CD147-shRNA对胃癌细胞CD147表达的抑制作用
摘要：目的：构建CD147-shRNA重组质粒并检测其对胃癌细胞SGC7901内源性CD147表达的抑制作用。方法：构建靶向CD147的siRNA表达载体pSilencer-CD147siRNA,稳定转染至SGC7901细胞中,通过Real-time PCR和Western blot法检测转染细胞中CD147表达水平的变化。结果：酶切鉴定和测序证实成功构建pSilencer-siRNA1,pSilencer-siRNA2和pSilencer-negative,转染后SGC7901中CD147表达水平显著降,而以pSilencer-siRNA2抑制作用最为显著。结论：构建pSilencer-CD147siRNA成功,并筛选出基因抑制效果抑制最佳的pSilencer-siRNA2,为进一步实验打下了基础。诺米芬新对甲基苯丙胺依赖大鼠多巴胺能神经元毒性的保护作用
摘要：目的：探索诺米芬辛（Nomifensine）对甲基苯丙胺依赖大鼠多巴胺能神经元毒性的保护作用并探讨其作用机制。方法：Wistar雄性大鼠30只,随机分为生理盐水组、甲基苯丙胺组（MA组）和甲基苯丙胺加诺米芬辛组三组。每晚8时分别腹腔注射Nacl10mg/kg、MA 10mg/kg和MA 10mg/kg＋Nomifensine 2mg/kg,连续四天。通过观察动物的刻板行为和条件位置偏爱实验（CPP实验）,建立甲基苯丙胺依赖大鼠模型。最后一次给药后的24小时处死各组实验动物,用免疫组织化学染色法（S-P法）和荧光分光光度计法检测大鼠脑内黑质、纹状体内多巴胺神经元细胞的形态和数量的变化,对神经纤维进行灰度值分析。结果：1.生理盐水组分别与甲基苯丙胺组、甲基苯丙胺加诺米芬辛组在刻板行为评分和持续时间上比较呈显著性差异;甲基苯丙胺加诺米芬辛组和甲基苯丙胺组在刻板行为评分和持续时间上比较呈显著性差异;甲基苯丙胺加诺米芬辛组和甲基苯丙胺组在CPP实验结果上比较呈显著性差异。2.通过脑内黑质、纹状体内多巴胺神经元细胞计数、神经纤维灰度值和TH含量荧光分光光度计测量,结果显示甲基苯丙胺加诺米芬辛组神经系统损伤轻于阳性对照组。结论：诺米芬辛对甲基苯丙胺中毒大鼠多巴胺能神经元有保护作用。缺氧条件下建立SD大鼠牙周炎动物模型的研究
摘要：目的：在模拟高原缺氧条件下建立稳定的缺氧SD大鼠牙周炎动物模型。方法：40只SD大鼠,雌雄各半,采用随机数字表法分为4组：常氧对照组（A组）,常氧牙周炎组（B组）,缺氧对照组（C组）,缺氧牙周炎组（D组）,每组10只。B、D组大鼠结扎牙颈部、高糖饮食、口腔涂菌及注射激素,A、C组不作任何处理,正常饮食。C、D组喂养的同时进入模拟海拔5000 m的低压氧舱。8 w后检测牙龈指数GI、菌斑指数PLI、牙周袋深度PD、牙槽骨吸收度ABL及组织病理学观察,对模型进行评估。结果：GI、PD及ABL指数在B组与A组,D组与C组,C组与A组,D组与B组比较均有统计学差异（P〈0.05）。PLI指数在B组与A组,D组与C组比较有统计学差异（P〈0.05）,在C组与A组,D组与B组比较无统计学差异（P〉0.05）。HE染色见A、C组无明显改变,B、D组牙龈糜烂,结合上皮向根方增殖迁移,牙周膜间隙增宽。结论：将采用结扎牙颈部、高糖饮食、口腔涂菌及注射激素综合方法作用的SD大鼠放入模拟海拔5000 m的低压氧舱,建立模拟高原缺氧大鼠牙周炎模型具有可行性,为高原牙周病的防治奠基了实验基础。左半结肠癌和右半结肠癌基因差异表达谱的建立
摘要：目的：初步探索左半结肠癌和右半结肠癌中基因表达的差异,为左右半结肠癌生物学特性上的差别提供分子遗传学依据。方法：以左右半结肠癌组织为研究对象,提取组织总RNA,依次进行样品RNA进行荧光标记,杂交和清洗,芯片扫描和芯片图像的采集和数据分析。结果：成功建立了左半结肠癌,左半结肠癌旁,右半结肠癌,右半结肠癌旁的基因表达谱,应用SAM软件分析比较得到左半结肠癌与右半结肠癌的差异基因共有11个,包括乳酸脱氢酶B链,泛素D,磷脂酰-4-3磷酸激酶C2-α,FAT,双特异性蛋白磷酸酶2,细胞周期蛋白依赖性激酶4抑制剂D,酪蛋白激酶-1结合蛋白,突触结合蛋白-13,锌指蛋白560,公认未定性蛋白,IgGFc结合蛋白。左半结肠癌旁与右半结肠癌旁的差异基因共有4个,包括金属蛋白酶7,早期生长反应蛋白1,左半结肠癌旁组织中下调的基因包括突触孔蛋白,膜相关磷脂酶A2基因。结论：左半结肠癌和右半结肠癌以及相应癌旁组织中存在差异表达基因,这些基因表达的差异可能是左右半结肠癌生物学性质差异的分子遗传学基础。微小RNAmiR-21和miR-31在13腔鳞癌组织中的表达及意义
摘要：目的：检测口腔鳞癌中微小RNA miR-21和miR-31的表达,探讨其与肿瘤发展的关系。方法：应用实时荧光定量PCR的方法检测72例口腔鳞癌,38例正常口腔粘膜miR-21和miR-31的表达,统计学分析其表达与肿瘤临床分期和病理分型的关系。结果：①口腔鳞癌组织与对照组比较,微小RNA miR-21和miR-31的表达都有显著增高（P〈0.05）,其中miR-21的增高更为显著（P〈0.001）。②统计学分析表明,miR-21的表达在晚期鳞癌组织较早中期鳞癌组织增高更为显著（P〈0.01）,在低分化鳞癌组织较中、高分化鳞癌组织增高更为显著（p〈0.001）;MiR-31的表达水平在不同肿瘤临床分期和病理分型鳞癌组织中无明显差异（P〉0.05）。结论：miR-21和miR-31在口腔鳞癌发生发展过程中表达有明显增高,其中miR-21表达水平可作为潜在的口腔鳞癌临床分期分级和预后的指标。移植骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞治疗大鼠脊髓损伤
摘要：目的：研究骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞移植治疗成鼠脊髓损伤的可行性。方法：选取成年SD大鼠32只,两只用以提取骨髓间充质干细胞,其余被分为3组,其中细胞移植组10只,PBS缓冲液组10只,空白对照组10只。骨髓间充质干细胞分离传代培养并诱导成神经元样细胞后用Hoechst33342标记,损伤1周后采取静脉注射移植的方法移植于大鼠脊髓损伤区,移植六周后用免疫荧光方法检测细胞的存活及与宿主脊髓的整合情况。脊髓损伤后的16周对各组动物进行BBB评分,用SPSS12.0进行数据分析。结果：细胞移植组动物的BBB评分提高显著,于其他两组差异有统计学意义。细胞移植组免疫荧光显示,移植细胞在体内大量存活并桥接于脊髓损伤区的两端,存活的多数细胞神经元特异性标记物NSE、NF-200、星形胶质细胞特异性标记物GFAP表达呈阳性。结论：移植定向诱导的神经元样细胞有助于大鼠脊髓损伤后的功能恢复。骨质疏松中破骨细胞活性与其RyR表达的关系研究
摘要：目的：研究骨质疏松病理状态下破骨细胞活性的变化与其线粒体表面RyR表达之间的关系。方法：构建骨质疏松SD大鼠模型,2周后取长管骨骨髓血提取破骨细胞,筛选出发育成熟细胞核大于3的破骨细胞,高速离心法分离细胞胞质Cytosol和细胞内质网SR,Western-Blot分析骨质疏松状态下OC表达RyR通道蛋白的变化;进一步用FlaxStation 3分析OC细胞[Ca2＋]i释放;最后评测骨质疏松环境下OC细胞活性和骨吸收能力变化。结果：与对照组相比,骨质疏松实验组大鼠OC细胞内质网SR上RyR蛋白表达显著减少;,同时破骨细胞[Ca2＋]i释放减少导致OC细胞活性骨吸收能力显著增加。结论：破骨细胞内RyR通过调控其细胞内钙释放程度对OC活性产生影响。仙人掌提取物对浅Ⅱ度烫伤治疗作用的研究
摘要：目的：探讨野生仙人掌提取物对浅Ⅱ度烫伤小鼠的治疗作用。方法：建立浅Ⅱ度烫伤小鼠模型,随机分为仙人掌提取物乙醇组A1,蒸馏水组A2和混合组A3（每组又分低、中、高3个浓度）,烫伤（阴性）组B,药物（阳性）组C。每天涂药1次,观察、记录创面愈合情况,分别在5d和12d各组随机取5只小鼠做病理切片,观察并记录血管、纤维细胞、成纤维细胞等的数量,进行统计学分析。结果：①混合提取物中、高浓度组愈合时间,与烫伤组相比有显著性差异（p〈0.05、p〈0.01）。②5d时不同的仙人掌提取物组与烫伤组比,血管数量、成纤维细胞占总纤维细胞的百分含量都有差异（p〈0.05）。结论：野生仙人掌提取物能加速烫伤创面愈合,尤其对血管和成纤维细胞有显著的促进增生作用,并加速再上皮化。仙灵脾对2型糖尿病大鼠血糖及氧化应激的影响
摘要：目的：研究仙灵脾对2型糖尿病大鼠血糖及氧化应激的影响。方法：利用链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠动物模型,将wistar大鼠随机分为对照组、单纯造模组、仙灵脾组及二甲双胍组。治疗8周,观察治疗期间及治疗后大鼠的一般状况、血糖、胰岛素、MCP-1、8-iso-PGF2α及24h尿白蛋白排泄量,计算ISI。结果：仙灵脾能改善2型糖尿病大鼠基本状况,仙灵脾组大鼠的血糖、胰岛素、8-iso-PGF2α及24h尿白蛋白排泄量均较单纯造模组降低,ISI明显提高;降低尿白蛋白优于二甲双胍组（P〈0.05）,改善ISI、降低血糖不及二甲双胍组明显,胰岛素、MCP-1、8-iso-PGF2α,两组无明显差异（P〉0.05）。结论：仙灵脾对2型糖尿病大鼠有降糖、改善氧化应激作用,其降糖作用可能与降低MCP-1、8-iso-PGF2α有关.pEGFP-C2/LAT-ORF3真核表达载体在Vero细胞中的表达特性及其对细胞活性的影响
摘要：目的：研究单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）潜伏相关转录体（LAT）开放读码框3（ORF3）的表达特点及其对细胞活性的影响。方法：双酶切和测序验证本实验室构建的HSV-2 LAT ORF3真核表达载体pEGFP-C2/LAT-ORF3的可用性,并将其转染入vero细胞,通过荧光和RT-PCR检验其在细胞中的表达,用MTT法进行细胞活性分析。结果：融合蛋白在细胞核中大量集中,且影响了绿色荧光蛋白在细胞中的分布;重组质粒对Vero细胞没有损伤作用。结论：HSV-2 LAT ORF3可抵消空质粒对细胞的损伤作用;其作用靶点可能主要存在于细胞核中,为阐明HSV-2 LAT ORF3在潜伏复发中的功能提供了实验基础。美国《化学文摘》2009年引文频次最高的1000种期刊表公布一〈现代生物医学进展〉名列第234位
摘要：据中国高等学校自然科学学报研究会与中国科学技术期刊编辑学会最近的信息显示： 在美国《化学文摘》2009年引文频次最高的1000种期刊表中，收录中国（含港台）期刊236种；中国期刊独占23．6％。可见中国期刊在CA中地位明显提高。Cpn0308基因真核载体构建及鉴定
摘要：目的：构建Cpn0308基因真核表达重组质粒,为肺炎衣原体（Chlamydia pneumoniae,Cpn）核酸疫苗的研制做准备。方法：用PCR技术从Cpn AR39株基因组DNA中扩增Cpn 0308基因,经双酶切、连接等反应,重组入pcDNA3.1/HisA真核表达载体,转化到感受态细胞,再经含氨苄青霉素的LB培养基筛选,酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果：从Cpn AR39株基因组DNA中扩增出特异的Cpn 0308基因,约400bp;酶切、重组、转化、筛选鉴定出pcDNA3.1/HisA-Cpn0308重组质粒;序列测定证实与GenBank登录的肺炎衣原体Cpn AR39株Cpn0308基因一致。结论：功地构建了pcDNA3.1/HisA-Cpn0308重组质粒,为肺炎衣原体核酸疫苗的研制奠定了基础。罗格列酮对脓毒症小鼠转归的影响
摘要：目的：探讨罗格列酮对脓毒症小鼠转归的影响。方法：采用雄性昆明小鼠,以盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症小鼠模型。48只小鼠随机分为4组：对照组（n=12）、脓毒症模型组（n=12）、罗格列酮预防组（预防组,n=12）及罗格列酮治疗组（治疗组,n=12）。各组分别于模型建立后24h和48h时留取血标本后活杀大鼠。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清高迁移率族蛋白1（HMGB1）及脂联素的含量。检测24h肌酸激酶（CK）、动脉氧分压（PaO2）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）等各器官功能指标的变化并绘制各组小鼠的生存曲线。结果：血清HMGB1含量与脂联素存在显著负相关性（r=-0.889）。脓毒症组、罗格列酮干预组各时相点HMGB1水平均较对照组高（P〈0.05）。预防组和治疗组HMGB1含量较模型组呈减少趋势（P〈0.01）。而脂联素含量的变化与HMGB1相反。与脓毒症组相比,罗格列酮预防和治疗组血清CK、PaO2、ALT、AST、Cr、BUN水平均明显改善（P〈0.01）。预防组和治疗组小鼠生存率明显高于模型组（P〈0.01）。结论：罗格列酮可显著提高脓毒症小鼠的生存率,抑制晚期炎症介质HMGB1的表达,促进脂联素的分泌,对脓毒症小鼠的心、肺、肝、肾等重要器官均具有保护作用。鼻咽癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平分析
摘要：目的：研究鼻咽癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平的特点、影响因素及临床意义。方法：运用流式细胞仪时66例鼻咽癌患者外周血T淋巴细胞亚群进行检测，并分析患者T淋巴细胞亚群变化，比较其与正常人群对照组的差异。结果：鼻咽癌患者CD4＋细胞数减少（40．58±15．26％），明显低于正常对照组（P〈0．01），CD8＋细胞数增加，Th／Ts比值下降或倒置（0．92±0．57）。结论：鼻咽癌患者存在细胞免疫功能紊乱，检测鼻咽癌患者外周血T淋巴细胞亚群的表达对评估患者的细胞免疫功能、疾病的治疗及预后具有一定的临床意义。甲磺酸伊马替尼治疗36例晚期胃肠道间质瘤的疗效分析
摘要：目的：研究甲磺酸伊马替尼治疗晚期胃肠道间质瘤近期疗效，及晚期胃肠道间质瘤临床病理特征与近期疗效的相关性。方法：对经甲磺酸伊马替尼，初始剂量为400mg／日，治疗的36例晚期乳腺癌患者进行回顾性分析，结合患者的临床病理学资料，将研究对象分为不同亚组，观察不同亚组间甲磺酸伊马替尼治疗晚期胃肠道间质瘤的近期有效率（RR）差异及治疗的不良反应。结果：该组GIST患者甲磺酸伊马替尼治疗的近期有效率为19例（52．8％），不同的转移病灶部位（P=0．048）的RR率有显著差异。该方案的毒副反应主要为水肿20例（55．6％），恶心17例（47．2％），呕吐8例（22．2％），且均可防控。结论：甲磺酸伊马替尼对晚期胃肠道间质瘤有较好的疗效．其近期有效率与转移灶部位密切相关。4例线粒体脑肌病的临床分析
摘要：目的：探讨线粒体脑肌病的临床特征，为其临床诊断提供帮助。方法：对4例线粒体脑肌病患者的临床与病理资料进行了回顾性分析。结果：4例患者均有身材矮小、智力下降、有视力或听力障碍、曾反复被诊断为病毒性脑炎的特点。4例患者血乳酸水平均升高，头部影像学有异常表现，肌肉活检均可见特征性的蓬毛样红纤维。结论：4例线粒体脑肌病患者临床表现貌似病毒性脑炎，结合临床肌肉活检可明确诊断。宫颈癌中CD1α分子和趋化因子CCL20/MIP-3α的表达
摘要：目的：研究CD1α分子,趋化因子人巨噬细胞炎性蛋白-3α（CCL20/MIP-3α）在宫颈癌组织中的表达及其相关性,探讨其在宫颈癌免疫逃逸机制中的作用。方法：应用免疫组化PV-6000通用二步法检测CD1α和趋化因子CCL20/MIP-3α在正常宫颈组织及宫颈癌组织中的表达,并分析两者之间的相关性。结果：CD1α和CCL20/MIP-3α在宫颈癌中的表达均明显降低（P均〈0.01）;CD1α与CCL20/MIP-3α在宫颈癌中的表达显著相关（P〈0.01）。结论：在宫颈癌组织中,趋化因子的减少导致抗原提呈细胞数量下降,不足以引起肿瘤局部免疫反应而导致了宫颈局部病变的侵袭及发展。医院病原菌感染的临床分布及耐药性分析
摘要：目的：了解南京地区病原菌感染的临床分布及其耐药性变化情况。方法：对2009年全年住院病人病原菌感染病例进行统计,并且对相应抗生素的耐药情况进行分析。结果：2009年度共分离临床菌株3346株,其中G-杆菌占56.3%,G＋球菌占25%,真菌感染占18.7%。以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌为代表的革兰阴性菌为最常见的临床分离细菌,耐药现象较为严重。大多数医院感染革兰阴性菌对加酶抑制剂抗菌药耐药率菌有不同程度的下降。结论：为减少病原菌感染的发生率及控制细菌耐药性必须加强抗生素的合理应用。
