白藜芦醇对人子宫内膜癌细胞系AN3CA增殖和凋亡效应及其机制探讨
摘要：目的：探讨白藜芦醇（resveratrol，Res）对人子宫内膜癌细胞AN3CA的增殖抑制和凋亡诱导效应及可能存在的机制。方法：应用噻唑蓝（MTT）法检测Res对AN3CA的增殖影响；流式细胞术检测Res对细胞周期分布和凋亡影响：荧光实时定量PCR检测Res对细胞Bcl-2、Bax和MMP-9mRNA表达水平的影响；WesternBlot方法检测Res对PCNA、Bcl-2、Bax及ERK1／2、P—ERK1／2蛋白表达水平的影响。结果：Res对子宫内膜癌细胞AN3CA具有显著的生长抑制作用（P〈0．01），呈时间-剂量依赖性；不同浓度Res处理细胞G0／G1期比例显著增加伴随S期细胞数的减少；细胞凋亡率明显增高，200Dmol／lRes处理48h凋亡率可达30．96％±2．041％（P〈0．01）。与对照组相比，Res能抑制PCNA的蛋白表达量，增加Bax和降低Bcl-2转录和蛋白水平的表达量。Res在短时间内（0．5—1h）激活ERK1／2的磷酸化表达但随着作用时间延长（4—48h）其表现为抑制效应。结论：Res具有抑制AN3CA细胞增殖，诱导细胞G0／G1期阻滞和凋亡的效应。Res诱导凋亡可能是通过上调Bax，下调Bcl-2发挥作用，其抗癌作用机制可能与ERK1／2通路失调相关。使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞
摘要：目的：使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞（hECs）。方法：使用中性蛋白酶和胰蛋白酶．EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞，使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器（RCCS）中培养，细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜，扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。结果：在旋转式生物反应器的微重力培养体系中，人表皮细胞能快速贴附到微载体表面，在培养过程中达到很大的细胞密度，并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。结论：使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞，是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。加兰他敏对间歇性低氧引起的认知损害的预防作用
摘要：目的：探究加兰他敏对间歇性低氧引起的认知损伤是否有保护作用，从而说明其对睡眠呼吸暂停综合症引起的认知损害是否有预防作用。方法：建立间歇低氧大鼠模型，行水迷宫试验检测行为功能变化，免疫组化检测海马神经元及胶质细胞数目的变化。结果：加兰他敏与间歇低氧模型纽相比，行水迷宫的平均逃避潜伏期缩短，游泳总距离减少；免疫组化的结果海马神经元的数目有所增加，胶质细胞的数目减少。结论：加兰他敏对间歇性低氧引起的认知损伤有明显的改善作用，可能与减少神经元的丢失及减少胶质细胞的再生有关。所以对于诊断了睡眠呼吸暂停综合征（ASA）的患者，如果同时合并其他痴呆的易感因素，可预防性应用加兰他敏.骨钙素减轻糖尿病大鼠血-视网膜屏障的损伤
摘要：目的：研究骨钙素（Osteocalcin）对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血-视网膜屏障的影响。方法：取健康SD大鼠24只，随机分为正常对照组、糖尿病1月（DM1）组、糖尿病骨钙素干预（DM1＋OCGY）组。尾静脉注射STZ建立DM模型，成模后DM1＋OCGY组腹腔注射骨钙素（2．57mg·kg·1·d^-1），DMl组腹腔注射等量生理盐水，1个月后处死动物。用伊文思蓝方法检测大鼠血-视网膜屏障的改变。结果：造模1月后大鼠视网膜血管渗透性显著增加，共聚焦显微镜显示红色荧光斑点主要分布在视网膜血管周围，给予骨钙素后，红色荧光斑点明显减少，进一步定量显示1M糖尿病大鼠视网膜伊文思蓝含量为57．4±8．7μg·g^-1，骨钙素能够改变这种变化，DM1＋OCGY组伊文思蓝含量为26．1±3．8μg·g^-1。结论：骨钙素能抑制糖尿病视网膜病的血管渗漏，对糖尿病引起的血一视网膜屏障破坏有保护作用。《分子影像学》第二版已正式出版发行
摘要：由哈尔滨医科大学附属第四医院申宝忠教授主编的《分子影像学》第二版（ISBN：978-7-117-13344-9／R-13345）一书已于2010年9月14日由人民卫生出版社出版发行。《分子影像学》是国内第一部分子影像学大型专著。对于分子影像学的基本概念、基本原理、基本方法和应用概况都有精彩而详细的论述，充分体现了国际分子影像学的最新进展。姜黄素对糖尿病大鼠疼痛过敏的影响
摘要：目的：神经病理性痛是糖尿病最常见的并发症之一，本课题旨在探讨姜黄素对糖尿病大鼠痛觉过敏的影响及其分子机制。方法：30只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和姜黄素治疗纽，模型纽和姜黄素治疗组利用腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）制备大鼠糖尿病模型，定期检测大鼠血糖、饮食、体重等变化，治疗组于STZ注射2wk后定期灌服姜黄素，分别在2wk和4wk后检测各组大鼠热痛敏和机械痛敏反应，在第4wk利用ELISA分别检测各组大鼠脊髓背角TNF-α表达变化。结果：STZ注射组大鼠2周后出现血糖〉14mol／L，并且该模型具有高血糖、体重增长缓慢、多饮多食多尿的特点，符合Ⅰ型糖尿病特征，痛行为测试结果显示糖尿病大鼠出现痛觉过敏，经过给予姜黄素灌服治疗后，痛觉过敏有所减轻，ELISA分析结果表明糖尿病大鼠脊髓背角TNF-α表达升高，经过姜黄素治疗后TNF-α表达有所下降。结论：成功制备STZ-型糖尿病大鼠模型，经过姜黄素治疗可以减轻糖尿病引起的疼痛过敏，姜黄素对糖尿病疼痛的治疗作用可能是通过降低大鼠脊髓背角TNF-α表达实现的。封面说明
摘要：自1997年第一只克隆羊多利的诞生拉开了人造生命的序幕，2010年，可谓是人造生命科学发展的一个新的里程碑。本刊2011年封面设计的灵感来自于人造生命技术的蓬勃发展：①封面背景以第三代测序技术即基于纳米孔的单分子实时DNA测序技术的研制成功为契机（图中，偏下），这为人造生命及人类健康提供了强有力的技术支撑。②封面图案以2010年诺贝尔生理与医学奖的体外受精技术（即试管婴儿），最强壮晶胚的筛选技术，人工卵巢及人类卵细胞的培育技术为主体（图上，右，中，左），PEP-1超氧化物歧化酶对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2的影响
摘要：目的：观察细胞穿透肽-铜，锌超氧化物歧化酶（PEP-1-SOD1）预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及其脑保护机制。方法：线栓法建立大鼠局灶性脑缺血6h后再灌注损伤模型，进行神经行为评分，并通过HE染色在光镜下观察神经细胞损伤变化，免疫组化法检测B细胞淋巴瘤基因-2（B—celllymphoma-2，Bcl-2）蛋白的阳性表达。结果：盐水对照组（缺血再灌注组或模型组）神经障碍显著高于假手术组（P〈0．05），与模型组相比，PEP-1-SOD1预处理组可降低神经障碍评分（P〈0．05）；光镜下，假手术组神经细胞结构正常，PEP-1-SDO1预处理组和缺血再灌注组均有不同程度的缺血再灌注损伤，PEP-1-SOD1预处理组较缺血再灌注组损伤轻；假手术组Bcl-2蛋白表达极弱，缺血再灌注组和PEP-1-SOD1预处理组在脑缺血再灌注后6h在缺血半暗带周围出现Bcl-2蛋白阳性表达，24h达到高峰，48h表达开始减少。与假手术组相比，PEP-1-SOD1预处理组和缺血再灌注组Bcl-2蛋白阳性细胞数显著增多（P〈0．05）；与缺血再灌注组相比，PEP-1-SOD1预处理组Bcl-2蛋白阳性细胞数显著增多（P〈0．05）。结论：PEP-1-SOD1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用，PEP-1-SOD1可通过上调Bcl-2蛋白的表达发挥脑保护作用。Simvastatin与rhG—CSF促进兔颈总动脉球囊损伤后内膜修复的实验研究
摘要：目的：观察辛伐他汀及重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）在兔颈总动脉内膜损伤后对血管壁变化及外周血中CD34＋细胞含量的影响。方法：雄性新西兰大白兔48只，随机均分为：单纯损伤组，辛伐他汀组，rhG—CSF组及辛伐他汀和rhG—CSF联合组（简称联合组），建立兔左颈总动脉内膜球囊导管损伤模型，术后给予辛伐他汀（10mg／kg／d经胃灌入）及rhG．CSF（100μg／a皮下注射）干预治疗，每组分别于术前1d、术后7d、14d、21d、28d抽取静脉血2ml，经流式细胞仪检测外周血中CD34＋细胞含量；4周后处死所有动物取损伤段血管，弹力纤维染色，计算内膜厚度、中膜厚度、管腔面积（S）、内膜面积（si）、中膜面积（Sm）TLSi／Sm比值评价血管再狭窄程度。结果：①术前4组之间相比外周血CD34＋细胞含量无明显差异（P〉0．05）；术后7d时各组外周血CD34＋细胞含量最高，后逐渐下降，28d较低，但仍高于术前含量；rhG—CSF组及联合组与对照组相比外周血CD34＋细胞明显增多（P〈O．01，P〈0．01）；术后7d、14天时辛伐他汀组与单纯损伤组相比外周血cD34＋细胞无明显差别（P〉0．05）。术后21d、28天时辛伐他汀组与单纯损伤组相比外周血CD34＋细胞有显著差异（P〈0．05）。②与单纯损伤组相比辛伐他汀组、rhG—CSF组及联合组Si／Sm比值明显减小（P〈0．05）；辛伐他汀组和rhG—CSF组两组间比较无显著差别（P〉0．05）；联合组分别与辛伐他汀组、rhG-CSF组比较血管内膜增生更少，具有显著性（P〈0．01，P〈0．01），结论：本实验研究发现辛伐他汀可促进损伤内膜修复及预防血管再狭窄，长期服用可以增加外周血CD34＋细胞；rhG—CSF可明显增加外周血CD34＋细胞及预防血管在狭窄；辛伐他汀与rhG—CSF联合用药可明显增加外周血CD34＋细胞、加速内皮修复与预防再狭窄深度烧伤创面异体脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植的临床观察
摘要：目的：探讨深度创面修复的有效方法。方法：30例患者随机分为两组，治疗组采用异体脱细胞真皮基质和自体刃厚皮片移植，对照组单纯采用自体刃厚皮片移植。最后采用温哥华瘢痕量表对患者术后1个月、6个月、12个月进行评分。结果：术后1个月，两组间温哥华评分无统计学差异。术后6个月、12个月，治疗组的温哥华评分低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：异体脱细胞真皮基质和自体刃厚皮移植是深度烧伤创面修复的一种有效方法。米诺环素对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡的影响
摘要：目的：观察米诺环素对糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡的影响，研究米诺环素对糖尿病视网膜神经保护作用，对米诺环素在糖尿病视网膜疾病中抑制神经细胞凋亡提供理论支持。方法：选择健康成年雄性SD大鼠30只，随机分成正常对照组、糖尿病模型组和米诺环素治疗组，每组10只。腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）诱发大鼠糖尿病。米诺环素治疗纽给予米诺环素腹腔注射（45mg／kg），共注射10d，模型组和对照组腹腔注射等体积生理盐水，于给药后8周的3组动物处死，冰浴下取其视网膜组织，随后制备视网膜石蜡切片，采用末端脱氧核糖核酸介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记L（TUNEL）法进行凋亡细胞原位标记，行视网膜神经细胞凋亡计数，对所有数据进行统计学分析。实验结果拟用均数和标准差（x±s）表示，P〈0．05为差异有统计学意义。结果 相同观察时相，与阴性对照组比较，模型对照组大鼠视网膜TUNEL阳性细胞显著增多（P〈0．01），在米诺环素组，大鼠视网膜TUNEL阳性细胞数比模型对照组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：米诺环素能有效降低糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡，对糖尿病视网膜神经细胞有保护作用。多烯磷脂酰胆碱对β-淀粉样蛋白（Aβ 1—40）致阿尔茨海默病模型大鼠的治疗作用
摘要：目的：研究多烯磷脂酰胆碱（Polyene Phosphatiayl choline，PPC）对β-淀粉样蛋白（Apl-40）致阿尔茨海默病（Alzheimer＇s Dis．ease，AD）模型大鼠的治疗作用。方法：32只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和处理组，海马内注射淀粉样蛋白（Aβ1—40），制作大鼠阿尔茨海默病模型，处理组给予多烯磷脂酰胆碱。通过Moms水迷宫实验验检测各组大鼠认知行为学改变，海马组织学及免疫组化染色，观察多烯磷脂酰胆碱对阿尔茨海默病模型大鼠的影响，并进行统计学分析。结果：①Moms水迷宫实验，模型组与正常组、假手术组比较，学习和记忆潜伏期显著增加；处理组与模型组比较，学习和记忆潜伏期显著减少；组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），提示多烯磷脂酰胆碱使AD模型大鼠的认知行为学功能改善。（2）Nissl染色，模型组与正常对照组、假手术组组织学染色结果有显著性差异（P〈0．05），PPC处理组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05），PPC处理组与正常组及假手术组比较也呈现出显著性差异（P〈0．05）；提示多烯磷脂酰胆碱可以减少神经元的凋亡。③β-淀粉样蛋白免疫组化染色，模型组与正常对照组、假手术组比较，Aβ沉积明显增加；PPC处理组与模型组比较，Aβ沉积范围明显缩小，PPC处理组与正常对照组、假手术组也呈现出显著性差。结论：多烯磷脂酰胆碱对淀粉样蛋白（Aβ1—40）致阿尔茨海默病模型大鼠有治疗作用。N-糖基化移位对乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗的表达及免疫原性的影响
摘要：目的：研究N-糖基化移位对乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗体外蛋白表达及小鼠体内体液免疫及细胞免疫应答的影响。方法：通过基因工程中定点突变技术，将乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白（MHBs）中第4位氨基酸上连接的糖链去除，或将糖链依次移位至第5、6或7位氨基酸，来构建N-糖基化去除及移位的核酸疫苗，分别命名为Adr—dN4、Adr-N4—5、Adr—N4．6、Adr—N4．7。用上述核酸疫苗与野生型MHBs核酸疫苗（pSW3891／MHBs／Adr，简称Adr）及空载体质粒pSW3891分别用脂质体瞬时转染293T细胞，应用蛋白印迹法检测MHBs的表达。采用肌肉注射法，以各组疫苗分别对BALB／c小鼠于第0、2、4和6周进行免疫．用ELISA法检测小鼠血清中抗．HBs抗体、ELISPOT法检测小鼠表面抗原多肽特异性分泌IFN-T的脾细胞数量。结果：蛋白印迹法结果显示Adr、Adr-dN4、Adr—N4．5、Adr—N4—6、Adr-N4—7体外转染293T细胞后，均可以在293T细胞内表达，且Adr、Adr-N4—5、Adr-N4—7可将表达产物分泌到细胞外。ELISA及EISPOT结果表明：Adr免疫组小鼠抗-HBs终点滴度及表面抗原特异性分泌IFN-γ的脾细胞数量，均略高于其他免疫组小鼠，但与Adr—N4—5、Adr．N4—7相比无统计学差异（P〉0．05），与Adr-dN4和Adr—N4—6组相比有显著的统计学差异（P〈0．05）。结论：在第5或7位氨基酸附加N-连接糖链，能修补或替代Asn4连接糖链引导MHBs分泌的功能。HBs表达蛋白分泌到细胞外对诱导机体产生特异性细胞和体液免疫是至关重要的。白介素1受体拮抗剂及转化生长因子β1对兔膝关节骨性关节炎（OA）的治疗研究
摘要：目的：通过关节腔内注射白介素l受体拮抗剂（IL-1Ra）及转化生长因子β1（TGF]B1），观察其对骨性关节炎的治疗作用。方法：16只3-4个月龄新西兰大白兔（雌雄不限）随机分为四组，每组四只，分为正常组，对照组，IL1-Ra组，TGF-β组，正常组仅打开左膝关节关节腔，剩余三组均给予左膝关节前交叉韧带离断术（anterior cruciate ligament transaction ACLT）。四周后IL-1Ra组给予关节腔内注射IL-1Ra5g／ml，TGF-β1组给予关节腔内注射TGF-β150mg／ml，每周两次，连续四周，正常组及对照组未采取任何措施。术后八周时采用空气栓塞法处死全部实验动物，取股骨远端长约1cm，固定后切片行细胞形态学观察。结果：大体肉眼观察：对照组股骨远端软骨面色颜色变暗并稍显粗糙，可见少量软骨脱落，其余两组关节软骨大体形态均接近正常。镜下观察：TGF-β1组软骨细胞增生明显，软骨细胞排列较正常软骨细胞排列轻度紊乱。IL—1Ra组软骨细胞增生数量未及TGF-β1组明显，软骨细胞排列也不及TGF-β1组规则。IL-1Ra组及TGF-β1组软骨细胞形态接近正常软骨细胞，基质染色接近正常。两组软骨膜表面光滑，无纤维细胞形成，软骨膜下未见纤维化。对照纽软骨细胞数量明显减少且排列紊乱，软骨细胞形态发生改变，可见软骨细胞凋亡，镜下可见软骨细胞核浓缩、裂解，并可见新生软骨形成，突出于正常软骨膜表面，软骨膜表面下方可见血管翳及纤维母细胞形成，出现轻度纤维化。基质染色不均匀且染色较淡。结论：IL-1Ra及TGF-β1关节腔内注射均能有效抑制骨性关节炎关节软骨的退变并增加软骨细胞再生，促进软骨基质合成，延缓骨性关节炎的发病进程.基于NR2B基因探讨疏肝与补肾法对吗啡精神依赖的调节作用及机制
摘要：目的：探讨补肾法与舒肝法对大鼠吗啡精神依赖的调节作用及机制。方法：使用盐酸吗啡建立大鼠精神依赖模型（conditioned place preference，CPP），采用Obersiver5．0行为学软件分析大鼠的CPP效应，并利用RealtimePCR方法测定伏核和前额叶皮质内NR2B亚基的mRNA含量。结果：与对照组相比，模型组大鼠在白侧累积停留时间极显著长于对照组（P〈0．01），同时伏核与前额叶皮质中NR2B的mRNA水平也显著升高（P〈0．01和P〈0．05）；与模型组相比，补肾组和舒肝组大鼠在白侧的累积停留时间显著下调（P〈0．05），疏肝组NR2B的mRNA也显著下降（P〈0．05），而补肾组变化不显著。结论：①补肾法与舒肝法对吗啡引起的精神依赖均有调节作用。②舒肝法的作用机制可能在于通过影响伏核和前额叶皮质中NR2B亚基的mRNA表达进一步调节精神依赖的相关神经通路。③补肾法的作用机制与NR2B亚基的mRNA表达关系不密切，其调节的具体机制尚有待研究。关节镜下多种移植物联合重建膝关节前、后交叉韧带
摘要：目的：评估关节镜下膝关节前交叉韧带（ACL）与后交叉韧带（PCL）同时重建的技术和临床效果。方法：自2003年6月～2009年10月，27例病人（28膝）经MRJ检查及关节镜检查证实ACL和PCL均断裂，其中9膝伴内侧副韧带损伤（MCL），8膝伴后外侧角损伤（PLC），5膝伴内侧半月板破裂，4膝伴外侧半月板损伤。27例患者于伤后3～10周在关节镜下行膝关节前、后交叉韧带联合重建。结果：本组术后早期均未发生严重并发症。术后随访12-88个月，平均（42．67±3．34）个月，Lysholm膝关节功能评分为78-93分，平均（86．67±5．21）分。国际膝关节文件编制委员会（mDC）综合评定由术前显著异常（D级）28膝，改进为随访时正常（A级）9膝、接近正常（B级）16膝、异常（C级）3膝。结论：关节镜下膝关节前交叉韧带（ACL）与后交叉韧带（PCL）同时重建创伤小、手术操作精细，术后膝关节功能恢复满意。早发型与晚发型重度子痫前期的临床表现及母婴结局的对比分析
摘要：目的：探讨早发型与晚发型重度子痫前期的不同临床表现及母婴结局，提高对重度予痫前期的临床认识。方法：回顾性分析重度子痫前期患者76例，按照不同的发病孕周，分为早发型（发病孕周〈32周）和晚发型（发病孕周1〉32周），比较两组孕妇临床情况、孕妇的并发症及围产儿结局。结果：早发型孕妇与晚发型孕妇在上述方面比较，差异均具有统计学意义（P〈0．05），早发型孕妇的各项临床表现显著差于晚发型孕妇。结论：对早发型重度子痫前期孕妇，更应加强临床各项监护措施，选择理想的终止妊娠的时机，同时加强预防措施，避免早发型重度子痫前期的发生。模拟野战条件，自主研制介入方舱内临时起搏实验
摘要：目的：研究模拟野战条件下在自主创新研制介入方舱内行，临时起搏实验的可行性和时效性。方法：对5例正常狗在微创介入方舱内使用普通电极导管进行急诊心脏临时起搏模拟操作，观察该过程的时间，和操作效果，以及舱内人员的配合。结果：应用普通电极导管急诊心脏超速起搏5例全部成功，股静脉穿刺，无穿刺部位血肿、感染，血栓栓塞，心脏穿孔等并发症发生。时间在10分钟以内。结论：依托微创介入方舱，在野外恶劣条件下进行临时起搏的急救过程安全，实用，快捷。可用于战时以及非战争卫勤急救任务中，发挥重要作用。
