淫羊藿黄酮诱导的骨髓间充质干细胞成骨分化中WNT信号通路的研究
摘要：目的：检测淫羊藿黄酮（FA）在促进人骨髓来源的间充质干细胞（MSC）成骨分化过程中WNT信号通路的功能。方法：从人骨髓中分离得到MSC，进行成骨诱导，通过茜素红染色，碱性磷酸酶活性，RT—PCR等检测成骨的情况，以及通过WNT信号通路的抑制剂DKK-1检测对成骨的影响。结果：RT—PCR结果显示β-cantenin，cyclin D在FA诱导的成骨分化中表达明显升高。抑制剂DKK-1部分的抑制了FA的成骨效果。结论：WNT信号通路参与了FA诱导的成骨分化的过程。hTERT基因组成型过量表达的Vero细胞系的建立
摘要：目的：建立组成型过量表达hTERT的Vero细胞系。方法：从质粒pCI-neo—hTERT酶切、分离纯化hTERTcDNA，克隆入phEF／chMAR．hyg载体中，构建重组真核表达质粒phEF／chMAR—hyg—hTERT。采用脂质体转染法转染Vero细胞，经潮霉素筛选、克隆分离培养，用RT．PCR检测转染阳性细胞克隆的hTERTmRNA表达丰度，Westernblotting验证高丰度表达hTERTmRNA克隆的hTERT表达。用CedexAS20细胞密度和活力分析系统考察过量表达hTERTVero细胞在组织培养板中批次培养的生长特性。结果：从phEF／chMAR—hyg．hTERT转染阳性细胞中筛选出hTERTmRNA和蛋白高丰度表达的Vero细胞系（Vero—T1），Vero-T细胞在批次培养中后期的细胞密度和活力均高于野生型Vero细胞。结论：成功建立了hTERT基因组成型过量表达的Vero细胞系．为探索以组成型过量表达hTERT的技术途径改善细胞培养特性、提高病毒疫苗生产工艺水平奠定了基础。人类博卡病毒（HBoV）非结构蛋白NS1基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
摘要：目的：克隆、表达、纯化人类博卡病毒（FmoV）非结构蛋白NS1，制备抗NSI多克隆抗体。方法：利用PCR扩增HBoV非结构蛋白NS1基因，将其克隆至pMAL-c2X表达载体上，重组质粒转化大肠杆菌DHIOB，IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Amylose Resin亲和层析柱纯化后，免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。用间接ELISA法检测抗体效价。结果：原核表达融合蛋白MBP-NS1，并获得了其多克隆抗体，抗体效价达到1：32000。结论：在原核表达系统中表达，纯化了融合蛋白，制备抗NS1多克隆抗体，为进一步研究该病毒非结构蛋白基因的转录和翻译机制提供可靠的工具。氧化型低密度脂蛋白对大鼠心肌细胞分泌TGF—β1和bFGF的影响
摘要：目的：探讨氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）对离体大鼠心肌细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的影响。方法：离体大鼠心肌细胞与LDL、ox-LDL共孵育，分别于0h、6h、12h、24h、48h收集细胞培养上清液，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清液中TGF-β1和bFGF的浓度。结果：与正常组和LDL组相比，ox-LDL组细胞培养上清液中TGF-β1和bFGF表达增加（P〈0．01）结论：OX—LDL能够刺激离体大鼠心肌细胞分泌TGF-β1和bFGF，其在心肌纤维化的进展中可能到起较重要作用。甘草酸二铵对于HCV相关性B—NHLCD25-和CD25＋T细胞增殖影响研究
摘要：目的：本研究初步探究甘草酸二铵（Diammonium Glycyrrihizinate，DG）对HCV相关性B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-cellnon-Hodgkin-Slymphoma,B-NHL）CD25-T细胞、CD25＋T细胞的免疫调控作用。方法：应用流式细胞分析仪检测HCV相关性B-NHLCD4＋CD25＋T细胞占CD4＋1r细胞的比例、CD25＋细胞占总PBMC比例，并与单纯HcV感染患者、健康人检测结果相对照。应用免疫磁珠分离法（MACS）分选获得CD25-和CD25＋细胞，将两者和未分选的外周血单个核细胞（peripheralblood mononuclear cell。PBMC）以CFSE标染孵育72小时后，应用流式细胞分析仪将APCCD3阳性细胞设定为门检测CD25T细胞、未分选T细胞、CD25＋T细胞的增殖情况，及甘草酸二铵干预后的CD25-T细胞、CD25＋T细胞增殖情况。结果：应用流式细胞分析仪检测健康人、单纯HCV感染者和HCV相关性B—NHL患者在CD4＋CD25＋占总CD4＋细胞比例和CD25＋占总细胞比例上均呈现逐步递增的关系（分别为33．94％±2．18％，57．95％±1．77％，70．24％±12．75％，P〈0．05；18．16％±2．23％，33．45％±1132％，54.69％±8．66％，P〈0．05）。CFSE标染后孵育72小时检测（MI＋M2）分裂相百分比呈现CD25-T细胞最高、未分选T细胞其次、CD2YT细胞最低的表现（分别为74．4％±1．2％，63．1％±5．4％，47．2％±5．9％，P〈0．05）。甘草酸二铵干预后CD25-T细胞较未干预CD25T细胞M1分裂相百分比增加（分别为57．7％±4．2％，46．5％±5．6％，P〈0．05）。甘草酸二铵干预后CD25＋T细胞较未干预cD25＋1r细胞M1分裂相百分比减少（分别为14．7％±1．3％，22．1％±4．1％，P〈0．05）。结论：HCV相关性B-NHLCIM＋CD25＋、CD25＋细胞百分比较单纯HCV感染者、健康人明显增加，提示存在T细胞免疫抑制，且抑制程度重于单纯HCV感染。去除CD25＋细胞后CD25T细胞增殖较未去除CD25＋的T细胞增殖活跃，说明HCV相关�会议征稿：2010年第十届全国脂质与脂蛋白学术会议征稿通知（第一轮）
摘要：由中国生物化学与分子生物学会脂质与脂蛋白分会主办，湖北省医学会、湖北省生物化学与分子生物学学会协办的”第十届全国脂质与脂蛋白学术会议”拟于2010年8—9月在湖北省宜昌市召开。本次会议主题为：”脂质学创新与发展，服务于和谐社会”。为促进了我国脂质与脂蛋白研究及学术水平，我们很荣幸的邀请多位在脂质、低频脉冲磁场对大鼠心肌微血管内皮细胞迁移和NO分泌能力的影响
摘要：目的：研究在固定时间和频率下，矩形波形低频脉冲磁场（LF—PMF）对大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）迁移和NO分泌能力的影响.方法：实验分为4组（对照组，1．0MT组，1．4MT组，1．8MT组）。对照组不加磁场干预，其余各组分别在频率为15Hz，磁场强度分别为1．0MT、1．4MT和1．8MT，时间为4h／d，连续照射3d的条件下，用三角波形作用离体培养的大鼠CMECs。利用transwell检测细胞迁移能力，硝酸还原酶法检测CMECs培养液中NO含量的变化。结果：1．0MT组，1．4MT组和1．8MT组LF-PMF迁移能力与对照组相比均有不同程度提高（（24．40±5．12）（个／视野）vs（22．00＋3．87）（个／视野），P〈0．05；（31．40±3．81）（个／视野）vs（22．00±3．87）（个／视野），P〈0．05；（37．40±4．01）（个／视野）vs（22．00±3．87）（个／视野），P〈0．01]。1．0MT组，1．4m组和1．8MT组LF-PMF的NO分泌能力与对照组相比均有提高[（25．26＋1．06）（umol／L）vs（19．18±2．88）（μmol／L），P〈0．05；（29．44＋I．10）（μmol／L）vs（19．18±2．88）（μmol／L），P〈0．05；（39．52＋1．25）（μmol／L）vs（19．18±2．88）（μmol／L），P〈0．011。结论：低频脉；中磁场磁场对CMECs的生物学作用与磁场的强度有一定关系，1．4M和1．8MT组LF—PMF促进细胞迁移，使NO分泌能力能力提高。LPS下调小鼠肝脏、肠道羧酸酯酶表达
摘要：目的：研究细菌脂多糖（LPS）对小鼠肝脏、肠道羧酸酯酶表达及酶活性的影响。方法：小鼠经腹腔注射5．0mg／kg的LPS，对照组给予生理盐水。注射后24h处死小鼠，取肝脏和肠道组织。用qRT—PCR技术检测小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶1和2（mCES1和mCES2）mRNA水平；Westernblot技术检测小鼠肝脏、肠道组织mCES1和mCES2蛋白表达水平。用分光光度计检测小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶总活性。结果：LPS显著降低小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶1和2的mRNA水平（P〈0．05），同时LPS也显著降低小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶的蛋白表达水平及酶活性（P〈0．05）。结论：LPS造成的炎症状态可显著降低小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶的表达及酶活性。关于2010年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
摘要：为促进我国生物医学研究的进步与发展，本刊经研究决定于2010年继续开展”生物医学”优秀论文评选活动。为了确保优秀论文评比的公证与公平性，编辑部现将有关事项通知如下：MEF2A基因突变对血管平滑肌细胞增殖迁移及其表型的影响
摘要：目的-观察肌细胞增强因子2A（MEF2A）基因突变对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖迁移及其表型的影响。方法：分别将野生型（WT）MEF2A质粒（岍组）、21个核苷酸缺失突变型（△21，显性负突变）MEF2A质粒（△21组）以及MEF2AsiRNA（siRNA组）转染进人主动脉血管平滑肌细胞（VSMC），通过溴化噻唑基蓝四唑（MTT）法和Millicell小室观察各组VSMC的增殖和迁移变化，免疫印迹（Westem blotting）检测各组VSMC之间MEF2A蛋白、平滑肌α肌动蛋白（α-SM-αctin）、SM22α、骨桥蛋白和丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）信号通路表达差异。结果：MEF2A △21组和MEF2AsiRNA组的VSMC增殖增加，迁移数量增多；同时此两纽中α-SM-actin和SM22a表达减少，骨桥蛋白表达增加；磷酸化p38和ERK1／2表达也明显增强。结论：MEF2A基因显性负突变及沉默可使VSMC向合成型转化，其增殖和迁移能力增加。而p38和ERK1／2MAPK信号通路可能参与MEF2A基因介导的血管平滑肌细胞表型转化。曾凡一副主编荣获中国青年女科学家奖
摘要：本刊讯：第六届”中国青年女科学家奖”于2010年1月26日在北京揭晓，5名青年女科学家成为这一奖项得主。其中，〈现代生物医学进展〉副主编曾凡一博士，（上海交通大学医学遗传研究所副所长、研究员、国家重大科学研究计划项目首席科学家）荣列其中。天然纳米材料凹凸棒土促进Sp2／0细胞增殖的研究
摘要：目的：研究天然纳米材料凹凸棒土（ATP）对Sp2／0细胞增值的作用，并探讨这种作用与ATP优化细胞培养环境相关。方法：通过CCK8法和细胞计数方法，比较正常培养方式和添加天然纳米材料凹凸棒土培养方式下Sp2／0细胞的生长曲线、细胞活性，除外，Sp2／0细胞培养过程中谷氨酰胺的消耗以及细胞代谢产物NH4＋浓度随时间的变化。结果：一定浓度范围的天然纳米材料凹凸棒土可有效的提高了Sp2／0细胞的细胞活性和细胞密度，促进了Sp2／0细胞的增殖。结论：天然纳米材料凹凸棒土通过降低细胞代谢产物中铵离子浓度，优化了细胞培养环境，促进了Sp2／0细胞增值。大鼠大脑皮质神经元原代培养不同培养体系及纯化方法的比较研究
摘要：目的：比较两种大鼠大脑皮质神经元的培养及纯化方法不同组合的优劣，探讨科学可靠的神经元培养纯化方法。方法：采用DMEM／F12＋血清的有血清培养体系和神经基础培养基（Neurobasal）＋B27的无血清培养体系培养原代神经元。在接种3天后分别采用加入阿糖胞苷和5．氟脱氧尿嘧啶两种方法进行神经元的纯化。在1天、3天、7天采用形态学及7天时免疫荧光化学法鉴定神经元的纯度及生长状态。结果：1天、3天时，有血清培养体系和无血清体系中的神经元的形态结构和密度无明显差别，在分别加入阿糖胞苷和5．氟脱氧尿嘧啶后，7天时无血清体系中加阿糖胞苷组细胞密度明显低于其他三组细胞密度。通过免疫荧光化学法鉴定可见无血清体系中的神经元纯度明显高于有血清体系。结论：有血清体系的神经元纯度较差，阿糖胞苷和5-氟脱氧尿嘧啶不能显著抑制胶质细胞等杂细胞的生长。无血清培养体系加阿糖胞苷的神经元细胞受损较多，无血清培养体系加5-氟脱氧尿嘧啶纯化培养的大鼠大脑皮质神经元，纯度较高，细胞数量合适，是体外研究神经系统相关理论的良好模型。《现代生物医学进展》被英国Global Health数据库收录
摘要：Global Health是英国国际农业与生物科学研究中心主办的、国际上权威的公共健康研究数据库。读者范围主要针对专业学术机构、研究人员、非政府组织、政策制定者、从业医师、健康机构专业人士及学生。该数据库填补了很多目前医学研究领域内的信息空白，提供最宽泛的内容覆盖面。Global Health在Ovid（奥维德技术）及Silver Platter平台上均可获得。银杏叶提取物对β-淀粉样蛋白致阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的影响及其作用机制研究
摘要：目的：研究银杏叶提取物（EGB）对β-淀粉样蛋白（β-amyloidprotein，Ap）致阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease，AD）模型大鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。方法：用Y迷宫测定AβAD大鼠学习记忆能力，苏木素-伊红（HE）染色，TUNEL法和免疫组化染色法分别检测其海马CA1区细胞形态学变化，神经元凋亡，Caspase-3P20的表达及Aβ沉积，并观察EGB的保护作用。结果：AβAD大鼠学习尝试次数明显增加，记忆正确次数明显减少；海马CA1区锥体细胞层损伤严重，可见到较多TUNEL和Caspase-3P20阳性神经元及Aβ性物质沉积。而银杏叶各剂量组均有不同程度的改善。结论：Aβ可引起β-淀粉样蛋白致AD大鼠海马CA1区神经元的凋亡，Caspase-3的激活参与了这一过程，而EGb有保护作用并能改善其学习记忆障碍。封面说明
摘要：图案说明：2009年瑞典卡罗林斯卡医学院宣布诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家伊丽莎白·布莱克本、卡萝尔·格雷德和杰克·绍斯塔克，以表彰他们”发现端粒和端粒酶是如何保护染色体的”。端粒和端粒酶的发现，解决了DNA末端复制这一基础生物学的问题，这一问题从端粒的角度揭示细胞分裂潜能控制，细胞衰老和癌变的分子基础，与疾病有密切关联，意义重大。α1-烟碱样乙酰胆碱受体在门脉高压症发病机制中的作用分析
摘要：目的：4g讨肝组织中的α1-烟碱样乙酰胆碱受体在胆汁性肝纤维化引起的门静脉高压症（PHT）发病机制中的作用。方法：取体重240-260g的清洁级雄性SD大鼠30只，根据体重随机分为假手术组、模型组。模型组采用胆总管结扎术（CBDL）对大鼠进行造模，分别于2周、4周测门静脉压力，并用免疫组化和免疫印迹法对α1-烟碱样乙酰胆碱受体（nAchRα1）进行定位及定量的检测。结果：假手术组的门静脉压力是7．97±0．55mmHg，造模后2周和4周门静脉压力升高，分别为14．15±0．92mmHg：17．75±0．86mmHg。免疫组化显示nAchRα1主要表达在肝窦和汇管区。免疫印迹显示模型组nAchRα1的表达较假手术组明显增多。结论：nAchRα1可能通过活化肝星状细胞，进而形成肝窦毛细血管化，来参与门静脉高压症的发病机制。TRAIL联合多西紫杉醇对人鼻咽癌CNE2细胞的体外作用研究
摘要：目的：研究肿瘤坏死因子相关凋亡配体（TRAIL）联合化疗药物多西紫杉醇对鼻咽癌CNE2细胞凋亡诱导作用。方法：应用MTT法检测不同浓度多西紫杉醇的抗癌活性，计算其亚毒性剂量，流式细胞仪检测多西紫杉醇及TRAIL单独或者联合作用于鼻咽癌CNE2细胞后的细胞凋亡发生率，TUNEL法观察细胞凋亡发生情况。结果：鼻咽癌细胞对TRAIL的作用敏感，多西紫杉醇可以增强其凋亡诱导作用。结论：TRAIL与多西紫杉醇具有协同抗鼻咽癌作用，有望应用于鼻咽癌的临床治疗。
