一株新的人肾癌原代细胞系的建立及其生物学特性鉴定
摘要：目的：取肾癌病人标本建立一株新的人肾癌细胞系，初步对该细胞系进行鉴定，为进一步的肾癌基础研究提供实验模型。方法：2008．2009年间共采集20例肾癌新鲜手术标本，于手术后1h内将每例标本切取四块0．5cm×0．5cm×0．5cm组织块，分别包埋于2只裸鼠的右后肢皮下及背部皮下，连续传代3次，取移植瘤体外培养，记录细胞株的生长曲线，测定细胞集落形成率，对细胞进行DNA含量测定，进行染色体分析及病理学检查。结果：其中1只裸鼠皮下移植瘤生长，继续传代，肿瘤生长速度明显加快。取移植瘤标本体外培养得到肾癌细胞系XJG-9201。形态结构，分化程度与原发瘤一致，染色体众数为65。细胞群体倍增时间为38．2h。细胞周期分析G1期62．7％，G2期11．2％，S1期25．3％，集落形成率为70％。结论：肾癌细胞系XJG-9201与原发癌保持相同的生物学特性，体外连续传代1年以上传115代。细胞形态不变，生长周期恒定，已成为一个稳定的细胞系。Ataxin-3融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
摘要：目的：表达GST-ataxin-3-N融合蛋白并制备GST—ataxin-3特异性抗体，为深入研究其功能及其在SCA3发病机制中的作用提供重要的技术和材料保障。方法：将人ataxin-3氨基端基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-2，在大肠杆菌（E．coli）BL21中表达，用Glutathione sepharose4B凝胶亲和柱纯化目的蛋白。利用纯化的GST—ataxin-3-N蛋白制备多克隆抗体。结果：成功构建了原核表达载体，得到高表达量的融合蛋白，经亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST—ataxin-3-N融合蛋白。以融合蛋白免疫新西兰免得到Ataxin-3-N多克隆抗体，Western Blotting及免疫荧光均证实该抗体能够识别Ataxin-3-myc蛋白，具有较高特异性。结论：利用原核表达人GST-ataxin-3-N融合蛋白制备的Ataxin-3多克隆抗体具有较好的特异性，可用于该蛋白的相关研究。在体分离小鼠小肠隐窝、绒毛上皮细胞的生化完整性研究
摘要：目的：检测低温条件下用螯合剂沉淀法分离的小鼠小肠上皮隐窝和绒毛细胞是否具有生化完整性。方法：使用螯合剂在低温（冰浴）条件下分离和富集小肠上皮绒毛和隐窝细胞；抽提DNA、RNA和总蛋白，用电泳的方法检测完整性；用Real－time PCR检测溶菌酶Lysozyme的表达以判断隐窝、绒毛细胞富集程度。结果：低温条件下分离的肠上皮隐窝、绒毛细胞形态完整；基因组DNA完整，未出现明显的DNA ladder现象；富集细胞的RNA完整；富集隐窝、绒毛细胞的蛋白未降解，两组总蛋白具有表达谱差异性；隐窝细胞富集物溶菌酶mRNA表达水平较绒毛细胞富集物高30倍以上。结论：小肠隐窝绒毛的生物学性状可在低温螯合剂沉底法分离过程中得到保存，提示此方法可以用来分析生理和创伤病理条件下小肠上皮基因和蛋白表达改变。溴氰菊酯致大鼠DNA损伤及对肝功能的影响
摘要：目的：研究溴氰菊酯（DM）对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用及对肝脏功能的影响。方法：32只雌性Wistar大鼠随机分成4组，染毒剂量分别为0，3．125，6．250，12．500mg／kg，连续灌胃染毒10天。DNA损伤采用单细胞凝胶电泳（彗星实验）进行评价，并测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）以反映肝功能变化。结果：染毒组大鼠外周淋巴细胞的尾DNA％（Tail DNA％）、尾矩（Tail Moment）和Olive尾矩（Olive Tail Moment）均高于对照组（P〈0．05），差别有统计学意义。各染毒组与对照组的肝功能差异均无统计学意义。结论：DM可导致外周血淋巴细胞DNA损伤。九节龙皂苷诱导胶质瘤SHG-44细胞凋亡的实验观察
摘要：目的：探讨九节龙皂苷对胶质瘤SHG-44细胞潜在的治疗作用及其机制。方法：用四基偶唑蓝（MTT）法检测5、7．5、10、12．5、15、20、40、80mg／L九节龙皂苷作用6、12、24、72h对人胶质瘤SHG-44细胞活性的影响和细胞流式术检测SGH-44细胞调亡情况；Hoeehst33258荧光染色法观察细胞形态的变化；琼脂糖凝胶电泳检测SHG-44细胞DNA的完整性。结果：九节龙皂苷明显抑制SHG-44细胞生长活性呈浓度-时间依赖性，并诱导细胞发生明显的凋亡，细胞核发生浓聚边集，DNA呈凋亡特异性“梯状”分布。结论：九节龙皂苷明显抑制SHG-44细胞的生长活性，能引起胶质瘤细胞大量凋亡，具有显著的抗肿瘤作用。电针对大鼠胃黏膜损伤修复的血清蛋白质差异表达研究
摘要：目的：观察电针胃经穴对大鼠胃黏膜损伤修复的血清蛋白质差异表达，为进一步阐明针刺效应的体液机理提供理论依据。方法：用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术和WCX2（弱阳离子交换芯片）对正常大鼠血清和电针大鼠血清进行蛋白质指纹图谱检测分析，通过Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件判别分析处理数据并结合生物信息学方法筛选差异表达蛋白质。结果：与正常大鼠血清比较，电针大鼠血清蛋白质在质荷比为2000-50000有25个蛋白质峰差异有显著意义，其中有19个标志蛋白在电针胃经大鼠血清中呈现高表达，6个标志蛋白在电针胃经大鼠血清中呈现低表达。结论：电针可促进胃黏膜损伤大鼠血清蛋白质差异表达，这种差异蛋白质可能与电针促进胃黏膜损伤修复效应密切相关。华蟾素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞株凋亡和增殖的影响
摘要：目的：探讨华蟾素对体外培养子宫内膜癌HEC-1-B细胞凋亡、增殖以及侵袭能力的影响。方法：体外培养HEC-1-B细胞，经不同浓度华蟾素（0．2mg／ml、2mg／ml和20mg／m1）干预24h后，采用MTT法观察细胞生长情况，流式细胞术分析细胞凋亡，Transwell小室检测细胞体外侵袭能力。结果：华蟾素能有效抑制HEC．1．B细胞生长，诱导细胞凋亡。未经华蟾素处理的细胞凋亡率仅为2．5％，经0．2mg／ml、2mg／ml、20mg／ml的华蟾素作用24h后，细胞凋亡率分别为7．4％、44．3％和78．5％。趋势卡方检验x^2=165．4983，P〈0．0001。HEC-1-B细胞经华蟾素作用后，细胞侵袭能力降低。在高浓度时，华蟾素有可能存在细胞毒作用。结论：华蟾素能通过诱导HEC-1-B细胞凋亡，从而抑制HEC-1-B细胞生长，并且降低细胞的侵袭能力。关于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
摘要：为促进我国生物医学研究的进步与发展，本刊经研究决定于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动。为了确保优秀论文评比的公正与公平性，编辑部现将有关事项通知如下：封面说明
摘要：这个图片设计，被编委会命名为“和谐生命之光”。中国传统哲学认为，道生一，一生二，二生三，三生万物，世界的和谐是一种一分为二的对立统一，但世界同时又是不断向前发展的，因此背景采用带有金属色彩的变形太极图案，由一个中心点分两部分旋转生出整个奇妙的世界，既是对传统的传承，也体现了新的发展。太极图案首先代表了传统的中国文化，有中国特色，该图案也在奥运会开幕式展示中国传统文化时出现过；第二，太极两象代表了中西文化交合，改良组织块消化法建立大鼠气道平滑肌细胞模型
摘要：目的：建立改进大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的体外培养方法，为相关研究提供实验材料。方法：将组织块连续贴壁进行细胞原代培养，胰酶消化传代培养，差速贴壁进行细胞纯化，形态学及免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。MTT法检测PDGF-BB诱导的ASMC增殖。结果：成功培养大鼠ASMC，以改良组织块消化法最为理想。第四代平滑肌细胞纯度可达95％以上。相差显微镜下培养细胞呈典型“峰谷状”生长。免疫荧光化学染色显示特异性平滑肌肌动蛋白阳性表达。随着PDGF浓度的升高（2-80ng／ml），MTT比色A490值呈上升趋势。与对照组相比较，80ng／ml、20ng／ml PDGF—BB组有统计学意义（P〈0．01）。结论：改良组织块消化法可缩短培养周期，在充分利用标本的基础上获得大量气道平滑肌细胞。49P（del）点突变提高中性纤维素内切酶EGV热稳定性的初步研究
摘要：目的：探讨利用点突变方法改善EGV热稳定性的可能性和有效性。方法：对来源于Melanocarpus albomyces endoglucanase的耐热性纤维素酶maEG进行同源建模和序列比较，删除49位脯氨酸49P（del）进行定点突变，并将得到的突变体在毕氏酵母X33中表达，对表达产物进行酶活性和热稳定性检测。结果：突变酶49P（del）在70℃处理120min，热稳定性比EGV提高了21．6％，且突变酶其他性质与野生型酶基本相似。结论：通过对中性纤维素内切酶EGV的定点突变，提高了该酶的热稳定性，并为进一步研究其结构和功能提供了材料。结果同时表明利用生物信息学和分子模拟技术，缩短表面环区对于酶的热稳定性有一定的作用。高分子量聚谷氨酸的微生物合成及其发酵过程的研究
摘要：目的：以枯草芽孢杆菌纳豆亚种为出发菌株，考察不同碳氮源及NaCl浓度、谷氨酸、种龄、接种量对微生物发酵产1-聚谷氨酸的影响，以提高γ-聚谷氨酸的产量。方法：该菌菌种活化后，接入种子培养基，于37℃、200r／min震荡培养18h，然后按2％接种量接入不同发酵培养基进行发酵培养。γ-聚谷氨酸分离纯化后，根据其产量筛选最适发酵培养基组成及发酵条件，并对产物进行分析测定。结果：①最佳碳氮源分别为葡萄糖、蛋白胨，NaCl浓度为30g／L、种龄15h、接种量3％，且需在培养基中添加谷氨酸。②该菌株在最适条件下发酵56h时，γ-聚谷氨酸产量达32．7g／L，凝胶渗透色谱分析其相对分子质量为426kDa，呈多分子质量聚集体形式。③γ-聚谷氨酸的合成与菌体生长并非完全同步。结论：γ-聚谷氨酸作为一种天然的、可生物降解的、对环境和人体无害的多聚物，可由微生物发酵合成，且在此适宜条件下产量较高。千层塔内生真菌的分离与鉴定
摘要：目的：为从千层塔中分离具有药用价值的内生真菌奠定基础。方法：新鲜千层塔茎段，经酒精和升汞消毒后，接种于PDA平板培养基上进行内生真菌的分离、纯化；根据菌落形态和孢子等形态特征，结合核糖体基因居间序列（ITS序列）进行菌株鉴定。结果：从千层塔的茎中分离出4株内生真菌。内生真菌I菌落形态和孢子特征与枝状枝孢霉属的特征相符合，ITS序列与GenBank中多条属于枝状枝孢霉的ITS序列相似，鉴定该菌株属于枝状枝孢霉；内生真菌II菌落形态和孢子特征与黄青霉的特征相符合，鉴定该菌株属于黄青霉；内生真菌III菌落形态和孢子特征与尖孢镰刀菌的特征相符合，ITS序列与GenBank中多条属于尖孢镰刀菌的ITS序列相似程度高，鉴定该菌株属于尖孢镰刀菌；内生真菌Ⅳ菌落形态与盾壳霉相似，ITS序列与GenBank中6条属于盾壳霉的ITS序列具有较高的相似性，鉴定该菌株属于盾壳霉。结论：从千层塔中分离和鉴定出4株内生真菌，分别属于枝状枝孢霉、黄青霉、尖孢镰刀茵和盾壳霉。七叶莲对蟾蜍坐骨神经动作电位的影响
摘要：目的：观察七叶莲水煎液对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的幅度及传导速度的影响，研究其对坐骨神经电生理特性的作用。方法：将制备的蟾蜍坐骨神经干分为4组，分别在任氏液和浓度为10％，20％，40％的七叶莲水煎液中浸泡，用MedLab生物信号采集处理系统引导神经干复合双相动作电位，并分别测定各组不同浸泡时间的坐骨神经干动作电位的幅度和传导速度两项电生理指标。记录不同浓度的七叶莲水煎液对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的幅度和传导速度的影响。结果：10％，20％，40％3种浓度的七叶莲水煎液均使坐骨神经复合动作电位的幅度变小（P〈0．01），传导速度变慢（P〈0．01）并最终使坐骨神经动作电位消失，且经过一段时间后动作电位的幅度和传导速度均能恢复。结论：七叶莲能可逆地阻滞神经动作电位的传导。TNFa-308基因启动子多态性与新疆维吾尔族人乙型肝炎易感性的相关性研究
摘要：目的：研究TNF-α基因单核苷酸多态性（SNP）308G—A位点与新疆地区维吾尔族人乙型肝炎之间的关系。方法：以聚合酶链式反应－限制性内切酶长度多态性（PCR-RFLP）技术，对120例乙肝患者和120例正常对照者TNF—α基因SNP308多态性位点进行基因分型。结果：SNP308多态性位点G／G基因型和G／A基因型频率在病例组为77％和23％，正常对照组为88％和12％，2组基因型和等位基因频率分布差异有显著性（p〈0．05）。结论：TNF—α基因启动子308多态性位点与新疆维吾尔族人乙肝有明显相关性。肺曲霉病40例的临床分析
摘要：目的：探讨肺曲霉病的临床表现、影像学特点、诊断和治疗，以提高对本病的认识。方法：回顾性分析本院2002年1月-2009年4月经病理确诊为肺曲霉病住院患者40例，总结其临床表现、影像学特点、诊断及治疗情况。结果：40例肺曲霉病患者中，曲菌球23例、侵袭性肺曲霉病17例。合并有基础疾病者36例（90．0％）：其中，肺结核15例（37．5％），支气管扩张6例（15．0％）。肺曲霉病的主要症状为咳嗽32例（80．0％），咳痰25例（62．5％），咯血24例（60．0％0。影像学表现多样，肿块结节型23例（57．5％），渗出型12例（30．0％）空洞样病灶12例（30．0％），“洞中球征”和“晕征”各8例（20．0％）。所有病例均经过病理检出，手术切除后病理检出26例（65．0％），纤维支气管镜下活检栓出12例（30．0％），CT引导下经皮肺穿刺活检检出2例。本组病例中，26倒在病理诊断前被初诊误诊，误诊率高达65．0％，初诊为肺结核13例（32．5％），肺癌8例（20．0％），细菌感染3例，支气管扩张并感染2例。26例（65．0％）经外科手术切除，随访均无复发；10例（25．O％）经抗真菌药物治疗，9例痊愈或显效。结论：肺曲霉病多继发于肺部基础疾病，临床表现以咳嗽、咳痰、反复间断咯血为主，缺乏特异性；影像学表现复杂多样。曲菌球和侵袭性肺曲霉病的发病危险因素、临床表现、影像学以及治疗方法均有不同。肺曲霉病误诊率高，确诊有赖于组织病理学；外科治疗和抗真菌药物治疗有较好的疗效。仪器信息网论坛升级为全新社区，由五个模块组成
摘要：经过一年时间的准备，仪器信息阳论坛升级为全新社区，由”仪器论坛”、”圈子”、”iLog博客”、”积分商城”和”积分加油站”五个模块组成。FLIP、FADD在上皮性卵巢癌中表达及其临床意义
摘要：目的：研究FLIP、FADD在上皮性卵巢癌组织中的表达情况，探讨二者在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法及RT—PCR法检测44例上皮性卵巢癌及17例正常卵巢组织中FLIP、FADD的表达，并检测上皮性卵巢癌中PCNA的表达，分析FLIP，FADD表达与上皮性卵巢癌临床病理参数及PCNA表达的关系。结果：FLIP、FADD在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率，与正常卵巢组织相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。FLIP，FADD表达与上皮性卵巢癌病理分级及临床分期有关，FLIP、FADD在I—II期中的阳性表达率，与III．IV期相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。FLIP、FADD在病理组织学-1级中的阳性表达率，与2—3级相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。FLIP、FADD的表达与患者年龄、组织学分型及淋巴结转移无关。上皮性卵巢癌组织中FLIP表达与PCNA表达成线性正相关，r分别0．880和0．564；FADD表达与PCNA表达成线性负相关，r分别为-0．591和-0．683。结论：FLIP、FADD与上皮性卵巢癌的发生发展密切相关，可能是治疗上皮性卵巢癌的潜在靶点。
