AKT途径在雌激素调控子宫内膜癌KLE细胞中乙二醛酶Ⅰ表达的作用
摘要：目的：探讨雌激素是否通过AKT途径调控子宫内膜癌KLE细胞中乙二醛酶Ⅰ（GlyoxalaseⅠ，GloⅠ）的表达。方法：采用RT—PCR和Western blotting检测雌激素（17-β雌二醇）处理或AKT途径抑制剂（LY294002）处理子宫内膜癌KLE细胞后GloⅠ的mRNA或蛋白的表达情况。实验分4组：Con组（对照组）；LY294002组（LY294002处理组）；E2组（17-β雌二醇处理组）；E2＋LY294002组（LY294002预处理1小时后再17-β雌二醇处理组）。结果：1、经不同浓度的17-β雌二醇（Con、10^-11、10^-10、10-9M）作用于KLE细胞24小时后，GloⅠmRNA的相对表达量分别为1，1．58±0．04，1．82±0．03，1．81±0．04，以10^-10M的浓度时最为显著（P〈0．05）。以10，lOM的17-13雌二醇作用于KLE细胞48小时后，GloⅠ蛋白的相对表达量为1．79±0．02，高于Con组。2、以LY294002抑制AKT途径后，KLE细胞中GloⅠmRNA的相对表达量为0．69±0．03，蛋白的相对表达量为0．16±0．02，均低于Con组.3、E2＋LY294002组GloⅠmRNA和蛋白的相对表达量分别为1．02±0．04、1．01±0．03，均低于E2组中GloⅠmRNA和蛋白的相对表达量，E2组分别为1．34±0．03、1．79±0．02。LY294002组GloⅠmRNA和蛋白的相对表达量分别为0．69±0．03，0．16±0．02，均低于Con组GloⅠmRNA和蛋白的相对表达量。结论：雌激素可上调子宫内膜癌KLE细胞中GloⅠmRNA和蛋白的表达。抑制AKT途径可下调子宫内膜癌KLE细胞中GloⅠmRNA和蛋白的表达。AKT途径在雌激素调控子宫内膜癌KLE细胞中GloⅠ的表达无明显作用．姜黄素诱导Nrf2核转位对脂多糖引起库普弗细胞分泌炎症细胞因子的影响
摘要：目的：研究姜黄素诱导大鼠Kupffer细胞Nrf2核转位对脂多糖（LPS）引起的炎症细胞因子分泌的影响。方法：分别用10μM、20μM和30μM干预Kupffer细胞8h，诱导Nrf2核转位水平；将Kupffer细胞随机分为对照组、LPS组和干预组，对照组正常培养未加姜黄素和LPS，LPS组用10μg／mL的LPS加入Kupffer细胞培养液共同培养2h；干预组用30μM姜黄素干预8h后，余处理同LPS组。Western blot检测Nrf2核转位水平，分光光度法检测细胞MDA、GSH水平，ELISA法检测上清液TNF-α和IL-6，放免法检测IL-1β。结果：①姜黄素诱导Kupffer细胞Nrf2核转位，核转位水平随浓度增加而增高。②LPS组MDA水平较对照组显著升高（P〈0．01），干预组MDA水平较LPS组显著降低（P〈0．01），仍显著高于对照组（P〈0．01）。LPS组GSH水平较对照组显著降低（P〈0．01），干预组GSH水平较LPS组显著升高（P〈0．01），仍显著低于对照组（P〈0．01）。③LPS组上清液TNF-α，IL-1β和IL-6显著高于对照组（P〈0．01），干预组均显著低于模型组（P〈0．01），但显著高于对照组（P〈0．01）。结论：姜黄素通过诱导Kupffer细胞Nrf2核转位，降低LPS诱导的氧化应激损伤，抑制Kupffer细胞分泌炎症细胞因子。体外缺血缺氧条件下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡发生的机制研究
摘要：目的：研究体外大鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs）在缺血缺氧条件下发生凋亡的作用机制。方法：采取大鼠骨髓，以密度梯度离心分离出单个核细胞（MNCs），于体外培养并由牛垂体提取物（PEX）诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞（MSCs）。经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后，骨髓间充质干细胞（BMSCs）在缺血缺氧条件下培养，通过Annexin V／PI双染细胞凋亡检测比较不同组别细胞的凋亡率和蛋白印迹法（western blot）来观察细胞中蛋白的变化。结果：①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定，提示骨髓间充质干细胞培养成功。②对照组（无缺血缺氧）与缺血缺氧组比较，缺血缺氧组的凋亡率显著性增加，而通过磷酸化Akt的表达量显著性增加提示PI3K（Phosphoinositide-3kinase）／Akt（ProteinkinaseB，PKB）信号通路被激活（P〈0．05）；同时缺血缺氧组与缺血缺氧＋PI3K／Akt抑制剂（LY294002）组比较，缺血缺氧＋PI3K／Akt抑制剂（LY294002）组的凋亡率显著降低，而通过磷酸化Akt的表达量显著减少提示PI3K/Akt信号通路被抑制（P〈0．05）。结论：PI3K／Akt信号通路对体外缺血缺氧条件下培养的骨髓间充质干细胞凋亡发生有关键性作用。甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体COX-2、PGE2、EP2受体及小胶质细胞表达的研究
摘要：目的：通过研究COX-2、PGE2、EP2受体及小胶质细胞在甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体内的表达变化探讨甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体中COX-2／PGE2系统与小胶质细胞活化之间的关系。方法：将40只健康成年雄性SD大鼠，随机分成对照组10只和实验组30只（实验组分成三个亚组，分为末次给药后1天组、2天组和3天组，n=10）。实验组给予10mg／kg的MA腹腔注射，对照组给予同样剂量的生理盐水，每天注射两次，注射时间为8：00、20：00，连续注射4天。分别于末次给药后的第1天、第2天、第3天处杀。用免疫组化技术对中毒大鼠纹状体（CPU）中COX-2、EP2受体及Iba1（钙离子接头蛋白，小胶质细胞内一种特异性标记物）的表达进行检测，并进行图像分析。另外，取大鼠的纹状体运用酶联免疫法检测PGE2的含量。结果：COX-2、PGE2、EP2受体及小胶质细胞在各组均有表达。与对照组相比，实验组中：COX-2、PGE2、EP2受体的1天组表达均不同程度下降；2天组中COX-2表达水平大幅度上升，PGE2、EP2受体表达仍低于正常水平；3天组COX-2表达水平继续升高，而PGE2、EP2受体表达趋于正常组水平。而小胶质细胞表达水平则是三个实验组均高于正常组，且3天组高于2天组，2天组高于l天组。对照组与实验组有显著性差异（P〈0．05）。结论：COX-2／PGE2系统与甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体内小胶质细胞活化无明显相关性；COX-2与甲基苯丙胺的神经毒性有关。p150Sa12在人卵巢癌细胞株中促进MX1基因的表达
摘要：目的：研究p150Sa12在人卵巢癌细胞株中对MX1基因表达的影响。方法：将MX1基因的启动子克隆至带有Luciferase报告基因的pGL3-basic载体中，将其与p150Sa12表达载体用PEI介导的转染方法共转染至卵巢癌细胞株SKOV3，用双荧光素酶检测系统检测MX1启动子活性变化；将p150Sa12表达载体转染至卵巢癌细胞株ES-2，用western blot检测细胞中MX1基因的表达变化。结果：双荧光素酶检测系统检测MX1启动子活性被p150Sa12上调，westemblot检测转染p150Sa12后细胞中MX1表达量增加。结论：D150Sa12在人卵巢癌细胞株申促进MX1基因的表达。COPD大鼠模型在不同时期细胞转录因子NF-κB变化及意义
摘要：目的：建立分别由吸烟以及气管内滴注脂多糖导致慢性阻塞性肺病小鼠模型，并研究核因子-κB在（COPD）的作用。方法：我们将50只wistar鼠随机分成2组，1组为正常对照组，2组为COPD进展组。COPD进展组又进一步分为暴露香烟烟雾及气管内滴注脂多糖1周、2周、3周、4周、5周。预备好的小鼠被解剖观察，肉眼观察小鼠外形及肺组织标本，显微镜下观察肺脏的病理改变。分析PH、氧分压、二氧化碳分压，NF-κB的活性被测量。结果：COPD小鼠模型肺组织的病理改变如同COPD患者，不同暴露组的实验小鼠细胞总数结果表明，实验小鼠COPD肺组织的病理改变和人类COPD的病理改变是一致的。动脉血气分析结果显示暴露与烟雾及气管内滴注脂多糖4周的小鼠与正常对照组比较血PH、氧分压是降低的，而二氧化碳分压是升高的。结论：NF-κB在促进肺部炎症反应中起着重要的作用，通过活化肿瘤坏死因子及肺泡巨噬细胞。PDIA1和EF1D在左侧和右侧结肠癌差异表达的实验研究
摘要：目的：初步确定蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1-delta为左侧和右侧结肠癌中差异表达蛋白，为左侧和右侧结肠癌在肿瘤生物学方面的差异提供分子遗传学依据。方法：收集人左侧结肠癌（LSCC）和右侧结肠癌（RSCC）组织标本，进行二维凝胶电泳、质谱分析和生物信息学分离和鉴定左右侧结肠癌中差异表达蛋白质，进一步应用RT—PCR、WesternBlot和免疫组织化学技术检测蛋白质二硫化畀构酶A1和延伸因子1-delta在左侧和右侧结肠癌中的表达状态。结果：筛选并成功鉴定出左侧和右侧结肠癌中16种差异表达蛋白质，与右侧结肠癌比较，lO种蛋白在左侧结肠癌表达上调，6种蛋白在左侧结肠癌表达下调，其中蛋白质二硫化异构酶A1在左侧结肠癌中表达上调，延伸因子1-delta在左侧结肠癌中表达下调，并通过RT-PCR、Western Blot和免疫组化方法证实了在左侧和右侧结肠癌中该两种蛋白表达的差异，与蛋白质组学结果一致。结论：左侧结肠癌和右侧结肠癌的蛋白质组存在差异，其中蛋白质二硫化异构酶A1和延伸因子1—delta在mRNA和蛋白水平均存在差异，这些可能是左侧和右侧结肠癌生物学行为差异的原因。GRP94和CD8在宫颈病变组织中的表达及意义
摘要：目的：探讨葡萄糖调节蛋白94（glucose—regulated protein94，GRP94）和CD8在宫颈病变组织中的表达及与HPV感染的关系。方法：采用免疫组化S—P法检测32例原发宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）及40例慢性宫颈炎组织中GRP94和CD8的表达及定位；采用western blot技术检测6例宫颈癌及6例正常宫颈组织中GRP94和CD8的表达。结果：①在宫颈癌、CIN2／3、CIN1及慢性宫颈炎组织中，GRP94的阳性表达率分别为87．5％、82．4％、40％和22．5％；CD8的阳性表达率分别为28．1％、64．7％、90％和97．5％；GRP94在宫颈癌和CIN2／3中的表达均显著高于慢性宫颈炎和CIN1组织（P均〈0．05）；CD8在宫颈癌组的表达显著低于慢性宫颈炎组、CIN1组及CIN2／3组（P均〈0．05）。②Western blot结果示GRP94在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织（P〈0．01）；CD8在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织（P〈0．01）。③GRP94的表达与宫颈癌分化程度、有无脉管侵袭有关（P〈0．05），而与年龄、病理类型、临床分期及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）；CD8的表达与有无脉管侵袭有关（P〈0．05），而与年龄、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。④宫颈病变组织中，GRP94的表达与HPV感染呈正相关（rs=0．377，P=0．000）；cD8的表达与HPV感染呈负相关（rs=-0．395，P=0．000）；GRP94与CD8的表达呈负相关（rs=-0．608，P=0．000）。结论：GRP94表达可能是宫颈CIN进展及宫颈癌预后判断的重要预测指标。姜半夏乙醇提取物对人胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡的影响
摘要：目的：观察姜半夏乙醇提取物对人胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡的影响。方法：不同浓度姜半夏乙醇提取物（终浓度为1mg／ml，0．5mg／ml，0．25mg／ml，0．125mg／ml）处理SGC7901细胞后，倒置相差显微镜下观察细胞的形态学变化；通过甲基噻唑基四唑法检测细胞增殖状况、描绘生长曲线，使用紫外分光光度法观察药物干预后细胞ATP酶活力；AnnexinV．异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）／碘化丙啶（propidium iodide，PI）双标记法流式细胞术检测姜半夏乙醇提取物对SGC7901细胞诱导凋亡的情况。结果：不同浓度姜半夏乙醇提取物均能不同程度地抑制人胃癌SGC7901细胞的增殖；在姜半夏乙醇提取物诱导细胞后细胞发生了边缘毛刺、体积缩小等形态学变化，同时可见细胞折光度和贴壁能力下降；Annexin V-F／TC／PI双标记法检测显示姜半夏乙醇提取物可诱导细胞发生凋亡；细胞总ATP酶活力在药物干预72小时后出现明显下降；并且随着药物浓度增加细胞凋亡率、细胞形态异常改变以及ATP酶活力抑制作用均呈上升趋势。结论：姜半夏乙醇提取物可抑制人胃癌SGC7901细胞的增殖，促进其凋亡，抑制细胞ATP酶活力。动物离心机中大鼠行为状态无线视频采集装置的研制
摘要：目的：研制一种在正加速度作用下能实时观测大鼠行为状态的实验视频采集装置，为研究正加速度导致脑损伤的病理生理机制和防治措施提供新的方法。方法：依据正加速度对大鼠体位的要求和离心机特殊的环境，通过特制的大鼠座舱和无线视频采集单元来实现对动物离心机中正加速度作用下大鼠行为状态的实时观测；固定大鼠的座舱主要由胸部固定圈、身长调节圈、头部运动限制框构成；无线视频采集单元由2.4G无线摄像头、无线信号接收器、信号放大器、计算机以及视频采集软件组成。结果：座舱特殊的大鼠固定方式，既满足了正加速度对体位的要求，又不影响对大鼠行为状态的观测，2．4G无线视频采集技术保证视频信号在离心机高速旋转环境下的实时传输和观测，视频画面清晰流畅，并且能保存视频供回放分析。结论：动物离心机无线视频采集装置可用于正加速度作用下大鼠行为状态的实时观测与研究。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978—7－117—13344—9／R-13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述，充分体现了国际分子影像学的最新进展。丁咯地尔和α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾功能的保护作用研究
摘要：目的：研究丁咯地尔和α-硫辛酸（ALA）对糖尿病（DM）大鼠肾功能的保护作用。方法：雄性SD大鼠用链脲佐菌素（60mg/kg）腹腔注射诱导DM。大鼠随机分为健康组（NC）、DM组（DMC）、DM＋ALA组（ALA组）、DM＋丁咯地尔组（丁咯地尔组）。ALA组和丁咯地尔组每天给予ALA100mg／kg灌胃和丁咯地尔（0．1g／kg）腹腔注射，NC组和DMC组大鼠给予等量生理盐水每日灌胃。干预4周后，测观察治疗后大鼠血糖、尿素氮、血肌苷，内生肌苷清除率、24小时尿蛋白排泄率，比色法检测血清抗氧化酶和丙二醛（MDA）含量。结果：①丁咯地尔和α-硫辛酸降低糖尿病大鼠的尿素氮、血肌苷、24h尿白蛋白排泄率、丙二醛，增加超氧化物歧化酶②两种药物联合用药具有协同作用。结论：丁咯地尔和ALA可能通过抑制机体氧化应激水平，减低早期DM大鼠肾脏损害。人体海马CA1区锥体细胞胞体的发育
摘要：目的：探究人体海马CA1区神经元锥体细胞胞体发育的过程。方法：取19孕周（19GW）、20GW、26GW、35GW、38GW水囊引产胎儿和8岁（8Y）死亡儿童各1例，所有标本来源符合相关法律法规和伦理要求，采用Golgi染色技术，借助配备有＂Neurolu-cida＂软件的共聚焦显微镜观察CA1区锥体细胞胞体，分析细胞体的长度和面积。结果：19GW和20GW细胞体形态尚不明显。26Gw、35Gw、38Gw、8Y海马CA1区锥体神经元胞体长度分别为56．5±2．5（μm）、80．8±8．5（μm）、85．9±12．2（μm）、91．3±9．6（μm）；胞体面积分别为254．5±13．7（μm^2）、362．5±15．5（μm^2）、380．5±22．8（μm^2）、460．8±25．7（μm^2）。26GW锥体细胞胞体长度和面积与35GW、38GW、8Y相比差异明显（P〈0．05）；8岁胞体长度和面积与38GW相比有小幅度增大；细胞形态学：26GW、35GW、38GW锥体细胞胞体切面呈椭圆形或三角形，随胎龄增大，胞体长度和面积逐渐增长增大，特别是细胞基底部增宽。胞体形态由椭圆形逐渐转换为三角形；细胞底部的基树突数量也逐渐增加，到38GW时可以达到4—7个，8Y锥体细胞胞体在切面上基本上都呈三角形，细胞长度和面积与38GW相比稍微增大，相对趋于稳定。结论：人体在发育过程中，锥体细胞长度呈逐渐增长、面积呈逐渐增大趋势，26GW与35GW之间变化最大，38GW与8Y胞体面积差异不明显，整个变化趋势逐渐变慢并趋于稳定。口服卡介菌治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究
摘要：目的：观察口服卡介菌对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）的治疗效果。方法：制备EAE大鼠模型，随机分为BCG高、中、低剂量组和PBS对照组，每组各15只，对大鼠治疗后的临床症状及病理组织学进行评估，提取脾脏淋巴细胞，流式细胞术检测T淋巴细胞亚群，3H—TdR掺入法检测淋巴细胞增殖能力。结果：BCG组EAE大鼠与对照组相比，临床症状减轻，发病时间延迟，炎性细胞浸润数减少；急性期，口服BCG各组CD4^＋、CD8^＋T细胞的数量随剂量增加而增加，缓解期CD4^＋、CD8^＋T细胞数量减少；口服BCG可促进EAE大鼠T淋巴细胞增殖能力；高、中剂量组上述变化均较其它分组明显。结论：口服BCG可很好的诱导免疫耐受，延迟EAE发病，减轻炎症反应，改善临床症状。抑癌基因p16对人肝癌细胞生长抑制的机制研究
摘要：目的：探讨抑癌基因p16对肝癌细胞生长的抑制作用及其机制。方法：将p16cDNA亚克隆至pcDNA3．1真核表达载体上，并经脂质体介导转染至人肝癌细胞株SMMC-7721：用MTT法和Western blot分析转染细胞的生长情况。结果：成功构建重组表达质粒pcDNA3．1-p16，转染pcDNA3．1-p16的SMMC-7721细胞生长速度受到明显抑制；转染后有外源p16蛋白的表达，且伴随Bax上调，Bcl-2和cIAP2的下调。结论：重组pcDNA3．1-p16质粒能在人肝癌细胞SMMC-7721内表达，且能抑制SMMC-7721的生长，其机理与诱导肿瘤细胞凋亡相关。来氟米特联合依那西普对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响
摘要：目的：研究来氟米特和依那西普联合使用对佐剂性关节炎（AA）大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法：建立AA大鼠关节炎模型，分为正常对照组、模型组、来氟米特组、依那西普组、来氟米特联合依那西普配伍组；采用关节炎指数评分法评价大鼠关节炎症程度，半定量RT-PCR和放射免疫法检测滑膜组织及血清中IL-1β、TNF-α表达水平，免疫组化方法检测滑膜组织中MMP－3含量。结果：①相较于AA模型组，来氟米特组、依那西普组和配伍组中大鼠的AI评分均显著下降（P〈0．01），其中以配伍组关节炎指数为最低（P〈0．05）。②模型组大鼠血清及滑膜组织的IL-1β和TNF-α水平明显高于正常对照组（P〈0．01），用药后各组的IL-1β和TNF-α水平均有所下降，并以配伍组降低最为明显（P〈0．01或P〈0．05）；③模型组大鼠滑膜组织MMP-3表达阳性密度显著高于正常对照组（P〈0．01），用药后备组的MMP-3阳性密度降低（P〈0．01），其中配伍组下降程度明显高于来氟米特组和依那西普组（P〈0．01）。结论：来氟米特和依那西普联合使用可明显减轻AA大鼠的关节炎症，降低血清和滑膜组织中IL-1β和TNF-α平，减少滑膜中MMP-3的表达，疗效优于单独使用来氟米特或依那西普。营养保健甘薯汁制备工艺的优化
摘要：目的：优化营养保健甘薯汁的制备工艺。方法：本研究以甘薯为原料，在加酶量、作用时间、反应温度、pH及底物浓度五个单因素试验的基础上采用响应面分析法，以甘薯浆中还原糖量为评价指标，对耐高温α-淀粉酶酶解甘薯浆中淀粉的最佳工艺进行了研究，并利用统计学方法建立了耐高温α-淀粉酶酶解甘薯浆中淀粉的二次多项数学模型。结果：最佳酶解条件为：加酶量480U／g，作用时间90min，反应温度77℃，pH值6．0，底物浓度2．6g／10ml。结论：在最佳酶解条件下，甘薯中还原糖最大估计值为13．97345％。实测值为（13．968±0．05）％。RIP3在淋巴瘤患者病理组织中的表达
摘要：目的：探讨RIP3（受体相互作用蛋白-3）在淋巴瘤患者病理组织中是否表达及其亚细胞定位，并初步观察RIP3的表达是否与淋巴瘤病理恶性度相关。方法：（1）利用免疫组化技术检测48例淋巴瘤和非肿瘤侵润淋巴结病理组织中RIP3表达，并观察RIP3亚细胞定位。结果：（1）RIP3在淋巴瘤患者病理组织中均有表达，其亚细胞定位主要在细胞核，在细胞质中相对弱表达。（2）RIP3表达与淋巴瘤病理恶性度可能存在相关性。结论：RIP3在淋巴瘤患者病理组织中存在阳性表达，为研究RIP3是否与淋巴瘤的发病、临床表现和预后相关，提供了新的探索途径：
