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摘要:目的:观察茶多酚联合反应停对人肺腺癌生长的抑制作用;为研究茶多酚抗肿瘤血管生成提供依据。方法:人源肺腺癌(A549)细胞系经传代培养后,以BALB/c-nu裸鼠进行肿瘤移植,并以茶多酚,反应停及其联合用药进行干预性治疗,通过观察抑瘤率评价单用及联合用药对A549移植瘤生长抑制作用。结果:茶多酚、反应停及联合用药组的抑瘤率分别为33%、21.6%和35.9%,茶多酚、联合用药组与模型组相比有统计学意义(P〈0.05);联合用药组与单用药组比,无统计学意义(P〉0.05)。结论:茶多酚对A549生长有明显的抑制效果;反应停对A549的抑制作用需进一步观察;两者联合使用未见明显增效作用。
摘要:目的:寻找提取纯化具有12次跨膜结构的葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的新方法,并通过晶体结构的解析来研究二型糖尿病的发生机制。方法:首次选用猪肉皮下脂肪作为GLUT4蛋白提取的原材料,采用组织匀浆,差速离心方法初步提取分离了富含GLUT4的组分,进一步通过硫酸铵沉淀法初步纯化到大量的GLUT4蛋白。结果:通过单抗1F8对每一个组分进行Westem Blot检测,证明了分子量55kD处的蛋白即是GLUT4。150g脂肪组织通过组织匀浆和差速离心后,于35%-55%的硫酸铵沉淀浓度范围内得到40mg纯度达到50%的GLUT4。纯化后的GLUT4可以在0.5%DM下稳定存在三天。结论:发展了快速有效提取GLUT4的新方法,为进一步蛋白结晶打下基础。
摘要:目的:探讨蜂胶水提物(WEP)和乙醇提物(EEP)的血管舒张作用。方法:以离体豚鼠胸主动脉环为材料,采用离体实验方法记录血管收缩张力。结果:对于PE(PE,1μM)和KC1(60mM)预收缩的主动脉环,EEP可以剂量依赖地使其舒张。去除内皮后舒张作用减弱,所以这种作用是内皮依赖性的;使用NO合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA,10μM)、鸟苷酸环化酶抑制剂(methylene blue,10μM)或者前列腺素合成酶抑制剂(indomethacin,10μM)预处理,血管舒张作用也减弱。这提示EEP的作用可能与血管内皮释放的一氧化氮和前列腺素有关;K^+通道通用抑制剂TEA(tetraethylammonium chloride,1 mM)的处理对EEP的舒血管作用没有影响,显示EEP对豚鼠动脉环的舒张作用与K^+通道无关;另外,EEP能使CaCl2的量效曲线下移,说明EEP可以抑制细胞外Ca^2+的内流,同时EEP还可以抑制细胞内Ca^2+的释放。结论:蜂胶乙醇提取物EEP能剂量依赖地引起离体豚鼠动脉环舒张。这种舒张作用与K^+通道无关,但受内皮NO-鸟苷酸环化酶途径和前列腺素调控,最终通过降低细胞内Ca^2+的浓度舒张血管。
摘要:目的:经抗原表位预测和同源性比较,禽流感M1蛋白位于58-66序列的九肽是A型流感病毒中保守并具有很强免疫原性的T细胞表位,鉴于鼠伤寒沙门氏菌LT2的SEF17菌毛基因agfA作为疫苗载体的优势,在其上构建引起机体细胞免疫的沙门氏菌口服活体重组疫苗,以求在人类对抗禽流感过程中发挥作用。方法:利用两步重叠延伸PCR和基因置换,将外源表位插入LT2菌毛,并利用抗生素抗性,温度敏感质粒,及菌毛的刚果红吸附能力筛选菌毛上插有外源抗原表位的重组菌,并通过测序进一步验证外源基因的插入。结果:两步重叠延伸PCR产物AB,CD,AD长度与理论大小530bp,423bp,932bp一致。两次转化PCR鉴定,产物长度与理论大小932bp,634bp一致。刚果红吸附测定,菌毛上插入有外源肽的菌落因吸附刚果红能力减弱呈粉色,对筛选出的KmS型粉色菌落的PCR鉴定,产物长度与理论大小417bp一致,测序结果也显示agfA中外源表位基因的插入。结论:禽流感M1蛋白位于58-66序列的T细胞表位成功插入沙门氏菌SEF17菌毛基因agfA。
摘要:目的:探讨不同剂量希罗达对4T1乳腺癌小鼠肿瘤血管生成的影响,并观察其抑瘤效果和毒副作用。方法:建立荷4T1乳腺癌小鼠模型,分别给予持续低剂量希罗达、最大耐受剂量(maximumtolerateddose,MTD)希罗达、低剂量希罗达治疗,观察肿瘤体积、小鼠体重和外周血白细胞计数及小鼠生存期。实验终末时行免疫组化染色,测定肿瘤微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果:与对照组和MTD希罗达治疗组比较,持续低剂量希罗达治疗组小鼠肿瘤MVD值和VEGF表达均显著降低(P〈0.05)。与MTD希罗达治疗组比较,持续低剂量希罗达治疗组肿瘤生长比较缓慢,并且没有明显的体重减轻或白细胞数下降等毒性迹象,小鼠生存期无显著延长(P〉0.05)。结论:持续低剂量希罗达给药方式靶向于乳腺癌血管生成,不易产生耐药,增加了抑瘤效果,毒副作用小,动物生存质量明显提高。
摘要:目的:研究旋转恒定磁场与凋亡诱导剂肿瘤坏死因子和放线菌酮的协同作用。方法:设置暴磁组和非暴磁组,用T检验的方法比较暴磁组和非暴磁组细胞凋亡的差别。结果:在其它条件相同的情况下,暴磁处理促进了由肿瘤坏死因子和放线菌酮诱导的Hela细胞的凋亡,但是单独暴磁处理或者暴磁处理与肿瘤坏事因子和放线菌酮其中之一共同处理并没有对细胞的凋亡产生显著的影响。结论:旋转恒定磁场能够与肿瘤坏死因子和放线菌酮产生协同作用。
摘要:目的:探讨β-细辛醚对痴呆大鼠海马神经元蛋白质表达谱的影响。方法:SD大鼠随机分为正常时照组、模型组和β-细辛醚治疗组。模型组和β-细辛醚治疗组大鼠行脑立体定位注射术,模型组从大鼠右侧海马注入β淀粉样蛋白(Aβ1-40)5μg;治疗组:将Aβ1-40和β-细辛醚(0.12%)混合后注入大鼠右侧海马。抽提各组大鼠海马神经元组织蛋白质,行双向电泳,采用PDQuest-7.1.1分析软件解析各组之间有明显差异表达的蛋白质。结果:β-细辛醚治疗组α-烯醇化酶(α-enolase)、钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶(Ca^2+/Calmodulin-dependent protein kinase)的表达高于模型组,而尿激酶型纤溶酶原激活物(urokillasc plasminogen activator surface)、P53抑癌基因(P53 tumor suppressor)和未知蛋白(SSP6001)表达则低于模型组。结论:β-细辛醚可能通过上调或下调上述蛋白质的表达,参与促进大鼠海马受损神经元保护作用。
摘要:目的:观察两种罗非鱼鱼皮酶解液对大鼠骨髓基质细胞的影响。方法:用密度梯度离心和贴壁筛选的方法获得骨髓基质细胞,用碱性磷酸酶染色法观察是否成功诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化,并分别采用MTT法和PNPP法测定两种酶解液对骨髓基质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响。结果:密度梯度离心和贴壁筛选可得到较为均一的骨髓基质细胞。这些骨髓基质细胞诱导后可以向成骨细胞分化。两种酶解液作用于骨髓基质细胞时,在浓度0.1mg·ml^-1均可以促进骨髓基质细胞增殖,在浓度0.1mg·ml^-1,0.01mg·ml^-1均可以提高骨髓基质细胞碱性磷酸酶活力。实验用两种酶解液的三个浓度与成骨诱导液协同作用于骨髓基质细胞时,均没有促进细胞增殖和提高碱性磷酸酶活性的显著作用。结论:两种酶解液可以促进骨髓基质细胞增殖,提高细胞碱性磷酸酶活力;与成骨诱导液协同作用于骨髓基质细胞时,对细胞增殖和碱性磷酸酶活性没有显著促进及提高作用。
摘要:目的:观察蜜环菌多糖对小鼠血清中IL-2和TGF-β1水平的干预作用。方法:实验组小鼠腹腔注射(i.p)不同浓度的蛮环菌多糖,阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予香菇多糖,连续给药14天。给药结束后,用形态学方法测定各组小鼠在植物血凝素(PHA)诱导下淋巴细胞转化率,用ELISA法测定各组小鼠血清中白介素2(IL-2)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果:蜜环菌多糖具有提高小鼠淋巴细胞转化率,增加血清中IL-2水平,并同时下调血清中TGF-β1水平的作用。结论:蜜环菌多糖可通过调节小鼠免疫细胞及免疫分子的作用,增强小鼠的免疫功能。
摘要:多环芳烃是一类普遍存在的环境污染物。本研究探讨了普通富集法,固定化富集法以及巴斯德消毒后富集法三种途径从相同红树林土壤中分离菲降解茵的差异。通过平板培养和变性梯度凝胶电泳两种方法分析分离结果。上述方法分别获得以鞘氨醇单胞茵、分枝杆菌以及红球茵为优势菌群的群落,表明分离方法对多环芳烃降解菌多样性的研究是一种重要的影响因素。
摘要:目的:评价受试酮洛芬缓释片与参比酮洛芬片的生物等效性。方法:采用反相高效液相色谱法测定24名健康男性志愿受试者交叉单剂量口服受试酮洛芬缓释片与参比酮洛芬片150mg后血浆中酮洛芬的浓度,用3p97程序进行数据处理。结果:口服受试和参比酮洛芬制剂后的AUC0→t分别是38.94±9.15μg·h·ml^-1、38.04±6.90μg·h·ml^-1;AUC0→∞分别是44.50±8.09μg·h·ml^-1、42.99±8.36μg·h·ml^-1;Tmax分别是3.87±0.55 h、1.96±0.60h;Cmax分别是5.78±1.11μg·ml^-1、11.62±2.10μg·ml^-1;t1/2(Ke)分别是5.88±1.16h、1.70±1.40h。结论:受试酮洛芬缓释片与参比酮洛芬片具有生物等效性。
摘要:目的:探讨HB(一种促凝血草药的简称)提取条件的优选,及其氯仿萃取纯化后水相提取物的体内、外促凝血作用。方法:以家兔、大鼠为研究对象,分为空白组、云南白药对照组和HB氯仿萃取水相提取物组。观察家兔体外凝血时间;及给药10d后大鼠的血生化指标,如凝血酶原(PT)时间、活化部分凝血活酶(APTT)时间、纤维蛋白原(FIB)含量、凝血酶(TT)时间、血小板计数(PLT)。结果:HB水提最优工艺条件是:提取水量10倍,提取温度90℃。提取时间1.5h。体外促凝效果的观察:家兔的四种方法体外凝血时间明显短于空白及云南白药对照组(P〈0.01),且凝血时间缩短70%以上。体内促凝作用观察:各用药组血小板计数均显著高于空白及云南白药组(p〈0.01);高(5,10,20mg/kg)剂量组PT时间均显著短于空白组(p〈0.01),与云南白药组相比无显著性差异(p〉0.05);各剂量组APTT、FIB、TT较空白及云南白药组无显著性差异。结论:HB氯仿萃取纯化后水相提取物具有良好的体内、外促凝血作用,而其能使血小板计数显著升高是其主要止血机理之一。
摘要:在微波辐射条件下,以2-萘酚和氯化苄为原料,用氢氧化钠作碱剂,碘化钾作催化剂,以水和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂合成了苄基-2-萘基醚;采用单因素实验法,考察了反应物的摩尔比、催化剂用量、微波功率、辐射时间等因素对苄基-2-萘基醚产率的影响。实验结果表明:在n(2-萘酚):n(氢氧化钠):n(氯化苄):n(碘化钾)=1:1.1:1:0.018,水7 ml,DMF 25 ml,微波功率320 W和辐射时间75 s的优化条件下,苄基-2-萘基醚的产率可达88.03%。
摘要:目的:调查西安地区老年空军人群慢性病患病情况及其生活评价的现况,分析其相关因素的影响。方法:采用整群抽样的方法对西安地区310名老年空军进行体格检查和使用生活综合评价调查表进行问卷调查。结果:在本次研究的老年空军人群中,慢性病患病率100%。同时患两种病及以上的占91.29%。患病率由高到低排名前10位的慢性病依次为高血压、冠心病、高脂血症、老年性白内障、脑血管疾病、前列腺疾病、糖尿病、慢性支气管炎、慢性胃肠道疾病、胆囊和胆道疾病。舒张压异常、体检白细胞指标异常的人群患脑血管疾病的优势比分别是2.16、3.95(P〈0.05);甘油三脂异常的人群患高脂血症的优势比是4.74(P〈0.001);在健康自评和心理卫生评定中、差的人群患冠心病的优势比分别是1.85、1.64(P〈0.001);体能检查中、差的人群惠老年性白内障的优势比是1.48(P〈0.05);生活功能、社会交往和活动强度中、差的人群患脑血管疾病的优势比分别是3.40、2.22、2.92(P〈0.001)。结论:应有针对性、有重点地开展危险因素的早期干预,促进预防和医疗两大系统的协作,才能有效地控制老年人慢性病的发生。
摘要:目的:研究乙醇代谢酶基因ADH3、ALDH2及CYP2E1 RsaⅠ/PstⅠ位点多态性与酒精性肝病(ALD)的关系。探讨遗传因素对其易感性的影响。方法:PCR-RFLP法检测东北地区汉族男性健康者、嗜酒者及ALD患者中ADH3、ALDH2和CYP2E1的基因型并比较其基因频率。结果:ADH3和CYP2E1的两种等位基因在各组中的分布差异无统计学意义;ALDH2的两种等位基因在三组间的频率存在统计学差异,ALDH2^*1在嗜酒及ALD组中的频率显著高于其在对照组中的频率,二组均以ALDH2^*1/2^*1基因型为主,未见ALDH2^*2/2^*2;与嗜酒者相比,ALDH2^*2在ALD组中的频率显著提高,且均为ALDH2^*1/2^*2。结论:ADH3及CYP2E1 RsaⅠ/PstⅠ位点多态性与东北地区汉族男性ALD的发生无关;ALDH2^*1是嗜酒的诱因,ALDH2^*2/2^*2可防止嗜酒及ALD的发生,ALDH2^*1/2^*2具有最高的患病风险。
摘要:目的:探讨5a-还原酶2(SRD5A2)在尿道下裂发生中的作用。方法:选择2005年6月至8月来湘雅二医院泌尿外科手术尿道下裂患儿共28例,另选尿道外口正常儿童20例为对照。应用RT-PCR方法对28例尿道下裂患者及20对照组的包皮组织中SRD5A2-mRNA表达进行检测,并结合计算机图像分析两组SRD5A2含量进行比较。结果:在所有实验样本中均有SRD5A2表达,在尿道下裂组和对照组包皮组织中SRD5A2-mRNA表达水平相比差异无统计学意义(P〉0.05)。尿道下裂轻、中、重各组之间SRD5A2-mRNA表达水平相比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:5a-还原酶2在尿道下裂患儿包皮组织中表达正常,可能与本组尿道下裂发生无关。
摘要:目的:比较Maria药物性肝损害(1997年)诊断标准和我国常用诊断标准对药物性肝损害的效价。方法:回顾性分析我院2005年1月至2006年4月期间经肝穿病理诊断为药物性肝损害的54例病例,分别按照上述两个标准评分。评价每一标准的准确性。结果:符合Maria药物性肝损害(1997年)诊断标准的(〉10分)有45例,占83%;符合我国常用诊断标准的有39例,占72%。结论:两个诊断标准符合率较高,均可做为药物性肝损害的诊断标准,但仍有部分病例不能准确诊断,需进一步完善。
摘要:目的:探讨掌握喘息“度”与支气管哮喘阶梯治疗的关系。方法:充分掌握支气管哮喘分级治疗方案和支气管哮喘病情,将喘息“度”细致化,与分级治疗用药“度”密切结合起来,对于完全理想的控制哮喘将会起到极大的指导作用,对于升阶梯和降阶梯治疗都会起到重要而细致的指导作用。必须将平喘治疗措施置于患者全身病情变化及总体治疗之下,会取得更加理想的哮喘控制效果。而强化支气管哮喘患者教育在支气管哮喘理想治疗中占据极为重要的地位,甚至直接关系到哮喘控制的持久性和稳定性。应得到高度重视。结果:喘息“度”与支气管哮喘的发作程度密切相关,准确把握并分级十分重要。结论:准确把握喘息“度”并与支气管哮喘分级治疗方法结合,将对稳定平息支气管哮喘起到意想不到的效果。