现代生物医学进展杂志 统计源期刊

现代生物医学进展 2007年第12期杂志 文档列表

现代生物医学进展杂志基础研究

转化生长因子-β1通过促进结缔组织生长因子表达抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖1761-1764

摘要：目的：研究转化生长因子-β1（Transforming growthfactor-β1，TGF-β1）和结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）对人胰腺癌细胞系PANC．1增殖的影响。方法-首先利用MTT检测重组TGF-β1、CTGF及anti-CTGF抗体处理PANC-1细胞后，细胞的增殖状态，用流式细胞仪（Flow cytometer，FCM）检测转染pcDNA3，1（-）-CTGF后PANC-1细胞的凋亡情况，最后利用RT．PCR检测TGF-β1作用PANC-1细胞后CTGFmRNA的表达。结果：TGF-β1和CTGF均呈浓度依赖性抑制PANC-1细胞增殖。加入anti．CTGF抗体可以取消TGF-[31对PANC-1细胞增殖的抑制作用；FCM结果显示pcDNA3．1（-）-CTGF质粒转染促进PANC-1细胞凋亡：RT-PCR则证明TGF-β1促进PANC-1细胞中CTGFmRNA表达。结论：TGF-β1可能通过促进CTGF表达来发挥抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖的作用。

酸性成纤维细胞生长因子对庆大霉素和顺铂所致肾小管上皮细胞损伤的保护作用1765-1768

摘要：目的：研究酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）对庆大霉素（GM）和顺铂（DDP）引起的体外培养肾小管上皮细胞损害的保护作用。方法：大鼠肾皮质经研磨、过网、胰蛋白酶消化，进行肾小管上皮细胞的体外培养。经C：ytokeratin18抗体进行鉴定后，用GM、DDP建立损伤模型，观察aFGF对损伤的肾小管上皮细胞的保护作用。结果：①经形态学观察、GM或DDP组与对照组比较，CAT、SOD、GSH-Px、Na^＋-K^＋-ATP酶活性下降，而NAG活性和NO、MDA升高（P〈0．01或P〈0．05），提示肾小管上皮细胞的培养和GM、DDP损伤的建模成功。②aFGF＋GM或DDP组与GM组或DDP组比较，大多数生化和酶学指标有显著或非常显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）；而aFGF＋GM或DDP组与对照组比较，CAT、NAG、GSH．Px、Na^＋-K^＋-ATP酶活性无显著性差异，但SOD活性下降、NO、MDA升高尚有显著性差异（P〈0、05）。结论：aFGF对GM、DDP损伤的肾小管上皮细胞有明显的保护作用。

glmU基因敲除后对分枝杆菌细胞壁中聚糖影响的初步分析1769-1771

摘要：应用已构建的glmU基因敲除的耻垢分枝杆菌作为实验模型，对细胞壁中的聚糖的组成成份和结构进行分析。气相色谱与高效液相Dionex的结果共同说明了在mc2155glmU KOT菌株的细胞壁内，当缺失活性GlmU时，阿拉伯糖含量增加，且其增加是来自于具有分支的阿拉伯糖末端的增多。此结果将能更进一步地认识GlmU的功能以及当GlmU功能异常时对细菌造成的影响．这些都将为研究以GlmU为靶位点的药物对细菌的影响提供实验支持。

AMP激活的蛋白激酶α2亚基在大肠杆菌中的克隆及表达1772-1775

摘要：目的：AMP激活的蛋白激酶（AMPK）在脑内作为多功能能量感受器发挥作用，主要协调代谢和能量的需要。脑神经元中AMPKα2亚基的含量明显高于α2亚基，本研究选择α2亚基作为对象，研究其在大肠杆菌中的表达情况，为以蛋白原核表达为前提的研究技术的应用提供实验依据。方法：大鼠AMPKet2蛋白编码区片段通过PCR方法从重组pcDNA3质粒中扩增后，克隆至带有λcI基因的pBT载体，构建融合表达载体pBT—AMPKα2。通过核苷酸序列测定证实结果正确后，转化pBT-AMPKα2入大肠杆菌XL—1 BlueMR菌株，IPTG诱导目的蛋白表达。结果：Western blotting显示AMPKα2-λcI融合蛋白表达，分子量约为89ku，与预期相符合。结果还表明AMPKα2-λcI融合蛋白以可溶性蛋白和不溶性包涵体两种形式存在，前者不稳定易发生降解，生成AMPKα2和kcI蛋白，分子量分别是62ku和27ku；后者稳定不发生降解。结论：AMPKα2亚基能以AMPKα2-λcI融合蛋白的形式在大肠杆菌中表达，这为今后以pBT—AMPKα2融合表达载体为工具利用大肠杆菌双杂交系统筛选AMPKα2的相互作用蛋白奠定基础。

注射性组织工程牙胚的构建及成牙能力研究1776-1778

摘要：目的：探索采用大鼠牙胚细胞构建可注射组织工程牙齿的可行性及在体内肾被膜移植的成牙能力研究。方法：采用出生后4dSD仔鼠磨牙牙胚细胞，培养传代后将牙胚细胞与牛真皮基质蛋白溶液混合构建组织工程牙胚，利用注射器植入SD大鼠肾被膜下，2wk后取材，HE染色观察移植物中的组织成熟情况，Masson’S三色法观察组织工程牙胚的成牙能力。结果：组织工程牙胚移植后2wk可在肾被膜下形成乳白色矿化组织，HE染色上皮细胞和间充质细胞进行重组，形成典型的牙髓牙本质复合体样组织和釉质样结构，Masson’S三色法可见绿色矿化基质形成并包绕牙乳头样组织。结论：牙胚细胞仍保留了牙齿发育的位置信息。采用牛真皮基质蛋白溶液作为组织工程支架有助于牙胚细胞相互作用并重新排列，构建的组织工程牙胚具有进一步成熟、矿化并形成牙齿的潜能。

药用植物刺山柑愈伤组织诱导及细胞生长代谢特征研究1779-1783

摘要：本文研究了不同外植体及激素对刺山柑愈伤组织诱导的影响，不同激素配比对愈伤组织增殖培养以及悬浮细胞的生长与代谢特征。结果表明：以刺山柑叶片作为诱导愈伤组织的材料，效果较佳；愈伤组织诱导和继代的适宜培养条件是分别是MS＋0．5mg／L2，4-D＋1．0mg／L6-BA和MS＋1．0mg／L2，4-D＋1．5mg／L6-BA。刺山柑悬浮培养细胞的生长周期为30天左右．细胞生长曲线呈“s”形，生物量增长2．8倍左右；细胞生长周期内，碳源消耗规律表现为蔗糖和可溶性总糖的浓度持续降低，而还原糖则表现为先升高后降低；过氧化物酶活测定显示酶活水平与蔗糖浓度的高低呈一定程度的正相关。

一株嗜酸兼性异养菌的分离和系统发育分析1784-1786

摘要：从广东大宝山矿区硫化矿酸性矿坑水中分离获得一株嗜酸兼性异养菌DBS4-1，对该菌株进行了形态、生理生化特性研究及16SrRNA序列分析。分析结果显示：该菌株为革兰氏阴性细菌，球状，菌体直径约为4．0±0．5μm；该菌株兼性异养，具有广泛的底物利用特性，可以利用有机物进行异养生长，同时在自养环境中，还可以利用三价铁、单质硫获得能量进行生长，最适生长温度为30℃左右，最适生长pH约为3．5；该菌16SrRNA序列与Thiobacillus acidophilus（D86511）同源性高达99％。结果表明DBS4-1属于嗜酸硫杆菌属（Acidiphilium sp．），嗜酸种（acidophilum）。

高纯度α-亚麻酸抗血栓活性的初步研究1787-1790

摘要：目的：评价从椒目中提取和纯化获得的高纯度α-亚麻酸的抗血栓药理活性。方法：采用小鼠和大鼠在体血栓形成和肺动脉栓塞等模型，分别观察试药对血小板在动．静脉旁路中丝线上的沉积、肺动脉栓塞小鼠的死亡率、体外血小板聚集和出凝血时间等指标。结果：1．50mg／kg，100mg／kg和250mg／kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸（α-亚麻酸／亚油酸=1／1）给小鼠灌胃治疗10天，显著延长出、凝血时间（P〈0.01）；明显降低胶原蛋白-肾上腺素诱发性肺动脉栓塞小鼠的死亡率（P〈0．01）。2、35mg／kg，70mg／kg和175mg／kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸给大鼠灌胃治疗10天，明显抑制血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积（P〈O．01）和大鼠体外血小板聚集（P〈O．01）。结论：从椒目中提纯的高纯度α-亚麻酸，作为一种木本油脂新的药用资源和其混合不饱和脂肪酸均具有明显抗血小板聚集和溶栓药理作用，并具有一定量效关系；同时还发现，当α-亚麻酸／亚油酸=1／1时。其抗血栓药理活性优于同剂量高纯度的α-亚麻酸。

大黄牡丹汤对实验性结肠炎小鼠血清细胞因子的影响1791-1793

摘要：目的：探讨大黄牡丹汤对TNBS诱导的小鼠实验性结肠炎的治疗作用及作用机理。方法：采用三硝基苯磺酸（TNBs）法制作实验性结肠炎小鼠模型，给予大黄牡丹汤治疗，观察小鼠的一般状态和DAI评分、结肠组织学变化。采用Luminex液相芯片系统检测血清中白介素1β、白介素4和肿瘤坏死因子α的含量。结果：大黄牡丹汤对TNBS结肠炎小鼠的一般状况及DAI评分有改善作用、并能缓解结肠局部的炎症，可降低血清中白介素1β和肿瘤坏死因子α的含量的水平。结论：大黄牡丹汤具有一定地防治TNBS所诱导的小鼠结肠炎的作用，其机制可能与抑制白介素1β和肿瘤坏死因子α的分泌有关。

下颌骨牵张成骨中不同牵张频率对牵张区成骨细胞增殖细胞核抗原表达的影响1794-1796

摘要：目的：对比研究下颌骨牵张成骨中不同牵张频率的作用下新骨组织中成骨细胞的增殖活性，从而筛选出最佳牵张频率。方法：选用16只3月龄的幼年山羊，随机分为4组，每组4只，第1组为对照组，分别对第2、3、4组动物右下颌骨行骨皮质切开术后进行牵张，第2组牵张频率为2次／天，第3组牵张频率为4次／天，第4组牵张频率为6次／天，于完成牵张后4周时分别处死动物，取牵张区新骨组织和对照组右下颌骨颏孔区骨组织行PCNA免疫组化染色并进行组间比较。结果：各牵张组牵张区新生骨组织中成骨细胞PCNA表达的阳性细胞数均显著高于对照组，6次／天牵张组和4次／天牵张组牵张区中成骨细胞PCNA表达的阳性细胞数显著高于2次／天牵张组，但6次／天牵张组和4次／天牵张组成骨细胞PCNA表达的阳性细胞数无显著性差异。结论：在下颌骨牵张成骨进程中，随着牵张频率的增加，牵张区成骨细胞的增殖能力提高，可能术后成骨效果更佳。

抗金黄色葡萄球菌卵黄抗体的制备及活性研究1797-1799

摘要：目的：制备金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体并考察其活性。方法：采用灭活的金黄色葡萄球菌免疫产蛋母鸡，通过水稀释法、硫酸铵和硫酸钠盐析及凝胶过滤法分离、纯化抗体。抗体效价测定及体外抑菌试验分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和液体培养基比浊法。结果：纯化所得抗体纯度达95．10％，回收率为20．08％。抗体对金黄色葡萄球菌具有特异性，效价最高可达1：6400。体外抑菌试验表明，抗体抑菌活随IgY浓度的增加而增强，当特异性IgY的浓度为10mg／ml时，能完全抑制细菌生长。结论：抗体制备及纯化所述方法简便、可行，所制抗体具有特异性和抑菌活性。

利用基因芯片数据挖掘宫颈癌相关基因的EST片段1800-1803

摘要：目的：利用基因芯片数据，探讨宫颈癌在分子水平上的发病机制，挖掘肿瘤相关基因EST片段，探索恶性肿瘤标志物，为肿瘤防治找到新的有效手段。方法：从基因芯片数据库GEO（gene expression omnibus）中获得GSM99077基因芯片数据，利用该数据筛选出宫颈癌相关基因的EST片段；然后通过NCBI中的在线BLAST软件找到与之相匹配的同源序列，对这些同源序列进行生物学功能分析，找到与肿瘤的相关性。结果：共发现宫颈癌组织与正常宫颈组织差异表达EST共127条，其中上调的106条，下调的11条，这些差异表达EST的同源序列的转录产物参与转录、翻译、细胞增殖分裂及细胞信号传导等过程。结论：基因芯片能有效、高通量地获取生物内在信息，通过对基因芯片数据再挖掘，可发现宫颈癌的发生涉及多个基因共同作用。

兔海水淹溺型肺水肿组织NKA活性与动脉血气的相关性分析1804-1807

摘要：目的：观察兔海水淹溺型肺水肿组织钠．钾ATP酶（Na^＋-K^＋-ATPase）活性变化与动脉血气变化的关系，探讨钠．钾ATP酶在海水淹溺肺水肿形成中的重要作用，为临床治疗提供实验依据。方法：将30只新西兰兔随机分为对照组（5只）及淹溺组（25只），淹溺组根据观察时间段分为10’、30’、60’、90’、120’组（每组5只），采用气管切开插入塑料导管、向气管内灌海水3mL／kg、双肺自主通气的方法进行兔海水淹溺肺水肿模型复制。于各观察时间点进行血气分析，并采集肺组织标本，对肺组织匀浆钠-钾ATP酶进行测定。结果：兔海水淹溺肺水肿各时间点钠-钾ATP酶活性降低，动脉血气显示低氧和酸中毒，钠-钾ATP酶活性变化与动脉血气主要指标变化具有线性回归关系（P〈0．01）。结论：海水淹溺型肺水肿组织NKA活性与动脉血气的具有相关性，钠．钾ATP酶在海水淹溺肺水肿发生发展中具有重要作用。

绞股蓝对电休克大鼠记忆障碍的改善作用1808-1810

摘要：绞股蓝又名七叶胆，为葫芦科绞股蓝属植物。它具有多种药理活性，并有实验证明其具有增强学习记忆的功能。本实验主要验证绞股蓝对电休克法造成的SD大鼠记忆障碍的改善作用。实验方法分为四个过程：①建立大鼠的空间分辨学习记忆；②采用电休克的方法破坏大鼠的记忆，建立记忆遗忘的大鼠模型；③把记忆遗忘的大鼠模型随机分成两组，分别用2．5％绞股蓝提取物的溶液和0．9％生理盐水（每天每只8ml／100g）对两组模型大鼠进行灌胃饲养8天；④观察测试大鼠的空间分辨学习记忆的改善情况，用Y型迷宫模型测试出记忆错误次数、正确率、测试总时间和主动回避次数等参考指标。结果表明绞股蓝组与对照组相比，错误次数较少，正确率较高，测试总时间较短，主动回避次数较多。由此证明绞股蓝对SD大鼠记忆障碍有明显的改善作用。

硒酸赖氨酸对四氧嘧啶诱发的小鼠肝损伤的防护作用1811-1812

摘要：目的：研究硒酸赖氨酸对四氧嘧啶诱发的小鼠肝损伤的防护作用。方法：选取昆明小鼠50只，雌雄各半，随机分成五组，即对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。采用四氧嘧啶致急性肝损伤模型，检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（AK_P）活性，并对各组小鼠肝脏进行组织病理学观察。结果：硒酸赖氨酸能降低小鼠血清中ALT、AST、AKP活性（P〈0.05或P〈0．01），明显减轻四氧嘧啶致肝损伤小鼠肝细胞的病变及炎症反应。结论：硒酸赖氨酸具有对四氧嘧啶诱发小鼠肝损伤的保护作用。

OPG mRNA在牙齿萌出过程中方组织内的表达1813-1815

摘要：目的：探讨骨保护素（osteoprotegerin OPG）mRNA在牙齿萌出过程中胎方组织内的表达。方法：运用原位杂交方法检测大鼠下颌第一磨牙胎方组织内OPGmRNA的表达。结果：大鼠下颌第一磨牙牙台方组织内牙囊成纤维细胞中OPGmRNA在牙齿骨内萌出阶段中期阳性表达，与萌出早、晚期比较差异有统计学意义（P〈0．01），其中早期比晚期差异显著（P〈0．01）；成釉细胞中OPGmRNA在牙齿骨内萌出阶段中期阳性表达，与萌出早、晚期比较差异亦有统计学意义（P〈0.01），早期与晚期没有显著性差异（P〉0．05）。结论：OPGmRNA在大鼠出生后下颌第一磨牙牙囊成纤维细胞、成釉细胞骨内萌出阶段中期表达最强，牙齿萌出过程中可能通过OPGmRNA表达量的变化来调节牙齿的萌出。

鱼类三叉神经节的形态及神经节细胞的分布1816-1817

摘要：目的：观察三叉神经节的形态结构及神经节细胞的分布。方法：用罗非鱼，进行40g／L甲醛灌注固定，观察三叉神经节的位置及分支分布，取三叉神经节，根及分支进行连续切片制作三维立体图像，观察神经节细胞的分布。结果：①三叉神经根在菱脑高度进出脑。②三叉神经节位于眼眶与颅腔之间的骨组织中。③从神经节发出的第一支（眼神经）通过眼眶的背侧分布于吻侧部，第二支（上颌神经）通过眼眶的腹侧分布于上颌部，第三支（下颌神经）通过眼眶的最腹侧分布于下颌部。④神经节细胞在神经节内背腹方向排列的一群细胞团。结论：罗非鱼三叉神经节是独立存在的，与其它鱼类的神经节有明显差异。

大鼠Otos基因RNA干扰质粒体的构建1818-1820

摘要：目的：构建其基因Otos的RNA干扰质粒载体，为研究Otospiralin在内耳的生理功能奠定基础。方法：在GenBank中查到大鼠Otos基因的序列，输入到相应的设计软件中，以此设计引物序列，经过PCR扩增，酶切后，克隆于pAVU6＋27载体并行酶切鉴定。结果：构建的鼠OtosshRNA载体经过测序鉴定，所得和预期相符。结论：重组质粒pAVU6＋27-Otos的成功构建为下一步研究打下良好的基础。