、骨髓形态、染色体及免疫表型等进行检测并对结果进行回顾性分析。结果:CLL多发于老年患者,男性多见,中位年龄65岁(45.82岁)。大部分患者初诊时可出现典型的临床表现,37例(68%)患者初诊时淋巴结大,49例(91%)初诊时白细胞≥10×109、L,淋巴细胞绝对值≥5×109/L。13例(24%)初诊时肝脾或者脾大,17例(31%)初诊时乏力、消瘦。34(63%)例患者可见典型的CLL免疫表型,CD5、CDl9.CD23、CD20的阳性率分别为90%、87%、72%、67%。32例患者染色体检测结果表明:13q-2例,17p.2例,11q-1例,+12有1例,6q-1例,t(14,16)1例。2例患者发生了自身免疫性溶血性贫血(AIHA)。1例患者发生了Richter转化,肿大淋巴结活检显示部分区域为弥漫性大B细胞淋巴瘤,其高表达CD20、CDl9、CD22。结论:慢性淋巴细胞白血病具有其典型的临床表现、免疫表型及遗传学改变,并且对诊断及治疗有重要意义。
1471-1474

急性心肌梗死患者冠脉搭桥术前中性粒细胞-淋巴细胞比率与围术期心肌损伤相关分析

摘要:目的:探讨急性心肌梗死患者冠脉搭桥(CABG)术前中性粒细胞.淋巴细胞比率(NLR)与围术期心肌损伤的关系,为,临床CABG围术期心肌保护提供参考依据。方法:选取2012年1月至2012年6月于首都医科大学附属北京安贞医院因急性心肌梗死接受冠脉搭桥手术(CABG)患者210例,收集术前血常规及术后肌钙蛋白I(cTnI)?Life酸激酶同工酶(CK-MB),计算NLR;采用四分位法根据NLR水平将患者分为四组,比较各组cTnI及CK—MB峰值,多元逐步回归分析NLR与cTnI及CK-MB峰值的相关性。结果:随着NLR水平升高,高血压病史和射血分数〈50%患者比例逐渐增多;白细胞计数、术后CK-MB及cTnI峰值、术后血肌酐值均逐渐增加;多元逐步回归分析显示,NLR、WBC分别与cTnI峰值呈正相关(r=0.526,r=0.186,P〈0.05)。结论:术前NLR、WBC与cTnI峰值呈正相关,NLR可能是反应急性心肌梗死患者冠脉搭桥围术期心肌损伤的良好标志物。
1475-1478