抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究
摘要：目的：对MAGE1-MAGE3-HSP70（M1-M3-HSP70）融合蛋白的理化性质及其纯化策略进行初步研究，为后期的临床前试验提供数据和依据。方法：以本实验室构建的菌种（BL21（DE3）pLysS-M1-M3-HSP70）为材料，采用常规细菌培养及诱导方法进行诱导表达，用聚丙烯酰胺凝胶（SDS—PAGE）电泳、免疫印迹（Westemblotting）对目的蛋白进行分析，然后确定盐析条件，使用ButylSepharoseHP疏水相互作用层析以及阴离子交换（Source30Q填料）对目的蛋白的纯化进行分析。结果：M1-M3-HSP70蛋白在大肠杆菌中表达后，目的蛋白分为两部分，一部分为包涵体形式（44．9％），一部分为可溶表达（55．1％）。对其可溶部分进行研究发现．细菌裂解后，目的蛋白存在聚合和降解现象；确定了盐析条件、洗脱缓冲液以及稳定的PH值范围，基本确定了目的蛋白的纯4~．z-艺。结论：明确了M1-M3-HSP70融合蛋白的基本性质，确定了目的蛋白的纯化方法，为基于融合蛋白的肿瘤疫苗的进一步研究提供了参考。LRRN3膜蛋白在人胚脊神经节的分布和表达
摘要：目的：探讨神经系统富亮氨酸重复超家族成员LRRN3膜蛋白在人胚脊神经节的表达和分布。方法：从人胚脊神经节分离mRNA和蛋白质，用RT-PCR、Western印记杂交法和免疫组织化学方法检测LRRN3膜蛋白表达。结果：LRRN3膜蛋白C端序列RT—PCR扩增产物cDNA在各胎龄脊神经节均有表达，长度约500bp；Western印记杂交结果显示LRRN3膜蛋白存在，分子质量约78kD；免疫组织化学和免疫荧光组织化学结果表明LRRN3阳性表达细胞均为脊神经节感觉神经细胞，部分神经细胞弱阳性表达，部分未表达。结论：LRRN3膜蛋白在脊神经节神经元的表达，推断与脊神经节感觉神经元的发育、形态构建及损伤后修复有密切的关系。低压舱模拟飞行对于脑力负荷影响的初步探讨
摘要：目的：通过低压舱模拟飞行环境下被试人员生理指标的变化，探讨飞行员脑力负荷的变化规律。方法：21名男性志愿者参加低压舱模拟飞行的实验过程，座舱内的压力高度模拟2400米高空压力，持续时间1．5h，重复两次，中间出舱休息0．5h，检测指标为心率变异性（HRV），心理运动测验以及NASA—TLX主观评定量表。结果：研究表明，NASA－TLX量表从主观感受上很好的反映了低压舱模拟飞行后脑力负荷的变化，HRV、心理运动测验也发生了相应的变化。结论：本研究结果提示低压舱模拟飞行所导致的脑力负荷变化是具有一定规律的，生理心理测验可能是测定变化规律的一种间接方法。内皮祖细胞移植加速鼠颈动脉内皮修复预防再狭窄的研究
摘要：目的：以安慰机组作对照，观察EPCs自体移植防治再狭窄的疗效以及该作用与血管再内皮化是否相关。方法：共30只雄性SD大鼠纳入实验，随机均分为假手术组、安慰剂组和EPCs移植组。造模前3周时取血3毫升，M199培养基培养传代，行EPCs鉴定，移植组在球囊损伤后即予尾静脉注射1×10^6个EPCs自体移植。4周后观察再狭窄和再内皮化程度。结果：与安慰剂组相比，EPCs自体移植组再内皮化程度提高，再狭窄程度减轻；EPCs移植组内膜／中膜比值与再内皮化率呈线性负相关。结论：EPCs体外扩增自体移植可预防再狭窄；其机制与加速再内皮化有关。铅锌镉联合染毒及营养干预对大鼠血液系统的影响研究
摘要：目的：了解铅锌镉联合染毒对大鼠血液系统的影响及营养干预对其损伤的修复作用。方法：选择SPF级初断乳Wistar大鼠72只，随机分为对照组、染毒组和干预组，分别采用生理盐水、铅锌镉联合染毒液及染毒后以营养干预液灌胃28天和56天之后，检测其血液系统中五元素和血细胞的指标。结果：染毒组较对照组大鼠血铜、血锌含量高，血钙含量低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；染毒组血铜含量高于干预组，血钙含量低于干预组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；干预组红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）、血细胞比容（HCT）均高于染毒组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；对照组白细胞（WBC）计数高于染毒组、干预组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：铅镉对大鼠血铜、血钙、血锌水平有影响；综合营养干预对重金属元素造成的血液系统损伤有明显的拮抗作用，对血液系统有一定的保护及修复作用。土茯苓对高尿酸症小鼠肾损伤的防治作用
摘要：目的：观察土茯苓对高尿酸症小鼠肾功及血清尿酸的影响。方法：将昆明种小鼠分为正常对照组、模型对照组、土茯苓治疗组、别嘌呤醇治疗组，造模成功后分别给予土茯苓、别嘌呤醇灌胃，7d后检测各组大鼠血中肌酐（Cr），尿素氮（Bun）、尿酸（UA）及黄嘌呤氧化酶（XOD）。结果：治疗7d后，与模型组相比，土茯苓治疗组大鼠血肌酐、尿素氮、血UA、XOD明显降低（P〈0．05）。结论：土茯苓对高尿酸症小鼠肾功能有保护作用，对尿酸升高有明显的治疗作用。Abhd2基因与肺气肿发病机制研究
摘要：目的：利用基因敲除技术构建的小鼠肺气肿模型研究Abhd2基因与肺气肿发病机制的相关性。方法：生后6月龄，12月龄的Abhd2基因敲除纯合子和野生型鼠各5只。断髓法处死小鼠，取全肺，提取肺总RNA，紫外线分光光度计测定肺总RNA纯度并计算其浓度。PCR扩增产物行1．5％的琼脂糖凝胶电泳，在紫外线凝胶扫描仪观察拍照，存入IDKadak成像分析系统，分别读取肺气肿的相关因子和相应β-actin光密度值。电泳带密度运用ImageJ软件通过光密度测定法定量分析，比值用于统计学分析。结果：12个月龄Abhd2基因敲除纯合子小鼠与野生型对照比肺组织中基质金属蛋白酶9、12、13、14、组织蛋白酶B、K、S的mRNA表达水平明显增高，金属蛋白酶组织抑制剂3mRNA表达水平明显下降，氧化剂与抗氧化剂的mRNA表达水平未见异常，Abhd2基因敲除纯合子小鼠与野生型对照小鼠比肺组织中白细胞介素-1β、白细胞介素-6、白细胞介素-13和肿瘤坏死因子-α的mRNA表达明显增高。结论：Ablad2基因敲除小鼠通过肺组织中巨噬细胞浸润增多、致炎细胞因子表达过多、蛋白酶基因表达过强与抗蛋白酶抑制剂表达降低以及异常增多的细胞凋亡，自发形成了肺气肿，且渐进性进展，而且肺气肿发生、发展过程与人类是相似的；因此它们对于人类肺气肿遗传易感性及环境因子的研究具有重要价值。细胞外基质金属蛋白酶诱导分子（CD147）在胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中的表达
摘要：目的：探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导分子（CD147）在胰腺癌细胞（Panc-1）及胰腺星状细胞（PSCs）的表达。方法：应用QRT—PCR，免疫细胞化学和免疫印迹分析方法检测Panc-1和PSCs细胞中EMMRPIN的表达，应用脱糖基化试剂N—glycosidase F及Endoglycosidase H鉴定CD147糖基化形式。结果：CD147在Panc-1和PSCs细胞质膜及细胞质中高表达，通过脱糖基化法首次鉴定出胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中CD147不同的糖基化修饰。结论：CD147的糖基化修饰具有细胞特异性，可能与细胞恶性程度相关。深低温冻存组织工程化软骨在喉狭窄功能重建中的应用
摘要：目的：探讨低温保存组织工程化软骨在喉狭窄功能重建中的应用价值。方法：取3周龄新西兰兔关节软骨细胞，体外培养，取第2代对数生长期培养细胞，制成细胞悬液，调整软骨细胞悬液浓度约为5×10^7个／ml左右，接种于PGA三维支架材料上，复合物体外培养2周后冻存，冻存6个月后解冻复苏，再行体外培养观察，2周后接种于已建立的喉甲状软骨缺损模型的软骨缺损处，并设对照组。术后12周取材，行大体及组织学观察。结果：经低温冻存的组织工程化软骨生长良好，组织学观察有软骨形成，与周围软骨组织结合紧密，与非冻存组相比差异无统计学意义。结论：深低温冻存对组织工程化软骨的生物活性无明显的影响，低温冻存的组织工程化软骨可用于喉软骨缺损的修复，重建喉功能。N-乙酰半胱氨酸对犬心房快速起搏电重构的影响
摘要：目的：探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对犬心房快速起搏电重构的影响。方法：取16只犬，随机分为对照组和NAC干预组。NAC组按照15mg／kg／d剂量给予NAC口服6周时间。在犬右房置入电极，快速起搏右心房，诱发房颤并维持2小时。在起搏前后分别测定有效不应期（AERP）。结果：房颤后对照组AERP显著缩短，AERP频率适应性下降（P〈0．05）；而NAC组房颤前后AERP和AERP频率适应性均无明显变化。结论：在心房快速起搏致房颤2h的模型中，NAC对心房电重构具有明显的保护作用。CDADC1在人视网膜色素上皮细胞中功能研究
摘要：目的：研究细胞增殖相关基因CDADC1在人视网膜色素上皮细胞ARPE19中的表达及对ARPE19细胞增殖的影响。方法：采用基因重组技术构建荧光表达载体pEGFP－C1－CDADC1和真核表达载体pcDNA3．1-myc-CDADC1，用脂质体转染法转染ARPE19细胞，观察GFP—CDADC1融合蛋白在ARPE19细胞的表达定位，流式细胞仪测定CDADC1转染后对ARPE19细胞生长周期、凋亡的影响。结果：FP—CDADC1融合蛋白亚细胞定位显示，CDADC1低表达于ARPE19细胞胞浆，高表达于细胞核；pcD—NA3．1-myc-CDADC1瞬时转染ARPE19细胞显示24小时细胞无明显改变，48小时后重组质粒转染组S期细胞占细胞总数的19．37％，pcDNA3．1-myc空载质粒转染组S期细胞占10．87％，而空白对照组S期细胞占3．33％，重组质粒转染组与两对照组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：CDADC1在增生性玻璃体视网膜病变（PVR）发生和发展过程中可促进DNA的合成，引起细胞增生。酿酒酵母菌培养条件的研究
摘要：目的：优化酿酒酵母液体发酵得到菌体的最佳条件。方法：通过单因素试验，以吸光度为指标，研究碳源、氮源、接种量、pH值及无机离子对酿酒酵母菌生长的影响。结果：酿酒酵母生长的最佳碳源是葡萄糖，最佳氮源是蛋白胨，最佳接种量2％，最佳初始pH为4．5，添加无机盐硫酸亚铁能够促进其生长。结论：得到了酿酒酵母液体生长的最佳培养基配方。血清CREG蛋白在急性心肌梗死早期的表达研究
摘要：目的：探讨血清中CREG蛋白在急性心肌梗死发作早期的表达情况，尝试为临床心肌缺血的极早期诊断提供一种新的血清标志分子。方法：在2010年6月至2010年11月期间，入选在沈阳军区总医院心内科住院治疗的急性ST段抬高型心肌梗死患者50例及非AMI对照50例，于AMI组胸痛发作后的不同时间点采血测定CK、CK—MB、LDH和cTnT，同时应用Westem blot技术测定血清中CREG蛋白的含量，并与对照组比较。结果：AMI组发病72小时内的血清中CREG蛋白表达均较对照组有不同程度的增高（P〈0．05）。胸痛开始2h内，AMI组血清中CREG的含量即明显增高，其在2h、4h及6h的含量显著高于对照组（P〈0．001）。在胸痛已经发作2小时内，两组间血清cTnT、CK、CK-MB及LDH水平比较无统计学意义（P〉0．05）。结论：CREG在AMI患者血清中的表达增高．其在血清中表达时间早于cTNT及CK-MB。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978-7-117—13344-9／R·13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述，充分体现了国际分子影像学的最新进展。两种介入途径治疗急性、亚急性门静脉及肠系膜上静脉血栓的临床疗效分析
摘要：目的：评价介入技术治疗急性和亚急性门静脉（portal vein，PV）及肠系膜上静脉（superior mesenterie vein, SMV）血栓形成的临床疗效。方法：对28例治疗急性和亚急性（发病一周至一月）的PV及SMV血栓患者进行介入治疗。按介入治疗途径不同分为下述两组：选择经颈静脉穿刺门静脉（transjugular intrahepatic portosystemic shunt , TIPS途径）置管溶栓（19例）和经皮穿肝内门脉（percutaneous transhepatic）置管溶栓治疗（9例）。结果：所有患者随访一周至三个月，其中治疗成功24例，临床症状明显改善，无严重并发症。经TIPS途径治疗的患者组中，16例随访显示大部分血栓被清除，门静脉系统有血流通过，临床症状缓解。3例SMV及PV恢复部分血流，但临床症状无明显改善。经皮穿肝内门脉直接置管溶栓治疗组中，6例患者的PV及SMV内血栓大部分清除，血流基本改善，2例患者PV及SMV血流部分好转，临床症状无明显改善，严重并发症1例（术后两天死于腹腔出血）。结论：经TIPS途径介入技术和经皮穿肝内门脉直接置管溶栓治疗是治疗急性和亚急性PV及SMV血栓形成的有效方法，前者的疗效及安全性均好于后者。血钙对老年肺炎患者的严重程度及预后的影响
摘要：目的：研究血清钙离子浓度与老年肺炎患者的严重程度及预后的关系。方法：按照脓毒症的诊断标准将入住急诊ICU的老年肺炎患者206例，分为脓毒症组（155例）和非脓毒症组（51例），脓毒症组又按照预后分为存活组（91例）和死亡组（64例）。分别测定血清钙离子浓度、血浆白蛋白、C-反应蛋白（CRP）、血白细胞计数等有关的实验室指标，比较2组指标的差别。结果：脓毒症组中血清钙离子浓度较非脓毒症组降低，CRP、血白细胞计数较非脓毒症组升高（P〈0．01）；亚组分析中，死亡组中血清钙离子浓度较存活组降低（P〈0．01），CRP较存活组升高（P〈0．05），血白细胞计数两组比较无明显差异（P〉0．05）；血清钙离子浓度与血浆白蛋白的浓度呈高度正相关。结论：血清钙离子浓度对判断老年肺炎患者的预后有一定的临床意义。膝关节不稳对骨折愈合的影响（附3例临床分析）
摘要：目的：探讨膝关节不稳对骨折愈合的影响。方法：回顾性分析我院收治3例患者因早期未能准确诊治膝关节交叉韧带损伤，而导致同侧股骨干骨折术后不愈合的临床资料。我们从生物力学角度分析，交叉韧带对膝关节生理性制导及稳定作用，反之损伤后膝关节的生理运动一定程度的丧失，以及随之而来的载荷传导紊乱，从而导致膝关节不稳。膝关节不稳所引起骨折端应力改变，其对骨折愈合将产生怎样的影响。结果：如未能及时修复交叉韧带在患者股骨干骨折术后行CPM锻炼及部分负重行走时将传导以骨折断端以一种剪切、旋转的应力，同时下肢垂直的纵向压应力将难以传导至骨折端，可能导致股骨干骨折术后的延缓愈合甚至不愈合。结论：膝关节不稳定可引起同侧肢体骨折端的应力改变，可能导致骨折的延缓愈合甚至不愈合。颅底脊索瘤的影像学诊断及治疗研究（附26例报告）
摘要：目的：探讨颅底脊索瘤的CT、MRI表现及治疗措施。方法：回顾性分析经病理证实的26例脊索瘤患者的临床资料。肿瘤位于鞍区及鼻咽部者9例，位于中颅窝者5例，位于后颅窝者8例，混合型4例。手术入路：额颞入路一翼点开颅9例，鼻内镜下经蝶入路5例，颞下、颞枕及扩大中颅窝入路8例，4例未手术行放射治疗。结果：肿瘤全切8例，大部及次全切14例，围手术期未见死亡病例。25例患者获得随访；3例于术后1年内复发，其中2例死亡，余者颅神经损伤及肢体症状均有改善。结论：脊索瘤无典型临床表现，现多可通过术前影像学检查得以诊断，少数位于特殊位置者需与垂体瘤，颅咽管瘤，三叉神经鞘瘤等鉴别；肿瘤全切较为困难，根据需要选择相应的手术入路可明显提高手术效果；放疗可作为术后辅助治疗。
