不同入肝血流阻断方式对荷瘤小鼠肝功能影响的实验研究
摘要：目的：探讨不同血流阻断方式对荷瘤小鼠肝细胞功能的影响。方法：选择昆明小鼠24只随机分为三组,正常对照组（Suspe-nded operation,SO）、肝门阻断组（Occlusion of the portal triad,OPT）、保留肝动脉持续阻断门静脉（Occlusion of portal vein,OPV）各8只。采用门静脉注射肿瘤的方法建立肝癌模型,建模后3天采用阻断范围为左外叶和中叶、阻断时间为60分钟的入肝血流阻断方式,复流后5天后,通过测量3组对肝脏的缺血再灌注损伤程度以及病理学变化来评价不同血流阻断方式对肝细胞功能影响的程度。结果：门静脉注射小鼠肝癌细胞8天后,对照组测量小鼠正常丙氨酸氨基转移酶（ALT）值为66.5±22.3 IU/L,OPT组值为276.3±80.5 IU/L,OPV组值为89.6±28.4 IU/L,两组比较有统计学差异（P〈0.01）;对照组测量小鼠正常天冬氨酸氨基转移酶（AST）值为301.3±126.7 IU/L,OPT组值为1126.4±285.5 IU/L,OPV组值为438.6±150.7 IU/L,两组比较有统计学差异（P〈0.01）,病理组织学OPV组肝细胞损伤程度明显较OPT组轻。结论：保留肝动脉持续阻断门静脉可以减轻荷瘤小鼠肝脏的缺血再灌注损伤。亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T、G1793A单核苷酸多态性与散发性乳腺癌易感性的关系
摘要：目的：研究亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T、G1793A位点单核苷酸多态性与散发性乳腺癌易感性关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,对200例乳腺癌患者及200例正常对照者MTHFR基因C677T、G1793A位点单核苷酸多态性进行分析,logistic回归分析不同基因型与乳腺癌风险的关系。结果：乳腺癌组MTHFR 677TT基因型频率为25.00%显著高于正常对照组的10.50%（X2=14.401,P=0.001）,CT基因型频率为44.50%低于正常对照组的54.50%,CC基因型频率在乳腺癌组和正常对照组中无差别;MTHFR 1793GA基因型频率为18.50%显著高于正常对照者的8.50%（X2=8.563,P=0.003）。乳腺癌患者MTHFR 677T和1793A等位基因频率分别为47.25%、9.25%,显著高于对照组中的37.75%、4.25%。MTHFR 677TT基因型携带者罹患乳腺癌的风险是677CC基因型携带者的2.732倍（95%CI=1.418～5.051,P=0.001）,MTHFR1793GA基因型携带者罹患乳腺癌的风险是1793GG基因型携带者的2.444倍（95%CI=1.325～4.505,P=0.003）。另外,乳腺癌组中MTHFR C677T基因多态性与肿瘤大小相关（x2=7.431,P=0.024,MTHFR G1793A基因多态性与淋巴结转移情况（x2=8.939,P=0.011）、癌组织学分级（x2=9.983,P=0.007）相关。结论：MTHFR C677T、G1793A基因多态性与散发性乳腺癌的易感性相关。过氧化物酶蛋白1真核表达载体构建及在Hela细胞的表达与定位
摘要：目的：构建过氧化物酶蛋白1（PRDX 1）的真核表达载体,观察其在Hela细胞内表达及定位。方法：提取BALB/c小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR方法扩增得到小鼠PRDX 1编码序列,酶切后克隆至pcDNA3-myc载体。重组质粒通过PCR、酶切、测序证明构建正确后经脂质体转染Hela细胞,然后利用Western blot和荧光显微镜技术观察该融合蛋白在细胞内表达及定位。结果：经鉴定证明重组质粒构建正确;Western blot实验显示,该质粒能够在Hela细胞中特异表达;免疫荧光试验显示,蛋白产物分布在胞浆和胞核,证明该蛋白在细胞内高表达。结论：成功构建带有myc标签的PRDX 1真核表达载体,该质粒能够在哺乳细胞中特异表达并且外源性PRDX 1蛋白分布在Hela细胞胞浆胞核内,为深入研究PRDX 1蛋白在细胞内相关生物学研究奠定了基础。肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞胶原表达的影响
摘要：目的：探讨肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞中胶原生成的影响及作用机制。方法：原代培养心肌成纤维细胞,将细胞分为正常糖组（NG,5.5mmol/L glucose）、高糖组（HG,25mmol/L glucose）、高糖＋10mmol/L肌肽组、高糖＋20mmol/L肌肽组、高糖＋40mmol/L肌肽组、高糖＋SB组（HG＋10μmol/L SB203580）、高糖＋PD组（HG＋10μmol/L PD98059）。ELISA检测胶原Ⅰ、Ⅲ的含量,Western blot检测TGF-β1、p-p38 MAPK和p-ERK（1/2）等蛋白的表达。结果：与正常糖组相比,高糖组中胶原Ⅰ和胶原Ⅲ含量增加（P〈0.01）;TGF-β1、p-p38和p-ERK等表达增加（P〈0.01）;与高糖组相比,高糖＋肌肽组中胶原Ⅰ、Ⅲ、TGF-β1、p-p38、和p-ERK等均降低（P〈0.05）;高糖＋SB组和高糖＋PD组中胶原Ⅰ、Ⅲ表达减少（P〈0.05）。结论：肌肽对心肌成纤维细胞中胶原生成具有抑制作用,且通过MAPK通路实现。王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠行为、肾上腺指数及血清Cort的影响
摘要：目的：观察王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠的行为学、肾上腺指数及血清皮质醇（Cort）的调控作用。方法：将45只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、王氏连朴饮（高、中、低剂量）组。利用复合因素复制脾胃湿热证动物模型。通过旷场实验观察大鼠行为学改变,称量法计算肾上腺指数,采用放射免疫法检测大鼠血清Cort的水平。结果：造模成功后大鼠行为发生改变,王氏连朴饮各剂量组对大鼠行为均有恢复作用,但各剂量组间无显著性差异;大鼠肾上腺指数增高,血清Cort升高（P〈0.05）,王氏连朴饮各剂量组对其均有降低作用,以中剂量组效果最好且有显著性差异（P〈0.05）。结论：王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠行为、肾上腺指数和血清Cort有干预作用,这可能是王氏连朴饮清热祛湿的机制之一。建立小鼠淋巴瘤模型所需环磷酰胺最佳预处理剂量探索
摘要：目的：探讨不同剂量环磷酰胺对小鼠肿瘤成模情况的影响,寻找一种简单、有效的建立肿瘤模型的预处理方法。方法：给予BALB/c裸鼠腹腔注射不同剂量环磷酰胺,72小时后再给予小鼠皮下接种淋巴瘤细胞,观察预处理前后小鼠外周血白细胞数量及体重变化情况,以及肿瘤成模率、急性死亡率等。结果：①组1（NS对照组）、组2（100mg/kg×1d）、组3（125mg/kg×1d）、组4（75mg/kg×2d）预处理后体重较处理前无显著性变化,亦无急性死亡情况发生;而组5（125mg/kg×2d）、组6（200mg/kg×2d）、组7（125mg/kg×3d）、组8（250mg/kg×3d）小鼠体重较预处理前明显减轻,且急性死亡率依次为30%、58.3%、50%、75%;②组1和组2小鼠预处理后72小时外周血白细胞数较处理前无明显差异,同时均未成模;而组3、组4、组5、组6、组7、组8小鼠白细胞较预处理前均显著下降,成模率依次为20%、83.3%、60%、33.3%、50%、25%。结论：使用环磷酰胺75mg/kg连续2天腹腔注射的预处理方案,操作简单,成本低廉,通过观察外周血白细胞数和小鼠体重水平等指标即可初步判断建模情况,同时肿瘤成模率高,毒副作用小,是理想的预处理方案。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978-7-117-13344-9/R.13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述,充分体现了国际分子影像学的最新进展。改良内皮抑素对人脐静脉内皮细胞抑制作用的实验研究
摘要：目的：探讨改良内皮抑素（RGDRGD-ES）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对最佳作用浓度和时间。方法：通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达载体。表达、纯化改良内皮抑素（RGDRGD-ES）,运用MTT法和流式细胞仪检测RGDRGD-ES对人脐静脉内皮细胞的抑制作用。结果：1.诱变了ES基因,获得了改良的RGDRGD-ES基因,并成功构建其原核表达载体。2.获得了RGDRGD-ES蛋白。3.改良的RGDRGD-ES能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长（P〈0.01）;抑制率随着药物浓度（10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml）的增加和作用时间（24 h、48 h、72 h）的延长而逐渐增加,具有浓度和时间依赖性（P〈0.01）;而30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间、72 h与96 h组间无明显差异（P〉0.05）。4.细胞凋亡率（作用24 h）具有药物浓度（10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml）依赖性（P〈0.01）,30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间凋亡率无明显差异（P〉0.05）。结论：成功构建了改良RGDRGD-ES基因的原核表达载体,RGDRGD-ES蛋白在30μg/ml浓度作用72小时条件下能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长,改良内皮抑素（RGDRGD-ES）对HUVEC的抑制作用较ES明显提高。番茄红素联合CIK治疗的抗肿瘤作用的实验研究
摘要：目的：探讨番茄红素联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）治疗的抗肿瘤作用及相应机制。方法：建立荷B16-F10黑色素瘤小鼠模型,观察联合治疗对肿瘤体积、宿主生存时间、淋巴细胞增殖活力及淋巴细胞杀伤能力的影响。结果：CIK及番茄红素治疗均可以抑制肿瘤的生长,延长荷瘤鼠的生存时间。与CIK治疗组相比较,中高剂量的番茄红素联合CIK治疗可以显著增强抗肿瘤疗效,延长荷瘤鼠的生存时间,并且可以通过刺激荷瘤鼠淋巴细胞增殖、增强淋巴细胞对肿瘤的杀伤能力提高CIK治疗的抗肿瘤疗效。结论：番茄红素能够通过提高宿主免疫水平而显著增强CIK治疗的抗肿瘤效果。Nanog基因在卵巢癌和卵巢肿瘤干细胞中的表达及意义
摘要：目的：探讨胚胎干细胞关键因子Nanog基因mRNA及其蛋白在卵巢癌和卵巢癌肿瘤干细胞中的表达及意义。方法：选取10例正常卵巢上皮组织、10例卵巢良性肿瘤及60例卵巢癌组织,采用逆转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）方法和免疫组织化学PV-6000两步法检测Nanog mRNA和蛋白表达水平;采用无血清悬浮培养法从SKOV-3卵巢癌细胞株中分离培养肿瘤干细胞,流式细胞术鉴定肿瘤干细胞CD117表达,采用RT-PCR和Western Blot方法检测SKOV-3卵巢癌细胞及肿瘤干细胞中NanogmRNA及其蛋白的表达水平。结果：Nanog mRNA在卵巢癌组织中的表达水平均高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织（P〈0.05）;Nanog mRNA在不同分化程度及临床分期的卵巢癌组织中表达水平不同,低分化组高于高分化组（P〈0.05）;III-IV期高于I-II期（P〈0.05）;免疫组化结果同RT-PCR。从SKOV-3卵巢癌细胞株中成功分离出肿瘤干细胞,SKOV-3卵巢癌细胞和肿瘤干细胞Nanog mRNA相对含量分别为0.6044±0.0368,0.8736±0.0537,差异具有统计学意义（P〈0.05）,两种细胞Nanog蛋白相对含量分别为0.6364±0.0169 1.2788±0.0314,差别具有统计学意义（P〈0.05）。结论：Nanog基因在卵巢癌组织和SKOV-3细胞系中均高表达,其在组织中的表达强度与临床分期及病理分级关系密切,且在肿瘤干细胞中表达高于一般卵巢癌细胞,其与卵巢癌的发生发展关系密切,可能是卵巢癌干细胞的表面标志物,有望成为新的标志物。三氧化二砷对人脐静脉内皮细胞凋亡及VCAM-1/ICAM-1表达的影响
摘要：目的：观察三氧化二砷（As2O3）对血管内皮细胞增殖、凋亡及VCAM-1/ICAM-1表达的影响,探讨As2O3对血管内皮细胞增殖生长以及炎症反应的影响。方法：人脐静脉内皮细胞（HUVEC）体外培养,以不同As2O3浓度及时间对其进行干预。采用CCK-8测定细胞增殖活性,流式细胞仪AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR检测VCAM-1mRNA表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞间黏附分子（VCAM-1）及血管细胞黏附分子（ICAM-1）的表达情况。结果：当As2O3浓度在3μmol.L-1时HUVEC培养24 h的的凋亡率为（0.134±0.03）%,48 h为（3.305±0.53）%,72 h为（3.748±0.84）%（P〈0.05）,凋亡率均在一较低水平。当As2O3浓度〉3μmol.L-1时HUVEC凋亡率明显增加（P〈0.01）。不同浓度As2O3作用HUVEC48 h后检测上清液中ICAM-1与VCAM-1浓度时发现1μmol.L-1时VCAM-1表达即开始增加（123.32±3.78 mmol.L-1,P〈0.01）,而HUVEC表达ICAM-1含量与对照组相比差异并不明显（38.94±2.59 mmol.L-1,P〉0.05）,随着As2O3浓度的增加,HUVEC表达ICAM-1/VCAM-1的量均增加但敏感性不同。对照组及（1.0、2.0、3.0、4.0、5.0）μmol.L-1As2O3作用于HUVEC 48 h实时荧光定量PCR法检测VCAM-1mRNA表达量明显增加,与对照组相比实验组的表达量分别为（1.657±0.287,1.858±0.241,2.321±0.280,3.012±0.235,3.508±0.342）（P〈0.01）。结论：As2O3可直接降低细胞活性,诱导细胞凋亡,并且呈一定的时间-浓度依赖性。在较低浓度时VCAM-1/ICAM-1的表达在一个相对较低的水平,随着As2O3浓度的逐渐升高,内皮细胞凋亡率增高,VCAM-1/ICAM-1表达增加,并且VCAM-1/ICAM-1对As2O3的敏感性呈现一定的差异性。木犀草素预防高脂膳食诱导的小鼠胰岛素抵抗的实验研究
摘要：目的：探讨黄酮类成分木犀草素对高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型的胰岛素抵抗的影响。方法：30只C57BL/6J小鼠分正常饮食对照组（10只）,高脂膳食组（对照组,10只）和高脂膳食加2%木犀草素组（木犀草素组,10只）,干预16周,观察体重、血脂水平、血糖、胰岛素敏感性及胰岛素水平的变化。结果：小鼠在给予高脂膳食16周后,体重水平、血脂水平、血糖水平、胰岛素水平显著高于木犀草素组,胰岛素敏感性显著下降,与木犀草素组比较,P〈0.05或P〈0.01。而木犀草素组则可显著抑制体重、血脂、血糖及胰岛素水平的升高,与胰岛素敏感性未见明显下降,与正常对照组比较,P〉0.05。结论：木犀草素可预防高脂膳食诱导的胰岛素抵抗。5-脱氧杂氮胞苷对人肝癌细胞HepG2增殖及beclin1表达的影响
摘要：目的：观察5-脱氧杂氮胞苷（5-aza-CdR）对HepG2细胞生长抑制及beclin1表达的影响,以探讨其抗肿瘤发生的潜在机制。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的生长抑制;用相差显微镜观察不同药物浓度下不同时间段的肝癌细胞形态学改变;采用RT-PCR法和Western blot法检测5-Aza-CdR对抑癌基因beclin1的mRNA和蛋白表达的影响。结果：5-aza-CdR可抑制HepG2细胞生长,呈剂量依赖性,并上调beclin1的mRNA和蛋白的表达。结果：显示102.4umol/L5-aza-C-dR作用72小时细胞增殖抑制率最高,可达（84.3±3.31）%,beclin1的mRNA和蛋白表达上调最明显,与对照组相比差异有统计学意义。结论：5-aza-CdR可抑制HepG2细胞增殖,其机制可能是通过恢复某些抑癌基因的表达,上调beclin1的mRNA和蛋白表达。用显示器测量办公亮度环境下的人眼对比度敏感视觉特性
摘要：对比度敏感是描述人眼视觉系统空间特性的主要指标之一,对比度敏感函数是反映不同条件下的对比度敏感与空间频率之间的关系。人眼对比度敏感数据的测量受到环境亮度较大的影响,为了研究常用办公环境条件下的人眼对比度敏感情况,对6位青年在环境亮度分别为153,312,470 cd/m2和暗室条件下,在距离为2米处观测11种空间频率的矩形光栅进行测量,光栅用显示器进行显示,其平均亮度分别为60和90 cd/m2。实验结果表明,对于相同频率的光栅,人眼对比度敏感程度随着环境亮度的增加而减小,而且人眼在暗室环境下比在办公环境条件下对亮度光栅更敏感;但是在观测平均亮度为60cd/m2的光栅时,人眼特殊地对在环境亮度为312 cd/m2的条件下更敏感。利用Poincare散点图法检测t波交替的指标研究
摘要：目的：利用Poincare散点图进行t波交替检测,不仅从形态上找到检测标准,进一步研究散点中有效的定量指标。方法：以European ST-T Database标准心电数据库和MIT-BIH心律失常数据库的心电信号作为检测对象,以128个连续心拍的t波中的7个点为检测数据,相邻心拍t波差分后组成新序列,并由差分序列作出散点图,观察散点形态。根据形态区别和t波交替的幅值变化特点,利用个散点到x＋y=0直线的距离均值作为定量检测指标D0,为避免不同心电信号幅值影响,D0除以RQ峰值差为最终指标D,找出合适阈值判定是否存在t波交替,并与谱分析法的检测结果比较分析。结果：①从Poincare散点图形态上,存在t波交替的散点图与正常t波存在明显区别,存在t波交替则散点集中在以x＋y=0为轴线的附近,形成类似椭圆的狭长形状;而正常t波形成的散点会以原点为中心均匀分布,散点形态为圆形。②由t波交替的特点和散点图形态可知,定量检测指标D越小,就越有可能存在t波交替。经过大量仿真测试和谱分析法的比较,规定检测标准为,当D〈=35uv时,存在t波交替;指标D与谱分析法的结论相吻合,并且两种方法的判定结果由kappa一致性检验,一致性程度好,进一步说明D指标具有优越的敏感性,是t波交替检测的有效指标。结论：Poincare散点图的散点分布形态和散点到x＋y=0轴线的距离均值分别是是t波交替有效的定性和定量检测指标。“黑美人”马铃薯中花色苷提取工艺研究
摘要：马铃薯（Solanum tuberosum）是一种重要的粮菜兼用型作物,马铃薯传入我国后产生了许多变种、变型和适合当地种植的地方品种,尤其是块茎的皮色和肉色出现了红色、紫色、黑色品种。＂黑美人＂马铃薯是甘肃省特有的经航空育种技术培育的新型马铃薯品种,经分析测定＂黑美人＂马铃薯中花色素含量非常丰富,其富含的花青素还具有抗癌、抗衰老、美容和防止高血压等多种保健作用。因此,＂黑美人＂马铃薯中花色苷提取工艺的研究,对于花色苷的应用与开发具有重要的研究意义。本研究以甘肃＂黑美人＂马铃薯为原料,对其所含花色苷提取工艺条件（乙醇浓度,温度,pH,提取时间,料液比,提取次数等）进行优化。研究结果显示最佳提取工艺参数为：乙醇浓度80%,温度75℃,pH 1.0,时间1 h,料液比1：20,提取3次。在优化后的提取工艺条件下,＂黑美人＂马铃薯的花色苷提取率得到提高,花色苷含量可达到33.05 mg/100g。常用人格测验在军校大一新生心理档案中的应用及结果分析
摘要：目的：通过总结与分析,研究适合军校新入校大学生心理档案建立的合理人格测验。方法：分别采用卡特尔十六种人格因素测验（16PF）、明尼苏达多项人格测验（MMPI）、症状自评量表（SCL-90）测量今年某军校大一新生98名,剔除无效后保留有效数据94例,根据结果筛选人员并做相关分析。结果：①16PF检测出3名问题人员,MMPI检测出18名,SCL-90检测出8名。②MMPI和SCL-90有较高的相关性,r〈0.42,P〈0.05,MMPI完全可以替代SCL-90③MMPI部分临床量表与16PF些许因素呈显著相关,可考虑将相关因素加入16PF评价标准里。结论：建立心理档案时,使用16PF作为初筛测验,MMPI作为复检测验,能够较完善地建立心理档案。腹腔镜与传统开腹TME在治疗中低位直肠癌的META分析
摘要：目的：探讨腹腔镜行TME手术治疗中低位直肠癌的可行性。方法：检索2001年1月～2012年2月间发表的比较腹腔镜与经腹TME手术治疗中低位直肠癌的随机对照试验（RCT）及临床对照试验（CCT）论文,根据纳入排除标准纳入文献,提取临床指标,进行META分析。结果：最终有22项临床试验被纳入,两组患者的性别、年龄等基本特征均衡。两组腹腔出血（P=0.36）、吻合口漏（P=0.06）及肠梗阻（P=0.16）之间差异无统计学意义,腹腔镜组较传统开腹组总的并发症（P〈0.0001）及切口感染发生率低（P=0.0006）,手术时间长（P=0.001）,术中出血量少（P〈0.00001）,术后肠道功能恢复时间早（P=0.0002）,住院时间短（P〈0.00001）。结论：LTME较OTME在中低位直肠癌手术中能够更安全的达到根治性切除的效果,而且在减少手术对患者的创伤方面具有优势。
