茶多酚联合吉非替尼抗肺腺癌血管生成的初步研究
摘要：目的：通过观察茶多酚联合吉非替尼对人肺腺癌生长的抑制作用，验证茶多酚抗肿瘤血管生成效应。方法：建立人肺腺癌A549移植瘤模型，设立对照组、茶多酚组、吉非替尼组及两者联合组。观察对肺腺癌A549移植瘤的抑制率，检测移植瘤体的微血管密度；并观察EGFR—VEGF这一肿瘤血管生成重要通路的相关因子VEGF、AKT-2、HIF-1α和STAT-3表达水平。结果：茶多酚组、吉非替尼组对移植性人肺腺癌A549瘤体、肿瘤组织微血管密度及VEGF的表达都有明显的抑制效果；两者联合使用效果明显增强；茶多酚组、吉非替尼组能明显抑制AKT-2、HIF-1α和STAT-3表达水平，但两者联合组对AKT-2、HIF-1α作用并不明显，而能明显抑制STAT3表达。结论：茶多酚、吉非替尼对移植性人肺腺癌A549具有明显的抑制效果，两者联合使用有一定增效作用，并能够影响肿瘤血管生成通路的相关因子表达。唐古特大黄多糖对过氧化氢所致肠上皮细胞损伤的保护作用
摘要：目的：观察唐古特大黄多糖（Rheum tanguticum polysaccharide, RTP）对过氧化氢所致正常人肠上皮细胞损伤的保护作用。方法：以过氧化氢（100μmol／L）诱导正常人肠上皮细胞损伤，损伤前用RTP（30，100，300μg／ml）预处理细胞。采用MTT比色法测定细胞活力并进行形态学观察；吖啶橙染色法及流式细胞术观察细胞凋亡情况，采用分光光度法，用相应试剂盒测定乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：加入过氧化氢后，细胞活力及SOD活性均降低，而MDA含量、LDH释放量及细胞凋亡数量均增高，与正常组比较具显著性差异（P〈0．05或0．01）；以RTP预处理细胞后发现，细胞活力明显增高，且SOD活性增强，同时，MDA水平、LDH活性均降低并可使凋亡细胞数减少。结论：RTP对过氧化氢所致的肠上皮细胞损伤具保护作用，且能抑制细胞凋亡及坏死，表明其具有一定的抗氧化损伤作用。关于2009年继续开展“生物医学”优秀论文评选活动的通知
嗜酸氧化亚铁硫杆菌APS还原酶的表达、纯化及其性质鉴定
摘要：嗜酸氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillus ferrooxidans ）中APS还原酶是硫同化途径的一个关键酶，其对硫酸盐的还原及硫化物的氧化具有重要调节作用。本文以A．ferrooxidans ATCC23270基因组为模板，通过PCR扩增得到编码APS还原酶的cysH基因，与原核表达载体pLM1构建重组体，转化入大肠杆（Escherichia coli，E．coli）DH5α中，测序正确后，加IPTG诱导表达，用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的APS还原酶。由蛋白颜色和紫外分析，确定其含有一个[Fe4S4]簇作为活性中心。表达产物进行SDS—PAGE分析，证实分子量为28kD。酶活测定表明其具有将APS还原为亚硫酸盐跟AMP的功能。法罗培南在大鼠肠道吸收部位的初步研究
摘要：目的：研究法罗培南在大鼠各肠段的吸收率，以确定最佳吸收部位，为制定合理的药物制剂提供科学依据。方法：采用大鼠在体肠循环法，各肠段区间如下：十二指肠段自幽门1cm处开始；空肠段离幽门15cm处开始；回肠段离盲肠上行20cm处开始；结肠段从盲肠后段开始。各肠段取10cm左右，将所取肠段两端开口、插管并结扎，插管与恒流泵连接，形成各自的回路。用HPLC法梯度洗脱测定法罗培南的浓度，依据药物在肠段中回流2小时后的减少量来确定各肠段法罗培南的吸收量。结果：法罗培南在大鼠各肠段吸收率平均值为十二指肠6．91±3．08％；空肠5．66±2．29％；回肠9．62±4．08％；结肠4．65±1．29％。稳定性实验、精密度实验、回收率实验的RSD分别为0．48％、0．234％和2．01％。结论：法罗培南在各肠段均有吸收，吸收率按回肠、十二指肠、空肠、结肠顺序依次降低。耐辐射奇球菌基因组DNA表达文库的构建与鉴定
摘要：目的：构建耐辐射奇球菌（Deinococcus radioduransR1）基因组DNA表达文库，为进一步研究耐辐射奇球菌高抗辐射的调控网络奠定基础。方法：提取耐辐射奇球菌基因组DNA，用Sau3AI酶将基因组DNA部分酶切成0．5—5kb大小的片段，用T4DNA连接酶将部分酶切片段与经BamHI和碱性磷酸酶（CIAP）处理的pGADT7载体进行连接后电击转化大肠杆菌DH5α。结果：得到重组子数为2．2×10^4扩增后的文库滴度为108cfu／mL。结论：构建了耐辐射奇球菌基因组pGADT7表达文库，为进一步筛选与高抗辐射相关基因产物的互作蛋白奠定了基础。柞蚕雄蛾提取液对放疗后荷瘤大鼠Th1／Th2漂移的影响
摘要：目的：研究柞蚕雄蛾提取液对放疗后荷瘤大鼠Th1／Th2平衡的影响及机制。方法：60只雄性Wistar大鼠建立W256荷瘤模型，随机分为模型组、单纯放疗组和实验组即放疗联合蚕蛾提取液治疗组，每组各20只。单纯放疗组和实验组给予常规放疗，5Gy／天，连续照射2天，总量10Gy。照射后10天取大鼠脾脏和胸腺，并计算脏器指数；用流式细胞术（FCM）检测外周血T淋巴细胞亚群变化；用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清中Thl型细胞因子INF-γ和Th2型细胞因子IL-4含量；用免疫组化检测脾脏中Th1型细胞因子INF-γ、Th2型细胞因子IL-4表达变化。结果：实验组与单纯放疗组比较，荷瘤大鼠脾脏和胸腺指数升高；荷瘤大鼠外周血中CD4＋T细胞比例与CD4＋T／CD8＋T值增加；荷瘤大鼠血清中细胞因子INF-γ含量明显升高，而IL-4含量显著降低；脾脏中INF-γ表达增加，IL-4表达减弱。结论：柞蚕雄蛾提取液可以改善荷瘤大鼠放疗后免疫功能抑制状态，改变荷瘤机体免疫功能，可作为恶性肿瘤传统放疗中的辅助用药。2，3-吲哚醌对MCF-7和HT-29细胞株的增殖抑制和凋亡诱导
摘要：目的：研究2，3-吲哚醌（2，3-dioxoindoline，ISA）对人乳腺癌细胞株MCF-7和人大肠癌细胞株HT-29的增殖与凋亡影响。方法：应用MTT比色法检测ISA对MCF-7和HT-29的生长抑制情况；Hochest33258荧光染色法检测细胞凋亡情况，Westem Blotting法检测凋亡相关基因bcl-2和bax在蛋白水平上的表达；RT-PCR两步法检测bcl-2和bax在mRNA水平上的变化。结果：①ISA在一定浓度范围内能明显抑制细胞生长；②荧光染色可观察到细胞核染色质浓集，核浓缩核碎裂，并出现典型的凋亡小体；⑧bcl-2mRNA及蛋白的表达随药物浓度增大而逐渐减少，各实验处理组与阴性对照组比较存在统计学差异（P〈0．05或P〈0．01），baxmRNA及蛋白的表达随药物浓度增大而无明显变化，各组间比较不存在统计学差异（P〉0．05）。结论：ISA能够抑制MCF-7和HT-29细胞增殖，并能选一步诱导其凋亡，其作用机制可能是与下调bcl-2表达有关。大黄素对人肝癌HepG2细胞AIF和EndoG蛋白表达的影响
摘要：目的：观察大黄素干预后，体外培养的人肝癌HepG2细胞株胞浆和胞核内AIF和EndoG的表达情况，探讨大黄素对非Cas—pase依赖细胞凋亡的影响。方法：将体外培养的HepG2细胞分为四组：空白对照组、Caspase抑制剂组、大黄素干预组、大黄素＋Caspase抑制剂组；取对数生长期的细胞进行实验，药物作用48小时后提取各组细胞胞浆及胞核蛋白；采用Western Blotting法分别检测各组细胞胞浆和胞核内AIF与EndoG的表达，并进行统计学分析。结果：AIF和EndoG在大黄素干预组、大黄素＋Cas-pase抑制剂组细胞胞浆和胞核的表达均高于空白对照组及Caspase抑制剂组（p〈0．01），其中以大黄素＋Caspase抑制剂组的表达最高（p〈0．01）。结论：大黄素能促进体外培养的人肝癌HepG2细胞AIF和EndoG的表达和核转位，可以通过非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡。封面说明
牛磺酸对缺氧培养下视网膜神经节细胞株RGC-5的保护效应
摘要：目的：观察牛磺（Taurine）对缺氧（Hypoxia）条件下大鼠视网膜神经节细胞株RGC-5存活的影响。方法：将RGC-5置于缺氧条件（5％02，5％C02，90％N2）下培养12h、24h和48h，观察不同浓度牛磺酸（0．01mM、0．1mM和1mM）对RGC-5形态、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）释放率以及细胞凋亡的影响。结果：RGC-5经缺氧处理后部分细胞皱缩、变圆和脱落，LDH释放率升高，其中12h，24h和48hLDH释放率分别为（11．57±2．08）％，（17．76±3．96）％和（46．95±6．70）％，而牛磺酸处理组LDH释放率均降低，其中0．1mM牛磺酸作用最显著，12h，24h和48h缺氧后LDH释放率分别为（7．76±2．00）％，（9．14±2．99）％和（27．15±5．14）％：RGC-5缺氧24h后凋亡细胞显著增加（16．20±2．82）％，而0．1mM牛磺酸处理组凋亡率较低（8．90±1．54）％。结论：牛磺酸对缺氧条件下RGC-5具有明显的保护作用。杨梅黄酮对大鼠下丘脑谷氨酸脱羧酶65、组胺1型受体及Hypocretin2型受体基因表达的影响
摘要：目的：探讨杨梅黄酮对大鼠下丘脑谷氨酸脱羧酶65、组胺1型受体及Hypocretin2型受体基因表达的调控作用。方法：大鼠分为正常对照、杨梅黄酮或Zolpidem处理组，分别于药物处理2小时或8小时后断头取下丘脑进行RT—PCR实验，观察上述基因mRNA水平的改变。结果：大鼠经杨梅黄酮或Zolpidem处理2小时后，谷氨酸脱羧酶65的mRNA水平显著升高，8小时后杨梅黄酮组恢复正常，而Zolpidem组虽有回归趋势，但未恢复到正常水平。而组胺1型受体和Hypocretin2型受体mRNA的水平在药物处理2小时后则出现明显下降趋势，8小时后恢复正常。结论：杨梅黄酮可能通过调节下丘脑睡眠相关基因的表达从而起到助眠作用。β2肾上腺素能受体过表达后大鼠心肌细胞收缩功能的改变及机制
摘要：目的：探讨大鼠心肌细胞过表达2-AR后心肌细胞收缩功能的改变及其可能机制。方法：采用胶原酶消化法分离培养大鼠心肌细胞，转染携带β2-A目的基因的重组腺病毒，通过免疫印迹方法检测细胞β2—AR蛋白表达的变化，通过ELISA方法检测细胞中cAMP水平的改变，采用单个细胞动态边缘检测系统测定细胞收缩功能的变化。结果：与正常心肌细胞相比，β2-AR的转染增加了细胞上β2-AR蛋白的含量（P〈0．05），并促进胞内cAMP水平的增加（14．763．15pmol／ml vs 9．31．4pmol／ml，P〈0．05）；进而增强了心肌细胞的基础收缩（8．203±2．596％vs5．472±2．918％，P〈0．01），但不改变最大收缩（9．128±2．852％vs9．366±2．646％）。结论：B，AR的过表达能够增加细胞内cAMP水平并改善心肌细胞的收缩功能。兔不同急性肝衰竭模型的建立与评价
摘要：目的：探讨一种理想的急性肝衰竭（AHF）模型建立方法。方法：36只实验免随机分为3组：①改良药物手术诱导组（A组，n=12），先用D-氨基半乳糖（D—Galn）和脂多糖（Lvs）腹腔注射，同时加用乳果糖，注射后2h以氟烷作为麻醉剂，切除约50％肝脏组织，术中经肝静脉注入5％葡萄糖氯化钠溶液10ml／kg体重；②传统手术诱导组（B组，n=12），切除约95％肝脏组织，术中不行肝静脉穿刺注射5％葡萄糖氯化钠溶液；③药物诱导组（C组，n=12），用D-氨基半乳糖（D—Galn）和脂多糖（Lvs）一次性腹腔注射。比较建模死亡率、建模后24h兔存活率、血谷丙转氨酶（ALT）、血氨（NH3）、总胆红素（TB）和血糖（BS）。结果：B组手术死亡率高于A组死亡率（41．77％vs0％），A组、B组兔建模成功后24h存活率及C组免建模成功后72h存活率分别为0％，0％，25％，A组ALT和NH3水平显著高于C组（P〈0．05），TB和BG水平低于C组，但差异无显著性。结论：通过改进的50％肝切除术可建立较理想的兔AHF模型，以氟炕作为麻醉剂，药物诱导注射同时加用乳果糖，术中经中叶肝静脉注入5％葡萄糖氯化钠溶液可减少手术死亡率。二甲基胂酸抑制胃癌细胞增殖的研究
摘要：目的：探讨二甲基肿酸（DMAA）对SGC7901胃癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法：依次用5，10，15，20，25，30mmol／L二甲基胂酸处理培养的SGC7901胃癌细胞24hrs，在5mmol／L和10mmol／L的浓度下分别处理6，12，18，24，30，36，42，48hrs，用MTT计数法测定DMAA对肿瘤细胞增殖的抑制率，用激光共聚焦显微镜检测细胞形态变化以及用DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：DMAA在不同浓度下对肿瘤细胞的抑制作用呈现典型的双曲线，即随着浓度的增加DMAA对胃癌细胞的抑制率不断增加并逐渐趋于稳定；在形态学上DMAA在低浓度下引起胃癌细胞的胞膜出泡、核固缩、染色体断裂和凋亡小体等典型的细胞凋亡的变化，而在高浓度下主要引起细胞坏死；DNA凝胶电泳结果显示，在低浓度DMAA作用下胃癌细胞DNA呈现细胞凋亡的梯状带型，而在高浓度下梯状带型则消失。结论：DMAA抑制胃癌细胞的增殖，其在低浓度时能有效诱导胃癌SGC7901细胞凋亡，而在高浓度时使胃癌细胞坏死而死亡。电针足三里穴对胃电的影响
摘要：目的：探讨电针大鼠足三里穴对胃动力的调节。方法：将大鼠随机分成足三里组、非经非穴组、非针刺对照组，观察电针后胃电的变化。结果：选取胃动过缓分布〉1／3（Ⅰ）及胃动过速分布〉1／3（Ⅱ）的各组数据进行统计学分析，胃电图表明：①各组Ⅰ的例数均比Ⅱ的例数多；②在Ⅰ或Ⅱ中，足三里组比其余两组的例数多、平均频率分布率多；⑨在Ⅰ中，足三里组比其余两组的平均主频慢。结论：电针足三里穴对大鼠胃电具有双向调节作用，以抑制作用为主。恒定磁场对大肠杆菌生长繁殖影响
摘要：目的：研究恒定磁场在静态处理和动态处理两种处理方式下对大肠杆菌生长繁殖的影响。方法：将处于对数生长期的大肠杆菌菌液置于磁场中（静态处理）或使菌液循环流动并通过磁场（动态处理），用平板法测定不同时刻菌液的活菌数，记录下菌落形成单位（CFU）的数目，并与相应时刻对照样（无磁处理）的CFU作对比。结果：两种处理方式下，菌液的相对CFU的数目都有下降，且动态处理的下降幅度大于静态处理。结论：恒定磁场在两种处理方式下都对大肠杆菌起到明显的杀死或抑制作用。文章的讨论部分总结了产生这种作用的可能机理。磁处理在中医药中的应用研究
摘要：本文介绍了磁学的发展历程及历史沿革，并将磁学与现代医学相结合，列举了磁学在临床的诸多应用。阐述了磁处理基本原理和对水的影响，介绍了磁处理水的广泛应用，同时将磁处理与传统中药相结合，初步探究两者之间的协同作用，并将磁处理作为中药提取手段之一。通过对中药化学成分的改变，药理作用的改变，临床疗效的改变等指标，拓展磁处理在中医药领域中的发展前景。
