两种不同mGluR5抑制剂对创伤后Homer1a蛋白表达水平影响的研究
摘要：目的：研究代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）的激动剂依赖性活性和激动剂非依赖性对创伤性脑损伤后Homer1a蛋白表达水平的影响。方法：离体培养神经元2 w,采用mGluR5抑制剂2-甲基-6-苯基乙炔基嘧啶（MPEP）和α-甲基-4-羧苯基甘氨酸（MCPG）两种不同剂量预处理神经元细胞1 h,神经元机械性损伤模型划伤细胞;利用立体定向仪固定大鼠,在大鼠脑皮层注射两种不同剂量的抑制剂,1 h后采用自由落体损伤模型造成大鼠颅脑损伤。通过Western blot分别检测离体和在体Homer1a蛋白表达水平的变化。结果：两种不同剂量MPEP预处理后,大鼠脑皮层和离体培养的神经元细胞中Homer1a蛋白表达水平表达明显减少,具有统计学差异（P〈0.05）;而两种不同剂量的MCPG预处理后,Homer1a蛋白表达水平的改变不明显。结论：颅脑损伤后内源性Homer1a的产生是与代谢型谷氨酸受体激动剂非依赖性活性密切相关。NDRG2在大鼠肺缺血再灌注损伤中的表达
摘要：目的：通过建立大鼠肺缺血再灌注损伤（Lung ischemia-reperfusion injury,LIRI）模型,观察肺缺血再灌注损伤后,肺组织中N-myc下游调节基因2（N-myc downstream regulated gene,NDRG2）表达水平的变化。方法：将70只健康成年雄性SD大鼠随机分成对照组（C）、缺血组（I）、缺血再灌注组（I/R（）后两组各含3个亚组）,每组10只。麻醉固定大鼠,颈部切口行气管插管。右侧开胸,肺缺血组依次分别选择游离夹闭右肺门（即右主支气管,右肺动、静脉）缺血30 min、60 min、120 min后,麻醉处死大鼠获取肺组织。肺缺血再灌注组同样选择游离夹闭右肺门,于夹闭右肺门60 min后松开,分别取再灌注30 min、60 min、120 min后麻醉处死大鼠获取肺组织样本。采用免疫组化对肺组织NDRG2进行蛋白定位检测、RT-PCR对肺组织NDRG2 mRNA含量进行检测、Western-blot对肺组织NDRG2蛋白含量进行检测。结果：肺缺血组与对照组比较,肺组织NDRG2的表达无明显变化（P〉0.05）;肺缺血再灌注组与对照组比较,NDRG2蛋白含量和mRNA表达量逐渐下降,在60 min时达最低,之后又有所回升,但仍低于对照组（P〈0.05）。结论：肺缺血再灌注损伤可下调肺组织中NDRG2的表达含量,NDRG2可能是肺缺血再灌注损伤的靶向调控位点。芪合酶基因Fm-STS在何首乌毛状根中的过量表达分析
摘要：目的：通过过量表达探究在何首乌中得到的芪合酶基因Fm-STS的功能。方法：由含CaMV 35S启动子驱动以及荧光标记蛋白（Green fluorescent protein,GFP）基因的植物转基因基础表达质粒pBIN-35S-GFP构建过量表达质粒pBIN-35S-STS-GFP（阳性）,并同空白表达质粒pBIN-35S-GFP（空白）均导入野生型发根农杆菌ATCC15834中,转化何首乌外植体（无菌苗叶片）,诱导生成毛状根并培养,对毛状根进行高效液相色谱分析芪合物二苯乙烯苷含量变化以及实时荧光定量检测基因Fm-STS表达差异。结果：在过表达组和空白组中毛状根中发根农杆菌Ri质粒中的rolB基因和外源基因GFP均有表达,芪合物二苯乙烯苷含量依次为4.67 mg/g和2.18 mg/g（干重）,在mRNA水平上检测基因Fm-STS表达量：过表达组是空白组的2.41倍。结论：基因FM-STS是何首乌中芪合物二苯乙烯苷生物合成过程中的酶基因,过量表达在基因功能研究中有良好的应用。远志水煎液中远志酸在血浆以及胃肠液中的浓度测定分析
摘要：目的：探讨远志水煎液中远志酸在血浆以及胃肠液中的药物吸收路径。方法：对大鼠进行远志灌胃后,采集肝门静脉血以及胃肠液,应用高效液相色谱方法,对不同给药时间点大鼠血浆以及胃肠液中的远志酸水平进行测定。结果：给予远志酸后,大鼠胃液中随即可测得远志酸,在给药30 min时的浓度达最高峰,并在30 min时肠液中测得远志酸,其浓度逐渐上升,在120 min时达峰值,随后逐渐下降,在60 min过后各个时间点浓度均高于血浆及胃液;血浆中的远志酸是在给药后的120 min和150 min时间点才可测出,其在血液中的持续时间很短。结论：远志水煎液中含有的皂苷以及大量苷元等被胃肠吸收后发挥抑制胃肠动力的作用,使得远志酸等苷元的排除减慢,而长时间滞留在肠液中,使胃肠动力进一步被抑制;但也不排除远志酸可能通过小肠吸收而最终进入血液后对胃肠神经递质及受体起到抑制作用。家兔离体心脏缺血再灌注模型制作方法的改进及其效果
摘要：目的：通过对家兔离体心脏缺血再灌注模型制作方法的改进,延长家兔离体心脏存活时间并提高其存活状态,为研究离体心脏缺血再灌注提供更为稳定的模型。方法：健康新西兰家兔20只随机分为对照组与实验组,每组10只;通过改进实验方法与优化剖取家兔心脏术式操作,记录两组离体心脏复跳和从复跳到稳定跳动时间、比较两组离体心脏的存活时间及状态。结果：改进组优化手术操作完全暴露家兔心脏、减少了心肌机械性损伤,用改进台氏液冲洗离体心脏,缩短了从心脏取出到主动脉挂于灌流装置上该过程的时间,从而缩短了心脏从离体到再灌注此段的缺血时间;灌流液的温度从30℃缓慢升至37℃,此过程避免了离体心脏从4℃环境直升为37℃的初期供氧与灌流液温度条件变化而带来的心肌内环境紊乱,加之在灌流装置中增加了心脏保温罩、不断更换以95%O2＋5%CO2氧饱和气化的新鲜台氏液,以共同维持离体心肌的正常生理功能。结果两组对比,改进组家兔离体心脏复跳时间和从复跳到稳定跳动时间比对照组缩短、明显显示其稳定有节律跳动时间延长（P〈0.01）。结论：本改进法可使家兔离体心脏复苏快、且能持续有节律稳定跳动7 h左右,达到延长家兔离体心脏存活时间的目的,该模型可适用于专业实验教学和科学研究。不同方法制备大鼠肝脏脱细胞支架及其免疫原性研究
摘要：目的：肝脏脱细胞支架（decellularized liver bioscaffold,DLB）在组织工程研究中具有良好前景,但对DLB的免疫原性尚未见探讨。本研究利用不同方案制备大鼠DLB,检测支架成分和体内重塑反应,为制备出低免疫原性的DLB提供改进依据。方法：选取文献报道的三种方案（分别以SDS,Triton X-100和NP-40为主要洗脱成分）,制备F344大鼠DLB,进行HE和Masson染色,检测DLB中DNA、氨基葡聚糖（GAG）以及羟脯氨酸（HYP）含量;再将DLB埋植于C57BL/6小鼠的背部皮下,于术后第3、7和14天取出后进行形态学观察和组织学评分。结果：三种方案均成功制备出符合脱细胞标准的大鼠DLB;形态学结果提示Triton X-100和NP-40方案较SDS方案能更好地保护肝脏超微结构;成分检测结果发现NP-40方案去除DNA的能力显著强于SDS和Triton X-100方案（P〈0.05）,而对GAG含量的洗脱作用最弱（P〈0.05）;异种体内埋置实验提示NP-40方案制备的DLB引起的免疫反应强度明显弱于SDS和Triton X-100方案,体内重塑结局评分显著高于SDS和Triton X-100方案。结论：与SDS和Triton X-100方案相比,NP-40方案能更有效地去除肝脏DNA,较好地保留GAG,诱导移植受体对DLB的良性重塑反应,为进一步的体内研究提供更优化的支架。EV71结构蛋白VP0的表达及抗体的制备
摘要：目的：原核表达EV71结构蛋白VP0（VP2＋VP4）并制备其多克隆抗体。方法：以肠道病毒71型（EV71）全基因组为模板,设计引物扩增出目的片段VP0,将其克隆至表达载体pET-30a（＋）,并转化大肠杆菌TG1,筛选出阳性克隆后进行测序。将重组表达载体pET-30a（＋）-VP0转入大肠杆菌表达菌株Rosetta中。该重组菌经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳和Western Blot验证后,有与预期分子量大小一致的蛋白条带,并且主要以包涵体的形式存在。包涵体用6 mol/L盐酸胍溶解,经过Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白。将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备了VP0多克隆抗体,并对该抗体进行了细胞免疫荧光分析。结果：经过大肠杆菌重组表达并纯化得到了纯度较高的VP0蛋白,制备的多克隆抗体经过细胞免疫荧光的验证表明反应性良好。结论：成功地表达VP0蛋白并制备了其多克隆抗体,有利于EV71病毒的检测及下一步对其疫苗的研究。雌孕激素通过调节一氧化氮影响束缚应激小鼠结肠动力
摘要：目的：应激对胃肠动力有重要的影响,可引起肠易激综合征患者症状的发作或加重,本研究采用束缚-浸水应激诱导肠易激综合征模型小鼠,分别予以雌激素、孕激素和雌激素＋孕激素处理,观察结肠动力学及NO含量指标,以探讨雌、孕激素能否改善应激诱发的结肠功能异常并探讨其调节机制,进从为临床治疗肠易激综合征提供理论依据。方法：建立束缚浸水应激诱发的肠易激综合征小鼠模型,制备离体结肠平滑肌肌条,应用张力换能器测定其肌张力,并检测其排便粪点数以观察结肠平滑肌动力,采用硝酸还原酶法测量结肠一氧化氮（NO）的含量。结果：束缚浸水应激刺激诱发结肠肌张力增加和NO含量减少,与模型组比较,雌激素可逆转该作用,而孕激素、雌激素＋孕激素则使该作用增强。结论：雌孕激素可以通过调节NO含量变化影响束缚-浸水应激诱导的肠易激综合征结肠收缩活动。束缚-浸水应激导致肠易激综合征模型小鼠结肠动力学改变,表现为增强远端结肠平滑肌收缩活动,同时模型小鼠结肠NO含量降低;雌激素可以逆转结肠平滑肌收缩活动增强和结肠NO含量降低;孕激素、雌激素＋孕激素使结肠平滑肌收缩活动增强和结肠NO含量降低作用更加明显。久肝胶囊解酒作用的研究
摘要：目的：研究久肝胶囊的解酒作用及其机制。方法：用白酒直接灌胃建立小鼠醉酒模型,分别进行致醉、防醉、解酒试验,观察久肝胶囊的药效;长期给酒造成酒精性肝损伤模型,测定小鼠血清中及肝脏中乙醇脱氢酶（ADH）和谷丙转氨酶（GPT）活性。结果：小鼠最适致醉量为0.16 ml/10 g;久肝胶囊对醉酒能起到预防作用,且使醉酒小鼠翻正反射恢复时间缩短;对酒精性肝损伤小鼠,久肝胶囊能使血清ADH、GPT活性及肝中ADH活性恢复正常。结论：久肝胶囊具有较好的预防醉酒和解酒作用,对酒精性肝损伤亦有较好的保护作用,其机制可能与恢复ADH和GPT活性有关。武汉地区老年变应性鼻炎现况分析研究
摘要：目的：通过研究老年变应性鼻炎患者年龄分布及变应原阳性率等变化,了解老年变应性鼻炎的发病趋势。方法：回顾性分析2006年至2010年武汉地区294例50～84岁的老年变应性鼻炎患者过敏原点刺试验结果,描述老年变应性鼻炎患者年龄分布及各变应原阳性率随时间变化的临床特征。结果：老年期患者（≥65岁）人数在受试老年患者总人数的比例随时间推移逐渐增加,但差异无统计学意义（P〉0.05）。在5年间老年变应性鼻炎患者粉尘螨阳性率为历年最高,其次为屋尘螨,两者的阳性率在5年间差异不具有统计学意义（P〉0.05）;艾蒿、豚草花粉、真菌I组、真菌II组阳性率改变均具有统计学意义（P〈0.05）,其中艾蒿、豚草花粉阳性率呈逐年下降趋势,真菌I组、真菌II组阳性率呈上升趋势;多价兽毛阳性率有增长趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）;春季花粉I组、春季花粉II组阳性率均呈波动性改变,其中春季花粉II组差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：老年变应性鼻炎患者人数显示逐年增长趋势,尘螨过敏在老年患者中仍为最为常见的变应原,但无整体人群体现出的增长趋势,真菌阳性检出率呈现显著增长趋势,兽毛过敏有较弱升高倾向。端粒长度及端粒酶活性与儿童先天性心脏病发病机制的相关性研究
摘要：目的：探讨不同年龄儿童外周血白细胞端粒长度及端粒酶活性与儿童先心病发病机制的相关性。方法：采用实时荧光定量PCR检测先天性心脏病2个年龄组及健康受试者外周血白细胞的端粒长度及hTERT mRNA（端粒酶催化亚基）。比较相同年龄的先天性心脏病与健康受试者外周血白细胞的端粒长度及hTERT mRNA差异,并比较不同年龄组间外周血白细胞的端粒长度及hTERT mRNA差异。结果：先天性心脏组3-6岁组的受检者及健康受试者3-6岁组平均外周血白细胞端粒（1.63±0.61）长于先天性心脏组7-10岁组的受检者及健康受试者7-10岁组（1.36±0.46）（t=11.37,P〈0.05）;各组均无端粒酶表达。结论：外周血白细胞的端粒长度随着年龄的增长而缩短。端粒酶活性与先天性心脏病发病并无直接相关性。磺达肝癸钠在65岁以上急性心肌梗死患者中的临床应用研究
摘要：目的：对比磺达肝癸钠（商品名：安卓,葛兰素史克）与那曲肝素（商品名：速碧林,葛兰素史克）在65岁以上急性心肌梗死患者中的有效性和安全性。方法：入选急性心肌梗死住院患者84例随机分为实验组（安卓2.5 mg每天一次皮下注射7天,n=45）和对照组（速碧林,5000 IU（0.4 ML）,每天2次皮下注射7天,n=39）,随访1个月。对比实验组和对照组抗凝效果。比较两组住院期间及治疗1个月内心源性死亡发生率及出血发生率。结果 ：（1）实验组与对照组相比,在治疗1周,心源性死亡发生率显著降低,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。1个月时,两组比较无统计学意义（P〉0.05）（2）出血发生率,实验组较对照组显著降低,轻中度出血发生率有统计学意义（P〈0.05）。严重出血发生率有统计学意义（P〈0.05）。结论：在急性心肌梗死患者治疗中,磺达肝癸钠与那曲肝素相比更安全有效。二氧化碳激光联合5%咪喹莫特乳膏治疗尖锐湿疣120例临床观察
摘要：目的：探讨二氧化碳激光联合局部外用5%咪喹莫特乳膏治疗尖锐湿疣的临床疗效、安全性以及对治疗后复发的预防作用。方法：收集我院自2011年1月至2011年10月的门诊共120例患尖锐湿疣患者,随机分为两组,每组各60例患者,两组患者年龄、性别、病程等差异无统计学意义。治疗组给予二氧化碳激光治疗,二氧化碳激光术后给予局部外用5%咪喹莫特乳膏治疗8周,每周一、三、五或二、四、六晚用药一次,对照组仅给予二氧化碳激光治疗,两组患者治疗后均每两周复查一次,共随访3个月,比较两组患者的治愈率、复发率及不良反应发生情况。结果：治疗后的3个月随访期间治疗组60例患者中治愈53例,复发7例,治愈率88.33%,复发率11.67%;对照组60例患者中治愈41例,复发19例,治愈率68.33%,复发率31.67%,两组间差异有统计学意义（X2=7.07,P〈0.01）,治疗组60例患者中32例出现不良反应,不良反应发生率为53.33%,对照组60例患者中17例出现不良反应,不良反应发生率为28.33%,两组间差异有统计学意义（X2=7.76,P〈0.01）,不良反应均表现为局部红斑、水肿及烧灼感,但未影响继续用药治疗,两组患者均无明显的全身不良反应发生。结论：二氧化碳激光联合5%咪喹莫特乳膏对于尖锐湿疣能够取得良好的治疗效果,并能有效预防治疗后复发。早孕孕妇血甲醛值测定
摘要：目的：调查妊娠结局正常的单胎孕妇在孕早期时血甲醛浓度正常值。方法：妊娠期无并发症,追踪其新生儿无出生缺陷的单胎孕妇,按标本号随机抽取130例,用气相色谱法测定她们在孕早期留取血样的甲醛浓度。结果：用气相色谱法测定甲醛浓度的最低检出限的浓度为0.007μg/ml。妊娠结局正常的孕妇孕早期血甲醛浓度为正偏态分布,130例孕妇血甲醛浓度最低为小于0.007μg/ml,最高值为0.152μg/ml,极差为0.145μg/ml,中位数（P50）为0.014μg/ml,P90为0.066μg/ml,P95为0.099μg/ml。结论：可采用气相色谱法测定正常的单胎孕妇的血甲醛浓度。连续股神经阻滞联合关节周围注射用于全膝关节置换术后镇痛及早期功能康复的研究
摘要：目的：比较连续股神经阻滞（continuous femoral nerve block,CFNB）联合关节周围注射和单纯连续股神经阻滞对全膝关节置换（TKA）术后疼痛及早期功能康复的影响。方法：将2012年1月～2012年9月于我院初次行单侧全膝关节置换的40例患者随机分为CFNB联合关节周围注射组（n=20例）和CFNB治疗组（n=20例）。观察和比较两组患者术后疼痛评分、CPM度数、被动屈伸活动度、围术期CRP水平及术后下肢深静脉血栓形成情况。结果：术后8h、12h,CFNB联合关节周围注射组的疼痛评分分别为2.45±0.2562和2.40±0.3026,明显低于CFNB组（5.25±0.3470和4.90±0.3692）,差异均有统计学意义（P〈0.05）;术后第2、3天,CFNB联合关节周围注射组的CPM锻炼度数（72.75±2.750、89.00±2.283）分别明显高于CFNB组（57.95±1.724、79.00±2.194）,差异均有统计学意义（P〈0.05）;两组患者术后膝关节被动活动度比较无统计学差异;CFNB联合关节周围注射组术后患者血清CRP水平低于CFNB组,均在术后第3天达到峰值,但组间比较均无统计学差异（P〉0.05）;两组患者术后双下肢深静脉血栓形成情况比较无统计学差异。结论：连续股神经阻滞联合关节周围注射较单纯连续股神经阻滞可更加有效降低全膝关节置换术患者术后的疼痛评分,并促进早期功能康复。舒利迭对COPD合并呼吸衰竭患者的脑钠肽和超敏C反应蛋白的影响
摘要：目的：观察舒利迭对COPD合并呼吸衰竭患者的的疗效及其对脑钠肽（BNP）和超敏C反应蛋白（hs-CRP）的影响。方法：选取2010年1月~2011年12月我院收治的COPD合并急性呼吸衰竭患者86例,随机分为观察组和对照组,每组各43例。对照组予以无创呼吸机辅助呼吸等支持对症治疗,观察组在对照组的基础上予以舒利迭治疗。观察两组的疗效,动脉血二氧化碳分压（PaCO2）,动脉血氧分压（PaO2）,PH值,BNP和hs-CRP的变化。结果：观察组的总有效率为93.02%,而对照组的疗效为72.09%,差异有统计学意义（P〈0.05）。与治疗前比较两组治疗后的PaO2和PH明显提高,观察组的提高水平较对照组更为明显（P〈0.01）,而两组的PaCO2、BNP和hs-CRP水平均较治疗前明显降低,而观察组的降低水平更为明显（P〈0.01）。结论：舒利迭对COPD合并呼吸衰竭的疗效显著,其机理可能与降低BNP和hs-CRP水平有关。生长抑素联合奥美拉唑治疗肝硬化并发上消化道大出血的疗效分析
摘要：目的：观察生长抑素联合奥美拉唑治疗肝硬化并发上消化道大出血的临床效果。方法：将确诊的42例肝硬化合并上消化道大出血患者随机分为两组。治疗组采用生长抑素联合奥美拉唑的治疗方案,对照组生长抑素用法同治疗组。结果：治疗组在平均止血时间、输血量、止血有效率上均明显优于对照组（P〈0.05）。结论：生长抑素联合奥美拉唑治疗肝硬化并上消化道大出血临床效果明显,能缩短止血时间,减少输血量。中老年人动脉硬化与心脏舒张期功能不全相关性的研究
摘要：目的：研究老年人动脉硬化与心脏舒张期功能不全的相关性。方法：将136例确诊为心脏舒张期功能不全的老年患者进行严重程度分级,与各组眼底动脉硬化病变的情况进行比较和分析。结果：在136例舒张期心功能不全的患者中,27例为轻度异常,无眼底动脉硬化患者占59.26%,有眼底动脉硬化患者占40.74%;78例为中度异常,无眼底动脉硬化患者占34.62%,有眼底粥样硬化患者占65.38%;31例为重度异常,无眼底动脉硬化患者占19.35%,有眼底粥样硬化患者占80.65%。3组之间进行比较,差异有统计学意义,P〈0.01;136例舒张期心功能不全的患者中,共有87例患者存在不同程度的眼底动脉硬化病变。其中,11例轻度舒张功能不全患者中,眼底动脉硬化I级占54.55%,眼底动脉硬化≥Ⅱ级占45.45%;51例中度舒张功能不全患者中,眼底动脉硬化I级占25.49%,眼底粥样硬化≥Ⅱ级占74.51%;25例重度舒张功能不全患者中,眼底动脉硬化I级占24.00%,眼底动脉硬化≥Ⅱ级占76.00%。3组之间进行比较,差异有统计学意义,P〈0.05。结论：老年动脉硬化患者与心脏舒张期功能不全情况存在着相关性,对临床诊断心功能不全有着重要的参考价值,值得进一步研究和探讨。
