茶多酚对NASH大鼠肝脏组织VEGF及氧化应激的影响
摘要：目的：茶多酚对NASH大鼠肝脏组织VEGF及氧化应激的影响。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为3组,正常对照组、模型组、茶多酚治疗组。正常组普通饲料喂养,模型组喂高脂饮食,茶多酚治疗组在高脂饮食12周后茶多酚（150mg（/kg.d）灌胃治疗,16周末处死各组大鼠,留取肝脏组织,观察各组大鼠肝组织病理改变,测定其肝脏丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性以及血管内皮生长因子（VEGF）、Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果：模型组大鼠肝组织中SOD活性降低而MDA含量以及VEGF、Ⅰ、Ⅲ型胶原表达均明显高于正常组。茶多酚治疗可减轻肝纤维化程度,显著升高肝组织中SOD活性、降低MDA含量以及VEGF、Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平。结论：茶多酚可通过抑制肝纤维化组织VEGF表达,降低肝组织氧化应激水平而发挥抗肝纤维化作用。EZH2靶向的shRNA质粒的构建和有效靶序列的筛选
摘要：目的：构建并筛选靶向zeste基因增强子人类同源物2（Enhancer of zeste homologue 2,EZH2）的短发卡RNA（short hairpinRNA,shRNA）的质粒表达载体。方法：设计并合成针对EZH2基因的带有小发夹结构的DN段并克隆至质粒pGPU6/GFP/Neo中,经酶切和测序分析后转染入胶质瘤U251细胞,分别应用实时荧光定量PCR和Western bloting在mRNA和蛋白质水平观察其对EZH2基因表达的沉默效果。结果：重组质粒构建成功,并成功转染入胶质瘤U251细胞,转染效率大约为70%。其中,以靶向hEZH2-715序列的质粒抑制效果最好,其对U251细胞EZH2 mRNA和protein抑制率分别为55%和89%。结论：成功构建了能高效抑制EZH2基因表达shRNA的重组质粒,为下一步探索EZH2在胶质瘤细胞中的生物学作用奠定了基础。PI3K/Akt通路在电针预处理诱导脑缺血耐受中的机制研究
摘要：目的：通过观察电针预处理对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶（PI3K/Akt）通路的变化以及该通路抑制剂对电针预处理的脑保护的影响,探讨电针预处理诱导脑缺血耐受的可能机制。方法：线栓法单侧阻断大脑中动脉120min,再灌注24h制备大鼠大脑局灶性缺血再灌注（I/R）模型;Western Blot检测Akt磷酸化水平的变化;侧脑室注射PI3K/Akt通路抑制剂LY294002;神经行为学评分（Garcia标准）及TTC染色检测脑梗死体积比评价脑损伤程度。结果：电针预处理使大鼠神经行为学评分增高,脑梗死体积比降低（P〈0.05）;可上调Akt磷酸化水平,I/R2h达高峰（P〈0.05）。侧脑室注射PI3K/Akt抑制剂LY294002,拮抗电针预处理的脑保护作用（P〈0.05）。结论：电针预处理增加Ak（tSer473）磷酸化水平,在缺血再灌注早期上调PI3K/Akt通路可能是诱导大鼠脑缺血耐受的产生的主要机制。GLPp16/CSP17探针在膀胱尿路上皮癌诊断中的应用
摘要：目的：探讨荧光原位杂交技术辅助诊断膀胱尿路上皮癌的可行性。方法：标记为17号染色体着丝粒及9号染色体p16位点9p21区带探针,采用荧光原位杂交技术（Fluorescence in Situ Hybridization FISH）对80例膀胱肿瘤患者尿液间期细胞核进行荧光原位杂交,以20例健康志愿者作为正常对照组,建立阈值。以术后病理结果作为诊断＂金标准＂,对80例膀胱肿瘤患者同时行尿脱落细胞学检查,与FISH进行比较。结果：17号染色体和9p21的畸变率分别为57.5%和63.8%。17号染色体畸变率主要表现为多倍体,与膀胱癌的分级有显著相关性（P〈0.01）;9号染色体畸变率主要变现为染色体缺失,与膀胱癌分期分级均无相关性（P〉0.05）。尿脱落细胞学灵敏度为12.2%,FTSH技术灵敏度为86.5%;两者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：荧光原位杂交技术可以作为膀胱尿路上皮癌诊断的一项重要方法,并可能在预后判断中具有重要临床意义。早期激素性股骨头坏死模型的建立
摘要：目的：建立早期股骨头坏死模型,为研究其发病机制及合理治疗方法的提供可靠的模型基础。方法：用单一剂量脂多糖LPS（10μg/kg）联合三次甲强龙MPS（10 mg/kg）注射,每次间隔24h,诱导建立兔早期股骨头坏死模型,通过影像学及组织病理性学方法评估模型建立情况。结果：4周后,模型组死亡1例,模型组16例X线检查未见异常表现,2例X线提示股骨头密度不均,未出现股骨头塌陷,18例HE染色示骨细胞空骨陷窝增多,脂肪细胞体积变大,数量增多。结论：用脂多糖（LPS）联合甲强龙可成功诱导建立兔早期股骨头坏死模型,模型成功率高、死亡率低。去甲斑蝥素对H446细胞Id1mRNA表达的影响（英文）
摘要：目的：观察去甲斑蝥素对小细胞肺癌H446细胞Id1mRNA表达的影响。方法：分别利用MTT法检测细胞生长活性;用划痕实验分析细胞迁移能力;采用Hoechst染色观察细胞凋亡;用实时荧光RT-PCR法测定H446中Id1mRNA的表达。结果：去甲斑蝥素对H446细胞的生长有明显的抑制作用,细胞的生长抑制率和凋亡率明显增加,细胞迁移距离明显缩短。去甲斑蝥素可抑制细胞内Id1mRNA的表达,其相对定量随去甲斑蝥素的浓度增大而减少。结论：在H446细胞中,去甲斑蝥素能抑制Id1mRNA的表达,这可能是去甲斑蝥素抑制细胞生长,迁移和诱导细胞凋亡的重要机制之一。γ-分泌酶抑制剂对糖基化终产物作用下心肌微血管内皮细胞的影响
摘要：目的：探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂（DAPT）对AGEs作用下的心肌微血管内皮细胞的增殖、迁移、管样结构的影响。方法：SD大鼠心肌微血管内皮细胞体外分离培养后,以不同浓度DAPT（0.25、0.5、1.0、5.0、10μmol/L）干预200mg/LAGEs作用下的CMECs24h,或者与DAPT（5μmol/L）孵育不同时间（24h、48h、72h、96h、120h）,采用MTT比色法检测细胞的增值能力;用Transwell法检测细胞的迁移能力;用毛细血管管样结构形成实验检测DAPT对血管新生的影响。结果：DAPT显著抑制AGEs作用下的心肌微血管内皮细胞的存活,同时浓度越高、时间越长,其抑制效果越明显。结论：DAPT通过阻断Notch信号通路,能抑制AGEs作用下的心肌微血管内皮细胞的增殖及血管新生,促进细胞凋亡。定位于1p36.12～1p35.1的良性家族性婴儿惊厥家系8个候选基因的排除克隆
摘要：目的：克隆定位于1p36.12～1p35.1上微卫星标志D1S2864和D1S2830之间12.4cM的区间内的腓骨肌萎缩症2L型的致病基因。方法：应用生物信息学方法筛选8个候选基因（NHE1、SMN、STX12、OX1R、BDR2、DHHC18、FLJ10315和SESN2）,设计合成扩增8个基因外显子及外显子与内含子交界的引物,DNA直接测序法进行序列变异分析。结果：未发现与BFIS共分离的致病突变,但发现3个已知的多态。结论：排除了8个候选基因为该BFIS致病基因的可能。联合应用NGF和胰岛素对糖尿病大鼠烫伤创面表皮干细胞的影响
摘要：目的：通过局部联合应用神经生长因子和胰岛素对糖尿病大鼠深II度烫伤创面表皮干细胞标记物β1整合素和角蛋白19（K19）表达的影响,探讨神经生长因子和胰岛素联合应用于糖尿病烫伤创面治疗后对创面愈合的影响。方法：雄性wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病模型60只,1月后在大鼠背部造成深II度烫伤。将大鼠随机分为糖尿病对照组（B）、胰岛素治疗组（C）、神经生长因子治疗组（D）、神经生长因子联合胰岛素治疗组（E）,每组15只。另取15只正常雄性wistar大鼠作为正常对照组（A）。观察伤后3、7、11、15、21 d各组创面愈合情况,检测创面β1整合素和角蛋白19（K19）的表达并计算创面愈合率。结果：E组创面愈合率自第7天起较A、B、C、D组增加,为[（25.33±2.32）%,（P〈0.05）];A、C、D组创面愈合率较B组增加分别为[（22.51±1.78）%,（16.68±1.95）%,（18.29±1.70）%,（P〈0.05）]。E组整合素β1和角蛋白19（K19）表达自伤后第7至21天各时相点显著增加,（P〈0.05）。结论：糖尿病大鼠深II度烫伤创面局部联合应用神经生长因子和胰岛素可促进表皮干细胞的增殖与分化从而加速创面的愈合。bFGF诱导肺腺癌细胞系A549上皮间质转化
摘要：目的：探讨上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）过程在肺癌侵袭转移中的作用。方法：体外培养A549细胞,以bFGF（10ng/ml）进行干预后,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;间接免疫荧光观察上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标志物vimentin蛋白表达的变化;采用细胞划痕试验检测bFGF对A549细胞迁移能力的影响;采用transwell小室试验检测bFGF对A549细胞侵袭能力的影响。结果：bFGF（10ng/ml）干预后,在倒置相差显微镜下观察,A549细胞形态变成了梭形,形态如同成纤维细胞。间接免疫荧光显示A549细胞E-cadherin表达随时间延长逐渐减弱,而vimentin表达逐渐增强。细胞划痕试验显示,bFGF干预后细胞迁移能力提高。Transwell小室试验显示,bFGF干预后细胞侵袭能力提高。结论：bFGF在体外诱导肺腺癌细胞系A549细胞发生上皮间质转化,上皮间质转化是肺癌侵袭转移的重要机制之一。Foxj1在脑外伤后的表达变化
摘要：目的：探讨脑外伤后Foxj1在脑组织中的表达变化及其意义。方法：建立大鼠脑外伤模型,利用Western blot和免疫组织化学方法检测脑外伤后Foxj1在脑组织中表达的变化。结果：Western blot显示大鼠脑外伤后,Foxj1的表达逐步增高,伤后3 d升至最高点,之后逐渐降低;免疫组织化学的结果与Western blot一致。结论：脑外伤后Foxj1在脑组织中的表达增高,这种增高的表达参与了脑外伤后脑组织的病理生理和生化变化。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978-7-117-13344-9/R.13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述,阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的分级检测
摘要：目的：对不同患病程度的OSAS患者的子带能量比特性进行研究,同时给出一种适用于家庭环境的OSAS检测方法。方法：以鼾声第一共振峰集中频段为先验知识,分析27例OSAS患者和13例单纯打鼾者鼾声的子带能量比。结果：本文方法能较好的区分OSAS患者和单纯打鼾者。中、重度OSAS患者的子带能量比均高于轻度患者,差异具有统计学意义,中度和重度患者的差异不明显。最后给出家庭环境中本文方法的检测精度,灵敏度为92.86%,特异性为92.97%。结论：本文方法能有效的检测OSAS患者,有望实现大规模普及化筛查,并为今后利用鼾声特性区分不同患病程度提供一种有效的研究思路。柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5及IL-13影响的实验研究（英文）
摘要：目的：观察柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5及IL-13含量的影响,探讨柴胡渗湿汤治疗哮喘的作用机制。方法：将84只雄性Wi star大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、定喘汤组、柴胡渗湿汤低剂量组、柴胡渗湿汤中剂量组、柴胡渗湿汤高剂量组,每组12只,采用卵蛋白制作大鼠哮喘模型,予相应药物干预。用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中IL-5及IL-13水平。实验数据采用SPSS11.5统计软件进行分析。结果：实验后各组死亡率比较均无差异,P〉0.05;模型对照组与正常对照组血清中IL-5及IL-13含量水平有显著差异,表明大鼠哮喘模型存在着血清IL-5及IL-13含量异常增高的病理状态;与模型对照组相比较,各治疗组血清中IL-5及IL-13的含量明显降低,其中尤以地塞米松组、柴胡渗湿汤中剂量组和柴胡渗湿汤高剂量组的作用更明显。结论：柴胡渗湿汤治疗哮喘的作用机制与降低IL-5及IL-13的水平有关;上述作用具有一定的量效关系,但并不因给药剂量的增加而增加。壳聚糖接枝改性PET人工韧带的表面结构与特性研究
摘要：目的：于聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）人工韧带材料表面接枝壳聚糖长链分子,对改性PET人工韧带的表面结构与特性进行分析,以期为较好生物相容性的PET人工韧带材料的设计和研发奠定一定的理论基础和技术支持。方法：首先采用化学接枝法在聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）织物表面接枝丙烯酸（PET-AAc）,再与壳聚糖分子发生酰胺化反应实现PET表面的壳聚糖接枝（PET-CHI）。借助接触角、x射线光电子能谱（XPS）、傅立叶红外光谱（FTIR）、热失重（TG）和扫描电镜（SEM）等对PET改性效果进行分析表征。结果：壳聚糖长链分子成功接枝到PET表面,壳聚糖在PET表面的接枝厚度为2.25μm,接枝量为9.66 wt%。结论：接枝改性后PET表面亲水性有较大提高,浸润性得到改善。性激素受体在膀胱肿瘤生存预后中的临床价值
摘要：目的：观察性激素受体（雄激素受体和雌激素β受体,AR和ERβ）在膀胱癌中的表达,通过它们与临床病理特征和术后复发预后的相关分析来探讨性激素受体的临床意义与价值。方法：采用免疫组织化学SP法检测AR和ERβ蛋白在64例膀胱尿路上皮癌的表达。显微镜下随机选取5个400×高倍视野,每个视野计数100个癌细胞中的阳性细胞数,通过计算染色阳性的细胞率来评估受体蛋白的表达情况。结果：两种性激素受体蛋白均阳性定位于细胞核中。AR阳性表达率为26.6%,ERβ阳性率为81.2%。AR和ERβ的阳性表达率在男女性别方面均无统计学差别（P=0.1982,0.0669）。随着膀胱癌病理分级升高,AR和ERβ的阳性表达率均增高（P=0.0182,0.0360）。同时,AR和ERβ的表达与患病年龄,膀胱内肿瘤数目,肿瘤大小,肿瘤的临床分期均无统计学相关性（P均〉0.05）。术后随访患者时间为2-81月,生存分析显示：AR与肿瘤的复发间隔期和5年复发率相关（P=0.0442）。ERβ则与肿瘤患者的总生存期相关（P=0.0001）。阳性表达AR的患者,复发间隔时间增长,5年复发率较低;ERβ阳性患者总生存期较长。结论：性激素受体AR和ERβ阳性表达于临床膀胱癌组织中,并且均与膀胱癌的分化密切相关。这提示AR和ERβ可能在膀胱癌的发生发展中起一定作用。同时,两种蛋白还能作为评估膀胱癌复发预后的预测指标。CYP2C19基因多态性与冠心病危险因素对氯吡格雷抵抗的影响
摘要：目的：观察细胞色素P450系统药物代谢酶CYP2C19基因多态性以及相关临床因素对氯吡格雷抵抗的影响。方法：选择2010年11月至2011年5月我科拟行PCI术治疗的冠心病患者共145例,均给予氯吡格雷300mg负荷剂量,75mg维持剂量。①通过流式细胞仪检测血管舒张因子刺激酸磷蛋白血小板反应性指数VASP PRI（以VASP PRI≥50%,定义为氯吡格雷抵抗）分为氯吡格雷抵抗组和氯吡格雷反应组。②检测入选患者的药物代谢酶CYP2C19的基因型;根据不同等位基因功能缺失,分为快代谢基因型（＊1/＊1）、中间代谢基因型（＊1/＊2、＊1/＊3）和慢代谢基因型（＊2/＊2、＊2/＊3、＊3/＊3）。③观察CYP2C19基因型及相关临床危险因素对氯吡格雷反应性的影响,④观察氯吡格雷抵抗与临床不良终点事件主要临床不良终点事件[心源性死亡、再发心肌梗死、靶病变再次血运重建术（TLR）]和次要临床终点事件（支架内血栓形成、脑血管意外、大出血）之间的相关性。结果：检测出氯吡格雷抵抗的患者31例,其发生率为20.67%;检测出CYP2C19慢代谢基因型携带患者19例,所占比例为12.67%。慢代谢基因型患者与（快代谢基因型＋中间代谢基因型患者）之间VASP PRI比为（49.20±8.45）%VS（44.17±5.41）%,P〈0.05,氯吡格雷抵抗发生率之比为35.49%（n=11）VS16.81%（n=20）,P〈0.05。多元回归分析提示CYP2C19慢代谢基因型（OR：4.43;95%CI：3.28-8.37,P〈0.05）和2型糖尿病（OR：2.76;95%CI：2.13-6.14;P〈0.05）是氯吡格雷抵抗的两种危险因素。临床随访结果显示氯吡格雷抵抗组与氯吡格雷反应组主要临床不良终点事件的发生率比为6.45%（n=2）vs2.63%（n=3）,P〈0.05。结论：携带CPY2C19慢代谢基因型和患有2型糖尿病是导致氯吡格雷抵抗的两种重要的危险因素,氯吡格雷抵抗的发生增加了临床不良终点事件的风险。野战微创介入方舱内实施对脾脏损伤的快速救治实验
摘要：目的：探讨在战争或自然灾害等野战特定条件下,使用野战微创介入方舱,现场对脾脏创伤实施快速微创介入栓塞救治的可行性及效果,形成介入方舱内对脾脏进行快速介入栓塞救治的流程。方法：野战条件下,展开野战介入方舱,在血管造影机下对大动物（狗）脾动脉进行血管内穿刺造模,建立脾动脉损伤模型,按照方舱内快速微创介入救治的流程,对脾动脉受损伤的动物（狗）实施腹部内受损脾动脉的栓塞止血术式。结果：按照设定的预案,对脾损伤的模型动物实施早期介入栓塞脾动脉止血治疗,全部实验动物2周存活率为100%。结论：野战条件下,考虑到转运风险时或者伤情十分紧急时,靠近事发现场展开野战微创介入方舱,对腹部脾脏损伤开展紧急介入栓塞止血救治,不仅可为病人后续的治疗争取宝贵时间,大幅降低一线伤死率,而且脾脏的保全也提高伤员愈后的生活质量。
