现代生物医学进展杂志社
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现代生物医学进展杂志

《现代生物医学进展》杂志在全国影响力巨大,创刊于2011年,公开发行的旬刊杂志。创刊以来,办刊质量和水平不断提高,主要栏目设置有:述评、研究快报、基础研究、临床研究、专论与综述、技术与方法、研究简报、生物磁学等。
  • 主管单位:黑龙江省卫生厅
  • 主办单位:黑龙江省红十字医院;黑龙江省森林工总医院
  • 国际刊号:1673-6273
  • 国内刊号:23-1544/R
  • 出版地方:黑龙江
  • 邮发代号:14-12
  • 创刊时间:2011
  • 发行周期:旬刊
  • 期刊开本:A4
  • 复合影响因子:0.76
  • 综合影响因子:0.318
期刊级别: 统计源期刊
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服务介绍

现代生物医学进展 2014年第02期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志论著

蛋白酪氨酸激酶NOK/STYK1胞内区的表达与纯化

摘要:目的:酪氨酸蛋白激酶NOK/STYKl具有很强的促肿瘤形成和转移能力,被认为是很有前途的肿瘤治疗靶点。由于NOK含有一个跨膜区,且富含疏水性氨基酸,其表达和纯化非常困难,直接影响了对其功能及相关分子机理的深入研究。本研究目的是获得可溶的且纯度较高的NOK胞内区融合蛋白ANOK(AA:49—422),为后续抗体的制备和功能研究奠定重要基础。方法:含有△NOK基因的原核表达载体,转入E-coliBL21中,IPTG诱导蛋白表达,通过亲和层析获得可溶的△NOK融合蛋白。融合蛋白经凝血酶酶切后,凝胶过滤层析分离标签蛋白获得z~NOK蛋白。同时,我们还通过Bac-to-Bac系统获得含有ANOK基因的杆状病毒,感染sO细胞,尝试在真核细胞中表达目的蛋白。结果:通过在sf9昆虫细胞和大肠杆菌表达系统中盐浓度等各种条件的摸索,首次获得了可溶的且纯度较高的NOK胞内区融合蛋白(ANOK—GST)和一定量去除标签的ANOK蛋白。本研究中与大肠杆菌相比,昆虫细胞并不适合△NOK的纯化。结论:我们建立了一套优化的NOK蛋白表达和纯化体系,从而为后续抗体制备和各种体内外生化实验等功能研究奠定基础,为研究NOK在肿瘤中的作用和药物筛选创造条件。同时丰富了整个RTKs家族作用机制的探索,进一步促进了以RTKs为靶点的治疗手段在临床上的应用。
201-205

不同程度内质网应激对巨噬细胞自噬的影响

摘要:目的:采用ox-LDL诱导巨噬细胞泡沫化模型,通过不同剂量衣霉素诱导巨噬细胞不同程度内质网应激,观察对其自噬的影响。方法:不同剂量衣霉素作用于小鼠巨噬细胞系RAW264.7,通过TUNEL染色检测其凋亡率,Westernblot检测内质网应激蛋白GRP78,以及自噬标志蛋白P62的表达水平。结果:与ox-LDL组和大剂量衣霉素组相比,小剂量衣霉素组可以显著减少巨噬细胞的凋亡(P〈0.01);与ox-LDL组相比,小剂量衣霉素组上调内质网应激蛋白GRP78表达的同时,自噬标志蛋白P62适度下降(P〈0.01);大剂量衣霉素组更为显著地上调了内质网应激蛋白GRP78表达,但同时自噬标志蛋白P62也显著增加(P〈0.01)。结论:小剂量衣霉素引起一定程度的内质网应激,可以激活适度的自噬,从而减少巨噬细胞的凋亡,可能有助于降低动脉粥样硬化的程度。
209-213

慢性激活MrgC受体上调CGRP表达的nNOS机制

摘要:目的:检查持续应用BAMS-22对体外组织培养感觉神经节合成钙调素基因相关肽(cGRP)的影响。方法:将体外培养的大鼠三叉神经节和背根神经节经BAM8—22和L-NAME处理后,用酶联免疫法测定CGRP的表达含量变化。结果:与对照组相比,连续4天给予SNSR的选择性激动剂BAM8-22,CGRP的合成会增加。联合给予BAM8—22和NOS的非选择性抑制剂L-NAME,CGRP的表达随不同剂量的L-NAME引起不同程度的上调。结论:持续激活SNSR能使感觉神经节合成CGRP增多,是在体动物慢性激活SNSR后吗啡镇痛作用降低的细胞学机制。
214-216

罗格列酮和强的松对博来霉素诱导大鼠肺纤维化中FIZZ1表达的影响

摘要:目的:观察Fizzl在肺组织中的动态表达及其意义,并比较罗格列酮与强的松对Fizzl表达的影响。方法:90只雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组,强的松干预组,罗格列酮干预组,强的松+罗格列酮干预组,模型组和干预组大鼠气管内一次性注入博来霉素构建大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水。造模24小时后各干预组给予相应药物灌胃。各组动物于7、14、28d随机处死6只,测肺系数,取肺组织病理切片行HE和Masson染色,观察肺泡炎和纤维化程度,测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组化法检测Fizzl在肺组织中的表达情况。结果:干预组各时期肺纤维化程度均较模型组轻。Fizzl表达呈动态性变化,第7天表达最高,14d,28d表达减弱。干预组各时期Fizzl表达水平较模型组降低,其中罗格列酮和强的松联合干预组早期对Fizz的下调水平更大。结论:Fizzl的表达上调可能参与博来霉素诱导的肺纤维化形成;罗格列酮、强的松均可下调Fizzl表达减轻博来霉素诱导的肺纤维化程度,减少肺组织胶原的沉积,提示Fizzl可成为肺纤维化治疗的新靶点,罗格列酮和强的松联用治疗较单用强的松效果更好,对Fizzl的下调水平更大。
217-222

K-Rasa^G12D基因突变体慢病毒载体的构建及其鉴定

摘要:目的:构建K-RasGl2D基因突变体慢病毒载体。方法:从病人组织中提取RNA通过RT—PCR反转录获得cDNA作为K-RasGl2D基因模板,通过PCR法扩增出K-RasGl2D基因突变体片段。将酶切的片段克隆入真核表达载体pCDH-CMV—MCS—EF1-RFP中,构建K-RasG12D基因突变体逆转录病毒真核表达载体。将连接产物转化至感受态大肠埃希菌DH5a,挑取转化平板上的细菌克隆,在抗生素培养液中培养过夜后进行PCR鉴定。经测序正确后转染293T细胞系,利用重组质粒PCR及串联基因表达的检测等方法对目的基因的转录与表达进行分析与鉴定。结果:所构建的K-RasGl2D突变体基因逆转录病毒真核表达载体经PCR鉴定和测序鉴定正确,转染293T细胞后可以观察到可检测到高强度表达的RFP荧光信号。结论:成功构建了重组真核表达载体,为下一步建立稳定转染细胞系及进一步研究K-Ras突变在癌症发病中的作用奠定了基础。
223-225

微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞线粒体功能的影响

摘要:目的:探究微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞线粒体功能的影响。方法:采用BALB/c小鼠作为模型动物,随机分为3组:A组,空白对照组,正常饮用水;B组,添加5g门L微囊藻毒素.LR的饮用水;C组,添加30gm微囊藻毒素-LR的饮用水。分组喂养3个月,分离小鼠肝脏、提取线粒体,采用线粒体荧光探针JC-1测定线粒体膜电位(MMP),qRT-PCR检测自噬相关基因Beclinl和Lc3α的转录水平,WesternBlot检测细胞色素c的释放,电镜观察线粒体的形态和内部结构。结果:微囊藻毒素-LR处理组的小鼠肝细胞线粒体膜电位明显下降,自噬相关基因Lc3α的转录水平上升,细胞色素C由线粒体释放到胞浆,电镜观察线粒体形态异常、内部结构被破坏。结论:微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞线粒体有较强的毒性作用,并引发线粒体自噬。
226-229

TGF-β1和IGF-1mRNA在早期胚胎停育绒毛组织中的表达及意义

摘要:目的:通过检测胚胎停育患者绒毛组织中TGF-β1和IGF-1mRNA的表达,探讨其在胚胎停育发病机制中的作用。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常人流(20例),胚胎停育(25例)绒毛组织中TGF-β1和IGF-1基因在转录水平的表达。结果:(1)与对照组相比,实验组绒毛组织中TGF-βmRNA表达量降低(P〈0.05),(2)胚胎停育患者绒毛中IGF—1mRNA表达量升高(P〈0.05)。(3)绒毛组织中TGF-β1与IGF-1的表达呈负相关(F=-0.793,P〈0.05)。结论:TGF-β1、IGF-1的表达在基因转录水平发生改变,TGF-β1表达的降低可能上调了IGF-1的表达,提示两者可能共同参与了胚胎停育的发生。
240-243

聚乙烯醇复合水凝胶外用膜剂的制备与性能

摘要:目的:考察PVA/葡聚糖/羧甲基纤维素钠复合水凝胶外用膜剂的制备方法,并与纯PVA水凝胶贴膜进行对比,考察本膜剂在物理性能和药物体系的体外释放行为上所具备的优越性。方法:利用冷冻-解冻物理交联方法制备水凝胶装载胰岛素模型药物的外用膜剂,通过万能拉力机和差示扫描量热法考察膜剂的物理性能,利用高效液色谱法考察该膜剂的体外释放行为。结果:PVA复合水凝胶外用贴膜相较于纯PVA水凝胶贴膜的韧性减小、刚性增加,体外释放变好。结论:通过将具有材料友好性的PVA和多糖葡聚糖、羧甲基纤维素钠合并使用制备胰岛素复合水凝胶贴膜,既能保证贴膜具有良好的物理性能,又具有较好地释放行为,优于目前文献报道的纯PVA水凝胶贴膜性能,有望继续研究优化性能。
244-246

补骨脂抑制人工关节假体周围骨溶解的研究

摘要:目的:探讨中药补骨脂对人工关节置换术后假体周围骨溶解,假体无菌性松动的核因子KB受体活化因子配体-核因子KB受体活化因子受体-骨保护素(RANKL-RANK-OPG)信号通路的作用。方法:取24只200+5g雌性SD大鼠。随机分为A、B、C组,均注射钛颗粒溶液建立骨溶解模型,术后A组采用中药补骨脂水溶液腹腔注射,B组采用外源性OPG腹腔注射作为阳性对照,C组采用生理盐水腹腔注射作为阴性对照。给药4周后,通过免疫组化及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组动物体内RANKL/RANK的表达水平变化。结果:用药4周后,3组12只大鼠背部气囊均为厚壁囊腔,骨溶解模型成功建立,免疫组化及RT-PCR检测RANKIJRANK均呈阳性表达。免疫组化RANKL平均光密度(AOD)值A组(0.168±0.017)、B组(0.147±0.009)明显低于C组(0.314±0.011),差异有统计学意义(P〈0.05);A组、B组之间比较无明显差异。RANKAOD值测定A组(0.172±0.015)、B组(0.193±0.045)明显低于C组(0.342±0.007),差异有统计学意义(P〈0.05);A组、B组之间比较无明显差异。RT-PCR检测RANKL相对量A组(0.575±0.143)、B组(0.543±0.174)明显低于C组(0.951±0.362),差异有统计学意义(P〈0.05);A组、B组之间比较无明显差异。RANK相对量A组(0.433±0.025)、B组(0.611±0.209)明显低于C组(0.871±0.211),差异有统计学意义(P〈0.05);A组、B组之间比较无明显差异。结论:中药补骨脂对人工关节置换术后假体周围骨溶解,假体无菌性松动具有抑制作用。
247-250

神经粘附分子NCAM140基因RNA干扰质粒的构建与鉴定

摘要:目的:构建有效的小鼠神经粘附分子(NCAMl40)基因的RNA干扰(RNAi)质粒载体,为研究NCAMl40参与的细胞信号通j咯转导、其生物学作用以及以NCAMl40为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒。方法:使用基因序列软件设计、筛选符合公开文献筛选参数的4条靶序列以及1条阴性对照序列,由上海吉玛技术有限公司合成。与载体质粒pGPU6/GFP/Neo重组后.分别命名为pSi—ncal、pSi—nca2、pSi-nca3、pSi—nca4和pSi—control。转染大肠杆菌感受态细胞。选择阳性克隆进行DNA测序鉴定,、qCestemblot方法进行干扰靶点的筛选。选取干扰效率最高的质粒转染MN9D细胞,普通光学显微镜分别计数同一视野细胞总数及GFP阳性细胞数,计算转染效率。结果:酶切和DNA测序结果证实shRNA正确插入pGPU6/GFP/Neo质粒;Westernblot结果显示与空质粒对照组比较,pSi—nca4组细胞NCAMl40表达明显下调,细胞转染效率为62%。结论:成功构建靶向小鼠NCAMl40基因的RNAi质粒,为NCAMl40参与的细胞信号通路的研究以及以NCAMl40为靶点的基因治疗提供了稳定转染:细胞的干扰质粒,为研究其生物学作用奠定了分子生物学基础。
251-255

自然流产患者绒毛和蜕膜中ZEB1的差异性表达及意义

摘要:目的:检测锌指结合蛋白(zincfingerE—box—bindingprotein,ZEB1)在自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的差异性表达。方法:选取2010年3月到2011年3月在我院妇产科门诊进行人工流产的患者,分为正常人工流产(对照组50例)和自然流产(实验组50例)两组,两组年龄和孕周间差异无统计学意义(P〉0.05)。用荧光实时定量PCR(qRT—PCR)技术检测在绒毛和蜕膜组织中ZEBlmRNA的表达量。结果:自然流产患者绒毛(0.835±0.047)中ZEB1的表达量低于对照组(1.942±0.095),自然流产患者蜕膜(0.65±0.058)中ZEBl的表达量低于对照组(1.13±0.084),差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:绒毛及蜕膜组织中ZEB1的异常表达可能参与自然流产的发生发展过程。
261-264

骨性Ⅲ类错合畸形患者正颌术后呼吸道情况随访调查

摘要:目的:通过评估骨性Ⅲ错合畸形患者正颌手术后睡眠时期的呼吸功能情况,研究该类患者正颌手术后存在呼吸道梗阻的可能性。为临床治疗提供依据。方法:分析56例接受正颌手术的骨性Ⅲ类错合畸形患者的术前及术后1周、1月、3月和术后6月的多导睡眠图报告。设计问卷调查表评估手术影响日间嗜睡度的变化。从PSG报告上获得的术前术后有代表性的2项参数睡眠呼吸暂停低通气指数与最低氧饱和度分别进行比较。结果:数据显示术前和术后AHI指数及SpO2无显著性差异(统计学上无差异)。54例病人术后均未出现睡眠呼吸障碍症状。2例病人术后出现睡眠时期打鼾,但术后随访6月后打鼾逐渐消失。结论:骨性Ⅲ类错合畸形患者正颌术后无明显呼吸道梗阻症状。但若患者同时具有超重、短颈、舌体大等其他危险因素及仅行下颌骨后退手术可能导致睡眠呼吸暂停低通气综合症的发生。
265-268

腹腔镜胆囊切除术(LC术)致胆管损伤的诊治体会

摘要:目的:总结腹腔镜胆囊切除术(1aparoscopiccholecystectomy,LC术)中胆管损伤的诊治体会。方法:回顾19例LC术致胆管损伤病例的临床资料,分析其发生的类型及原因,并总结其诊断和治疗要点。结果:19例患者中,1例发生在左右肝管汇合以上处损伤,2例发生胆总管缺损伤,3例发生胆总管横断伤,5例发生胆总管侧面伤,3例发生胆总管钳夹但未切断,1例发生右肝管损伤,4例发生胆囊管残端漏。治疗方法应视胆管损伤类型的不同而不同。采用断端处胆管端端吻合,同时放置T管引流、单纯胆总管T管引流、开腹去除误夹夹子、ERCP检查放置鼻胆管引流及胆肠Rouxeny吻合术。胆肠Rouxeny吻合术是临床上最常用的修补胆道损伤的手术方法。随访6个月~18年,恢复好,无1例死亡。结论:胆管损伤是LC术最常见的并发症之一,规范的操作及手术适应症的掌握能减少其发生。一旦出现胆管损伤,及时诊断及正确处理能减少其不良后果。
269-271

神经刺激仪经肌间沟定位臂丛神经分支行臂丛麻醉效果分析

摘要:目的:比较神经刺激仪经肌间沟定位臂丛神经分支行肌间沟臂丛神经阻滞麻醉的效果及安全性。方法:选择拟行肌间沟臂丛神经阻滞的上肢手术的患者80例,ASAI或II级,随机均分为A组和B组,每组40例患者。两组均给予1%的利多卡因+0.375%耐乐品20mL。记录完成操作所需时间、感觉神经阻滞起效时间、感觉神经阻滞完善时间、运动神经阻滞起效时间、运动神经阻滞完善时间;评价手术区域麻醉效果(优、良、差、失败);观察并记录并发症。结果:A组完成操作所需时间(5.01±1.40)min,明显长于B组(2.83+O.87)min(P〈0.01)。A组感觉阻滞起效时间(4.48±1.36)min,明显短于B组(7.0±2.06)min(P〈0.01);A组运动阻滞起效时间(4.88+±1.18)min,明显短于B组(7.0±1.67)min(P〈0.01)。A组感觉阻滞完善时间(11.73±3.62)短于B组(13.33±3.02)min(P=0.033)。A组运动阻滞完善时间(11.18±2.73)短于B组(12.41±2.48)min(P=0.038);麻醉效果优等率A组为87.5%,B组为67.5%,差异有统计学意义x^2=4.588,P=0.032;优良率A组为97.5%,B组为90.0%,差异无统计学意义x2=1.920,P=0.166;A组、B组均未出现严重麻醉并发症。结论:A组行肌间沟臂丛神经阻滞比B组阻滞操作时间长,但神经阻滞麻醉效果好,神经阻滞完善率高。
272-274

不同粘度对比剂对冠状动脉造影患者肾功能的影响

摘要:目的:对比剂肾病(CIN)是介入治疗中常见并发症之一。由于对比剂肾病发病机制复杂,其确切的机制尚不明确,有研究认为应用渗透压相似的对比剂,高粘度组对比剂引起CIN的几率明显高于低粘度组。本研究探讨接受不同粘度对比剂冠状动脉造影检查的患者术后引起肾功能损害的差异及其可能的机制。方法:80例接受冠状动脉造影检查的患者随机分为两组。分别为20℃碘海醇组、37℃碘海醇组,每组各40例。分别于冠脉造影前8h、冠脉造影后48h采集同一患者肘正中静脉血进行血清肌酐(Scr)、血清胱抑素C(CysC)检测,并对数据进行统计学分析。结果:两组患者组间比较基本资料无明显差异,两组患者术后Ser、CysC较术前均升高,差异均有统计学意义(P〈0.05);20℃碘海醇组术后Scr较37℃碘海醇组升高不明显,差异无统计学意义(P〉0.05);20℃碘海醇组术后CysC较37℃碘海醇组升高明显,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:冠脉造影检查时.对比剂对患者的肾功能有损害;选择低粘度对比剂可能减少其对冠状动脉造影患者的肾功能的不良影响;其作用机制可能与对比剂改变血液粘滞性,从而影响肾血流有关。
275-277

22例糖尿病视神经病变综合治疗的疗效观察

摘要:目的:总结诊断及治疗糖尿病性视神经病变(diabeticopticneuropathy,DON)的临床经验,为本病的治疗和预防提供依据。方法:回顾性研究22例糖尿病视神经痛变的发病特点,在接受治疗的患者中严格控制血糖,应用复方樟柳碱注射液病侧颞浅动脉旁皮下注射,口服或静脉滴注活血化瘀药物,并口服维生素B1、维生素B2、肌苷片等营养视神经的药物,同时给予全身检查,包括对高血压、糖尿病等全身疾病的治疗,观察经综合治疗前后的视力、眼底、视野改变及眼底荧光血管造影(fundusfluoresceinall-giography,FFA)的特点等。结果:接受治疗的患者共有22例(29只眼),治愈10例(12只眼);好转7例(10只眼),总有效率为79.3%。结论:糖尿病性视神经病变的及时正确诊断、系统的综合治疗,可有效提高视力,扩大视野。
278-280

全数字化X线摄影联合MR动态增强检查诊断早期乳腺癌的临床价值研究

摘要:目的:分析早期乳腺癌的全数字X线摄影与MRI影像学表现,评价全数字X线摄影联合MRI检查在早期乳腺癌诊断中的临床价值。方法:回顾性分析2009年10月至2012年5月在我院经穿刺或手术病理证实为早期乳腺癌的42例患者的临床资料,术前均行数字X线及动态增强MR检查,比较两种方法单独使用和联合使用的诊断乳腺癌的准确率。结果:全数字化X线摄片诊断早期乳腺癌的准确率为69.0%(29/42),动态增强MR检查为95.2%(40/42),两者比较差异有统计学意义(P〈0.05);两者联合使用诊断早期乳腺癌的准确率为97.6%(41/42)。结论:动态增强MR检查对早期乳腺癌的诊断价值明显优于全数字X线摄影,但后者对微小钙化显示较好,两者联合可提高诊断正确率,尤其对多腺体型和致密型乳腺的早期乳腺癌的检出具有重要的价值。
281-285

机械通气与乌司他丁治疗急性呼吸窘迫综合症的疗效观察

摘要:目的:观察机械通气与乌司他丁治疗急性呼吸窘迫综合症的临床疗效。方法:回顾性分析60例急性呼吸窘迫综合症患者的资料,治疗组(30例)采取机械通气与乌司他丁治疗,对照组(30例)采取机械通气治疗,观察两组的的呼吸频率、PaO2、PaO2/FiO2、PCO2、APACHEII评分、胸片变化、VAP发生率及病死率。结果:治疗组的呼吸频率、Pa02、PaO2/FiO2、PCO2指标均优于对照组(t=-6.39,6.27,24.07,9.82,P〈0.05);治疗组的VAP发生率20.0%明显小于对照组的36.7%(x^2=5.84,P=0.016〈0.05);治疗组的病死率3.3%明显小于对照组的16.7%(x^2=5.71,P=0.017〈0.05)。两组之间的APACHEII评分及胸片变化均有明显差异(t=7.14,6.33,P〈0.05)。结论:机械通气与乌司他丁治疗急性呼吸窘迫综合症的临床疗效较好,能够较好地改善肺功能,缓解ARDS患者症状,提高安全可靠性,控制死亡率。
286-288