畸精子症病人的睾丸特异性表达基因SPEM1筛查分析
摘要：目的：探讨睾丸特异性表达基因SPEM1突变与畸精子症患者之间的关系。方法：收集从2005年4月至2007年3月临床上不明原因的畸精症患者113份外周血标本以及100份正常生育能力男子的外周血标本，抽提其DNA。然后采用PCR技术、变性高效液相色谱技术（DHPLC）以及测序等手段对全部DNA样本进行该基因的突变筛查。结果：在畸精症患者中发现1个新的未见报道的多态性位点；尚未发现有基因突变或微缺失。结论：SPEM1基因突变或缺失不是引起本组畸精子症病人的主要致病基因，该基因在对畸精子症所致不育的诊断价值尚需进一步研究。大鼠心肌梗死后螺内酯与氯沙坦干预对其心肌胶原变化的影响
摘要：目的：观察大鼠急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）后左心室心肌重构分析和非梗死区I、Ⅲ型胶原含量的变化，分别使用螺内酯和氯沙坦以及将两药合用对AMI模型进行干预，探索醛固酮受体拮抗剂和血管紧张素受体阻断剂对AMI后心室重构和胶原增生的影响。方法：将50只雌性SD大鼠随机分为AMI组、螺内酯组、氯沙坦组、联合用药组和假手术组，每组10只，结扎大鼠左前降支建立急性心肌梗死模型。术后8周进行血流动力学测定、病理分析和非梗死区I、Ⅲ型胶原含量的测定。结果：AMI组与假手术组相比，左心室舒张末压（LVEDP）、容积、重量和非梗死区I、Ⅲ型胶原含量均显著增加（P〈0.05）；左心室球形指数、左心室内压最大上升和下降速率（±dp／dt／LVSP）均显著降低（P〈0.05）。螺内酯组与AMI组相比，左心室非梗死区I、Ⅲ型胶原含量显著减少（P〈0.05），其余各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。氯沙坦组和联合用药组与AMI组相比，LVEDP、左心室实际重量显著降低（P〈0.05）；左心室容积仅联合用药组有显著降低（P〈0.05）；而两组的±dp／dt／LVSP显著增加（P〈0.05）。螺内酯、氯沙坦和联合用药3组与AMI组相比，左心室非梗死区I、Ⅲ型胶原含量均显著减少（P〈0.05）；且3组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：螺内酯能有效抑制AMI左心室非梗死区I、Ⅲ型胶原的增生，提示螺内酯可能有改善左心室重构的潜在作用。氯沙坦与螺内酯合用可更有效防治AMI后左心室重构，改善左心室舒张功能。关于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
摘要：为促进我国生物医学研究的进步与发展，本刊经研究决定于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动。为了确保优秀论文评比的公正与公平性，编辑部现将有关事项通知如下：姜黄素抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖和诱导凋亡的作用
摘要：目的：探讨姜黄素对大鼠气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）增殖和凋亡的影响。方法：采用改良组织块消化法培养原代大鼠气道平滑肌细胞，以PDGF诱导ASMCs增殖建立模型。MTT法检测不同浓度姜黄素抑制ASMCs增殖情况，Hoechst33342染色和DNALadder检测细胞凋亡，Western Blot检测ERK1／2和磷酸化ERK1／2的表达。结果：①MTT检测给予姜黄素处理12h后，与模型组相比较，10μmol／1组、20μmol/1组和40μmol／1组的细胞平均抑制率均增加显著，P〈0.05；48h后各浓度组抑制率均升高。②Hoechst33342观察到10μmol／1、20μmol／1和40μmol／1姜黄素组中强荧光细胞比例随姜黄素剂量增大而增多，细胞核内多个不均一蓝染现象。③DNA Ladder观察到40μmol／1组姜黄素处理组出现梯状分布。④姜黄素（40μmol／1）与PDGF（20ng／ml）共同处理30min和60min后P-ERK1／2蛋白表达水平显著降低。结论：姜黄素对ASMCs增殖有抑制作用，同时高浓度的姜黄素可促进ASMCs凋亡，可能与下调ERK1／2的表达有关。封面说明
摘要：这个图片设计，被编委会命名为“和谐生命之光”。中国传统哲学认为，道生一，一生二，二生三，三生万物，世界的和谐是一种一分为二的对立统一，但世界同时又是不断向前发展的，因此背景采用带有金属色彩的变形太极图案，由一个中心点分丽部分旋转生出整个奇妙的世界，既是对传统的传承，也体现了新的发展。ROCKⅠ／Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响
摘要：目的：探讨ROCK亚型ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞（A7r5）迁移及增殖的影响。方法：利用Western blot技术检测ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平；利用siRNA技术使ROCKⅠ和ROCKⅡ基因表达分别下调，并检测基因下调后蛋白表达水平；利用Boyden小室法，观察ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后及ROCK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响；使用MTT法检测ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响。结果：ROCKⅠ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同，ROCKⅡ较ROCKⅠ的表达水平高4倍；通过对A7r5细胞进行ROCKⅠ和ROCKⅡsiRNA转染，使二者蛋白表达水平分别下调83.4％和94.7％；基因表达下调后，ROCKⅠ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移，而ROCKⅡ无明显影响，Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移；ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别。结论：ROCKⅠ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用，ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异。毕赤酵母菌高效表达乙肝表面抗原的研究
摘要：目的：筛选高效表达HBsAg的毕赤酵母菌，制备目的蛋白。方法：从已确诊的乙肝病人血清中提取DNA，PCR扩增HBV S基因，将其分别克隆入毕赤酵母胞内表达载体pPICZA中。构建重组质粒pPICZA-S和pPICZA-SH，经SacⅠ线性化后，LiCl化学法转化入酵母菌株GS115、X-33、KM71H和SMD1168。结果：诱导表达后的GS115工程茵单位体积的培养基所得的抗原含量最高，诱导培养基中加入0.1％酪蛋氨基酸后，可抑制目的蛋白的水解，有利于目的蛋白的表达，粗略估算表达量为15.3mg／L，最佳收获时间为72h。结论：经SDS-PAGE和Western-blot分析表明，所得产物为乙肝表面抗原S蛋白。硝酸甘油对胰腺癌皮下成瘤的抑制作用及对HIF-1α与P-gP，GST-π的表达影响
摘要：目的：探讨一氧化氮供体药物硝酸甘油对对裸鼠胰腺癌皮下成瘤的抑制作用及对瘤体组织中低氧诱导因子1α（hypoxia induced factor 1α，HIF-1α），P糖蛋白（P-glucoprotein，P-gP）和谷胱甘肽S转移酶-π（Glutathione S-transferase pi，GST-π）的表达影响。方法：40只6-8周的18.22g的BALB／c裸鼠双侧腹股沟皮下注射胰腺癌PANC-1细胞成瘤，瘤体超过150mm3后随机分组，干预组用硝酸甘油帖剂干预，对照组贴安慰剂，并分别绘制生长曲线。采用免疫组织化学方法检测成瘤裸鼠中瘤体组织中HIF-1α、P-gP和GST-π的表达。结果：32例裸鼠成瘤，成瘤率80％，干预28天后，干预组和对照组的瘤体大小分别为1550.4±148.6mm^3和750.6±71.2mm^3。16只对照组瘤体组织中HIF-1α阳性表达12例（75％），P-gP阳性表达10例（62.5％），GST-π阳性表达8例（50％）。在16例干预组裸鼠瘤体组织中HIF-1α、P-gP、GST-π阳性表达分别是11例（68.8％），8例（50％），7例（43.8％）。结论：特定剂量硝酸甘油对裸鼠皮下成瘤有明显抑制作用，且对HIF-1α及P-gP、GST-π的表达也有一定的抑制作用。凹顶藻萜类化合物对小鼠H22肿瘤生长及VEGF、PCNA表达的影响
摘要：目的：观察凹顶藻提取物（Laurencia terpenoid extract，LET）对接种H22细胞小鼠的肿瘤生长及血管内皮细胞生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法：昆明小鼠随机分为5组（10只／组），即模型组、LET低中高剂量组（25、50、100mg／kg·d^-1）、环磷酰胺组（CTX对照组）。各组小鼠左前腋下皮下接种H22肝癌细胞，第二天除模型组外，其余4组分别以不同剂量的LET、CTX灌胃，于15天后处死，完整剥离出肿瘤，称重，计算抑瘤率。免疫组化法测定肿瘤组织中VEGF、PCNA的表达。结果：LET低、中、高剂量组小鼠H22肿瘤质量增长均较模型组缓慢（P〈0.05），抑瘤率分别为27.5％、34.9％、41.4％；同时LET中、高剂量组VEGF阳性表达较模型组显著减少（P〈0.05），低剂量组未见明显变化，但LET各剂量组PCNA阳性表达较模型组显著减少（P〈0.05）。结论：LET各剂量组可以抑制小鼠H22肿瘤的生长，具有较高的抑瘤活性，且中、高剂量组能抑制VEGF的表达（P〈0.05），低、中、高剂量组能抑制PCNA的表达（P〈0.05）。LET对肿瘤组织VEGF、PCNA表达的抑制作用可能是其抗H22肿瘤及抗血管生成的一个重要原因。岩藻多糖在2型糖尿病大鼠模型的作用及机制研究
摘要：目的：研究岩藻多糖（Fucoidan）对链脲佐菌素诱导实验性2型糖尿病大鼠的治疗作用。方法：在SD大鼠建立2型糖尿病动物模型，随机分为5组，分别用生理盐水、岩藻多糖高、中、低剂量（600mg／kg、400mg／kg、150mg／kg）、二甲双胍（200mg／kg）灌胃给药30天，同时采用正常sD大鼠为正常对照。测定各组大鼠体重、空腹血糖、血脂和血清胰岛素水平。结果：高、中剂量岩藻多糖能够明显降低模型动物空腹血糖水平，降低空腹胰岛素水平，改善胰岛素抵抗，降低血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量（P〈0.05），升高高密度脂蛋白胆固醇含量（P〈0.05），其作用效果与阳性对照药二甲双胍效果相当。低剂量岩藻多糖作用效果不明显。结论：岩藻多糖有降血糖、调节血脂紊乱的功能，对实验性2型糖尿病大鼠有治疗作用。脂质体介导的人甲状腺过氧化物酶基因转染肺癌A549细胞及其蛋白表达
摘要：目的：利用基因转染技术，研究以脂质体Lipofectamine2000为载体介导的人甲状腺过氧化物酶（TPO）基因体外转染肺癌细胞，检测感染细胞内TPO蛋白的表达，为放射性碘治疗肺癌提供理论和实验依据。方法：将获得的含TPO基因的质粒pcDAN3.1-hTPO进行扩增、纯化，并经酶切鉴定和DNA测序。将肺癌A549细胞在体外复苏与培养并分为两组：转染质粒pcDAN3.1-hTPO的为实验组，转染空质粒pcDAN3.1的为对照组。以脂质体Lipofectamine2000为载体，介导TPO基因转染肺癌细胞。采用Western Blot免疫印迹法和免疫组化法分别检测肺癌细胞中TPO蛋白的表达。结果：①酶切鉴定和DNA测序结果表明质粒pc-DAN3.1-hTPO中插入的基因为hTPO基因，其片段大小和方向正确。②体外培养的肺癌细胞活力及数量正常，细胞活力为96％，细胞生长密度为1×10^6/ml，满足实验要求。③质粒转染A549细胞后，Western Blot免疫印迹法显示：在实验组中，肺癌A549细胞有TPO蛋白的表达，而在对照组中无表达。④免疫组化染色结果显示：在实验组的肺癌A549细胞中，TPO蛋白表达阳性且主要分布于细胞膜上，阳性表达率可达75％，而在对照组中TPO蛋白表达阴性，两组比较差异有显著性（P=0.000）。结论：①获得的hTPO基因片段的核苷酸序列与GeneBank报道完全一致。②在脂质体Lipofectamine2000的介导下，TPO基因能够有效地转染肺癌细胞。③转染人甲状腺过氧化物酶基因的肺癌细胞能够在体外成功地表达TPO蛋白。中药止泻液对乳鼠轮状病毒肠炎水通道蛋白表达的影响
摘要：目的：用中药止泻液对轮状病毒肠炎乳鼠进行干预后，检测乳鼠空肠，回肠与近端结肠粘膜水通道蛋白（aquaporin，AQP）1，3，4，8mRNA的表达情况，研究中药止泻液对乳鼠轮状病毒肠炎AQP1，3，4，8mRNA表达的影响。方法：在实验条件下，用恒河猴SA11株轮状病毒感染6日龄乳鼠24h后，予各乳鼠灌注止泻液，每日3次，于接毒后48h始，每天处死2只乳鼠，连续6天。采用实时荧光定量PCR方法对乳鼠的空肠，回肠与近端结肠黏膜细胞的AQP1，3，4，8mRNA进行定性和相对定量分析研究，探讨中药止泻液对轮状病毒腹泻模型乳鼠肠道AQP1，3，4，8mRNA表达的影响。结果：结肠AQPI mRNA在中药干预组乳鼠中表达量显著高于空白组（t=-3.47，P〈0.05）。AQP3，4，8mRNA表达量无统计学差异。在空肠，回肠中，中药干预组与空白组AQP1，3，4，8mRNA表达量均无统计学差异。结论：中药干预组乳鼠结肠AQP1 mRNA表达上升，提示中药止泻液能明显提高乳鼠结肠组织AQP1 mRNA的表达，通过增加结肠对水分的吸收，来达到收敛止泻的作用。在本研究中，中药止泻液对轮状病毒肠炎乳鼠肠道AQP3，4，8mRNA表达没有明显的影响。甘草甜素对肾脏转化生长因子β1作用的实验研究
摘要：目的：探讨甘草甜素对肾小球硬化模型中转化生长因子β1（TGFβ1）作用。方法：采用尾静脉注射阿霉素方法建立大鼠肾小球硬化模型。实验随机分为模型组、治疗组和对照组。检测各组第4和8周各项指标的变化。包括①24h尿蛋白定量，血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、胆固醇（Cho）和白蛋白（AIb）。②各组肾皮质进行光镜等病理学检测。③应用免疫组织化学方法检测肾组织内转化生长因子β1（TGFβ1）蛋白质的表达。④采用标准曲线法进行荧光定量PCR检测肾组织内TGFβ1 mRNA的表达。结果：①治疗组与模型组相比较，24h尿蛋白定量、BUN、Scr、Cho和AIb均有不同程度改善（p〈0.05）。②肾皮质病理学改变肾小球硬化程度治疗组明显轻于模型组。③肾组织内TGFβ1蛋白和mRNA表达治疗组与模型组比较表这峰值均有不同程度降低（p〈0.05）。结论：从蛋白和mRNA水平同时证实甘草甜素对TGVβ1蛋白和mRNA的表达有明显的抑制作用，对大鼠肾小球硬化有早期保护作用，为临床应用提供了依据。内毒素血症在腹部火器伤肠管穿透后肝损伤中的作用
摘要：目的：探讨血浆内毒素在腹部火器伤肠管穿透后肝损伤中的作用。方法：健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h组，实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后，用显色基质鲎试剂法检测各组血浆内毒素水平，用免疫组化图像分析法测定各组肝内TNF-α含量，同时测定血清中ALT水平变化情况，在光镜下观察各组肝脏组织学变化。结果：伤后各组血浆内毒素水平、肝组织TNF-α的表达及血清ALT水平均明显高于对照组（P〈0.05）。血浆内毒素水平于伤后8h出现高峰，伤后12h仍维持在高峰值水平；伤后各组出现逐渐加重的肝细胞水肿、变性、坏死，肝组织TNF-α含量及血清ALT水平均于伤后2h和12h出现2个高峰。相关分析表明，伤后肝组织TNF-α含量与血浆内毒素及血清ALT水平均呈正相关（r值分剐为0.802、0.895，P〈0.05）。结论：腹部火器伤肠穿孔后内毒素血症可引起肝内TNF-α含量增高来介导继发性肝损伤的发生。MSCTA对基底动脉变异的初步研究及其临床意义
摘要：目的：研究MSCT血管成像对基底动脉变异的诊断价值，并探讨其临床意义。方法：回顾性分析MSCT血管成像诊断基底动脉变异120例，所有患者均采用GE LightSpeed64层螺旋CT对其头颈部动脉进行CT血管成像扫描，将获得的原始数据传入AW4.2P后处理工作站，血管重建技术包括容积再现（VR）、最大密度投影（MIP）、多平面重建（MPR）及曲面重建（CPR），影像分析采用智能血管分析与目测法相结合。结果：基底动脉走行弯曲50例（42％），包括左侧凸30例（25％）、右侧凸例15例（占12.5％）、S型凸5例（3.5％）；基底动脉起止点变异47例（39.3％），其中起点变异35例（29.3％）、终点变异12例（10％）；基底动脉形态变异14例（11.7％），其中开窗型10例（8.3％）、管径粗大2例（占1.7％）、管径细小2例（1.7％）；基底动脉主要分支变异9例（7.5％）。结论：MSCT血管成像是一种无创性诊断基底动脉变异的有效方法，能够解释临床上部分不明原因的基底动脉供血不足，具有重要的临床意义。PTEN及COX-2在乳腺癌的表达、意义及相关性
摘要：目的：研究PTEN及COX-2在乳腺癌的表达、与临床病理特征的关系及二者表达的相关性。方法：采用免疫组化技术（S-P法）检测48例乳腺癌和12例乳腺纤维腺瘤中PTEN、COX-2的表达情况。结果：PTEN在乳腺癌中的高表达率52.08％（25／48）明显低于乳腺纤维腺瘤91.67％（11／12）（p〈0.05）；PTEN的表达水平与腋淋巴结转移呈负相关，与ER水平呈正相关。与乳腺纤维腺瘤组织16，67％（2／12）相比，COX-2在乳腺癌组织中的表达明显增强68.75％（33／48）（P〈0.05），COX-2与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及ER、PR水平有关。结论：PTEN和COX-2的异常表达与乳腺癌发生、发展密切相关；PTEN和COX-2在乳腺癌中的表达呈负相关，两者共同参与了乳腺癌发生和发展。慢性粒细胞性白血病并骨髓纤维化患者格列卫停药致骨髓坏死1例临床分析
摘要：目的：探究格列卫治疗相关毒副反应，总结相关毒副反应的I临床表现、实验室特征。提高，临床医生对于格列卫相关毒副反应的认识和处理水平。方法：分析1例接受格列卫治疗的慢性粒细胞白血病并骨髓纤维化患者自行停药后出现致死性骨髓坏死的临床表现特征，实验室检查，治疗过程及预后情况。结果：该例慢性粒细胞白血病并骨髓纤维化患者对羟基脲、干扰素和常规HA方案化疗不敏感。患者接受格列卫治疗1月后临床症状、血象明显改善。格列卫治疗2月后出现背痛，下肢疼痛副反应。格列卫不当停药后出现致死性骨髓坏死。结论：格列卫对于慢性粒细胞白血病合并骨髓纤维化患者的疗效尤其优于羟基脲、干扰素和常规化疗。接受格列卫治疗的患者当出现药物副反应考虑停药时应慎重。2型糖尿病视网膜病变与胰岛素抵抗及β细胞功能的关系
摘要：目的：探讨新疆汉族2型糖尿病视网膜病变（DR）与胰岛素抵抗（IR）TLB细胞功能的关系。方法：免散瞳眼底照相行眼底筛查我院内分泌科住院病人及体检正常人群258例，正常人（NC）83例、糖尿病无视网膜病变（NDR）60例、糖尿病视网膜病变（DR）115例，测定其空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINs），计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR指数）、β细胞功能指数（HOMA-β指数），并测定其临床一般资料，记录身高、体重等。结果：NDR组、DR组HOMA-IR指数、HOMA-β指数明显高于NC组，差异有统计学意义（p〈0.05），但NDR组与DR组相比，HOMA-IR指数、HOMA-β指数差异无统计学意义（p〉0.05）。2型糖尿病视网膜病变与FBG、FINS、HOMA.IR、HOMA-β呈正相关（p〈0.01）。多元Logistic回归分析显示病程、吸烟史、TG、TC、尿微量白蛋白（UAE）、糖化血红蛋白（HbAlc）、血尿酸（SUA）、收缩压（SBP）HOMA-IR、HOMA-β为DR的危险因素。校正这些因素后DR仍与UAE、SUA、SBP、HOMA-IR、HOMA-β相关。结论：DR的发生与发展除了与病程、脂代谢紊乱、吸烟有关外，还与IR、β细胞功能、UAE及SUA等有关。
