从转录水平研究SATB1表达调控的分子机制
摘要：目的：研究SATB15’转录调控区及3’UTR的调控作用,以阐明SATB1在各肿瘤细胞系中的表达和调控机制。方法：采用半定量RT-PCR分析人乳腺癌细胞系BT549和MCF7、人肺癌细胞系NCI-H-446、QG56和SPC-A1中SATB1的转录水平,并利用Western Blot方法检测各肿瘤细胞系中蛋白表达水平。分别构建SATB1两个转录本5’上游序列驱动的报告基因载体,将载体瞬时转染QG56及SPC-A1。构建含SATB1基因3’非翻译区（3’UTR）的报告载体,瞬时转染NCI-H-446、QG56及SPC-A1。运用双通道荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果：在BT549、NCI-H-446、QG56和SPC-A1中检测到SATB1的转录本2,仅在BT549及QG56有转录本1表达;但在NCI-H-446、QG56及SPC-A1中,未检测到蛋白水平的表达。在QG56中,转录本1上游-638～＋404序列段荧光素酶活性最高,而在SPC-A1中转录本2上游-1218～＋48序列段的荧光素酶活性最高。运用生物信息学分析-638～＋404和-1218～＋48两个序列段的转录因子结合位点。在NCI-H-446中,含有SATB13’非翻译区（3’UTR）报告载体的荧光素酶活性显著低于PGL3control的活性（P〈0.05）。结论：在肺癌细胞中,SATB1的表达与细胞转移能力的高低无关。RT-PCR、荧光素酶活性及生物信息学分析结果的一致表明SATB1的两个转录本分别受其5’上游序列调控。在NCI-H-446中,SATB1的表达受其3’UTR的调控。PA domain4-Fc融合蛋白抗血清可以保护小鼠巨噬细胞免受炭疽毒素损害
摘要：目的：探讨炭疽杆菌保护性抗原PA（protective antigen）domain4能否作为炭疽疫苗和炭疽感染时紧急预防用药。方法：构建含有PAdomain4和人IgGFc片段的表达载体,通过免疫大耳白兔获得针对该融合蛋白的免疫血清,通过小鼠巨噬细胞保护试验验证PA domain4-Fc是否具有疫苗和紧急预防用功能。结果：获得了表达PA domain4-Fc融合蛋白的CHO细胞株和针对PA domain4-Fc的兔抗血清,细胞保护试验证实PA domain4-Fc抗血清能够保护小鼠巨噬细胞免受炭疽毒素的攻击,但PA domain4-Fc蛋白本身并不能直接拮抗炭疽毒素对细胞的损害。结论：PA domain4-Fc抗血清可以保护小鼠巨噬细胞免受炭疽毒素损害,表明PA domain4-Fc具有作为炭疽疫苗的可能,但PA domain4-Fc蛋白不能直接竞争性拮抗炭疽毒素损害细胞。金匮肾气丸和男宝胶囊对肾阳虚证雄性大鼠生殖能力影响的干预研究
摘要：目的：研究金匮肾气丸和男宝胶囊对肾阳虚证雄性大鼠生殖能力的影响及作用机理。方法：用成年雄性SD大鼠80只随机分成4组：空白对照组（正常组）、金匮肾气丸组、男宝胶囊组、模型组。除正常组外,其他组大鼠用氢化可的松注射液制造肾阳虚模型。正常组和模型组用等体积蒸馏水灌胃,治疗组用相应剂量的药物灌胃,持续给药30d。检测各组大鼠左侧睾丸、脾脏、胸腺质量,测血清睾丸酮（T）、促黄体生成激素（LH）、促卵泡生成激素（FSH）水平,精子密度、精子活率改变情况。结果：模型组左侧睾丸、脾脏、胸腺质量低于正常组、金匮肾气丸组和男宝胶囊组（P〈0.05）。模型组血清T、LH、FSH水平低于正常组、金匮肾气丸组和男宝胶囊组（P〈0.05）。模型组精子密度、精子活率低于正常组、金匮肾气丸组和男宝胶囊组（P〈0.05）。结论：金匮肾气丸和男宝胶囊对肾阳虚证雄性大鼠生殖能力有较好的治疗作用。新疆维吾尔族子宫颈鳞癌患者血浆甘油三酯及胆固醇检测
摘要：目的：探讨新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌与血浆甘油三酯和胆固醇水平的相关性。方法：采集69例新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者及100例新疆维吾尔族正常对照血浆,用全自动生化分析仪测定血浆甘油三酯和胆固醇水平。结果：69例新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者与100例新疆维吾尔族正常对照血浆甘油三酯水平（^-X±S）分别为1.15±0.87mmol/L及1.27±1.39mmol/L均为正常水平（0.11-1.69mmol/L）。子宫颈鳞癌患者与正常对照血浆胆固醇水平（^-X±S）分别为3.80±2.03mmol/L及3.29±1.93mmol/L均为正常水平（2.59-6.47mmol/L）。子宫颈鳞癌患者与正常对照相比血浆甘油三酯和胆固醇水平无显著性差异。结论血浆甘油三酯和胆固醇水平与新疆维吾尔族子宫颈鳞癌不相关。三七总皂苷对脊髓损伤后的保护作用及GFAP相关机制
摘要：目的：探讨三七总皂苷对脊髓损伤后的保护作用以及对GFAP表达变化的影响。方法：健康成年雌性SD大鼠63只,随机分为正常组,溶媒对照组,三七总皂苷组,大鼠脊髓T10右侧半横断损伤后15min,腹腔注射三七总皂苷,剂量为20mg·kg^-1,以后每天给药一次,溶媒对照组注射等量生理盐水。术后1d,3d,7d,14d,21d,28d进行BBB评分行为学检测;动物存活1d、3d、7d、14d、28d,运用免疫组织化学方法检测脊髓损伤远侧端GFAP表达的变化。结果：BBB评分显示,三七总皂苷能明显促进脊髓损伤后运动功能的恢复,其中损伤后7d和14d的评分明显高于溶媒对照组。免疫组化结果显示脊髓T10右侧半横断损伤后,脊髓远侧段GFAP的表达损伤侧均强于对侧,损伤侧灰质GFAP的表达呈现出1d,3d逐渐增强,7d达高峰的趋势,14dGFAP的表达逐渐下降,至28d仍略高于正常组。三七总皂苷组和溶媒对照组相比,GFAP表达的时间趋势相同,但相同时间点GFAP的表达弱于对照组,尤其是3d、7d。结论：三七总皂苷能抑制脊髓半横断损伤后星形胶质细胞的活化,这可能是其促进脊髓损伤后运动功能恢复的机制之一。理气调补汤对运动性疲劳大鼠血清皮质醇和白细胞介素2影响的研究
摘要：目的：通过观察理气调补汤对运动性疲劳大鼠血清皮质醇（C）和白细胞介素2（IL-2）水平的影响,以期揭示中药理气调补汤促进运动性疲劳恢复的作用机理。方法：健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组（Ⅰ组）8只、单纯运动组（Ⅱ组）11只、中药运动组（Ⅲ组）11只。实验时Ⅲ组每天定时定量中药灌胃1ml/100g体重,Ⅰ组、Ⅱ组灌胃相同剂量的生理盐水。实验采用游泳运动训练方式。6周末力竭训练后24h分离血清测定C和IL-2含量。结果：Ⅲ组大鼠游泳至力竭的时间较Ⅱ组显著延长;Ⅱ组和Ⅲ组大鼠血清IL-2浓度均显著低于Ⅰ组,但Ⅲ组大鼠血清IL-2浓度显著高于Ⅱ组;血清C浓度Ⅱ组显著高于Ⅰ组,Ⅲ组较Ⅱ组显著降低。结论：大强度运动训练可能导致HPA轴释放过量皮质醇,从而使免疫功能受到抑制。理气调补汤能够调节疲劳大鼠的HPA轴适应性,降低C的过量释放,维持免疫功能稳定,延缓疲劳的发生。超微超顺磁性氧化铁纳米粒检测良恶性淋巴结的实验研究
摘要：目的：研究超微超顺磁性氧化铁纳米粒（USPIO）增强MRI检测正常、反应性增生淋巴结和肿瘤转移淋巴结的价值。方法：新西兰兔24只,静脉注射0.2mmolFe/kg的USPIO,原子吸收光谱仪检测兔体内脏器铁含量。另取4只兔,作为正常淋巴结组,4只兔双侧后腿肌肉注射蛋黄乳胶,用于建立腘窝反应性增生淋巴结模型,4只兔后腿肌肉接种VX2肉瘤,用于建立腘窝肿瘤转移淋巴结模型。3组动物均静注0.2mmolFe/kg的USPIO,于注射前、注射后12h分别行MRI扫描,观察淋巴结信号强度变化,扫描后取出淋巴结,行HE染色、普鲁士蓝染色观察淋巴结结构变化,铁颗粒的存在,原子吸收光谱仪检测铁含量。结果：USPIO在兔体内血循环时间较长（〉12h）,除脾肝肺外,其主要分布至淋巴结等网状内皮细胞和吞噬细胞。MRI平扫时,正常、反应性增生淋巴结和肿瘤转移淋巴结T2信号强度无显著差异,静注USPIO后,正常、反应性增生淋巴结中心T2信号强度明显降低,肿瘤转移淋巴结信号强度无明显变化。HE染色、普鲁士蓝染色和原子吸收光谱仪检测显示,正常、反应性增生淋巴结均含有USPIO铁颗粒,而肿瘤转移性淋巴结淋巴结结构丧失,未见铁颗粒。结论：静脉注射USPIO后MR成像可用来鉴别良恶性淋巴结。大鼠去神经支配脾脏内淋巴细胞ERK表达变化的研究
摘要：目的：探讨脾脏神经支配与免疫功能关系。方法：清洁级成年雄性SD大鼠20只,随机分成实验组、对照组。手术切除实验组10只大鼠脾脏神经纤维,饲养1周后取出脾脏,4%多聚甲醛固定,石蜡切片行HE染色及ABC免疫组织化学染色。结果：（1）HE染色两组大鼠脾脏结构结构清晰,动脉周围淋巴鞘内淋巴细胞密集成团状,红髓内可见大量红细胞,在去除大鼠脾脏神经支配的实验组较对照组脾脏大体结构无明显变化;（2）两组脾脏淋巴细胞均有ERK表达,对照组正常脾脏表达ERK阳性细胞占16.2%,实验组仅占6.0%。实验组脾脏内表达ERK阳性细胞数量明显低于对照组,差异具有显著性（P〈0.01）,同时ERK表达量也低于对照组,且差异具有显著性（P〈0.01）。结论：在去除神经支配后,脾脏内淋巴细胞增殖活性明显降低,在一定程度上影响到脾脏免疫功能。金黄色葡萄球菌B型肠毒素受体拮抗剂的原核表达、纯化及活性初步分析
摘要：目的：利用大肠杆菌表达葡萄球菌肠毒素B（SEB）的受体拮抗剂蛋白,检测其与SEB的结合能力,为今后利用其进行SEB快速检测奠定基础。方法：首先确定SEB受体拮抗剂的基因序列,然后将SEB受体拮抗剂质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,利用IPTG诱导表达获得蛋白,产物经镍柱纯化后,ELISA鉴定其与SEB结合能力。结果：该质粒在大肠杆菌中获得表达,表达产物可与SEB特异性结合,两者结合能力可达ng/mL。结论：本研究成功对SEB受体拮抗剂进行了原核表达、纯化及初步活性分析。磺化壳聚糖对MCF-7的体外抑制作用研究
摘要：目的：研究磺化壳聚糖（SCTS）对体外培养的人乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡的作用。方法：用不同浓度磺化壳聚糖对体外培养人乳腺癌细胞MCF-7进行干预,MTT法检测SCTS对MCF-7细胞增殖的抑制作用;显微荧光法、流式细胞术检测细胞凋亡。结果：磺化壳聚糖抑制MCF-7细胞增殖,且呈时间、剂量依赖性;镜下可见凋亡细胞的形态学改变、FCM显示G0/G1期细胞增加,而S期细胞减少。结论：磺化壳聚糖可有效抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,促进细胞凋亡。穿心莲内酯抑制人结肠癌SW1116细胞增殖及诱导细胞凋亡作用的研究
摘要：目的：观察穿心莲内酯对人结肠癌SW1116细胞生长及肿瘤细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制。方法：用不同浓度的穿心莲内酯处理SW1116细胞,MTT检测穿心莲内酯对SW1116细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率;比色法测定Caspase-3酶活性;Western blot法检测bax、Bcl-2的蛋白表达。结果：穿心莲内酯能够剂量依赖型的抑制人结肠癌SW1116细胞的增殖,并诱导凋亡;穿心莲内酯与SW1116细胞作用48小时后Caspase-3酶活性显著增强;同时,穿心莲内酯处理SW1116细胞后,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达下调。结论：穿心莲内酯可抑制人结肠癌SW1116的增殖,诱导其凋亡,机制可能与调节Caspase-3、Bcl-2和Bax表达水平有关。人参皂甙Rg1对人慢性粒细胞白血病p210 bcr/abl融合蛋白表达的影响
摘要：目的：研究人参皂甙Rg1对人慢性髓细胞白血病敏感株K562细胞p210bcr/abl融合蛋白表达的影响。方法：体外培养K562细胞,经人参皂甙Rg1处理不同时间后,用流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western印迹技术检测细胞内p210bcr/abl融合蛋白表达。结果：人参皂甙Rg1可诱导细胞凋亡,凋亡率并随时间延长而升高;人参皂甙Rg1可下调p210bcr/abl蛋白表达量,并具时间依赖性。结论：人参皂甙Rg1可通过降低p210bcr/abl蛋白水平来诱导K562细胞凋亡,达到有效抗人慢性髓细胞白血病的效果。西安地区EV71-VP1基因分析
摘要：目的：通过在原核表达系统初步构建EV71-VP1,对西安地区肠道病毒71型（EV71）的外壳蛋白VP1基因进行分析。方法：采集西安地区手足口病患儿的疱液、咽部分泌物进行病毒分离和RT-PCR检测;通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增肠道病毒71型（EV71）外壳蛋白VP1基因,构建重组表达质粒PQE30/VP1,转化到大肠杆菌BL21中,对VP1基因进行遗传学分析。结果：对肠道病毒71型（EV71）西安地方株VP1基因测序,并将其与阜阳株（序列号为EU913471）相比较,表明我国西安地区EV71分离株与阜阳株有较大差别,核苷酸差异约为4%。结论：西安地方株VP1基因与阜阳株相比,其核苷酸差异较为明显。这将为西安地区EV71的分子流行病学研究以及EV71所致疾病的预防和控制,打下良好的基础。大鼠胰岛β细胞GPR40表达与内脏脂肪含量及胰岛素分泌的关系
摘要：目的：观察SD大鼠胰岛β细胞G蛋白偶联受体40（GPR40）的表达与内脏脂肪含量及胰岛素1相分泌之间的关系。方法：大鼠按体质量分为3组（100g、200g及300g组）,行静脉糖耐量实验,胶原酶原位灌注法分离胰岛,免疫组织化学法结合激光扫描共聚焦显微镜技术对胰岛β细胞表达的GPR40进行定位,并行半定量分析。结果：随着大鼠体质量的增加,内脏脂肪含量明显增加,300g组大鼠胰岛β细胞GPR40表达较100g及200g组明显增加,3组大鼠胰岛素1相分泌无显著差异。结论：GPR40表达的变化可能与内脏脂肪含量及年龄因素有关,其表达水平对正常大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌无明显影响。去甲肾上腺素对THP-1巨噬细胞ABCA1、SR-AⅠ和CD36表达的影响
摘要：目的：探讨去甲肾上腺素（noradrenalin,NA）对THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运体A1（ATP binding cassette transporter A1,ABCA1）、A类清道夫受体（Scavenger receptorAⅠ,SR-AⅠ）和B型清道夫受体CD36（Cluster of Differentiation 36,CD36）表达的影响。方法：不同浓度NA处理THP-1巨噬细胞24小时,运用逆转录多聚酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测其ABCA1、SR-AⅠ和CD36的mRNA表达,western-blotting检测ABCA1和SR-AⅠ蛋白的表达。结果：100nmol/L,1μmol/L及10μmol/L的NA作用于THP-1巨噬细胞,引起ABCA1 mRNA和蛋白水平下调（P〈0.05）,1μmol/L及10μmol/L的NA则升高SR-AⅠ mRNA和蛋白的水平（p〈0.05）,10pmol/L～10μmol/L的NA作用THP-1巨噬细胞24小时,各组CD36 mRNA表达与对照组比较其差异无统计学意义。结论：应激浓度的NA可能通过影响ABCA1和SR-AⅠ的表达而参与和/或促进AS的发生发展。双气囊小肠镜在小肠出血中的应用价值
摘要：目的：观察双气囊小肠镜在小肠出血中的病变检出率、病因诊断率、耐受性和安全性,并探讨双气囊小肠镜对小肠出血的内镜下治疗情况。方法：对2006年3月至2009年11月烟台毓璜顶医院消化内科收治的可疑小肠出血患者102例行双气囊小肠镜检查,首选进镜方式分为经口或经肛2种,首选方式检查后未发现病灶者,日后改换进镜方式再行检查。对活动性出血病灶行内镜下止血治疗,小肠息肉行息肉切除。结果：双气囊小肠镜的病变检出率为94.12%（96/102）,病因诊断率为84.31%（86/102）,其中35例检查时见病变活动性出血,行内镜下止血治疗,33例止血成功,内镜止血成功率为94.30%（33/35）;在耐受性方面,双气囊小肠镜的耐受性依次为：全麻下经肛进镜、全麻下经口进镜、非麻醉经肛进镜、非麻醉经口进镜。所有患者均未发生严重并发症。结论：双气囊小肠镜对小肠出血具有较高的病变检出率和病因诊断率,并且可行内镜下止血治疗,是一项安全、有效的临床诊疗方法。实时组织弹性成像在评价肝脏肿瘤中的初步应用
摘要：目的：探讨实时组织弹性成像对肝肿瘤诊断及鉴别诊断中的价值。方法：用弹性成像技术对51例共67个肝实性占位性病变进行良恶性的鉴别诊断,并与病理结果进行对照。结果：（1）弹性成像诊断恶性肿瘤的敏感度为80%,特异度为95.5%,阳性预测值为97.3%,阴性预测值为70%;（2）弹性成像诊断≤2cm的恶性肿瘤的准确性较高。结论：实时组织弹性成像有助于肝良恶性肿瘤的鉴别,并对≤2cm的病灶诊断准确率较高。封面说明
摘要：2010年封面设计采用紫红,草绿两种颜色,红色感觉温暖,绿色体现生机,分别对应半月刊上、下半月,具体颜色由编辑部决定。
